Este documento describe una práctica de laboratorio sobre la actividad enzimática. Los estudiantes demostrarán la presencia de la enzima catalasa en tejidos y comprobarán cómo la temperatura afecta la actividad enzimática. También comprobarán la hidrólisis del almidón por la acción de la amilasa. El documento explica las características y factores que influyen en la actividad enzimática como parte del marco teórico de la práctica.

1. FACULTAD DE
CIENCIAS DE LA
SALUD
E.A.P. MEDICINA
HUMANA
2023 - II

2. Curso: Biología Celular y Molecular
Tema:
Práctica N° 7
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.
Docente: Plana docente

3. ¿Qué estamos observando?

4. I. COMPETENCIA
Al finalizar la sesión de práctica, el alumno demuestra la presencia
de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales y comprueba
la acción de la temperatura sobre la actividad enzimática y
comprueba la hidrólisis del almidón por acción de la amilasa.

5. Enzimas
Las células llevan a cabo simultáneamente una gran cantidad de reacciones químicas necesarias para
la vida. Muchos de los productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no fuera por
la participación de las enzimas, algunas reacciones no se producirían tan rápido
II. MARCO TEÓRICO
Características de las enzimas
⮚ Son proteínas globulares
⮚ Se recuperan intactas después de la
reacción
⮚ Altamente específicas
⮚ Se requieren en mínimas cantidades
⮚ Modifican la estructura química del
sustrato
⮚ Pueden ser regulables
⮚ Disminuyen la energía de activación.
⮚ Pueden ser susceptibles de ser
inhibidas
Fuente: https://www.ahmadcoaching.com/2020/12/induced-fit-model-of-enzyme-action.html

6. Existen dos modelos para explicar cómo el sustrato se une al centro activo del enzima

7. Nomenclatura y clasificación de las enzimas
Nombre común: Uso cotidiano
Nombre del sustrato de la reacción + ASA
Ejem: Sacarasa; amilasa, etc.
Nombre arbitrarios: Ejm. Ptialina salival; pepsina del jugo gástrico,etc
Clasificación:

8. Factores que influyen en la actividad enzimática
Entre los principales factores que influyen en la actividad
de las enzimas tenemos:
⮚ Temperatura
⮚ pH
⮚ Concentración de sustrato
⮚ Inhibidores
⮚ Cofactores y coenzimas

9. Cofactores y coenzimas:
Alguna enzimas se encuentran inactivadas y reciben el nombre de Apoenzima, para su activación estas enzimas
requieren de un cofactor o de una coenzima.
Los cofactores pueden ser iones inorgánicos como el Fe++; Mg++, Zn++, entre otros. Cuando un cofactor es una
molécula orgánica se llama coenzima.

10. Concentración del sustrato y enzima:

11. pH y Temperatura:

12. Enzima: Catalasa
La catalasa es una enzima que se encuentra en las
células de los tejidos animales y vegetales.
La enzima se localiza en los peroxisomas y cataliza la
descomposición del peróxido de hidrógeno (H202) en
oxígeno y agua
El peróxido de hidrógeno es un residuo del metabolismo
celular de muchos organismos vivos, pero dada su
toxicidad debe transformarse rápidamente en
compuestos menos peligrosos.
La deficiencia en catalasa produce acatalasia. Esta
enfermedad está caracterizada por la ausencia de
actividad de la catalasa en los glóbulos rojos y se asocia
con las lesiones orales ulcerantes.

13. Enzima: Amilasa
La saliva, principalmente aquella producida por la parótida, contiene
una enzima, la amilasa salival, llamada también ptialina, Esta es capaz
de actuar sobre los almidones y sobre el glucógeno, rompiendo lo
enlaces alfa 1-4 de tal forma que se separan sus moléculas. Las
moléculas que resultan son del disacárido maltosa, Pero la acción de
la amilasa salival es de corta duración, el bolo alimenticio permanece
en la boca durante el tiempo de la masticación y luego es deglutido.
En el estómago el HCl del jugo gástrico le confiere un carácter ácido,
con un pH cercano a 2. El pH óptimo de la amilasa está cercano a 7,
por lo cual una vez llegado el bolo alimenticio al estómago se
suspende la acción de la enzima.
En realidad, la digestión de los almidones se inicia en el intestino
delgado por la acción de la amilasa pancreática, enzima que tiene el
mismo mecanismo de la amilasa salival, es decir el almidón se va
convirtiendo en maltosa.

14. III. MATERIALES Y EQUIPO
⮚ Gradillas.
⮚ Tubos de ensayo.
⮚ Mechero.
⮚ Pipetas.
⮚ Pinzas.
⮚ Baño María.
⮚ Beaker.
⮚ Trocitos de hígado de pollo.
⮚ Trocitos de papa.
⮚ Arena fina.
⮚ Agua oxigenada.
⮚ Solución de almidón al 1%.
⮚ Reactivo de lugol.
⮚

15. IV. PROCEDIMIENTO
A. Reconocimiento de la catalasa
1. Rotular tres tubos de ensayo con las letras A, B Y C.
2. Colocar en el tubo A un pedazo de hígado del tamaño de un frijol, en el tubo B un pedazo similar
de papaya y en el tubo C arena.
3. Añadir 3 ml de agua oxigenada a cada tubo.
4. Se observará un intenso burbujeo debido al desprendimiento de oxígeno.
5. Grafica e interpreta lo observado.

16. B. Desnaturalización de la catalasa
1. Colocar en un tubo de ensayo un trocito de hígado entero.
2. Poner el tubo en un beaker con agua hervida durante cinco minutos.
3. Después de este tiempo, retirar el tubo.
4. Añadir 2 ml de agua oxigenada.
5. Observar el resultado.
6. Grafica e interpreta lo observado.
7. Repetir lo mismo con la para cruda.

17. C. Hidrólisis del almidón por acción de la amilasa
1. Realice un enjuague de la cavidad oral con agua.
2. Manteniendo la boca cerrada esperará 5 a 7 minutos, evitando hablar y pasar saliva.
3. La colección de saliva se realizará en un beaker dejando caer por gravedad la saliva, evitando
así la formación de espuma.
4. La organización del ensayo se encuentra en el siguiente cuadro:

18. V. RESULTADOS
Esquematice los resultados e interprete estos según los cambios ocurridos
en cada una de las reacciones
VI. CUESTIONARIO
1. Si el sitio activo de una enzima consiste en una sería de aminoácidos. ¿Por
qué se necesita el resto de la proteína?
2. ¿Cuál es la importancia de las enzimas en el cuerpo humano?
3. ¿Qué estructuras de nuestro producen enzimas y cuál es su función de
ellas?

19. VII. FUENTES DE INFORMACIÓN
1. Lehninger, Albert l. Principios de bioquímica. 4ª ed. España. Omega. 2006.
2. Lodish, H. F., Berk, a., Matsudaira, P., Kaiser, M., Krieger, M., Scott, M. P.,
Zipursky, S. L. y Darnell, J. E.: Biología celular y molecular. Médica
panamericana, 5.a ed., 2010.

20. Experiencia ducativa xcepcional
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