Hipótesis: Todos los organismos vivos están constituidos de proteínas.



Objetivo: Demostrar la presencia de las proteínas en los materiales biológicos.



Material: el hueso de una pierna de pollo crudo , leche , limones , vinagre , 3 frascos grandes con
tapa , líquido blanqueador, filtros para cafetera, colador , 1 huevo crudo , alcohol, cabello .



Metodología

a) Queratína, proteína del cabello



-Poner en un frasco un poco de liquido blanqueador



-Colocar un mechón de cabello y observar las burbujas



- Cerrar el frasco y esperar de 5 a 10 minutos



b) Caseína, proteína de la leche



-Poner un poco de leche en dos frascos



- Etiquetar a uno como limón y al otro como vinagre



- Añadir al frasco etiquetado como limón el jugo de un limón



- Agregar al otro frasco un poco de vinagre
- Mezclar con los agitadores los líquidos de ambos frascos



- Observar y dejar los frascos reposar por 30 minutos



- Poner un papel filtro de cafetera en un colador y pasar la mezcla del vinagre



- Tocar el polvo blanco que se queda en el papel filtro



c) Colagena, proteína del hueso



- Pelar una pierna de pollo cruda hasta que quede lo más limpia posible el hueso y un poco de
cartílago



- Poner el hueso en un frasco



- Añadir vinagre hasta cubrir el hueso y observar la formación de burbujas



- Dejar por 10 días, cambiando el vinagre cada 2 días



- Sacar el hueso y suavemente probar su elasticidad tratando de doblarlo



- Con una lupa ver sus características



d) Ovoalbumina, proteína de la clara del huevo



-Obtener con cuidado la clara de un huevo
- Colocar la clara en 2 vasos desechables transparentes



-Etiquetarlos respectivamente como alcohol y vinagre



- Añadir a uno un poco de alcohol y al otro vinagre



- Observar cuidadosamente



- Dejar reposar uno 10 minutos y volver a observar inclinando ligeramente el vaso



Después de hacer los experimentos, cambia el hueso por cartílago o bien a la clara agregarle sal de
mesa o caliéntala, también se puede agitar la clara, observa, discute y saca conclusiones.



Conceptos revisados: Proteínas, tipos de proteínas, estructura de las proteínas, funciones de las
proteínas, composición de las proteínas, aminoácidos, peso molecular de los compuestos
biológicos, precipitación, floculación, coagulación, desnaturalización y filtración.



Conclusiones: Las proteínas son los componentes estructurales principales de todos los tejidos
vivos



La presencia de las proteínas no se nota



Las proteínas tienen propiedades que se alteran s se cambia el medio donde se encuentran y
pueden hacerse evidentes



Los factores que alteran a las proteínas son: temperatura, pH y la presencia elevada de sal.
Variantes en los materiales: Diferentes partes de organismos y fluidos biológicos, varias
temperaturas, diferentes concentraciones de sal y la

agitación.



Desnaturalización de proteínas.



OBJETIVOS



Objetivo experimental



Observar el comportamiento de una proteína globular hidrosoluble en solución acuosa en función
de la fuerza iónica.



Tiempo requerido



Alrededor de tres horas.



Conocimientos necesarios



Composición química de las proteínas; propiedades físicas y químicas de los polipéptidos;
clasificación bioquímica de las proteínas.



Antecedentes teóricos
La solubilidad de las proteínas es sensible a la composición y al pH del medio, así como a la
presencia de otros solventes. Asimismo, las proteínas presentan comportamiento de electrolitos
simples en solución, por lo que son susceptibles a la concentración iónica del medio.



Las proteínas globulares hidrosolubles muestran un mínimo de solubilidad, aunque el pH al que
ello ocurre varía de una proteína a otra, siendo éste un pH isoeléctrico, definido como el valor de
pH al que la molécula no posee carga eléctrica y es incapaz de desplazarse en un campo eléctrico.
En estas condiciones no existe repulsión electrostática entre moléculas de proteínas vecinas
tienden a coalescer y precipitar.



Las sales neutras ejercen efectos pronunciados sobre la solubilidad de las proteínas globulares. A
baja concentración, las sales incrementan la solubilidad de muchas proteínas, fenómeno que
recibe el nombre de solubilización por salado. Las sales de los iones divalentes, MgCl2 y el
(NH4)2SO4, son mucho más eficaces en la solubilización de las proteínas que las sales de iones
monovalentes, NaCl, NH4Cl y KCl. La capacidad de las sales neutras para influir en la solubilidad de
las proteínas está en función de su fuerza iónica, que constituye una medida, tanto de la
concentración como del número de las cargas eléctricas existentes en los cationes y los aniones
aportados por la sal. La fuerza iónica es proporcional a cizi2, por lo que al agregar la constante de
proporcionalidad nuestra ecuación queda como



I = ½ Si cizi2



donde,



I = fuerza iónica

ci = concentración iónica

zi = número de carga



Material necesario



1. Por grupo
* Balanza analítica 1

* Hielo



2. Por equipo



* Agitador magnético 1

* Anillo de hierro de 10 cm 1

* Bisturí o navaja o cuchillo 1

* Botella lavadora 1

* Cristalizadores de 10 cm 2

* Electrodo para H+ 1

* Electrodo de referencia 1

* Espátula 1

* Mechero de Bunsen 1

* Manguera de hule 1

* Parrilla magnética 1

* Pinzas para soporte 2

* Potenciómetro 1

* Probeta de 50 ml 1

* Solución estándar pH 7 1

* Solución estándar pH 4 1

* Soportes universales 2

* Termómetro -10 a 200 °C 2

* Vasos de precipitado 100 ml1 2

* Vasos de precipitado 50 ml 4
Soluciones



1. Por grupo



2. Por equipo



* Agua destilada 50 ml

* Cloroformo 50 ml

* Cloruro de magnesio 0.3 mmoles

* Cloruro de sodio 0.3 mmoles

* Etanol absoluto 50 ml

* Hidróxido de amonio 50 ml

* Huevos 6

* Limón(jugo) 1

* Tetracloruro de carbono 50 ml



PROCEDIMIENTO.

Equipo de protección.

Ojos.



* Anteojos de policarbonato o monogógles sin ventilación.



Piel.



* Guantes de neopreno para ácidos y solventes orgánicos.
* Guantes térmicos para materiales calientes.

* Ropa de algodón.



Respiratorio.



* Respirador para ácidos y solventes orgánicos (Código amarillo o negro).

* Maneje los ácidos en campana para vapores.

* Maneje los solventes orgánicos en campana para vapores.

* No respire los vapores.



Precauciones especiales.



* Baño de ojos disponible.

* Regadera de seguridad disponible.

* Lave abundantemente después de usar los reactivos.



Método



1. Preparación de soluciones.



* Con la probeta graduada se miden 30 ml de los siguientes reactivos líquidos y se colocan en
vasos de precipitados de 100 ml:

o Agua destilada

o Cloroformo

o Etanol absoluto

o Hidróxido de amonio
o Tetracloruro de carbono

* Con la espátula se toman 0.3 mmoles, pesando en vasos de precipitados de 50 ml con la balanza
analítica, de las siguientes sales:

o Cloruro de magnesio

o Cloruro de sodio



2. Experimento.

Precipitación de proteína.



* Se toma un vaso de precipitados limpio y los cinco vasos con reactivos líquidos.

* Se toma el limón, se corta a la mitad y se exprime el jugo en el vaso de precipitados limpio.

* Se toma otro vaso de precipitados limpio. Este vaso se coloca sobre la parrilla magnética y se le
introduce el agitador magnético.

* Se toma otro vaso de precipitados limpio.

* Se toman cuatro huevos. Se cascan y se coloca la mitad de la clara de cada huevo en sendos
vasos de precipitados, desechando las yemas.

* La clara de uno de los vasos limpios se deja como testigo o control.

* Se toman dos vasos de precipitados limpios.

* Se casca un huevo y se coloca la mitad de la clara cada uno de los vasos limpios.

* En uno de los vasos se agregan los 0.3 mmoles de cloruro de magnesio, mientras que en el otro
se agregan los 0.3 mmoles de cloruro de sodio.

* En un cristalizador se forma una cama de hielo y se le agrega cloruro de sodio hasta que la
temperatura descienda a -4 °C.

* Se coloca el cristalizador sobre un soporte universal.

* Se coloca el mechero de Bunsen sobre el soporte universal.

* Se coloca el anillo de hierro en el soporte universal sobre el mechero de Bunsen.

* Otro cristalizador se coloca sobre el anillo de hierro y se le pone un poco de agua para formar un
baño de María.
* Se toman dos vasos de precipitados limpios.

* Se casca un huevo y se coloca la mitad de la clara en cada vaso.

* Se embebe uno de los vasos de precipitados con clara en la cama de hielo, se le introduce un
termómetro sujeto al soporte y se hace girar el vaso sobre la cama de hielo para enfriarlo.

* Se registran la temperatura y el tiempo.

* El otro vaso se coloca sobre el baño de María y se le introduce el termómetro sujeto al soporte
universal.

* Se registran la temperatura y el tiempo.

Hipótesis

  • 1.
    Hipótesis: Todos losorganismos vivos están constituidos de proteínas. Objetivo: Demostrar la presencia de las proteínas en los materiales biológicos. Material: el hueso de una pierna de pollo crudo , leche , limones , vinagre , 3 frascos grandes con tapa , líquido blanqueador, filtros para cafetera, colador , 1 huevo crudo , alcohol, cabello . Metodología a) Queratína, proteína del cabello -Poner en un frasco un poco de liquido blanqueador -Colocar un mechón de cabello y observar las burbujas - Cerrar el frasco y esperar de 5 a 10 minutos b) Caseína, proteína de la leche -Poner un poco de leche en dos frascos - Etiquetar a uno como limón y al otro como vinagre - Añadir al frasco etiquetado como limón el jugo de un limón - Agregar al otro frasco un poco de vinagre
  • 2.
    - Mezclar conlos agitadores los líquidos de ambos frascos - Observar y dejar los frascos reposar por 30 minutos - Poner un papel filtro de cafetera en un colador y pasar la mezcla del vinagre - Tocar el polvo blanco que se queda en el papel filtro c) Colagena, proteína del hueso - Pelar una pierna de pollo cruda hasta que quede lo más limpia posible el hueso y un poco de cartílago - Poner el hueso en un frasco - Añadir vinagre hasta cubrir el hueso y observar la formación de burbujas - Dejar por 10 días, cambiando el vinagre cada 2 días - Sacar el hueso y suavemente probar su elasticidad tratando de doblarlo - Con una lupa ver sus características d) Ovoalbumina, proteína de la clara del huevo -Obtener con cuidado la clara de un huevo
  • 3.
    - Colocar laclara en 2 vasos desechables transparentes -Etiquetarlos respectivamente como alcohol y vinagre - Añadir a uno un poco de alcohol y al otro vinagre - Observar cuidadosamente - Dejar reposar uno 10 minutos y volver a observar inclinando ligeramente el vaso Después de hacer los experimentos, cambia el hueso por cartílago o bien a la clara agregarle sal de mesa o caliéntala, también se puede agitar la clara, observa, discute y saca conclusiones. Conceptos revisados: Proteínas, tipos de proteínas, estructura de las proteínas, funciones de las proteínas, composición de las proteínas, aminoácidos, peso molecular de los compuestos biológicos, precipitación, floculación, coagulación, desnaturalización y filtración. Conclusiones: Las proteínas son los componentes estructurales principales de todos los tejidos vivos La presencia de las proteínas no se nota Las proteínas tienen propiedades que se alteran s se cambia el medio donde se encuentran y pueden hacerse evidentes Los factores que alteran a las proteínas son: temperatura, pH y la presencia elevada de sal.
  • 4.
    Variantes en losmateriales: Diferentes partes de organismos y fluidos biológicos, varias temperaturas, diferentes concentraciones de sal y la agitación. Desnaturalización de proteínas. OBJETIVOS Objetivo experimental Observar el comportamiento de una proteína globular hidrosoluble en solución acuosa en función de la fuerza iónica. Tiempo requerido Alrededor de tres horas. Conocimientos necesarios Composición química de las proteínas; propiedades físicas y químicas de los polipéptidos; clasificación bioquímica de las proteínas. Antecedentes teóricos
  • 5.
    La solubilidad delas proteínas es sensible a la composición y al pH del medio, así como a la presencia de otros solventes. Asimismo, las proteínas presentan comportamiento de electrolitos simples en solución, por lo que son susceptibles a la concentración iónica del medio. Las proteínas globulares hidrosolubles muestran un mínimo de solubilidad, aunque el pH al que ello ocurre varía de una proteína a otra, siendo éste un pH isoeléctrico, definido como el valor de pH al que la molécula no posee carga eléctrica y es incapaz de desplazarse en un campo eléctrico. En estas condiciones no existe repulsión electrostática entre moléculas de proteínas vecinas tienden a coalescer y precipitar. Las sales neutras ejercen efectos pronunciados sobre la solubilidad de las proteínas globulares. A baja concentración, las sales incrementan la solubilidad de muchas proteínas, fenómeno que recibe el nombre de solubilización por salado. Las sales de los iones divalentes, MgCl2 y el (NH4)2SO4, son mucho más eficaces en la solubilización de las proteínas que las sales de iones monovalentes, NaCl, NH4Cl y KCl. La capacidad de las sales neutras para influir en la solubilidad de las proteínas está en función de su fuerza iónica, que constituye una medida, tanto de la concentración como del número de las cargas eléctricas existentes en los cationes y los aniones aportados por la sal. La fuerza iónica es proporcional a cizi2, por lo que al agregar la constante de proporcionalidad nuestra ecuación queda como I = ½ Si cizi2 donde, I = fuerza iónica ci = concentración iónica zi = número de carga Material necesario 1. Por grupo
  • 6.
    * Balanza analítica1 * Hielo 2. Por equipo * Agitador magnético 1 * Anillo de hierro de 10 cm 1 * Bisturí o navaja o cuchillo 1 * Botella lavadora 1 * Cristalizadores de 10 cm 2 * Electrodo para H+ 1 * Electrodo de referencia 1 * Espátula 1 * Mechero de Bunsen 1 * Manguera de hule 1 * Parrilla magnética 1 * Pinzas para soporte 2 * Potenciómetro 1 * Probeta de 50 ml 1 * Solución estándar pH 7 1 * Solución estándar pH 4 1 * Soportes universales 2 * Termómetro -10 a 200 °C 2 * Vasos de precipitado 100 ml1 2 * Vasos de precipitado 50 ml 4
  • 7.
    Soluciones 1. Por grupo 2.Por equipo * Agua destilada 50 ml * Cloroformo 50 ml * Cloruro de magnesio 0.3 mmoles * Cloruro de sodio 0.3 mmoles * Etanol absoluto 50 ml * Hidróxido de amonio 50 ml * Huevos 6 * Limón(jugo) 1 * Tetracloruro de carbono 50 ml PROCEDIMIENTO. Equipo de protección. Ojos. * Anteojos de policarbonato o monogógles sin ventilación. Piel. * Guantes de neopreno para ácidos y solventes orgánicos.
  • 8.
    * Guantes térmicospara materiales calientes. * Ropa de algodón. Respiratorio. * Respirador para ácidos y solventes orgánicos (Código amarillo o negro). * Maneje los ácidos en campana para vapores. * Maneje los solventes orgánicos en campana para vapores. * No respire los vapores. Precauciones especiales. * Baño de ojos disponible. * Regadera de seguridad disponible. * Lave abundantemente después de usar los reactivos. Método 1. Preparación de soluciones. * Con la probeta graduada se miden 30 ml de los siguientes reactivos líquidos y se colocan en vasos de precipitados de 100 ml: o Agua destilada o Cloroformo o Etanol absoluto o Hidróxido de amonio
  • 9.
    o Tetracloruro decarbono * Con la espátula se toman 0.3 mmoles, pesando en vasos de precipitados de 50 ml con la balanza analítica, de las siguientes sales: o Cloruro de magnesio o Cloruro de sodio 2. Experimento. Precipitación de proteína. * Se toma un vaso de precipitados limpio y los cinco vasos con reactivos líquidos. * Se toma el limón, se corta a la mitad y se exprime el jugo en el vaso de precipitados limpio. * Se toma otro vaso de precipitados limpio. Este vaso se coloca sobre la parrilla magnética y se le introduce el agitador magnético. * Se toma otro vaso de precipitados limpio. * Se toman cuatro huevos. Se cascan y se coloca la mitad de la clara de cada huevo en sendos vasos de precipitados, desechando las yemas. * La clara de uno de los vasos limpios se deja como testigo o control. * Se toman dos vasos de precipitados limpios. * Se casca un huevo y se coloca la mitad de la clara cada uno de los vasos limpios. * En uno de los vasos se agregan los 0.3 mmoles de cloruro de magnesio, mientras que en el otro se agregan los 0.3 mmoles de cloruro de sodio. * En un cristalizador se forma una cama de hielo y se le agrega cloruro de sodio hasta que la temperatura descienda a -4 °C. * Se coloca el cristalizador sobre un soporte universal. * Se coloca el mechero de Bunsen sobre el soporte universal. * Se coloca el anillo de hierro en el soporte universal sobre el mechero de Bunsen. * Otro cristalizador se coloca sobre el anillo de hierro y se le pone un poco de agua para formar un baño de María.
  • 10.
    * Se tomandos vasos de precipitados limpios. * Se casca un huevo y se coloca la mitad de la clara en cada vaso. * Se embebe uno de los vasos de precipitados con clara en la cama de hielo, se le introduce un termómetro sujeto al soporte y se hace girar el vaso sobre la cama de hielo para enfriarlo. * Se registran la temperatura y el tiempo. * El otro vaso se coloca sobre el baño de María y se le introduce el termómetro sujeto al soporte universal. * Se registran la temperatura y el tiempo.