Una breve presentación en powerpoint a cerca de la electroforesis capilar, el funcionamiento del analizador capillarys 2 flex piercing y su utilidad en el diagnostico diferencial de diferentes patologías mediante la interpretación de proteinogramas.
A brief powerpoint presentation about capillary electrophoresis, the operation of the capillarys 2 flex piercing analyzer and its usefulness in the differential diagnosis of different pathologies through the interpretation of proteinograms.
La relajación de las especies excitadas va acompañada de la producción de espectros de líneas UV y visible, que son útiles para el análisis cualitativo y cuantitativo de elementos. Históricamente, la espectroscopia de emisión atómica requería la atomización y excitación mediante una flama. Estos métodos todavía tienen aplicaciones importantes para el análisis químico. Sin embargo, las fuentes de plasma se han convertido en las más utilizadas en espectrometría de emisión atómica.
Espectrofotometría, Absorbancia, Transmitancia, Ley de Beer, Longitud de Onda, Celdas, Monocromador, Concentración, Curva de calibración, Química Analítica
Una breve presentación en powerpoint a cerca de la electroforesis capilar, el funcionamiento del analizador capillarys 2 flex piercing y su utilidad en el diagnostico diferencial de diferentes patologías mediante la interpretación de proteinogramas.
A brief powerpoint presentation about capillary electrophoresis, the operation of the capillarys 2 flex piercing analyzer and its usefulness in the differential diagnosis of different pathologies through the interpretation of proteinograms.
La relajación de las especies excitadas va acompañada de la producción de espectros de líneas UV y visible, que son útiles para el análisis cualitativo y cuantitativo de elementos. Históricamente, la espectroscopia de emisión atómica requería la atomización y excitación mediante una flama. Estos métodos todavía tienen aplicaciones importantes para el análisis químico. Sin embargo, las fuentes de plasma se han convertido en las más utilizadas en espectrometría de emisión atómica.
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IMÁGENES SUBLIMINALES EN LAS PUBLICACIONES DE LOS TESTIGOS DE JEHOVÁClaude LaCombe
Recuerdo perfectamente la primera vez que oí hablar de las imágenes subliminales de los Testigos de Jehová. Fue en los primeros años del foro de religión “Yahoo respuestas” (que, por cierto, desapareció definitivamente el 30 de junio de 2021). El tema del debate era el “arte religioso”. Todos compartíamos nuestros puntos de vista sobre cuadros como “La Mona Lisa” o el arte apocalíptico de los adventistas, cuando repentinamente uno de los participantes dijo que en las publicaciones de los Testigos de Jehová se ocultaban imágenes subliminales demoniacas.
Lo que pasó después se halla plasmado en la presente obra.
Presentación de la conferencia sobre la basílica de San Pedro en el Vaticano realizada en el Ateneo Cultural y Mercantil de Onda el jueves 2 de mayo de 2024.
La Unidad Eudista de Espiritualidad se complace en poner a su disposición el siguiente Triduo Eudista, que tiene como propósito ofrecer tres breves meditaciones sobre Jesucristo Sumo y Eterno Sacerdote, el Sagrado Corazón de Jesús y el Inmaculado Corazón de María. En cada día encuentran una oración inicial, una meditación y una oración final.
SEMIOLOGIA DE HEMORRAGIAS DIGESTIVAS.pptxOsiris Urbano
Evaluación de principales hallazgos de la Historia Clínica utiles en la orientación diagnóstica de Hemorragia Digestiva en el abordaje inicial del paciente.
1. Gonza Escobar, Josue Jonas
Roman Zela, Bryam Alberto
Zárate Carpio, Antonella Alexandra
Electroforesis
SEMINARIO 10/11/23
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR
DE SAR MARCOS
INGENIERIA BIOMÉDICA
2. ÍNDICE
¿QUÉ ES LA ELECTROFORESIS?
¿CÚALES SON SUS COMPONENTES?
ELECTROFORESIS DE PROTEINAS Y
DE ÁCIDOS NUCLEICOS
INTRODUCCIÓN PROCEDIMIENTO
TIPOS DE ELECTROFORESIS
APLICACIONES
VENTAJAS Y LIMITACIONES
RESULTADOS
1
2
3
4
5
6
7
8
9
CONCLUSIONES
10
3. INTRODUCCIÓN
Fuente de
alimentación
Generamos un campo eléctrico: Las
biomoléculas que presenten carga
eléctrica se desplazarán hacia el
polo de carga opuesta al de la
molécula.
Estas migraciones se dan a través
de un gel o matriz porosa.
Las moléculas de diferentes
tamaños o pesos moleculares
migrarán a diferentes velocidades:
las más livianas se moverán más
rápido que las pesadas.
polo
positivo
polo
negativo
4. ¿QUE ES LA ELECTROFORESIS?
ETIMOLOGÍA
ELECTRO - Electricidad
FORESIS - Transporte
Técnica que nos permite separar y analizar
biomoléculas (generalmente proteínas y ácidos
nucleicos) en función de su peso molecular (tamaño)
y mediante una campo eléctrico. (en función de su
movilidad)
biomoléculas separadas
5. MIGRACIÓN DE LAS BIOMOLÉCULAS
pb (Pares de bases)
kDa (Kilo Dalton)
MEDICIONES
6. ELECTROFORESIS LIBRE Y DE ZONA
La muestra se desplaza sobre
un soporte sólido.
La muestra se desplaza sobre
disoluciones o suspensiones.
Poco poder de resolución.
8. BUFFER O TAMPÓN
pH básico
pH ácido
La mayoría de las biomoléculas poseen una
carga eléctrica cuya magnitud depende del
pH del medio en el que se encuentran
Durante la electroforesis se produce la
electrolisis del agua, generándose protones
en el ánodo e iones hidroxilo en el cátodo.
Esto afectaría mucho a la acidez o
basicidad del entorno, lo que podría afectar
a la muestra.
El pH influye en la carga neta de las
biomoléculas.
El pH se ajusta de acuerdo a lo que se
quiera lograr en la separación.
9. SOPORTE ELECTROFORÉTICO
Gel poroso
Permite el paso de moléculas
Material inerte: sin carga y no produce adsorción
a la muestra
acetato de celulosa / papel / agar /
almidón
NO RESTRICTIVO
Tamaño poro >>> Tamaño moléculas
Separación solo por cargas.
Electroforesis de proteínas
agarosa / poliacrilamida
RESTRICTIVO
Tamaño poro : Tamaño moléculas
Separación por cargas y tamaño.
Electroforesis de proteínas (CARGA Y TAMAÑO)
poliacrilamida
Electroforesis de ácidos nucleicos (TAMAÑO)
10. ELECTROFORESIS DE ÁCIDOS NUCLEICOS
ELECTROFORESIS DE PROTEINAS
Los ácidos nucleicos solo poseen carga negativa (debido a sus grupos
fosfato) , por lo cual, en una electroforesis, estos migrarán hacia el polo
positivo (ÁNODO).
Los geles más utilizados son los de agarosa y poliacrilamida.
Útil para la separación de fragmentos de distinto tamaño de ADN.
Las proteínas poseen carga positiva y carga negativa. En este caso,
se realiza pretratamiento con detergentes, como el dodecilsulfato
de sodio (SDS), que les confiere carga negativa; con ello se
homogenizan las proteínas de la muestra y todas migrarán hacia el
polo positivo, y sólo se separarán por tamaño.
Separación por carga y tamaño.
11. [agarosa]
tamaño de las
moléculas
Método estándar cuando no se requiere
de un alto poder de resolución.
Alto rango de tamaño de separación.
Poder de resolución bajo.
Se corren de forma horizontal.
(50 pb hasta unas 40 kb)
Electroforesis en gel de agarosa
Bajo rango de tamaño de los fragmentos que podemos
separar.
Poder de resolución alto.
Se corren de forma vertical.
Son más complicados en su elaboración y manipulación.
(5-600 pb)
(permite separación de moléculas que difieren en solo 1pb)
Electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE)
gel + resistente,
no se desliza
12. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
ELECTROFORESIS NATIVA
(NO DISOCIANTE)
Las muestras se separan sin alterar su estructura
nativa: mantienen su estructura tridimensional. Las
proteinas siguen siendo funcionales y mantienen
las interacciones entre subunidades.
Es útil para estudiar interacciones proteína-
proteína, proteína-ADN, entre otros, en su estado
natural.
Migran en función de su carga, tamaño y de su
forma.
ELECTROFORESIS DESNATURANTE
(DISOCIANTE)
Implica la desnaturalización de las muestras antes
de cargarlas en el gel. Este proceso altera la
estructura tridimensional de las moléculas.
Las moléculas se separan en el gel según su
tamaño, ya que la carga y la forma no son
factores predominantes debido a la
desnaturalización.
Se pueden comparar tamaños sin que la
estructura secundaria interfiera.
agente
13. SELECCIÓN DEL TAMAÑO DE LOS POROS
identificacion de
moleculas
específicas
cálculo del
porcentaje de
acrilamida
14. TINCION DE PROTEINAS
BANDAS
Representa una población de moléculas
con propiedades similares, ya sea en
términos de tamaño molecular o de
carga.
AZUL DE COOMASSIE
ácidos nucleicos
luz ultravioleta
BROMURO DE ETIDIO
identificación de
bandas de interés
proteinas
entre cuántos pares
de bases
15. MARCADORES DE PESO MOLECULAR
Sustancias con PM
conocidos : Estándares
de referencia.
Por comparación
podemos averiguar
el PM aparente de
nuestra proteína.
estimar el tamaño de las moléculas
desconocidas en función de la
distancia migratoria de sus bandas
en el gel.
16. TIPOS DE TAMPÓN DE CORRIDA
Son aquellos en el cual todos los
compuestos tienen el mismo pH
Diferencia en composición y en
pH - Concentrador y Separador
17. PROCEDIMIENTO
El procedimiento para realizar una electroforesis puede variar según el
tipo de electroforesis que estés realizando y del tipo de moléculas que
estés separando.
18.
19. Preparación del
gel y muestras
1
2
Construcción de la
cámara de
electroforesis
Conexión de
electrodos y aplicación
de corriente eléctrica
3
PROCEDIMIENTO
Tampón de carga
Glicerol
Azul de bromofenol
Dodecilsulfato de sodio
Tampón
electrolítico
TBE
TAE
Tris glicina
20. 4 Migración y
separación
Detención y
visualización
5
Análisis de
resultados
6
PROCEDIMIENTO
Azul de Coomassie: proteínas
Xileno-cianol y verde cianol
Bromuro de etidio
Colorantes
22. TIPOS DE ELECTROFORESIS
Existen varios tipos de electroforesis, cada
uno diseñado para separar un tipo particular
de molécula. Algunos de los tipos de
electroforesis más comunes incluyen:
Electroforesis
Vertical
Electroforesis
Horizontal
Isoelectroenfoque
Electroforesis de
Capilaridad
Electroforesis de
Campo Pulsado
Electroforesis
Bidimensional
24. * SDS-PAGE
Separación de proteínas en
masas moleculares por los
efectos de filtración por geles.
Tipo de electroforesis en gel de
poliacrilamida que se
encuentra en presencia de
dodecilsulfato sódico.
SDS
Gel acumulador
Gel separador
DISCONTINUA:
26. TIPOS DE ELECTROFORESIS
3 ISOELECTROENFOQUE
Separar proteínas y otros
biomoléculas en función de sus
puntos isoeléctricos (pI).
Las proteínas en la muestra se
mueven hacia el punto del gel
donde el pH coincide con su pI.
UREA
28. 5
TIPOS DE ELECTROFORESIS
ELECTROFORESIS DE
CAPILARIDAD
Se basa en la diferente velocidad de
desplazamiento de las distintas
biomoléculas a través de un medio
líquido, al someterlas a la acción de
un alto campo eléctrico.
Alta rapidez de análisis
Alta eficiencia de separación
Corto tiempo
Características
Variedad
29. 6
TIPOS DE ELECTROFORESIS
ELECTROFORESIS DE
CAMPO PULSADO
Separación de ADN de alto peso
molecular (hasta 10 kpb) por medio
de la alternación de campos
eléctricos (homogéneo y no
homogéneo).
Variaciones
OFAGE
FIGE
TAFE
CHEF
PACE
RGE
CFGE
ZIFE
ST/RIDE
Subtificación
30. APLICACIONES DE LA ELECTROFORESIS
La electroforesis tiene una amplia variedad de
aplicaciones en la investigación científica, la
medicina y la industria.
MEDICINA Y
ANÁLISIS
CLÍNICO
BIOLOGÍA
MOLECULAR
DETECCIÓN DE
FARMACOS
ANÁLISIS
FORENSE
31. PRUEBA DE PATERNIDAD
MEDICINA FORENSE
Ejemplo de un
caso de
criminalística
resuelto
utilizando
electroforesis
en gel vertical
de acrilamida.
Cada pico corresponde a un alelo, el hijo (H) debe
poseer un alelo de la madre (M) y otro del padre
(P) para que la paternidad sea compatible
33. ANÁLISIS EN LA MUTACIÓN GÉNICA
El cambio de un nucleótido en
el genoma puede ser
indicativo de alguna
patología, existen muchas
mutaciones puntuales
implicadas en el desarrollo de
enfermedades (Tabla 3); y
una forma de identificarlas es
a través de la secuenciación
del ADN mediante el método
de Sanger.
34. ANÁLISIS EN LA MUTACIÓN GÉNICA
La EC permite el análisis de la expansión de repeticiones de
nucleótidos en el genoma (STRs), constituyéndose como la
herramienta ideal para el diagnóstico de algunas enfermedades.
36. EC DEL LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO
El
banda de Bence Jones de
doble banda que cuantificó en
7,0 g/L, se mostró mediante
la inmunofijación es causada
por cadenas ligeras κ libres.
Condiciones electroforéticas
como en la figura 1
37. DETECCIÓN DE
COMPUESTOS QUIM,
Fenotiazinas Quinolonas Triazinas
Usos:
Medicina: Algunas
fenotiazinas se utilizan como
fármacos, especialmente en
psiquiatría.
Biología y Investigación:
Utilizadas para estudiar
propiedades de memb.
celular y en inv. relacionadas
con la fluorescencia.
Medicina: Son un grupo
importante de antibióticos de
amplio espectro. Utilizados
para tratar infecciones
bacterianas.
Agricultura: Algunas
quinolonas se utilizan en la
agricultura como agentes
antibacterianos en veterinaria.
Usos:
Agricultura: Las triazinas,
como la atrazina, han sido
utilizadas como herbicidas.
Investigación y Análisis: En
entornos de laboratorio, las
triazinas se utilizan en análisis
y estudios medioambientales.
Usos:
38. RESULTADOS VISUALES
DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN
RAPIDEZ Y EFICIENCIA
VENTAJAS DE LA ELECTROFORESIS
SEPARACIÓN MOLECULAR
AMPLIA APLICACIÓN EN DIVERSOS CAMPOS
39. LIMITACIONES DE LA ELECTROFORESIS
CUANTIFICACIÓN ABSOLUTA
RESOLUCION A SIMPLE VISTA LIMITADA
SENSIBILIDAD A CONDICIONES EXTERNAS
40. CONCLUSIONES
La electroforesis demuestra su papel esencial en la investigación
biomolecular y su impacto significativo en la comprensión de la biología,
el diagnóstico médico y el desarrollo de terapias avanzadas. Desde la
electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida para la separación de
ácidos nucleicos, hasta la electroforesis de proteínas para el análisis de
perfiles proteicos, el estudio detallado de cada variante revela sus
ventajas y desventajas. La diversidad de sus aplicaciones y su continua
evolución la posicionan como una herramienta fundamental en la
vanguardia de la ciencia y la investigación.