El documento describe el ciclo celular y la replicación del ADN. El ciclo celular consta de la interfase y la mitosis y está regulado por puntos de control. La replicación del ADN ocurre en la fase S a través de un modelo semiconservativo y comienza en orígenes de replicación, produciendo dos moléculas de ADN hijas idénticas a la original. Las enzimas ADN polimerasas catalizan la replicación y corrigen errores para asegurar la fidelidad.

1. Reproducción celularTema 8

2. DiferenciaciónMuerteDivisión

3. El ciclo celularEl ciclo celular es un conjunto ordenado de sucesos que culmina con el crecimiento de la célula y la división en dos células hijas.Puede durar desde unas pocas horas hasta varios años (depende del tipo de célula)Se divide en dos fases:InterfaseFase M (mitosis y citocinesis)

4. InterfasePeriodo de tiempo entre dos mitosis sucesivas

5. Ocupa la mayor parte del tiempo del ciclo celular.

6. La actividad metabólica es muy alta.

7. La célula aumenta de tamaño y duplica el material genético.Periodos o fases de la interfase:Fase G1 (Fase G0)

8. Fase S

9. Fase G2 Fase G1: Es la primera fase de crecimiento. Dura hasta la entrada en la fase S.

10. Hay una intensa actividad biosintética.

11. Se sintetizan ARN y proteínas para que la célula aumente de tamaño.

12. En las células que no entran en mitosis, esta fase es permanente y se llama G0 (estado de reposo o quiescencia).

13. G0 es un estado propio de células diferenciadas, que entran en quiscencia o que van a morir (apoptosis).

14. Las decisiones que se toman en G1 dependen de complejos moleculares llamados puntos de control, basados en quinasas dependientes de ciclinas (CdKs)

15. El principal punto de control se denomina punto de restricción y decide si la célula entra en fase S o no. Durante la fase G1 la célula comprueba las condiciones externas e internas y decide si continuar con el ciclo celular o no. En metazoos, el avance del ciclo celular está condicionado por:Señales externas: adhesión, factores tróficos o mitógenos que emiten otras células del organismo.

16. Señales internas: Son aquellas que informan del estado de salud de la célula, como una correcta dotación de elementos celulares tras la división, una segregación correcta de los cromosomas, etcétera. Si todas estas señales son propicias la célula crecerá en tamaño y se preparará para entrar en la fase S.

17. Una vez doblado su tamaño se inicia la duplicación del ADN, la síntesis de histonas y la duplicación de los centrosomas (en células animales)

18. Aparecen los cromosomas con dos cromátidas cada uno, unidas por el centrómero.

19. Es importante tener en cuenta que no todo el ADN se está replicando a la vez. Se estima que en cualquier momento de la fase S se está copiando entre un 10 y un 15 % del ADN total.

20. Si se detectan roturas del ADN, mediante los sistemas de control, la copia del resto del ADN se detiene. Fase S:

21. Fase G2: Es la segunda fase de crecimiento, hay un ligero aumento de tamaño.

22. Se sintetizan proteínas necesarias para la inminente división celular.

23. Acaba con el inicio de la condensación de los cromosomas y la entrada en mitosis.

24. Durante esta etapa, sin embargo, se comprueba si ha habido errores durante la replicación del ADN y si se ha producido su duplicación completa. Si éstos defectos son detectados la célula no entrará en fase M y el ciclo celular se detendrá hasta que los daños sean reparados o el ADN sea completamente copiado.

25. Por tanto, existe un punto de control en esta fase.

27. Las células controlan el momento de inicio de cada una de las fases para evitar fallos en el ciclo vital. Para ello las células detienen el avance del ciclo en determinados puntos de control de modo que no se pasa de una fase a la siguiente hasta que las etapas procedentes se hayan desarrollado con satisfacción.Los puntos de control son: Paso de G0 a G1: comienzo de la proliferación.

28. Transición de G1 a S: iniciación de la replicación.

29. Paso de G2 a M: iniciación de la mitosis.

30. Avance de metafase a anafase.Control del ciclo celular

31. REGULACION DEL CICLO CELULARCELULAS ANIMALESPunto de restricciónFACTORES DE CRECIMIENTO

32. 13

33. PUNTOS DE CONTROL DEL CICLO CELULAR CONTROL DE LA METAFASEMaquinaria de replicación del DNAMaquinaria de la mitosis¿Se ha producido daño en el DNA?¿Se ha replicado todo el DNA?Entorno¿Es el entorno favorable?¿Se ha producido daño en el DNA?¿Están todos los cromosomas alineados en el huso?¿Tiene la célula el tamaño adecuado?Crecimiento celular¡COMENZAR MITOSIS!¡FINALIZAR MITOSIS!CONTROL DE LA FASE G2CONTROL DE LA FASE G1CONTROL DE LA FASE S¡CONTINUAR LA SÍNTESIS DE DNA!¡ENTRAR EN CICLO!Crecimiento celular¿Tiene la célula el tamaño adecuado?¿Se ha producido daño en el DNA?Entorno¿Es el entorno favorable?¿Se ha producido daño en el DNA?

34. El punto R: regula el paso de la fase G1 a la fase S; este momento la célula decide si entra o no en la siguiente fase tras evaluar si hay algún daño en el ADN, si el tamaño celular es el adecuado para dar lugar a dos células hijas y, en conclusión, si tiene la capacidad suficiente para completar el ciclo. Si la evaluación es negativa la célula determinara el proceso y entrara en la fase Go. Las células especializadas se encuentran indefinidamente en este estado ya que ha perdido su capacidad mitótica; otros tipos de células pueden retornar a la fase G1 si es estimulado por algún agente mitógeno. R

35. 16CONTROL CICLO CELULARPROTEÍNAS CLAVE: - Quinasas dependientes de ciclina o Cdk - CiclinasPunto de control 1:Cdk + Ciclina G1Quinasa de inicioComienza fase S Duplicación ADN

36. Punto de control G2 : regula el paso de la fase G2 a la mitosis : decide si se inicia o no la mitosis tras comprobar que se ha replicado el ADN y que este no contiene ningún fallo.

37. Punto de control M: este punto supervisa que el huso mitótico se forme adecuadamente y que los cromosomas estén alineados correctamente en el huso durante la metafase.

38. Se detendría la mitosis en caso de que la alineación de los cromosomas es incorrecta.

39. El control lo ejercen gracias a una serie de proteínas entre las que destacan las ciclinas y las quinasas dependientes de ciclinas (CDK)PROFESOR JANO – Recursos culturales18CONTROL CICLO CELULARPunto de control 2:Cdk + ciclina mitóticaFactor promotor de Mitosis MitosisPROTEÍNAS CLAVE: - Quinasas dependientes de ciclina o Cdk - Ciclinas

40. Replicación del ADNEs el proceso necesario para que se realice la división celular.

41. Ocurre en la fase S del ciclo celular.

42. El mecanismo de replicación se basa en la complementariedad de bases.

43. Inicialmente se plantearon tres posibles modelos de replicación:

44. Modelo conservativo

45. Modelo dispersivo

46. Modelo semiconservativoPosibles modelos en la replicación del ADNCONSERVATIVODISPERSIVOSEMICONSERVATIVO

47. RESULTADOS DEL EXPERIMENTOCONTROL (Centrifugación del ADN conocido)Descarta el modelo conservativoDescarta el modelo dispersivoExperimento de Meselson y StahlADN 14N y ADN 15NADN 14NADN 15N1ª generación2ª generación3ª generaciónINTERPRETACIÓN DEL EXPERIMENTO3ª generaciónCultivo con 14NCultivo con 15N2ª generación1ª generación

48. http://biologia.uab.es/genomica/swf/dna.htm

49. Replicación del ADN – Características generalesProceso de duplicación del ADN mediante un modelo semiconservativo.Comienza en sitios específicos (orígenes de replicación)El proceso de replicación es bidireccionalLas dos hebras nuevas se van alargando progresivamente, por adición secuencial de nucleótidosLa replicación siempre se produce en sentido 5' -> 3', siendo el extremo 3'-OH libre el punto a partir del cual se produce la elongación del DNA. Como las dos hebras de ADN son antiparalelas, una de las hebras se sintetiza de forma continua y otra de forma discontinua.El proceso de duplicación está catalizado por las enzimas ADN polimerasas (aunque intervienen muchas otras enzimas en el proceso)Hay una corrección de errores para asegurar la fidelidad de las copias

50. Replicación en procariotasEl proceso de replicación de DNA es el mecanismo que permite al DNA duplicarse (es decir, sintetizar una copia idéntica).

51. Esta duplicación se produce según el modelo semiconservativo, lo que indica que las dos cadenas complementarias del DNA original, al separarse, sirven de molde cada una para la síntesis de una nueva cadena complementaria de la cadena molde.

52. El proceso se ha estudiado en la bacteria E. Coli

53. Consta de las siguientes fases:IniciaciónElongaciónTerminación Durante la elongación se da una corrección de errores Fase de iniciaciónLa replicación comienza en sitios específicos del ADN conocidos como “origen de replicación” o región oriC.Los orígenes de replicación son los puntos fijos que están a partir de los cuales se lleva cabo la replicación, que avanza de forma secuencial formando estructuras con forma de horquilla. Procariontes: Un origen de replicación.Eucariontes: Múltiples orígenes de replicación.El DNA se replica desenrollando la hélice y rompiendo los puentes de hidrógeno entre las hebras complementarias.

55. El DNA se replica desenrollando la hélice y rompiendo los puentes de hidrógeno entre las hebras complementarias.Se forma la burbuja de replicación, con dos horquillas de replicación, que se van extendiendo en las dos direcciones: replicación bidireccionalComienza la fase de elongación.

56. Ori CEvitan las tensiones debidas a un superenrrollamientoGirasaTopoisomerasaProteínas específicasProteínas SSBImpiden que el ADN se vuelva a enrollarHelicasaLas proteínas específicas se unen al punto de iniciaciónLa helicasa rompe los enlaces de hidrógeno entre las bases y abre la doble héliceBurbuja de replicaciónFases de la replicación: iniciaciónConsiste en el desenrollamiento y apertura de la doble hélice de ADN

57. ResumenReconocimiento del OriC por proteínas especificasLas helicasas rompen los puentes de HLas girasas y topoisomerasas alivian las tensiones del desenrrollamiento.Las proteínas SSB evitan que se vuelvan a unir las cadenas sencillas y se enrollen de nuevoFormación de la burbuja de replicación

58. Fase de elongaciónSe sintetiza la nueva hebra de ADN sobre la hebra original. Se debe a la actuación de las ADN polimerasas. En procariotas hay tres y su función es doble:Actividad polimerasa. Va uniendo los desorribonucleotridostrifosfatos complementarios a la cadena original.Actividad exonucleasa. Elimina nucleótidos mal emparejados y trozos de ARN cebador

59. EXONUCLEASAPOLIMERIZACIÓNPOLIMERASAINICIACIÓNdirecciónfuncióndirecciónfunciónActividad de las ADN polimerasasJunto a las enzimas que participan en la iniciación, en esta fase actúan las ADN polimerasas.elimina cebador5’ 3’I5’ 3’síntesisno3’ 5’reparaciónII3’ 5’5’ 3’reparaciónsíntesisnoIII3’ 5’5’ 3’reparaciónsíntesisno

60. La ADN polimerasa no puede actuar desde un principio, necesita un pequeño fragmento sobre el que empezar a añadir nucleótidos. Este primer fragmento es un trozo de unos 10 nucleótidos de ARN llamado cebador o primer, que presenta el extremo 3’ libre El primer es sintetizado por una ARN polimerasa o primasa, que actúa en la zona donde comienza la replicación.A partir de este fragmento, la ADN polimerasa comienza la adición de nucleótidos sobre el extremo 3’ libre.Este enzima recorre la cadena molde en sentido 5’3’ y sintetiza la nueva cadena en sentido 3’5’ (las cadenas de ADN son antiparalelas)

61. El mecanismo de elongación es distinto en las dos cadenas:En una de las cadenas, la hebra conductora, la síntesis es continua. En la otra cadena, la hebra retardada, se produce una síntesis a base de pequeños fragmentos de ADN (fragmentos de Okazaki).La síntesis de cada uno de los fragmentos de Okazaki necesita de su cebador correspondiente (sintetizado por la primasa). Los cebadores serán posteriormente eliminados por la ADN polimerasa I que rellena el hueco con desoxirribonucleotidos. Finalmente una ligasa une los fragmentos sueltos.

62. 3’Una de las hebras se sintetiza de modo contínuo. Es la conductora o lider.5’Fragmentos de Okazaki3’La ADN polimerasa necesita un fragmento de ARN (cebador o primer) con el extremo 3’ libre para iniciar la síntesis.5’La otra hebra se sintetiza de modo discontinuo formándose fragmentos que se unirán más tarde. Es la retardada.El mecanismo de elongaciónLa ADN polimerasa recorre las hebras molde en el sentido 3’-5’ uniendo los nuevos nucleótidos en el extremo 3’.5’3’5’3’3’5’3’

63. 12CebadorPrimasasCebador3456Hebra retardadaNuevo cebadorLigasasNuevo cebadorHebra retardadaEl mecanismo de elongaciónLa primasa sintetiza un cebador en cada hebra conductora de la burbuja de replicación.Las ADN polimerasa comienzan la síntesis de la hebra conductora por el extremo 3’ de cada cebador.La primasa sintetiza un nuevo cebador sobre cada hebra retardada.La ADN polimerasa comienza a sintetizar un fragmento de ADN a partir del nuevo cebador.Cuando la ADN polimerasa llega al cebador de ARN, lo elimina y lo reemplaza por ADN.La ligasa une los fragmentos de ADN.

64. Terminación del procesoLa replicación termina cuando se unen todos los fragmentos de Okazaki de la hebra retardada

65. Corrección de erroresDurante la replicación se puede producir un error en el apareamiento de bases con una tasa de 1/100.000 bases.Parte de estos errores se corrigen durante la replicación. La ADN polimerasa actúa como exonucleasa y elimina los nucleótidos mal apareados y rellena el hueco con los nucleótidos correctos. La ADN ligasa une los fragmentos resultantes.A pesar de todo, siempre quedan algunos errores (mutaciones)

66. Existen cinco tipos de ADN polimerasas (, , , , y  ).

67. Replicación en los eucariontesEs muy parecida a la de los procariontes, salvo en algunas diferencias debidos a las propias diferencias en el material genético de procariotas y eucariotas:El material genético de eucariotas esta dividido en varios cromosomas, mucho mas largos que el cromosoma procariota.

68. La replicación se origina simultáneamente en muchos puntos: los replicones (puede haber mas de6000 en un solo cromosoma).

69. Existen cinco tipos de ADN polimerasas (, , , , y  ).

70. El ADN eucariota está asociado a histonas, que se tienen que duplicar durante la duplicación para formar los nucleosomas.

71. Los nuevos nucleosomas se incorporan a la hebra retardada y los viejos se quedan en la conductora3’Telómero5’CebadorÚltimo cebador3’5’La ADN polimerasa polimeriza desde el extremo 3’ libreEliminación de cebadores3’Hebra más corta5’Replicación en los eucariontesCuando se elimina el último cebador, la ADN polimerasa no podrá rellenar el hueco, al no poder sintetizar en dirección 3’ - 5’.Debido a esto el extremo del cromosoma (telómero) se va acortando cada vez que la célula se divide. 5’3’5’5’Esto se asocia al envejecimiento y muerte celular.5’5’

72. MUERTE CELULARSe puede dar de dos formas: Necrosis y apoptosisNecrosis: Se produce cuando la célula sufre un daño grave.

73. Comprende un estado irreversible de la célula. No se puede mantener la integridad de la membrana plasmática y hay un escape de elementos citoplasmáticos, desnaturalización de las proteínas por autólisis o proveniente de enzimas líticas de leucocitos vecinos, ya que la necrosis atrae los componentes de la inflamación.

74. Todos estos cambios condenan a la célula a perder su función específica, y quedan restos celulares que serán fagocitados por los macrófagos. MUERTE CELULARLa apoptosis es una forma de muerte celular, que está regulada genéticamente. Es parte integral del desarrollo de los tejidos tanto de plantas como de animales pluricelulares. Cuando una célula muere por apoptosis, empaqueta su contenido citoplasmático, lo que evita que se produzca la respuesta inflamatoria característica de la muerte accidental o necrosis.

75. La apoptosis se puede producir en dos momentos: Durante el desarrollo embrionario: en este momento su función es eliminar las células innecesarias (como el tejido interdigital en la formación de los dedos)En un individuo adulto: para el recambio y renovación de tejidos, o la destrucción de la células que pueden presentar una amenaza para el organismo.

76. La apoptosis implica varios cambios en la célula: Cuando las células reciben la señal del inicio de apoptosis se suicidan fabricando una serie de proteínas letales como pueden ser: - Endonucleasas; que fragmentan el ADN - Hidrolasas y proteasas: que atacan al entramado celular.

79. MitosisEs la división del núcleo celular (fase M del ciclo celular).