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“TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
PARACELSO
UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA
“Calidad, Pertinencia y Calidez”
D.L. N°69-04, 14 DE ABRIL DE 1969
PROV. EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADEMICADE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PRACTICA N°1
DOCENTE: Dr. B.Q.F. Carlos García
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 8 de Noviembre del 2017
CURSO: Octavo Semestre
PARALELO: “B”
Título de la práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL
Tóxico: Metanol
Volumen Administrado: 10 ml
Muestra: Vísceras de pollo
TIEMPOS:
Inicio de la práctica: 07h30 am
Hora de disección: 07h45 am
Hora de inicio de destilado: 07h57 am
Hora de finalización de destilado: 08h10 am
Hora de finalización de la práctica: 08h33 am
1. OBJETIVOS
 Observar las características que presentan las vísceras de pollo tras la
intoxicación producida por alcohol metílico.
 Conocer las pruebas de identificación del metanol en el destilado en las
vísceras de pollo.
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por
sí mismo es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos.
Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la
fabricación de plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina,
anticongelantes, líquido limpiacristales, líquido para fotocopias, limpiadores de
hogar. La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o
intencionada. También se han dado casos de intoxicación por adulteración de
bebidas alcohólicas.
3. INSTRUCCIONES
3.1 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
“TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
PARACELSO
3.2 Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o
accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando.
3.3 Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes,
mascarilla, gorro, zapatones.
3.4 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRA
 VIDRIO
Vasos de
precipitación
Pipetas
Erlenmeyer
Tubos de ensayo
Probeta
Perlas de vidrio
Agitador
Embudo
 OTROS
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Aguja hipodérmica 10
mL
Cronómetro
Estuche de disección
Panema
Agitador
Fosforo
Pinzas
Cocineta
Espátula
Gradilla
Aparato de
destilación
Balanza
Baño maría
Campana
Cloruro de
fenilhidracina
Nitroprusiato
sódico
Hidróxido de
sodio
HCl
Cloruro de fenil
hidracina
Ferricianuro de
potasio
Ácido sulfúrico
Leche
Cloruro férrico
Sulfato ferroso
Ácido sulfúrico
Ácido clorhídrico
Destilado de
vísceras del
animal de
experimentación
5. ACTIVIDADES A REALIZAR
5.1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse
5.2. Preparar una solución de formaldehido al 4%.
5.3. Agarrar la muestra de experimentación (vísceras de pollo) y mediante una
aguja hipodérmica administrar 8mL de solución de formaldehido.
5.4. Colocar la muestra de experimentación (vísceras de pollo) en la panema y
observar los efectos de la intoxicación.
“TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
PARACELSO
5.5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, cortar muy fino
las vísceras de pollo, lo más finas posibles en un vaso de precipitación.
5.6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácidotartárico
al 4% y perlas de vidrio.
5.7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N.
5.8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las
reacciones de reconocimientos en medios biológicos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
6.1 Reacción de Schiff:
A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio
al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se
deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de
ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera
que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de
ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo
de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.
6.2 Reacción de Rimini
A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4
gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de
solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.
6.3 Con la Fenilhidracina
En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña
cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4
gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de
hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella.
6.4 Reacción de Marquis
Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se
agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina
en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de
algún tiempo un color violeta.
“TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
PARACELSO
6.5 Con el Ácido Cromotrópico
Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el
formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.
6.6 Reactivo de Hehner:
Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica
con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro
férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500 ml de ácido sulfúrico); en caso positivo
en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.
7. GRÁFICOS:
REACCIÓNDE
SCHIFF
REACCIÓNDE
RIMINÍ
CONLA
FENILHIDRACINA
REACCIÓNDE
MARQUIS
CONEL ÁCIDO
CROMOTRÓPICO
REACTIVO DE
HEHNER
“TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
PARACELSO
8. RESULTADOS DEFINIDOS:
Reacción de Schiff Reacción de Rimini
Coloración violeta / positivo
No hubo coloración pero sí precipitó /
positivo no característico
Con la Fenilhidracina Reacción de Marquis
Coloración café / positivo Coloración violeta / positivo
Con el Ácido Cromotrópico Reactivo de Hehner:
Coloración rojo naranja / positivo
característico
No hubo coloración pero sí precipitó /
positivo no característico
CONCLUSIÓN
Al concluir la práctica nos dimos cuenta cuales son las manifestaciones que
presentó las vísceras del pollo ante la administración del toxico; las reacciones
que nos dieron un resultado positivo fueron: R. Schiff, Fenilhidracina, Marquis y
Ácido Cromotrópico, y, las que nos dieron un resultado positivo no característico
fueron; R. de Riminí y R. de Hehner, por lo que podemos deducir que mediante
las reacciones de identificación si se observó presencia de metanol.
10. RECOMENDACIONES
Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para
evitar posteriormente cualquier tipo de accidente.
Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la
práctica y así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo.
Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar
contaminación con las sustancias químicas utilizadas.
11. CUESTIONARIO
11.1 ¿Cuál es el mecanismo de acción del metanol?
El metanol se absorbe por vía oral, a través de la piel, y por vía respiratoria. Su
volumen de distribución es 0.6 l/kg. Se distribuye en el agua corporal y es
prácticamente insoluble en la grasa.
“TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS”
PARACELSO
11.2 ¿Cómo se diagnostica la intoxicación por metanol?
Puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los
acompañantes o realizar una prueba analítica de sangre y orina.
11.3 ¿Cuáles son las aplicaciones del metanol?
 En la producción de productos químicos puesto que es un sustituto
potencial del petróleo.
 En la producción de biodiesel, combustible alternativo de combustión
limpia elaborado a partir de elementos naturales y biodegradables.
 Disolvente de pinturas
 Limpieza de superficies metálicas
 Combustibles para cocinas de camping y soldadores.
 Agente extractor en la industria petrolera, química y alimenticia.
12. ANEXOS

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Práctica de laboratorio

  • 1. “TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO UNIVERSIDAD TECNICA DE MACHALA “Calidad, Pertinencia y Calidez” D.L. N°69-04, 14 DE ABRIL DE 1969 PROV. EL ORO-REP. DEL ECUADOR UNIDAD ACADEMICADE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA PRACTICA N°1 DOCENTE: Dr. B.Q.F. Carlos García CARRERA: Bioquímica y Farmacia FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 8 de Noviembre del 2017 CURSO: Octavo Semestre PARALELO: “B” Título de la práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL Tóxico: Metanol Volumen Administrado: 10 ml Muestra: Vísceras de pollo TIEMPOS: Inicio de la práctica: 07h30 am Hora de disección: 07h45 am Hora de inicio de destilado: 07h57 am Hora de finalización de destilado: 08h10 am Hora de finalización de la práctica: 08h33 am 1. OBJETIVOS  Observar las características que presentan las vísceras de pollo tras la intoxicación producida por alcohol metílico.  Conocer las pruebas de identificación del metanol en el destilado en las vísceras de pollo. 2. FUNDAMENTO TEÓRICO El metanol (CH3OH) es un líquido incoloro y volátil a temperatura ambiente. Por sí mismo es inofensivo, pero sus metabolitos son tóxicos. Tiene una amplia utilización industrial como disolvente, utilizándose en la fabricación de plásticos, material fotográfico, componentes de la gasolina, anticongelantes, líquido limpiacristales, líquido para fotocopias, limpiadores de hogar. La intoxicación se produce generalmente por ingesta accidental o intencionada. También se han dado casos de intoxicación por adulteración de bebidas alcohólicas. 3. INSTRUCCIONES 3.1 Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
  • 2. “TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO 3.2 Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando. 3.3 Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla, gorro, zapatones. 3.4 Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario. 4. MATERIALES, EQUIPOS REACTIVOS Y SUSTANCIAS MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRA  VIDRIO Vasos de precipitación Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Probeta Perlas de vidrio Agitador Embudo  OTROS Guantes Mascarilla Gorro Mandil Aguja hipodérmica 10 mL Cronómetro Estuche de disección Panema Agitador Fosforo Pinzas Cocineta Espátula Gradilla Aparato de destilación Balanza Baño maría Campana Cloruro de fenilhidracina Nitroprusiato sódico Hidróxido de sodio HCl Cloruro de fenil hidracina Ferricianuro de potasio Ácido sulfúrico Leche Cloruro férrico Sulfato ferroso Ácido sulfúrico Ácido clorhídrico Destilado de vísceras del animal de experimentación 5. ACTIVIDADES A REALIZAR 5.1. Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse 5.2. Preparar una solución de formaldehido al 4%. 5.3. Agarrar la muestra de experimentación (vísceras de pollo) y mediante una aguja hipodérmica administrar 8mL de solución de formaldehido. 5.4. Colocar la muestra de experimentación (vísceras de pollo) en la panema y observar los efectos de la intoxicación.
  • 3. “TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO 5.5. Luego del deceso, con la ayuda del estuche de disección, cortar muy fino las vísceras de pollo, lo más finas posibles en un vaso de precipitación. 5.6. Verter las vísceras en un balón de destilación y agregar 50 mL ácidotartárico al 4% y perlas de vidrio. 5.7. Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N. 5.8. Con aproximadamente 15 mL del destilado recogido (muestra) realizar las reacciones de reconocimientos en medios biológicos. 6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN 6.1 Reacción de Schiff: A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo. 6.2 Reacción de Rimini A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa. 6.3 Con la Fenilhidracina En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtienen una coloración rojo grosella. 6.4 Reacción de Marquis Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.
  • 4. “TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO 6.5 Con el Ácido Cromotrópico Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente. 6.6 Reactivo de Hehner: Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500 ml de ácido sulfúrico); en caso positivo en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta. 7. GRÁFICOS: REACCIÓNDE SCHIFF REACCIÓNDE RIMINÍ CONLA FENILHIDRACINA REACCIÓNDE MARQUIS CONEL ÁCIDO CROMOTRÓPICO REACTIVO DE HEHNER
  • 5. “TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO 8. RESULTADOS DEFINIDOS: Reacción de Schiff Reacción de Rimini Coloración violeta / positivo No hubo coloración pero sí precipitó / positivo no característico Con la Fenilhidracina Reacción de Marquis Coloración café / positivo Coloración violeta / positivo Con el Ácido Cromotrópico Reactivo de Hehner: Coloración rojo naranja / positivo característico No hubo coloración pero sí precipitó / positivo no característico CONCLUSIÓN Al concluir la práctica nos dimos cuenta cuales son las manifestaciones que presentó las vísceras del pollo ante la administración del toxico; las reacciones que nos dieron un resultado positivo fueron: R. Schiff, Fenilhidracina, Marquis y Ácido Cromotrópico, y, las que nos dieron un resultado positivo no característico fueron; R. de Riminí y R. de Hehner, por lo que podemos deducir que mediante las reacciones de identificación si se observó presencia de metanol. 10. RECOMENDACIONES Conocer y aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio para evitar posteriormente cualquier tipo de accidente. Preparar correctamente los reactivos a la concentración requerida en la práctica y así mismo utilizar pipetas o bulbos para cada reactivo. Culminada la práctica se debe dejar el área desinfectada, para evitar contaminación con las sustancias químicas utilizadas. 11. CUESTIONARIO 11.1 ¿Cuál es el mecanismo de acción del metanol? El metanol se absorbe por vía oral, a través de la piel, y por vía respiratoria. Su volumen de distribución es 0.6 l/kg. Se distribuye en el agua corporal y es prácticamente insoluble en la grasa.
  • 6. “TODO ES VENENONADA ESVENENO,TODO DEPENDE DE LA DOSIS” PARACELSO 11.2 ¿Cómo se diagnostica la intoxicación por metanol? Puede hacerse por la historia clínica a través del paciente o de los acompañantes o realizar una prueba analítica de sangre y orina. 11.3 ¿Cuáles son las aplicaciones del metanol?  En la producción de productos químicos puesto que es un sustituto potencial del petróleo.  En la producción de biodiesel, combustible alternativo de combustión limpia elaborado a partir de elementos naturales y biodegradables.  Disolvente de pinturas  Limpieza de superficies metálicas  Combustibles para cocinas de camping y soldadores.  Agente extractor en la industria petrolera, química y alimenticia. 12. ANEXOS