toxicologia

1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad, Pertinencia y Calidez”
D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969
PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PRÁCTICA Nº BF.8.01-1
NOMBRE DE LA PRÁCTICA: INTOXICACIÓN POR METANOL
DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
CICLO/NIVEL: 8vo Semestre “B”
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 31/Mayo/2017
ESTUDIANTE: Paloma da Silva
DOCENTE RESPONSABLE: Bioq. Carlos Alberto García Gonzales, Msc.
Animal de Experimentación: Pollo
Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.
Volumen administrado: 10mL de Alcohol Metílico.
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 7:30 am
Hora de disección: 8:00 am
Hora Inicio de Destilado: 8:20 am
Hora de finalización de Destilado: 8:55 am
Hora finalización de la práctica: 10:30 am
1. OBJETIVOS:
1.1. Identificar los síntomas que presenta un pollo tras la intoxicación producida por
alcohol metílico para saber cuál es su consecuencia de acuerdo a la dosis que se
administre.
1.2.Realizar la determinación de las reacciones de reconocimiento de la presencia de
metanol en las vísceras del pollo para saber si este se encuentra presente o no.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO:
El metanol es utilizado comúnmente como un solvente orgánico industrial, se ha
desarrollado su uso como combustible alternativo y se encuentra a la disposición del
público en una amplia variedad de productos. La utilización tan expandida de esta
sustancia, incrementa la probabilidad de la exposición aguda o crónica al mismo y
subraya la importancia de conocer los mecanismos fisiopatológicos responsables de su
toxicidad.
En la actualidad, son bien conocidos los efectos del envenenamiento por metanol en el
sistema nervioso central (SNC) y especialmente en las vías visuales. La ceguera o déficit

2. visual severo son posiblemente las secuelas más frecuentes en el hombre. Además, por
su acción a nivel de la maquinaria energética mitocondrial, la intoxicación crónica por
metanol ha sido utilizada experimentalmente como un modelo de neuropatía óptica.
3. RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS SUSTANCIAS E
INSUMOS
4. INSTRUCCIONES:
4.1 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
4.2 Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios
innecesarios para el trabajo que se esté realizando.
4.3 Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla,
gorro, zapatones.
Materiales Equipos Sustancias Muestra
VIDRIO:
Vasos de
precipitación
-Pipetas
-Erlenmeyer
-Tubos de
ensayo
-Probeta
-Perlas de vidrio
-Agitador
-Embudo
OTROS
-Guantes
-Mascarilla
-Gorro
-Mandil
-Aguja
hipodérmica 10
mL
-Cronómetro
-Estuche de
disección
-Panema
-Agitador
-Fosforo
-Pinzas
-Cocineta
-Espátula
-Gradilla
-Aparato de
destilación
-Balanza
-Baño maría
-Campana
- Cloruro de
fenilhidracina
-Nitroprusiato
sódico
-Hidróxido de
sodio
-HCl
-Cloruro de fenil
hidracina
-Ferricianuro de
potasio Ácido -
sulfúrico
-Leche
-Cloruro férrico
-Sulfato ferroso
-Ácido sulfúrico
-Ácido clorhídrico
Destilado de
vísceras del
animal de
Experimentación.

3. 4.4 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
5. PROCEDIMIENTO:
5.1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse
5.2. Preparar una solución de formaldehido al 4%.
5.3. Agarrar al animal de experimentación (rata wistar) por sus patas y mediante una
aguja hipodérmica administrar 8mL de solución de formaldehido.
5.4. Colocar al animal de experimentación (rata wistar) en la panema y observar los
efectos de la intoxicación.
5.5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, abrir el al animal de
experimentación (rata wistar) y recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas
posibles en un vaso de precipitación.
5.6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácido tartárico al 4%
y perlas de vidrio.
5.7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N.
5.8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las
reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN:
6.1 Reacción de Schiff:
A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de yodato de potasio al 1% después
de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos
la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle
nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de violeta
de genciana, con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
6.2 Reacción de Rimini
A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de
solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de
hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
6.3 Con la Fenilhidracina
En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de
muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de
yoduro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de sodio al 12% se obtienen
una coloración rojo grosella.
6.4 Reacción de Marquis

4. Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego
con una solución sulfúrica de formol (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido
sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.
6.5 Reacción de Hehner
Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido
sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de
cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se
produce un color violeta o azul violeta.
En esta práctica logramos con éxito nuestro objetivo de determinar las reacciones de
reconocimiento del metanol utilizando como muestra a las vísceras del pollo y tenemos como
consecuencia los siguientes resultados:
 En la reacción de Schiff tenemos positivo no característico.
 En la reacción de Rimini nos dio de positivo característico.
 En la reacción de Fenilhidracina dio positvo característico.
 En la reacción de ácido cromotopico tenemos positivo característico.
 En la reacción de Henner nos dio de positivo no característico.
 En la reacción de Marquis dio positvo no característico.
ANEXOS
PREGUNTAS SOBRE EL ARTÍCULO:
¿Cuál es uno de los métodos que se puede utilizar para detener la intoxicación por
metanol?
La hemodiálisis HD.
¿Cuáles son las indicaciones de la hemodiálisis HD para un caso clínico?
Nivel de metanol en sangre >50 mg/dl (no disponible en nuestro medio de forma urgente),
acidosis metabólica grave, alteraciones visuales o neurológicas e ingestión >30 ml de
metanol.
¿Cuál es la duración de la hemodiálisis HD en caso de intoxicación grave por
metanol?
9 horas.

5. 8. RESULTADOS OBTENIDOS.
Reacción de Schiff:
Reacción de Rimini

6. Con la Fenilhidracina
Reacción de Marquis
Con el Ácido Cromotrópico
Reacción de Hehner

7. BIBLIOGRAFIA:
Nefrología (2015). Intoxicaciones por metanol y reacciones. Nefrología, consecuencias
de intoxicación por metanol. Recuperado de: http://www.revistanefrologia.com/es-
publicacion-nefrologia-articulo-intoxicacion-por-metanol-evolucion-niveles-
sanguineos-con-hemodialisis-alto-flujo-X0211699511051081