Trabajo de 1er curso del ciclo superior de Anatomía Patológica. Asignatura Biología Moplecular. El trabajo habla sobre los distintos tipos de cultivos celulares, historia, técnicas, equipos, ventajas, desventajas, medios de cultivo...
Este documento describe los principales componentes de la célula y los procesos de adhesión celular. Explica que las células están compuestas de una membrana plasmática, organelos y un citoesqueleto. Detalla los tipos de moléculas de adhesión celular como integrinas y cadherinas que permiten la unión de las células a la matriz extracelular y entre sí. Además, explica que el citoesqueleto está formado por microtúbulos, filamentos intermedios y microfilamentos de actina a los cuales se unen
Este documento describe los métodos y equipos básicos para el cultivo celular, incluyendo la campana de flujo laminar, el incubador CO2, el autoclave y otros equipos. Explica cómo realizar cultivos primarios y establecer líneas celulares estables, así como el mantenimiento y almacenamiento de las líneas celulares, incluida la congelación. También cubre la preparación de medios de cultivo y los pasos experimentales básicos para estudiar fenómenos celulares.
Este documento describe los procedimientos de citogenética convencional, incluyendo el cultivo celular directo e indirecto. Explica cómo se realizan los cultivos de líquidos orgánicos fetales, vellosidades coriales y restos endouterinos mediante centrifugación, tratamiento hipotónico y fijación. También describe el cultivo de linfocitos periféricos mediante la estimulación mitogénica, cosecha en metafase y análisis cromosómico. El objetivo es detectar anomalías cromosómicas en el diagn
INTRODUCCIÓN
La velocidad de sedimentación globular (VSG) es una propiedad física de la sangre. Si se dispone de un tubo de sangre con anticoagulante y se deja en reposo se observa que después de un cierto tiempo las células se sedimentan formando 2 fases bien de limitadas que corresponden al plasma y a las células constituidas prácticamente en su totalidad por hematíes. La VSG es equivalente a la longitud del recorrido descendente de la parte superior de la columna de hematíes en un intervalo determinado de tiempo y varios factores contribuyen a este valor.
FUNDAMENTO
El test de velocidad de sedimentación globular (VSG) mide la sedimentación de eritrocitos en su plasma nativo.
VSG es un test no específico que puede ser utilizado para detectar un amplio rango de enfermedades y para monitorear el curso evolutivo de ciertas enfermedades crónicas como los procesos inflamatorios crónicos (artritis reumatoidea, polimialgia reumática y tuberculosis) o la respuesta a la terapia, por ejemplo con citostáticos (enfermedad de Hodgkin, linfomas y mieloma múltiple). Sin embargo en ocasiones cuadros tan graves como neoplasias y la cirrosis pueden presentar una VSG normal. Constituye uno de los tests más utilizados como screening en el laboratorio clínico. Se trata de un método sencillo para realizar y que requiere equipamiento simple.
OBJETIVO
o Que el estudiante realice el procedimiento de cómo se procesa la velocidad de sedimento globular.
o Que el estudiante conozca e investigue por que se realiza este tipo de prueba en el laboratorio clínico.
o Que el estudiante aprenda a realizar la lectura del VSG.
MATERIALES UTILIZADOS EN LA PRÁCTICA
Sangre total (extracción venosa)
Solución anticoagulante
Pipeta de eritrosedimentación (pipeta de Westergreen)
Soporte que inmovilice la pipeta en posición vertical.
Cronómetro
Aguja
Ligadura
Alcohol
Algodón
INDUMENTARIA
Mandilón
Guantes
INSTRUCTIVO PARA LA OBTENCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR PUNCIÓN VENOSA
1. Durante la toma de muestra deben guardarse las más estrictas normas de higiene.
2. El material descartable a usar se abrirá sólo al momento de su utilización y, una vez manipulado, no podrá guardarse nuevamente aun cuando se lo considere nuevo.
3. Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes para ese fin.
4. Al momento de hacer la extracción colocarse los guantes desechables, los cuales se mantendrán puestos durante todo el procedimiento.
5. Antes de iniciar la toma de muestra, tener TODO el material preparado.
6. Elegir una vena bien visible en el antebrazo, localizándola visualmente y por palpación.
Colocar el lazo y volver a palpar la vena, indicarle al paciente que abra y cierre el puño para facilitar la extracción.
7. Una vez identificada la vena, limpiar el área circundante con algodón empapado en alcohol. Dejar secar.
Este documento describe varias técnicas citoquímicas para la identificación de leucocitos, incluyendo reacciones para enzimas como peroxidasa, fosfatasa alcalina, fosfatasa ácida y esterasas, así como tinción para glucógeno y lípidos. Explica los procesos de la técnica citoquímica y cómo estas tinciones son útiles para diferenciar tipos de leucemia.
Este documento describe los métodos y técnicas básicas para el cultivo celular, incluyendo el equipo necesario, los tipos de cultivos (primarios y líneas estables), la preparación del medio de cultivo, y los procedimientos para el mantenimiento y almacenamiento de líneas celulares. Explica conceptos como la asepsia, subcultivos, curvas de crecimiento celular, y los requisitos físico-químicos del medio de cultivo para diferentes tipos de células.
Este documento describe los cultivos de células animales, incluyendo que requieren medios ricos en nutrientes y superficies sólidas, los cultivos primarios y cepas tienen un período de vida limitado, mientras que las células transformadas proliferan indefinidamente. También explica que las células híbridas denominadas hibridomas producen abundantes anticuerpos monoclonales y que el medio HAT se utiliza comúnmente para aislar estas células híbridas.
Este documento describe los requerimientos energéticos y no energéticos de los medios de cultivo para el crecimiento microbiano. Explica que los requerimientos energéticos incluyen una fuente de carbono y nitrógeno, mientras que los no energéticos incluyen fuentes de azufre, fósforo, iones metálicos y factores de crecimiento. También clasifica los medios de cultivo según su consistencia en sólidos, líquidos y semisólidos, y proporciona ejemplos como el agar sang
Este documento describe los principales componentes de la célula y los procesos de adhesión celular. Explica que las células están compuestas de una membrana plasmática, organelos y un citoesqueleto. Detalla los tipos de moléculas de adhesión celular como integrinas y cadherinas que permiten la unión de las células a la matriz extracelular y entre sí. Además, explica que el citoesqueleto está formado por microtúbulos, filamentos intermedios y microfilamentos de actina a los cuales se unen
Este documento describe los métodos y equipos básicos para el cultivo celular, incluyendo la campana de flujo laminar, el incubador CO2, el autoclave y otros equipos. Explica cómo realizar cultivos primarios y establecer líneas celulares estables, así como el mantenimiento y almacenamiento de las líneas celulares, incluida la congelación. También cubre la preparación de medios de cultivo y los pasos experimentales básicos para estudiar fenómenos celulares.
Este documento describe los procedimientos de citogenética convencional, incluyendo el cultivo celular directo e indirecto. Explica cómo se realizan los cultivos de líquidos orgánicos fetales, vellosidades coriales y restos endouterinos mediante centrifugación, tratamiento hipotónico y fijación. También describe el cultivo de linfocitos periféricos mediante la estimulación mitogénica, cosecha en metafase y análisis cromosómico. El objetivo es detectar anomalías cromosómicas en el diagn
INTRODUCCIÓN
La velocidad de sedimentación globular (VSG) es una propiedad física de la sangre. Si se dispone de un tubo de sangre con anticoagulante y se deja en reposo se observa que después de un cierto tiempo las células se sedimentan formando 2 fases bien de limitadas que corresponden al plasma y a las células constituidas prácticamente en su totalidad por hematíes. La VSG es equivalente a la longitud del recorrido descendente de la parte superior de la columna de hematíes en un intervalo determinado de tiempo y varios factores contribuyen a este valor.
FUNDAMENTO
El test de velocidad de sedimentación globular (VSG) mide la sedimentación de eritrocitos en su plasma nativo.
VSG es un test no específico que puede ser utilizado para detectar un amplio rango de enfermedades y para monitorear el curso evolutivo de ciertas enfermedades crónicas como los procesos inflamatorios crónicos (artritis reumatoidea, polimialgia reumática y tuberculosis) o la respuesta a la terapia, por ejemplo con citostáticos (enfermedad de Hodgkin, linfomas y mieloma múltiple). Sin embargo en ocasiones cuadros tan graves como neoplasias y la cirrosis pueden presentar una VSG normal. Constituye uno de los tests más utilizados como screening en el laboratorio clínico. Se trata de un método sencillo para realizar y que requiere equipamiento simple.
OBJETIVO
o Que el estudiante realice el procedimiento de cómo se procesa la velocidad de sedimento globular.
o Que el estudiante conozca e investigue por que se realiza este tipo de prueba en el laboratorio clínico.
o Que el estudiante aprenda a realizar la lectura del VSG.
MATERIALES UTILIZADOS EN LA PRÁCTICA
Sangre total (extracción venosa)
Solución anticoagulante
Pipeta de eritrosedimentación (pipeta de Westergreen)
Soporte que inmovilice la pipeta en posición vertical.
Cronómetro
Aguja
Ligadura
Alcohol
Algodón
INDUMENTARIA
Mandilón
Guantes
INSTRUCTIVO PARA LA OBTENCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR PUNCIÓN VENOSA
1. Durante la toma de muestra deben guardarse las más estrictas normas de higiene.
2. El material descartable a usar se abrirá sólo al momento de su utilización y, una vez manipulado, no podrá guardarse nuevamente aun cuando se lo considere nuevo.
3. Una vez realizada la toma de muestra, descartar inmediatamente los materiales usados en recipientes para ese fin.
4. Al momento de hacer la extracción colocarse los guantes desechables, los cuales se mantendrán puestos durante todo el procedimiento.
5. Antes de iniciar la toma de muestra, tener TODO el material preparado.
6. Elegir una vena bien visible en el antebrazo, localizándola visualmente y por palpación.
Colocar el lazo y volver a palpar la vena, indicarle al paciente que abra y cierre el puño para facilitar la extracción.
7. Una vez identificada la vena, limpiar el área circundante con algodón empapado en alcohol. Dejar secar.
Este documento describe varias técnicas citoquímicas para la identificación de leucocitos, incluyendo reacciones para enzimas como peroxidasa, fosfatasa alcalina, fosfatasa ácida y esterasas, así como tinción para glucógeno y lípidos. Explica los procesos de la técnica citoquímica y cómo estas tinciones son útiles para diferenciar tipos de leucemia.
Este documento describe los métodos y técnicas básicas para el cultivo celular, incluyendo el equipo necesario, los tipos de cultivos (primarios y líneas estables), la preparación del medio de cultivo, y los procedimientos para el mantenimiento y almacenamiento de líneas celulares. Explica conceptos como la asepsia, subcultivos, curvas de crecimiento celular, y los requisitos físico-químicos del medio de cultivo para diferentes tipos de células.
Este documento describe los cultivos de células animales, incluyendo que requieren medios ricos en nutrientes y superficies sólidas, los cultivos primarios y cepas tienen un período de vida limitado, mientras que las células transformadas proliferan indefinidamente. También explica que las células híbridas denominadas hibridomas producen abundantes anticuerpos monoclonales y que el medio HAT se utiliza comúnmente para aislar estas células híbridas.
Este documento describe los requerimientos energéticos y no energéticos de los medios de cultivo para el crecimiento microbiano. Explica que los requerimientos energéticos incluyen una fuente de carbono y nitrógeno, mientras que los no energéticos incluyen fuentes de azufre, fósforo, iones metálicos y factores de crecimiento. También clasifica los medios de cultivo según su consistencia en sólidos, líquidos y semisólidos, y proporciona ejemplos como el agar sang
El documento proporciona información sobre el proceso de fijación histológica. La fijación tiene como objetivo interrumpir los procesos de degradación que ocurren después de la muerte celular y conservar la arquitectura y composición de los tejidos lo más similar posible a como se encontraban en el organismo vivo. Existen diferentes métodos y soluciones químicas de fijación que cumplen funciones como evitar la autólisis, proteger de bacterias, e insolubilizar componentes celulares.
Este documento proporciona información sobre varios análisis de sangre comunes, incluidos el hematocrito, la concentración de hemoglobina, el recuento de glóbulos rojos y blancos, e índices eritrocitarios. Describe los fundamentos, muestras, procedimientos, interpretación de resultados e causas potenciales de error para cada análisis. Además, explica cómo los resultados anormales pueden indicar condiciones como anemia o policitemia.
Este documento describe técnicas de identificación de ácidos nucleicos como Southern blot y Northern blot. Southern blot permite identificar secuencias de ADN mediante la hibridación de una sonda marcada con fragmentos de ADN transferidos a una membrana. Northern blot identifica transcritos de ARN mediante la hibridación de una sonda con ARN transferido a una membrana. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permite amplificar segmentos específicos de ADN.
La anomalía Alder Reily es un trastorno autosómico caracterizado por la presencia de gránulos azurófilos agrupados en racimos en el citoplasma de granulocitos, monocitos y linfocitos. Se diferencia de las granulaciones tóxicas por presentarse en otras células además de neutrófilos y por la ausencia de vacuolas tóxicas. Está asociada a mucopolisacaridosis.
Este documento proporciona información sobre el análisis de frotis de sangre periférica. Explica la técnica para realizar y teñir el frotis, así como el examen microscópico. Describe los hallazgos normales y anormales en la serie roja, serie blanca y plaquetas. Identifica hallazgos preocupantes como blastos, células tumorales o un frotis leucoeritroblástico que sugieren un trastorno hematológico subyacente. El frotis de sangre periférica ofrece
El hematocrito es una prueba de laboratorio que mide el porcentaje de glóbulos rojos en la sangre y proporciona información sobre la capacidad de la sangre para transportar oxígeno. Se realiza tomando una muestra de sangre en un tubo capilar que se centrifuga para separar los componentes de la sangre, y luego se mide la proporción de glóbulos rojos. Los valores normales de hematocrito son del 37% al 42% para adultos, y pueden estar aumentados o disminuidos por varias afecciones médicas.
Este documento proporciona instrucciones para realizar un recuento de plaquetas. Explica que las plaquetas son fragmentos de células que ayudan a la coagulación y mantienen la integridad de los vasos sanguíneos. Describe el procedimiento para preparar una muestra de sangre, contar las plaquetas usando un microscopio y calcular los resultados, los cuales deben estar entre 150,000-450,000 plaquetas por mm3 para ser considerados normales.
Las plaquetas se generan en la médula ósea por fragmentación de los megacariocitos y circulan en la sangre por 10 días. Cumplen un rol fundamental en la hemostasia primaria a través de mecanismos de adhesión, activación y agregación que involucran diversas glicoproteínas de membrana y la síntesis de tromboxano A2. Las plaquetas también participan en procesos fisiológicos y patológicos como la remodelación tisular, señalización citoquímica, inflamación y
El documento describe los procesos de inclusión de tejidos para microscopía óptica e histopatología, incluyendo deshidratación, aclaramiento e infiltración con parafina. Explica los pasos del proceso de inclusión, los agentes químicos utilizados en cada etapa, y los procedimientos para la preparación y orientación de muestras en bloques de parafina antes del corte. También cubre la limpieza y mantenimiento de equipos como procesadores de tejidos y estaciones de inclusión.
El documento describe un método para determinar manualmente la hemoglobina en sangre. El método implica la oxidación de la hemoglobina a cianmetahemoglobina usando ferricianuro de potasio, lo que produce un compuesto estable de color rojo que puede medirse fotométricamente. El procedimiento incluye la preparación de la muestra y el reactivo, la mezcla y reposo de la muestra en el reactivo, y la medición espectrofotométrica a 540 nm para cuantificar la hemoglobina en la muestra.
Quiero compartir la información que recopilé, ya que estuve dudando por la variación de las fuentes y afirmaciones. Después de haber verificado que esto es correcto, decidí subirlo para facilitarle la vida a alguien. ¡Espero sirva de ayuda!
Este documento describe los pasos para realizar un frotis o extensión de sangre. 1) Se coloca una gota de sangre mezclada con anticoagulante sobre un portaobjetos. 2) Otro portaobjetos se coloca sobre la gota formando un ángulo de 45 grados. 3) Se desliza suavemente el segundo portaobjetos sobre el primero para extender la gota de sangre de forma uniforme sobre la superficie.
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivosRai Encalada
Este documento presenta un algoritmo para la identificación de cocos Gram positivos mediante una serie de pruebas bioquímicas y de sensibilidad a antibióticos. El algoritmo comienza con la catalasa y oxidasa/bacitracina/furazolidona para diferenciar entre Staphylococcus, Micrococcus y Streptococcus. Luego utiliza coagulasa, novobiocina y DNAsa termoestable para identificar especies de Staphylococcus como S. aureus o S. saprophyticus. Finalmente emplea pruebas adicionales como fermentación
Este documento resume la investigación sobre el sistema sanguíneo MNSs. Describe los antígenos M, N, S, s y U que se encuentran en las glicoproteínas GPA y GPB. Explica que estos antígenos son heredados de forma codominante y pueden dar lugar a nueve fenotipos diferentes. También analiza factores como genes híbridos y modificaciones en la glicosilación que pueden dar lugar a variantes raras en el sistema MNSs.
El documento describe los procesos de formación de los diferentes tipos de glóbulos blancos o leucocitos (leucopoyesis) y sus características. La leucopoyesis incluye la serie mielocítica que produce neutrófilos, eosinófilos y basófilos en la médula ósea, la serie monocítica que produce monocitos, y la serie linfocítica que produce linfocitos B y T, los cuales maduran principalmente en el timo y médula ósea. También se describen procesos como la leucocitosis
ARTICULO: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0025775317300313
En estas presentaciones, encontraras el uso de la tecnica de los microarrays teniendo en cuenta un caso clinico de manera que podras relacionarlo en la patologia universitaria
MICROARRAY ¿QUE ES?
Es Un formato experimental, basado en la síntesis o fijación de sondas, que representan los genes (o proteinas, o metabolitos), sobre un sustrato sólido (cristal, plástico, silice) y expuestos a las moléculas diana (la muestra).
En donde La tecnología de microarrays de ADN permite realizar análisis genéticos sobre miles de genes simultáneamente.
El análisis de estos experimentos supone un reto desde el punto de vista estadístico, ya que los métodos clásicos de análisis deben adaptarse a la enorme multiplicidad de hipótesis que se prueban.
Que a nivel de diagnostico genético-prenatal mediante la tecnica de microarray, nos permitira identificar el genoma completo del futuro del bebe en busca de pequeñas ganancias o pérdidas de material genético que el cariotipo no alcanza a detectar. Así mismo, se pueden detectar síndromes genéticos fetales severos que pueden comprometer su calidad de vida.
Este documento describe las pruebas de antígenos febriles, las cuales se usan para diagnosticar enfermedades febriles como la fiebre tifoidea, brucelosis y rickettsiosis. Explica que estas pruebas detectan anticuerpos en el suero del paciente contra salmonella, brucella y rickettsias. También provee detalles sobre los métodos de prueba rápida en placa y de titulación en tubo, así como sobre los antígenos y enfermedades específicas que cada prueba evalúa
Fundamentos de técnicas blotting: Southern, Northern, Western. Carolina Herrera
El documento describe las técnicas de Southern blot, Northern blot y Western blot. Estas técnicas comienzan con la separación de moléculas (ADN, ARN o proteínas) mediante electroforesis en gel. Luego, las moléculas se transfieren a una membrana para identificar fragmentos específicos mediante sondas marcadas o anticuerpos. El Southern blot se usa para detectar secuencias de ADN, el Northern blot para detectar genes transcriptos, y el Western blot para detectar proteínas mediante anticuerpos.
Utilidad clinica de la metodologia citogenetica. e2Aleyeli Cordova
El documento describe diferentes técnicas citogenéticas moleculares como bandeo Q, G, C y NOR y sus aplicaciones clínicas. El bandeo Q revela la composición de bases no homogénea a lo largo de los cromosomas. El bandeo G y C permiten identificar alteraciones cromosómicas y mapear genes. El bandeo NOR localiza los organizadores nucleolares en cromosomas acrocéntricos. Juntas, estas técnicas han mejorado significativamente el diagnóstico de trastornos genéticos.
El cultivo celular tiene una larga historia e importancia para la investigación médica y biotecnológica. Involucra el crecimiento de células fuera de su entorno natural mediante tres técnicas principales: cultivo de órganos, explantos y células individuales. Ofrece ventajas como el control del ambiente y la producción de líneas celulares, aunque también presenta limitaciones como la falta de regulación sistémica y la posible dediferenciación celular.
Este documento describe los diferentes tipos de medios de cultivo celular, incluyendo medios definidos, medios suplementados con suero, y las propiedades físico-químicas importantes como pH, CO2, amortiguadores y temperatura. Explica que un medio de cultivo completo contiene soluciones salinas equilibradas, aminoácidos, vitaminas, suplementos orgánicos, factores de crecimiento del suero y antibióticos para prevenir la contaminación.
El documento proporciona información sobre el proceso de fijación histológica. La fijación tiene como objetivo interrumpir los procesos de degradación que ocurren después de la muerte celular y conservar la arquitectura y composición de los tejidos lo más similar posible a como se encontraban en el organismo vivo. Existen diferentes métodos y soluciones químicas de fijación que cumplen funciones como evitar la autólisis, proteger de bacterias, e insolubilizar componentes celulares.
Este documento proporciona información sobre varios análisis de sangre comunes, incluidos el hematocrito, la concentración de hemoglobina, el recuento de glóbulos rojos y blancos, e índices eritrocitarios. Describe los fundamentos, muestras, procedimientos, interpretación de resultados e causas potenciales de error para cada análisis. Además, explica cómo los resultados anormales pueden indicar condiciones como anemia o policitemia.
Este documento describe técnicas de identificación de ácidos nucleicos como Southern blot y Northern blot. Southern blot permite identificar secuencias de ADN mediante la hibridación de una sonda marcada con fragmentos de ADN transferidos a una membrana. Northern blot identifica transcritos de ARN mediante la hibridación de una sonda con ARN transferido a una membrana. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permite amplificar segmentos específicos de ADN.
La anomalía Alder Reily es un trastorno autosómico caracterizado por la presencia de gránulos azurófilos agrupados en racimos en el citoplasma de granulocitos, monocitos y linfocitos. Se diferencia de las granulaciones tóxicas por presentarse en otras células además de neutrófilos y por la ausencia de vacuolas tóxicas. Está asociada a mucopolisacaridosis.
Este documento proporciona información sobre el análisis de frotis de sangre periférica. Explica la técnica para realizar y teñir el frotis, así como el examen microscópico. Describe los hallazgos normales y anormales en la serie roja, serie blanca y plaquetas. Identifica hallazgos preocupantes como blastos, células tumorales o un frotis leucoeritroblástico que sugieren un trastorno hematológico subyacente. El frotis de sangre periférica ofrece
El hematocrito es una prueba de laboratorio que mide el porcentaje de glóbulos rojos en la sangre y proporciona información sobre la capacidad de la sangre para transportar oxígeno. Se realiza tomando una muestra de sangre en un tubo capilar que se centrifuga para separar los componentes de la sangre, y luego se mide la proporción de glóbulos rojos. Los valores normales de hematocrito son del 37% al 42% para adultos, y pueden estar aumentados o disminuidos por varias afecciones médicas.
Este documento proporciona instrucciones para realizar un recuento de plaquetas. Explica que las plaquetas son fragmentos de células que ayudan a la coagulación y mantienen la integridad de los vasos sanguíneos. Describe el procedimiento para preparar una muestra de sangre, contar las plaquetas usando un microscopio y calcular los resultados, los cuales deben estar entre 150,000-450,000 plaquetas por mm3 para ser considerados normales.
Las plaquetas se generan en la médula ósea por fragmentación de los megacariocitos y circulan en la sangre por 10 días. Cumplen un rol fundamental en la hemostasia primaria a través de mecanismos de adhesión, activación y agregación que involucran diversas glicoproteínas de membrana y la síntesis de tromboxano A2. Las plaquetas también participan en procesos fisiológicos y patológicos como la remodelación tisular, señalización citoquímica, inflamación y
El documento describe los procesos de inclusión de tejidos para microscopía óptica e histopatología, incluyendo deshidratación, aclaramiento e infiltración con parafina. Explica los pasos del proceso de inclusión, los agentes químicos utilizados en cada etapa, y los procedimientos para la preparación y orientación de muestras en bloques de parafina antes del corte. También cubre la limpieza y mantenimiento de equipos como procesadores de tejidos y estaciones de inclusión.
El documento describe un método para determinar manualmente la hemoglobina en sangre. El método implica la oxidación de la hemoglobina a cianmetahemoglobina usando ferricianuro de potasio, lo que produce un compuesto estable de color rojo que puede medirse fotométricamente. El procedimiento incluye la preparación de la muestra y el reactivo, la mezcla y reposo de la muestra en el reactivo, y la medición espectrofotométrica a 540 nm para cuantificar la hemoglobina en la muestra.
Quiero compartir la información que recopilé, ya que estuve dudando por la variación de las fuentes y afirmaciones. Después de haber verificado que esto es correcto, decidí subirlo para facilitarle la vida a alguien. ¡Espero sirva de ayuda!
Este documento describe los pasos para realizar un frotis o extensión de sangre. 1) Se coloca una gota de sangre mezclada con anticoagulante sobre un portaobjetos. 2) Otro portaobjetos se coloca sobre la gota formando un ángulo de 45 grados. 3) Se desliza suavemente el segundo portaobjetos sobre el primero para extender la gota de sangre de forma uniforme sobre la superficie.
Algoritmo para la identificación de cocos gramspositivosRai Encalada
Este documento presenta un algoritmo para la identificación de cocos Gram positivos mediante una serie de pruebas bioquímicas y de sensibilidad a antibióticos. El algoritmo comienza con la catalasa y oxidasa/bacitracina/furazolidona para diferenciar entre Staphylococcus, Micrococcus y Streptococcus. Luego utiliza coagulasa, novobiocina y DNAsa termoestable para identificar especies de Staphylococcus como S. aureus o S. saprophyticus. Finalmente emplea pruebas adicionales como fermentación
Este documento resume la investigación sobre el sistema sanguíneo MNSs. Describe los antígenos M, N, S, s y U que se encuentran en las glicoproteínas GPA y GPB. Explica que estos antígenos son heredados de forma codominante y pueden dar lugar a nueve fenotipos diferentes. También analiza factores como genes híbridos y modificaciones en la glicosilación que pueden dar lugar a variantes raras en el sistema MNSs.
El documento describe los procesos de formación de los diferentes tipos de glóbulos blancos o leucocitos (leucopoyesis) y sus características. La leucopoyesis incluye la serie mielocítica que produce neutrófilos, eosinófilos y basófilos en la médula ósea, la serie monocítica que produce monocitos, y la serie linfocítica que produce linfocitos B y T, los cuales maduran principalmente en el timo y médula ósea. También se describen procesos como la leucocitosis
ARTICULO: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0025775317300313
En estas presentaciones, encontraras el uso de la tecnica de los microarrays teniendo en cuenta un caso clinico de manera que podras relacionarlo en la patologia universitaria
MICROARRAY ¿QUE ES?
Es Un formato experimental, basado en la síntesis o fijación de sondas, que representan los genes (o proteinas, o metabolitos), sobre un sustrato sólido (cristal, plástico, silice) y expuestos a las moléculas diana (la muestra).
En donde La tecnología de microarrays de ADN permite realizar análisis genéticos sobre miles de genes simultáneamente.
El análisis de estos experimentos supone un reto desde el punto de vista estadístico, ya que los métodos clásicos de análisis deben adaptarse a la enorme multiplicidad de hipótesis que se prueban.
Que a nivel de diagnostico genético-prenatal mediante la tecnica de microarray, nos permitira identificar el genoma completo del futuro del bebe en busca de pequeñas ganancias o pérdidas de material genético que el cariotipo no alcanza a detectar. Así mismo, se pueden detectar síndromes genéticos fetales severos que pueden comprometer su calidad de vida.
Este documento describe las pruebas de antígenos febriles, las cuales se usan para diagnosticar enfermedades febriles como la fiebre tifoidea, brucelosis y rickettsiosis. Explica que estas pruebas detectan anticuerpos en el suero del paciente contra salmonella, brucella y rickettsias. También provee detalles sobre los métodos de prueba rápida en placa y de titulación en tubo, así como sobre los antígenos y enfermedades específicas que cada prueba evalúa
Fundamentos de técnicas blotting: Southern, Northern, Western. Carolina Herrera
El documento describe las técnicas de Southern blot, Northern blot y Western blot. Estas técnicas comienzan con la separación de moléculas (ADN, ARN o proteínas) mediante electroforesis en gel. Luego, las moléculas se transfieren a una membrana para identificar fragmentos específicos mediante sondas marcadas o anticuerpos. El Southern blot se usa para detectar secuencias de ADN, el Northern blot para detectar genes transcriptos, y el Western blot para detectar proteínas mediante anticuerpos.
Utilidad clinica de la metodologia citogenetica. e2Aleyeli Cordova
El documento describe diferentes técnicas citogenéticas moleculares como bandeo Q, G, C y NOR y sus aplicaciones clínicas. El bandeo Q revela la composición de bases no homogénea a lo largo de los cromosomas. El bandeo G y C permiten identificar alteraciones cromosómicas y mapear genes. El bandeo NOR localiza los organizadores nucleolares en cromosomas acrocéntricos. Juntas, estas técnicas han mejorado significativamente el diagnóstico de trastornos genéticos.
El cultivo celular tiene una larga historia e importancia para la investigación médica y biotecnológica. Involucra el crecimiento de células fuera de su entorno natural mediante tres técnicas principales: cultivo de órganos, explantos y células individuales. Ofrece ventajas como el control del ambiente y la producción de líneas celulares, aunque también presenta limitaciones como la falta de regulación sistémica y la posible dediferenciación celular.
Este documento describe los diferentes tipos de medios de cultivo celular, incluyendo medios definidos, medios suplementados con suero, y las propiedades físico-químicas importantes como pH, CO2, amortiguadores y temperatura. Explica que un medio de cultivo completo contiene soluciones salinas equilibradas, aminoácidos, vitaminas, suplementos orgánicos, factores de crecimiento del suero y antibióticos para prevenir la contaminación.
Enfermedades de Reporte Obligatorio en CerdosJose Fernandez
Este documento describe varias enfermedades de declaración obligatoria en cerdos. Entre ellas se encuentran la cisticercosis porcina, causada por la tenia solium; la encefalomielitis por virus Nipah, que afecta los sistemas respiratorios y nerviosos de los cerdos; y la gastroenteritis transmisible, provocada por un coronavirus que causa diarrea y vómitos. El documento resalta la importancia de implementar medidas sanitarias para prevenir y controlar estas enfermedades en las granjas porcinas.
Este documento describe diferentes métodos para cultivar virus, incluyendo cultivos de bacteriófagos, animales vivos, huevos embrionados y cultivos celulares. Explica que los cultivos virales han permitido el aislamiento y amplificación de partículas virales y han contribuido al descubrimiento de nuevos virus y al desarrollo de vacunas. Además, detalla específicamente los métodos para cultivar virus usando bacterias, animales, huevos y diferentes tipos de cultivos celulares como líneas celulares primarias y continuas
Este documento describe los factores abióticos que afectan a las masas forestales, dividiéndolos en factores naturales como las temperaturas, la luz, la sequía y factores no naturales como la contaminación atmosférica. Los factores naturales pueden ser de origen climático como las heladas o de origen edáfico como las carencias de nutrientes en el suelo. Los factores no naturales incluyen la contaminación por metales pesados y sales procedentes de la combustión que acidifican el suelo y afectan negativamente a los ár
O documento discute o conceito de cultura de células e tecidos, incluindo: 1) A definição de cultura de células e tecidos como técnicas para cultivar células fora do organismo mantendo suas características; 2) A classificação de culturas de células em linhagens de células e culturas de órgãos/tecidos; 3) Os equipamentos básicos necessários para cultivo de células como câmara de fluxo laminar, estufa de CO2 e centrífuga.
1) La ecología estudia las interacciones entre los seres vivos y su medio ambiente, así como los efectos de las modificaciones humanas.
2) La ecología involucra campos como la biología, geología y química. Estudia organismos, poblaciones, comunidades y ecosistemas.
3) La educación ambiental busca promover una relación armónica entre el ser humano y la naturaleza a través del desarrollo sostenible.
Este documento describe diferentes tipos de cultivos celulares, incluyendo cultivos primarios, secundarios y estables continuos. También describe líneas celulares humanas y de otros animales comúnmente usadas, así como técnicas para transferir ADN a células en cultivo. Explica el proceso de generar hibridomas mediante la fusión de células plasmáticas y tumorales para producir anticuerpos monoclonales, los cuales pueden usarse para localizar proteínas a través de técnicas como la inmunolocalización.
Este documento presenta el syllabus de la asignatura de Biotecnología Vegetal de la Universidad Técnica de Esmeraldas para el primer semestre de 2015. El syllabus incluye la justificación, objetivos, unidades temáticas, contenidos, metodologías y formas de evaluación de la asignatura. La biotecnología vegetal busca contribuir al mejoramiento de la producción agrícola y forestal a través de técnicas como la micropropagación y cultivo de tejidos vegetales in vitro.
El documento presenta una clase sobre bioseguridad impartida por la Dra. Joyce Del Pino. La clase introduce los conceptos de bioseguridad y sus objetivos de proteger la salud de los trabajadores de la salud y el medio ambiente. También explica los diferentes riesgos biológicos, químicos y físicos, así como la importancia de seguir normas y procedimientos de seguridad.
El cultivo de tejidos y células ha evolucionado de una técnica difícil a una tecnología reproducible gracias a factores como antibióticos, medios definidos y equipos estandarizados. Incluye el cultivo de órganos embrionarios y de células aisladas para su propagación. Requiere un ambiente esterilizado y un medio de cultivo con nutrientes y suero para mantener vivas las células fuera del cuerpo y aplicarse en áreas como pruebas de drogas, vacunas y producción de proteínas.
Este documento resume varios tópicos literarios recurrentes en la literatura. Entre ellos se encuentran la aurea mediocritas, que hace referencia a buscar el equilibrio y evitar los extremos; carpe diem, que invita a disfrutar de la juventud; memento mori, que recuerda la inevitabilidad de la muerte; y locus amoenus, que describe un lugar placentero en la naturaleza. El documento provee definiciones y ejemplos breves de cada tópico a través de citas literarias.
Este documento resume los principales métodos de diagnóstico de laboratorio para detectar enfermedades infecciosas virales y bacterianas. Describe las técnicas directas e indirectas para identificar virus respiratorios, virus herpes, gastroenteritis virales, enfermedades tropicales como dengue, chikungunya y fiebre amarilla, así como hepatitis, VPH y otras infecciones. El documento proporciona detalles sobre las muestras clínicas, pruebas serológicas, cultivos celulares, microscopía y
El documento describe diferentes técnicas de diagnóstico microbiológico para enfermedades infecciosas, incluyendo diagnóstico directo a través de muestras clínicas, diagnóstico indirecto mediante serología, técnicas moleculares como PCR, y métodos específicos para diagnóstico de micobacterias, virus, y cuantificación viral. Se discuten consideraciones importantes como tipo y calidad de muestras, y ventajas de nuevas técnicas como ser más asequibles y útiles para tratamiento.
Curso básico de citometría de flujo. Cedido por Javier Godino Gómez.Unidad de Separación Celular y Citometria
Servicios Científico Técnicos IIS Aragón. Instituto Aragonés de Ciencias de la Salud. Edificio CIBA
La histología estudia la estructura microscópica de los tejidos. Existen varias técnicas para preparar y analizar los tejidos, incluyendo la fijación, deshidratación, inclusión en parafina, tinción y microscopía de luz. La microscopía electrónica permite un mayor aumento. La histología proporciona información sobre la función celular y sus relaciones con la bioquímica, fisiología y patología.
El documento resume los principales temas literarios del Renacimiento que aparecen con frecuencia a lo largo de la historia de la literatura. Estos incluyen carpe diem (aprovecha el momento), beatus ille (la vida retirada es feliz), aurea mediocritas (la virtud está en el equilibrio), donna angelicata (la mujer como símbolo espiritual), descriptio puellae (descripción de la amada) y locus amoenus (lugar delicioso para conversaciones pastoriles).
Este documento describe los principales tipos de tinción utilizados en histología, incluyendo hematoxilina, eosina, azul de toluidina, tricrómica de Gomori, tricrómica de Masson, tricrómica de Mallory, Weigert para elastina, azan de Heidenhain, impregnación argéntica, Wright, Orceína y PAS. Cada tinción se describe por los colores que da a las diferentes estructuras celulares como núcleos, citoplasma y fibras, así como las estructuras que tiñe de
Este documento trata sobre los principios del cultivo de microorganismos. Explica que los medios de cultivo proveen los nutrientes necesarios para el crecimiento óptimo de los microorganismos y que factores ambientales como la temperatura, pH y oxígeno también influyen en su crecimiento. Además, describe diferentes técnicas para obtener cultivos puros y diferentes tipos de medios de cultivo como medios sólidos, líquidos, selectivos y diferenciales. Finalmente, explica cómo se preparan los medios de cultivo y los diferentes macronut
Este documento describe técnicas básicas para el cultivo y estudio de bacterias en el laboratorio, incluyendo cómo preparar el área de trabajo, transferir muestras de forma aséptica, y sembrar bacterias en medios líquidos, semisólidos y sólidos. Explica cómo aislar bacterias individuales para obtener cultivos puros mediante técnicas como la siembra por estría y cómo caracterizar bacterias basado en sus características culturales y microscópicas.
El documento describe la evolución y tipos de medios de cultivo utilizados en microbiología. Explica que los medios de cultivo contienen nutrientes necesarios para el crecimiento microbiano y deben mantener condiciones como temperatura, pH y oxígeno adecuados. Los primeros medios utilizaban gelatina pero luego se adoptó el agar, y actualmente existen más de 10,000 medios diferentes. Los medios se han vuelto más sofisticados para promover el crecimiento selectivo de ciertos microorganismos.
Este documento describe un experimento de laboratorio realizado por estudiantes para analizar el efecto de antibióticos naturales y sintéticos como la miel y la penicilina en microorganismos cultivados. Explica los tipos de medios de cultivo, técnicas para obtener cultivos puros como la siembra en placas, y proporciona detalles sobre antibióticos naturales como la miel y plantas, y antibióticos sintéticos como la penicilina. El objetivo es observar los microorganismos bajo el
Este documento describe los métodos para seleccionar, mantener y mejorar cepas microbianas industriales. Explica que la selección de cepas comienza considerando su estabilidad genética, velocidad de crecimiento, ausencia de contaminantes, requerimientos nutricionales, capacidad de conservación y rendimiento del producto deseado. Luego describe métodos para obtener cepas como el aislamiento de fuentes naturales o colecciones, y técnicas para mantenerlas como subcultivo, congelación, liofilización y cultivos en t
Este documento presenta información sobre ecología y microbiología. Explica los cinco reinos biológicos, incluidas las características de bacterias, protistas, hongos, plantas y animales. También describe la estructura y fisiología de bacterias, virus y protistas. Explica conceptos como nutrición, crecimiento bacteriano, fases del crecimiento y factores que afectan a los microorganismos.
Este documento describe un procedimiento de laboratorio para aislar y cultivar microorganismos de diferentes fuentes, incluyendo material vegetal enfermo, suelo y aire. El procedimiento involucra la desinfección de las muestras, su siembra en medios de cultivo específicos y la incubación para permitir el crecimiento microbiano. Los resultados incluyeron cultivos puros de bacterias gram positivas, gram negativas y hongos.
El documento presenta los resultados de una práctica de laboratorio realizada por tres estudiantes para sembrar y contar bacterias mesófilas aerobias, hongos filamentosos y levaduras presentes en muestras diversas. Se utilizaron medios de cultivo como agar de patata y dextrosa, el cual contiene antibióticos para inhibir el crecimiento de bacterias y permitir el aislamiento de hongos y levaduras. Los estudiantes realizaron siembras en superficie y en profundidad para obtener recuentos microbiológicos
Este documento describe los medios de cultivo, la siembra, el aislamiento y la técnica aséptica para el cultivo de microorganismos. Explica los componentes comunes de los medios de cultivo como el agar y los extractos, y los tipos de medios como los medios de enriquecimiento y los medios selectivos. También detalla los pasos para el aislamiento de microorganismos a través de la siembra en medios sólidos y la obtención de colonias puras, así como la importancia de trabajar bajo condiciones aséptic
EXPOSICION CULTIVO IN VITRO grupo 4.pptxYEIMYAYALA1
El cultivo in vitro es una técnica para cultivar células y tejidos vegetales fuera de su entorno natural en un ambiente controlado de laboratorio. Los explantes más usados son las yemas vegetativas, segmentos de tallo y hojas. El objetivo es producir plantas de forma rápida a través de la micropropagación mediante la regeneración de plantas a partir de una célula.
El documento describe métodos de siembra y aislamiento de microorganismos, incluyendo diferentes tipos de medios de cultivo y técnicas de aislamiento como la siembra por agotamiento. Explica que los medios de cultivo proporcionan nutrientes a los microorganismos para permitir su crecimiento controlado, y que las técnicas de aislamiento como la siembra por agotamiento permiten obtener colonias aisladas para su estudio individual.
Este documento presenta conceptos básicos sobre bacteriología clínica. Resume los requisitos ambientales de las bacterias, incluida la temperatura y el oxígeno necesarios para su crecimiento. Explica la importancia de la toma, preservación y transporte adecuados de muestras para el aislamiento e identificación de bacterias en el laboratorio clínico. También describe los principios de la tinción de Gram y otras técnicas microscópicas para la observación preliminar de muestras.
La visita al Laboratorio de Biología Molecular y Genómica de la UNAM describió las instalaciones, equipos y proyectos del laboratorio. Se divide en cuatro secciones con mesas de trabajo, un cuarto oscuro y de cultivo, un anexo y cubículos. Entre los equipos se encuentran centrifugas, incubadoras, un espectrofotómetro y autoclaves. Los proyectos incluyen investigación sobre la levadura, genes bajo estrés y la bacteria Escherichia coli. El laboratorio implementa estrictas medidas de seguridad.
El documento presenta los resultados de un informe sobre medios de cultivo utilizados para cultivar Escherichia coli. Se describen dos métodos de siembra: uno en un caldo nutritivo líquido y otro en agar MacConkey sólido. Tras la incubación, se observó el crecimiento de bacilos Gram negativos característicos de E. coli en el agar.
GUIA LABORATORIO PRIMER CORTE TÉCNICAS BÁSICAS DE LABORATORIO PARA AISLAMIENT...DAYANNAVANESSASANCHE
Este documento presenta las técnicas básicas de laboratorio para el aislamiento, cultivo y caracterización de bacterias. Describe los métodos de siembra, los tipos de medios de cultivo y sus usos, y el procedimiento para realizar siembras bacterianas en tubos y cajas de Petri para su posterior análisis e identificación.
El documento presenta información sobre experimentos realizados para observar la ductibilidad y tensión superficial en diferentes líquidos. Incluye materiales, procedimientos y observaciones para un experimento sobre un similar de piedra caliza y otro sobre tensión superficial entre líquidos de diferente densidad como agua, alcohol y aceite.
La microbiología estudia los microorganismos como bacterias, hongos y protozoos. La microbiología incluye campos como bacteriología, micología y parasitología. El documento describe brevemente estos campos y también define términos importantes en microbiología como anticuerpo, comensal, disbiosis, enterotipo, fermentación, flora intestinal, probiótico, prebiótico y simbiosis.
1) La clasificación de las bacterias se realiza según su morfología, metabolismo, tolerancia a temperaturas y pH, entre otros factores. Las bacterias pueden presentarse como cocos, bacilos o en forma de espiral. 2) Los medios de cultivo son esenciales para estudiar bacterias en el laboratorio y pueden ser líquidos, sólidos o semisólidos, naturales, sintéticos o enriquecidos. 3) La morfología de las colonias bacterianas en medios sólidos incluye características como la forma
Este documento presenta las prácticas de laboratorio de microbiología que se realizarán. Contiene información sobre normas de bioseguridad, preparación de medios de cultivo, microorganismos en el ambiente, y siembra de microorganismos. El objetivo general es conocer y estudiar microorganismos que pueden afectar a los seres vivos.
El documento describe los objetivos y fundamentos teóricos de la fermentación microbiana. Explica que la fermentación es un proceso catabólico anaeróbico que transforma moléculas complejas en moléculas simples dentro del metabolismo microbiano. También describe los medios de cultivo y variables como la temperatura y pH que deben controlarse durante el proceso de fermentación.
Una unidad de medida es una cantidad de una determinada magnitud física, definida y adoptada por convención o por ley. Cualquier valor de una cantidad física puede expresarse como un múltiplo de la unidad de medida. Para entender mejor las mismas, hay que saber como se pueden convertir en otras unidades de medida.
"Abordando la Complejidad de las Quemaduras: Desde los Orígenes y Factores de...AlexanderZrate2
Las quemaduras, una de las lesiones traumáticas más comunes, representan un desafío significativo para el cuerpo humano. Estas lesiones pueden ser causadas por una variedad de agentes, desde el contacto con el calor extremo hasta la exposición a productos químicos corrosivos, la electricidad y la radiación. Independientemente de su origen, las quemaduras pueden provocar un amplio espectro de daños, que van desde lesiones superficiales de la piel hasta afectaciones graves de tejidos más profundos, con potencial para comprometer la vida del individuo afectado.
La incidencia y gravedad de las quemaduras pueden variar según factores como la edad, la ocupación, el entorno y la atención médica disponible. Las quemaduras son un problema global de salud pública, con impacto no solo en la salud física, sino también en la calidad de vida y la salud mental de los afectados. Además del dolor y la discapacidad física que pueden ocasionar, las quemaduras pueden dejar cicatrices permanentes y aumentar el riesgo de infecciones y otras complicaciones a largo plazo.
El manejo adecuado de las quemaduras es esencial para minimizar el riesgo de complicaciones y promover una recuperación óptima. Desde los primeros auxilios en el lugar del incidente hasta el tratamiento médico especializado en centros de quemados, se requiere una atención integral y multidisciplinaria. Además, la prevención juega un papel fundamental en la reducción de la incidencia de quemaduras, mediante la educación pública, la implementación de medidas de seguridad en el hogar, el trabajo y otros entornos, y la promoción de políticas de salud y seguridad efectivas.
En esta exploración exhaustiva sobre el tema de las quemaduras, analizaremos en detalle los diferentes tipos de quemaduras, sus causas y factores de riesgo, los mecanismos fisiopatológicos involucrados, las complicaciones potenciales y las estrategias de tratamiento y prevención más relevantes en la actualidad. Además, consideraremos los avances científicos y tecnológicos recientes que están transformando el enfoque hacia la gestión de las quemaduras, con el objetivo último de mejorar los resultados para los pacientes y reducir la carga global de esta importante condición médica.
Es en el Paleozoico cuando comienza a aparecer la vida más antigua. En Venezuela, el Paleozoico puede considerarse concentrado en tres regiones positivas distintas:
Región Norte del Escudo Guayanés.
Cordillera de los Andes venezolanos.
Sierra de Perijá.
Procedimientos para aplicar un inyectable y todo lo que tenemos que hacer antes de aplicarlo, también tenemos los pasos a seguir para realzar una venoclisis.
Presentación con todo tipo de contenido sobre el hábitat del desierto cálido. Perfecto para exposiciones escolares. La presentación contiene las características del desierto cálido así como geográficamente donde se encuentra al rededor del mundo. Además contiene información sobre la fauna y flora y sus adaptaciones al medio ambiente en este caso, el desierto cálido. Por último contiene curiosidades y datos importantes sobre el desierto cálido.
Reacciones Químicas en el cuerpo humano.pptxPamelaKim10
Este documento analiza las diversas reacciones químicas que ocurren dentro del cuerpo humano, las cuales son esenciales para mantener la vida y la salud.
2. Índice
1. Introducción.
1.1. Definición.
1.2. Historia.
2. Tipos de cultivos celulares.
3. Medios de cultivo.
4. Dificultades de la implantación de cultivos en un organismo vivo
5. Rutinas en el trabajo con cultivos celulares.
6. Técnicas.
7. Equipos.
8. Aplicaciones.
9. Ventajas y desventajas.
4. Definición
Es un modelo de estudio in vitro realizado con unas técnicas
que permiten mantener al máximo las propiedades
fisiológicas bioquímicas genéticas
5. Historia
El primer investigador fue Wilhelm Roux que cultivó células de
embrión de pollo en solución salina durante días.
Demostrando que las células embrionarias podían sobrevivir sin
requerir la presencia de un organismo.
Tenían una limitación inicial: Los cultivos no tenían medios nutritivos
adecuados para la propagación celular.
M. Burrows descubrió que el plasma era un nutriente esencial en los
medios de cultivo, óptimos para la propagación de células.
6. Historia
Originario del siglo XIX: Para el estudio de las
variaciones/comportamiento de las células animales libres
ocurridas dentro del organismo y bajo el estrés de un experimento.
En la actualidad, pueden cultivarse en el laboratorio, una
amplia gama de células procedentes de diferentes
tejidos organismos
9. Cultivo de órganos
Colocamos el órgano rejilla en interfase líquido-gaseoso que
permite obtener nutrientes y liberar desechos.
Mantener la estructura característica del tejido in vivo
Diferenciación de tipos celulares
Inconveniente: Proliferación celular limitada
Se necesita nuevo explante para cada experimento
Difícil cuantificación y la cantidad de material que se puede
cultivar es reducida
10.
11. Explantes primarios
Colocamos un fragmento de tejido/órgano interfase sólido-líquido
en soporte de vidrio/plástico.
Se adhieren a la superficie
En la periferia pueden migrar y proliferar
Útil en pequeñas cantidades de tejido. Ej.- biopsias de piel
12. Cultivo celular primario
Es el más utilizado Explantes primarios
Se obtiene a partir de Suspensiones de células disgregadas
Se pierden las uniones celulares
Las células son capaces de proliferar notablemente
Cuando ocupan toda la superficie, se inhibe la proliferación
Cultivos en suspensión
Hay dos tipos de cultivo celular primario
Cultivos en monocapa
13. Cultivo celular primario: CULTIVOS EN SUSPENSIÓN
Las células crecen en suspensión en el medio de cultivo
1. Recolectar en un tubo
2. Eliminar el medio de cultivo mediante centrifugación
3. Lavar con suero fisiológico antes de la extracción y
purificación
14. Cultivo celular primario: CULTIVOS EN MONOCAPA
Las células crecen en monocapa adherida a la pared del frasco de
cultivo.
Podemos utilizar el propio frasco para continuar el proceso de
extracción.
Podemos pasar la monocapa a un tubo.
15. Cultivos histotípicos y organotípicos
Cultivos histotípicos
Único tipo celular elevada densidad celular
Crean una estructura tridimensional parecida al tejido original
Cultivos organotípicos
Varios tipos celulares muy parecidos a los original
Base de la ingeniería de tejidos
Objetivo final: Crear tejidos “in vitro” completamente funcionales que
pueden utilizarse en injertos o trasplantes.
17. Medios de cultivo
Medios de cultivo Condiciones necesarias para el
desarrollo de organismos
Demostrar ciertas características bioquímicas de los microorganismos
Nutrientes
Factores de crecimiento
Otros componentes
18. Composición de los medios de cultivo
● Peptonas
○ Se obtienen por digestión enzimática o química de proteínas animales o vegetales.
○ Ricas en péptidos y aa.
● Extractos, los más habituales son:
○ Extracto de carne.
○ Extracto de levadura.
● Fluidos corporales
○ Los más utilizados son la sangre y el plasma.
○ Contienen factores de crecimiento que facilitan el crecimiento de algunos
microorganismos.
● Los Sistemas Amortiguadores se utilizan para mantener el pH del medio. Se usan sobre
todo fosfatos disódicos y dipotásicos.
19. Composición de los medios de cultivo II
● Indicadores de pH: se añaden con frecuencia a los medios de cultivo para:
○ Poner de manifiesto ciertas propiedades bioquímicas.
○ Comprobar si el microorganismos es capaz de utilizar ciertas sustancias.
● Agentes reductores (cisteína, tioglicolato y otros): Se añaden a los medios de cultivo
para crear condiciones que permitan el desarrollo de microorganismos anaerobios.
● Agentes selectivos (cristal violeta, sales biliares, determinados antibióticos…): se
usan para convertir al medio selectivo a determinados microorganismos.
● Si el medio es sólido, ágar: agente gelificante, polisacárido que se obtiene de las algas
marinas.
21. ● Proliferación
● Diferenciarse en los tipos celulares deseados
● Sobrevivir en el receptor tras el implante
● Integrarse en el tejido circundante
● Funcionar apropiadamente durante toda la
vida del receptor
● No producir daño al receptor
Dificultades en la implantación de cultivos en un organismo vivo
23. Puntos a tener en cuenta en cultivos celulares
● No mezclar nunca dos cultivos diferentes.
● No tener mucho tiempo fuera de estufa los cultivos.
● No invadir campos.
● Tapar rápidamente los frascos.
● Agitación del cultivo sembrado de dcha/izq y de arriba/abajo. Nunca agitar en
círculo.
● Para transferir las células un pequeño número de estas a un nuevo
recipiente
Cultivarse más tiempo Si se transfiere habitualmente se evita que
envejezcan (situaciones prolongadas de alta densidad celular)
○ Cultivos adherentes (despegar y pasar)
○ Cultivos en suspensión (tomar unas pocas y resuspender en medio fresco)
24. Puntos a tener en cuenta en cultivos celulares II
● Las células están en continua división durante el
cultivo, crecen hasta ocupar todo el área
disponible. Esto puede generar varios problemas:
○ Agotamiento de los nutrientes del medio
○ Acumulación de células apoptóticas y/o
necróticas
○ Inhibición de la división celular por contacto
Evitarlo cambiar este
medio:
● Cultivos en
suspensión
(centrifugación)
● Cultivos adherentes
(aspiración)
26. Técnicas
Los cultivos animales tienen aplicación en muchas
investigaciones, hasta tal punto que han sido fundamentales
para numerosos avances científicos alcanzados en distintas
ramas biomédicas.
Las técnicas de cultivo celular permiten el estudio de:
● Metabolismo celular.
● El control del ciclo celular.
● El cultivo de virus.
● La clonación.
27. Hay investigaciones, como el trabajo con animales
transgénicos, que no pueden realizarse sin el cultivo de células.
Asimismo se han desarrollado numerosas aplicaciones para
investigación en biología celular y bioquímica, en farmacología
y toxicología, en procesos industriales para la obtención de
anticuerpos u hormonas y técnicas diagnósticas para el
diagnóstico prenatal de enfermedades y para el cáncer...
29. Equipos
● Realización del cultivo
○ Autoclave
○ Baño termostático
○ Incubador con CO2
○ Campana de flujo laminar
● Visualización y verificación del cultivo
○ Microscopio invertido
● Mantenimiento del cultivo en un breve período
de tiempo
○ Nevera
○ Depósito de CO2
● Mantenimiento del cultivo en un período
prolongado
○ Congelador
○ Depósito de CO2
30. Autoclave
Sirve para esterilizar todo el material que
vamos a utilizar.
Es de metal y debe aguantar las elevadas
temperaturas y presiones.
Realización del cultivo celular
31. Campana de flujo laminar
Permiten obtener una zona estéril y
segura en la que trabajar.
Realización del cultivo celular
32. Baño termostático
Son recipientes que contienen agua y un
sistema de regulación de la temperatura.
Se utilizan para atemperar medios de
cultivo o incluso para incubar cultivos de
microorganismos.
Realización del cultivo celular
33. Incubador con CO2
Es un dispositivo que sirve para
mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares.
Mantiene la temperatura, la humedad
y otras condiciones en grado óptimo,
tales como el contenido de dióxido de
carbono (CO2
) y de oxígeno en su
atmósfera interior.
Realización del cultivo celular
34. Microscopio invertido
En este microscopio, los cultivos o muestras se
pueden colocar en diferentes recipientes con
espesores y características ópticas variables, lo
cual permite observar organismos o tejidos en
cultivo sin una preparación previa.
Además, se pueden observar grandes cultivos o
muestras bajo estados muy naturales, lo cual
permite disminuir las condiciones de estrés
Visualización y verificación del cultivo
35. Nevera y sistema de CO2
La nevera sirve para mantener los cultivos
entre 2-4 ºC.
El sistema de CO2
sirve para mantener las
condiciones adecuadas.
Mantenimiento del cultivo celular (breve período de tiempo)
36. Congelador y CO2
Mantienen los cultivos celulares a
temperaturas inferiores a -20ºC
Nos permiten conservar los cultivos
durante mucho más tiempo,
comparándolo con la conservación en
nevera.
Mantenimiento del cultivo celular (período de tiempo prolongado)
38. Con los cultivos celulares podemos estudiar distintas
actividades de las células, como por ejemplo:
● Actividad intracelular.
● Movimiento intracelular de moléculas.
● Interacción célula-célula.
● Interacción con el medio extracelular.
● Genética.
● Productos celulares y tisulares.
Aplicaciones
39. Cultivo celular de las células “in vitro”.
Sirve para trabajar:
● En estudios contra el cáncer
Reproducción asistida
● En reproducción y diferenciación celular
Clonación
● Medicina regenerativa de tejidos (total o parcial)
Principales usos
40. Ramas en las que se utilizan los cultivos
Algunas de las áreas que más trabajan con
cultivos son:
● Oncología
● Virología
● Inmunología
● Odontología
● Otras ramas: transplantes, reproducción
asistida...
42. ● Control fino y preciso del medio. Se pueden controlar
factores:
○ Físico-químicos: pH, Ta
, presión osmótica, niveles de O2
/CO2
…
○ Fisiológicos: Hormonas, nutrientes, factores de crecimiento
Ventajas
43. ● Caracterización y homogeneidad de la muestra. Todas
las células son homogéneas, lo que supera el problema de
la heterogeneidad.
44. ● Economía. Al realizarse en volúmenes reducidos, se
requieren menos cantidad de reactivos o drogas.
45. ● Técnica sensible. El crecimiento celular es muy lento y se
necesita un medio muy complejo similar al plasma o líquido
intersticial. Por ello se necesitan unas continuas condiciones
de asepsia.
Desventajas
46. ● Cantidad y coste. Producir 1g de tejido en cultivo cuesta 10
veces más que obtener tejido animal. Además, se obtienen
cantidades muy pequeñas (para tener 100g requerimos
instalaciones industriales).
47. ● Inestabilidad. Muchas líneas celulares son inestables
debido a aneuploidías. Para evitarlo, se resiembra cada
cierto tiempo con líneas estables a partir de un stock.
48. ● Difícil relación células cultivadas-células derivadas del
tejido, debido a sus diferentes propiedades.
● Problemas de inestabilidad genética al realizar varios
pases de cultivos de células no transformadas.