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MICROBIOLOGIA
Alumnos : Alberca Risco Neidy E.
Barrantes Salazar Noimer
Franklin.
Coronel Toro Arlan J.
Rodríguez La Torre Pepe L.
Rojas Segura Roxana
Saldaña Zavaleta Erdwin
Aldair. Blgo-Mblgo: Cristian Enrrique Polo
Zavala
INGENIERÍA FORESTAL Y
AMBIENTAL - II
Es posiblemente la tinción más usada.
Inventada por Christian Gram (150-1938) en 1884.
Permite diferenciar a las bacterias de acuerdo a la estructura
de su pared bacteriana en Gram positivas y Gram negativas.
La pared celular es la barrera para la decoloración de las
bacterias Gram positivas y Gram negativas.
Colocar las láminas extendidas y fijadas en una bandeja
adecuada y cubrir su superficie con cristal violeta por un
minuto. Lavar con agua destilada y escurrir.
Cubrir la superficie de la lámina con la solución de
lugol por un minuto. Lavar con agua destilada y
escurrir.
Colocar cada una de las láminas en posición inclinada y
decolorarlas con alcohol a 95° hasta que el color libre deje de
salir (aproximadamente 10-20 segundos).Lavar con agua
destilada y escurrir.
Este es el paso más importante de la coloración ya
que una excesiva adición del alcohol permite la
salida del colorante primario de las células Gram
positivas.
Cubrir las láminas con safranina por 30 segundos. Lavar con
agua destilada y escurrir.
Secar las láminas utilizando papel absorbente.
ESTERILIZACIÒN
EN CALOR SECO
ESTERILIZACIÒ
N POR CALOR
SECO
Produce la
destrucción
de los
microorganismos por
oxidación de sus
componentes
celulares.
Es un proceso menos
eficiente que la
esterilización por calor
húmedo
Se deben
aplicar
temperaturas
más altas
durante mayor
tiempo.
Pupinel
SE PUDE REALIZAR DE TRES
MÈTODOS
AIRE
CALIENTE
Se lleva a cabo en hornos especiales que
permiten la distribución uniforme del calor
en su interior, donde. Trabajo Práctico Nº 7
el material se expone a temperaturas de
aproximadamente 170ºC durante 2 horas.
LLAMA DIRECTA
Consiste en colocar el material directamente
al fuego hasta que éste se ponga al rojo vivo.
De esta forma se queman los contaminantes
hasta reducirlos a cenizas. Su eficacia
depende de la calidad de la llama.
El material a esterilizar se coloca en
cámaras especiales que alcanzan
elevadas temperaturas. Con este método
se queman los contaminantes hasta
reducirlos a cenizas.
INCINERACION
ESTERILIZACIÒN EN
CALOR HÙMEDO
ESTERILIZACIÓN POR
CALOR HÚMEDO
Este tipo de calor es más
conveniente porque el vapor de
agua difunde por ósmosis a través
de la membrana de los
microorganismos, produciendo la
muerte de los mismos por
coagulación de su protoplasma y
no por deshidratación, como en el
caso del calor seco.
EBULLICIO
N
VAPOR
A PRESIÓN
VAPOR
FLUENTE
Métodos utilizados son
EBULLICIÓN
Se realiza a 100 °C, a
esta temperatura se
destruyen todas las
células vegetativas,
esporos de hongos y
levaduras, y la mayor
parte de las esporas
bacterianas.
VAPOR
FLUENTE
Consiste en un tratamiento
con vapor de agua a presión
atmosférica (o sea vapor
saturado a 100 °C). Esta es
una técnica útil para tratar
sustancias que no admiten
calentamientos superiores a
100 °C sin perder alguna de
sus propiedades.
VAPOR A
PRESIÓN
Normalmente se realiza en el laboratorio
la esterilización de medios de cultivo en
un equipo denominado autoclave. Las
condiciones de tiempo y temperatura
dependen dela naturaleza del medio.
Cabe destacar que a menudo la
esterilización presenta dos aspectos a
veces incompatibles, se quiere por un
lado destruir todos los microorganismos
presentes y por el otro evitar la
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  • 1. MICROBIOLOGIA Alumnos : Alberca Risco Neidy E. Barrantes Salazar Noimer Franklin. Coronel Toro Arlan J. Rodríguez La Torre Pepe L. Rojas Segura Roxana Saldaña Zavaleta Erdwin Aldair. Blgo-Mblgo: Cristian Enrrique Polo Zavala INGENIERÍA FORESTAL Y AMBIENTAL - II
  • 2.
  • 3. Es posiblemente la tinción más usada. Inventada por Christian Gram (150-1938) en 1884. Permite diferenciar a las bacterias de acuerdo a la estructura de su pared bacteriana en Gram positivas y Gram negativas. La pared celular es la barrera para la decoloración de las bacterias Gram positivas y Gram negativas.
  • 4.
  • 5. Colocar las láminas extendidas y fijadas en una bandeja adecuada y cubrir su superficie con cristal violeta por un minuto. Lavar con agua destilada y escurrir. Cubrir la superficie de la lámina con la solución de lugol por un minuto. Lavar con agua destilada y escurrir.
  • 6. Colocar cada una de las láminas en posición inclinada y decolorarlas con alcohol a 95° hasta que el color libre deje de salir (aproximadamente 10-20 segundos).Lavar con agua destilada y escurrir. Este es el paso más importante de la coloración ya que una excesiva adición del alcohol permite la salida del colorante primario de las células Gram positivas.
  • 7. Cubrir las láminas con safranina por 30 segundos. Lavar con agua destilada y escurrir. Secar las láminas utilizando papel absorbente.
  • 9. ESTERILIZACIÒ N POR CALOR SECO Produce la destrucción de los microorganismos por oxidación de sus componentes celulares. Es un proceso menos eficiente que la esterilización por calor húmedo Se deben aplicar temperaturas más altas durante mayor tiempo. Pupinel
  • 10. SE PUDE REALIZAR DE TRES MÈTODOS AIRE CALIENTE Se lleva a cabo en hornos especiales que permiten la distribución uniforme del calor en su interior, donde. Trabajo Práctico Nº 7 el material se expone a temperaturas de aproximadamente 170ºC durante 2 horas. LLAMA DIRECTA Consiste en colocar el material directamente al fuego hasta que éste se ponga al rojo vivo. De esta forma se queman los contaminantes hasta reducirlos a cenizas. Su eficacia depende de la calidad de la llama.
  • 11. El material a esterilizar se coloca en cámaras especiales que alcanzan elevadas temperaturas. Con este método se queman los contaminantes hasta reducirlos a cenizas. INCINERACION
  • 12.
  • 14. ESTERILIZACIÓN POR CALOR HÚMEDO Este tipo de calor es más conveniente porque el vapor de agua difunde por ósmosis a través de la membrana de los microorganismos, produciendo la muerte de los mismos por coagulación de su protoplasma y no por deshidratación, como en el caso del calor seco. EBULLICIO N VAPOR A PRESIÓN VAPOR FLUENTE Métodos utilizados son
  • 15. EBULLICIÓN Se realiza a 100 °C, a esta temperatura se destruyen todas las células vegetativas, esporos de hongos y levaduras, y la mayor parte de las esporas bacterianas.
  • 16. VAPOR FLUENTE Consiste en un tratamiento con vapor de agua a presión atmosférica (o sea vapor saturado a 100 °C). Esta es una técnica útil para tratar sustancias que no admiten calentamientos superiores a 100 °C sin perder alguna de sus propiedades.
  • 17. VAPOR A PRESIÓN Normalmente se realiza en el laboratorio la esterilización de medios de cultivo en un equipo denominado autoclave. Las condiciones de tiempo y temperatura dependen dela naturaleza del medio. Cabe destacar que a menudo la esterilización presenta dos aspectos a veces incompatibles, se quiere por un lado destruir todos los microorganismos presentes y por el otro evitar la alteración de los nutrientes.