Este documento describe las características de las Enterobacteriaceae, una familia de bacterias gramnegativas. Describe sus características morfológicas, bioquímicas y de cultivo, así como pruebas para identificar patógenos comunes como E. coli, Klebsiella, Proteus, Enterobacter, Shigella y Salmonella. Explica cómo estas pruebas analizan la fermentación de azúcares, producción de enzimas y otros metabolitos para distinguir entre especies.

1. ENTEROBACTERIAS
P.Q.C. MIGUEL ANGEL ORTIZ GIL.
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2. Características Generales:
• Las Enterobacteriaceae habitan en:
– Distribuidas en suelo,
– agua,
– alimentos.
– Flora normal del intestino de humanos y
animales.
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3. • MORFOLÓGICAS Y TINTORIALES
–Bacilos o cocobacilos cortos gram
negativos,
– no esporulados,
–mótiles (flagelos perítricos) o no,
– capsulados o no,
– pilis.
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4. • BIOQUÍMICAS
– Anaerobios facultativos,
– catalasa positiva, (excepto Shigella
dysenteriae Tipo 1)
– oxidasa negativa,
– fermentan la glucosa,
– reducen nitratos a nitritos.
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5. Reacción de catalasa
• Esta prueba detecta la presencia de
citocromooxidasas
• La prueba se hace con peróxido de
hidrógeno (H2O2) al 3% sobre un
portaobjetos. La producción inmediata y
abundante de burbujas indica la conversión
del H202 en agua y oxígeno gaseoso.
• La prueba de la catalasa debe realizarse a
partir de un medio que no contenga sangre
porque los eritrocitos pueden producir una
reacción de catalasa débil.
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6. Prueba de la catalasa
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7. Reacción de
citocromo oxidasa
• Los citocromo son
hemoproteinas que contienen
hierro y actuan como último
eslabón de la cadena de la
respiración aerobia ;
transfireren electrones de
Hidrógeno al Oxígeno, con la
formación de agua.
• El sistema citocromo se
encuentra presente en
microorganismos aerobios,
microaerofílicos y en algunos
anaerobios facultativos, pero
nunca en anaerobios
estrictos.
Dimetil-p-fenilendiamina al 1%
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8. • Los modos de transmisión a los seres
humanos son:
– Infecciones Nosocomiales
• ( E. coli)
– Ingesta de alimentos o agua.
• Salmonella,
• Shigella,
• Yersinia enterocolitica.
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Enterobacteriaceae
Patógenos
oportunistas.
Patógenos
evidentes.
Citrobacter.
Enterobacter.
Klebsiella.
Proteus.
Serratia
•Salmonella tiphy – (fiebre
tifoidea.)
•Shigella – (Disentería).
•Y. Pestis (peste negro).

10. MEDIOS DE CULTIVO
1. Medios no selectivos: agar sangre
2. Medios selectivos-diferenciales: agar McConkey, agar EMB, SS agar,
agar XLD.
McConkey: colonias rosadas (fermentan lactosa) y colonias transparentes
(no fermentan lactosa).
Agar EMB: colonias azules (fermentan lactosa) y colonias transparentes
(no fermentan lactosa).
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11. Mac Conkey
• Gram positivas ven inhibido - sales biliares y
cristal violeta.
• Fermenten la lactosa liberarán productos ácidos
que producirán un cambio de pH que se
detectará gracias al rojo neutro.
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13. Aspectos de las colonias.
• En agar sangre y agar chocolate las
colonias son:
– Grandes.
– Gris.
– Lisas.
• Klebsiella o Enterobacter.
– Mucoides – (polisacáridos).
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14. • E. Coli – ( Beta hemolítica).
P. mirabilis.
• Motilidad. P. penneri.
P. Vulgaris.
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15. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN
1. Pruebas bioquímicas
2. Pruebas serológicas
3. Pruebas de biología molecular
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17. Pruebas bioquímicas
• Estudia el metabolismo de la bacteria
• Estudio basado en la determinación de la
presencia o ausencia de diferentes enzimas
codificadas por el material genético del
cromosoma bacteriano
• Se detecta a través de medios de cultivo
especiales
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18. Los medios de cultivo generalmente
están formados por:
• El sustrato sobre los cuales actúan las
enzimas
• Un indicador que puede detectar la
disminución del sustrato o la presencia de
un producto metabólico especifico
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19. La medición de las diferentes características
metabólicas de un microorganismo permiten
identificar la especie
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20. Pruebas bioquímicas
Metabolismo fermentativo
• Mide la capacidad del microorganismo
para utilizar los hidratos de carbono
• Microorganismo actúa sobre los
carbohidratos y acidifica el medio
• El indicador presente vira
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21. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICAS
Prueba TSI (triple azúcar hierro)
Contiene lactosa 10 g, sacarosa 10 g y glucosa 1 g.
Resultados:
Superficie inclinada/fondo:
- ácida/ácida: Bacterias fermentadoras de lactosa: E. coli, Klebsiella,
Citrobacter, Enterobacter, etc
- alcalina/ácida: Bacterias no fermentadoras de lactosa. Salmonella (H2S+),
Shigella (H2S -), Yersinia.
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22. TSI
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23. TSI
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24. CITRATO DE SIMMONS
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25. CITRATO DE SIMMONS
• Mide la capacidad de un organismo para
utilizar el citrato como única fuente de
carbono
• Citrato compuesto orgánico constituye
uno de los metabolitos del ciclo de Klebs
• Las bacterias al utilizar citrato extraen
nitrógeno de la sal de amonio con
producción de amoniaco que hace vire el
indicador
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26. CITRATO DE SIMMONS
• Para esta prueba se utiliza el agar de citrato de
Simmons que contiene citrato de sodio y azul de
timol como indicador.
• La única fuente de carbono en este medio es el
citrato.
• Si la reacción es positiva el indicador vira a
azul.
• En la reacción negativa los microorganismos no
crecen y el medio conserva su color verde
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27. CITRATO DE SIMMONS
• El medio también contiene sales de
amonio que la bacteria usa como
fuentes de nitrógeno
• Fosfato de amonio amoniaco
alcalinización del medio
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28. CITRATO DE SIMMONS
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29. CITRATO DE SIMMONS
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30. CITRATO DE SIMMONS
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31. Descarboxilasas de aminoácidos
(arginina, lisina, ornitina
Los medios contienen:
•Peptona
•Extracto de carne
•Glucosa
•Aminoácido
•Purpura de bromocresol
MEDIO DE LIA
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32. Descarboxilasas de aminoácidos
lisina, ornitina
• Los aminóacidos al perder el grupo carboxilo
se convierten en aminas lo que incrementa el
pH del medio y el indicador (púrpura del
bromocresol) vira a violeta
R – CH - NH2 - COOH R- CH2 - NH2 + CO2
Aminoácido Amina Dióxido de carbono
pH alcalino
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33. Descarboxilaciòn lisina (LIA y MIO)
Ejemplo:
Aminoácido amina + dióxido de carbono
Lisina lisina descarboxilasa cadaverina
L- Ornitina Ornitina descarboxilasa Putrescina + CO2
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34. Descarboxilaciòn lisina (LIA)
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35. Descarboxilaciòn lisina (LIA)
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36. Veracruz llaattee ccoonn ffuueerrzzaa

37. MEDIO DE MIO
Prueba que se utiliza para investigar:
Motilidad (M)
Producción de Indol (I)
INDOL
Descarboxilación Ornitina.
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38. INDOL
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39. Indol
• El indol es uno de los productos de
degradación metabólica del aminoácido
triptofano.
• Las bacterias que poseen la triptofanasa .
• La prueba de indol está basada cuando el
indol reacciona con el grupo aldehído del
p-dimetilaminobenzaldehído.
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40. Medio de MIO
(p-dimetilaminobenzaldehído)
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41. INDOL
Prueba positiva
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42. INDOL
Prueba negativa
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43. E. coli
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44. Escherichia coli.
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• Mac Conkey.
– Colonias Planas.
– Colonias secas.
– Colonias Rosadas.
(LF)
• INDOL (+)
TSI LIA
K/A k/A Ó A/A

45. Escherichia coli
Clasificación de las cepas productoras de
diarrea
1. E. coli enterotoxigénica
2. E. coli enteropatógena
3. E. coli enterohemorrágica
4. E. coli enteroinvasiva
5. E. coli enteroagregante
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46. E. coli
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47. Klebsiella
pneumoniae
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48. Klebsiella.
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• Mac Conkey
– LF.
– Mucoides. (polisacáridos).
• Indicaciones de laboratorio:
– Lysine +
– Citrato +
– Indol –
– +/+ TSI (con gas)
– No-motile
– Ornithine –

49. Klebsiella pneumoniae
Cápsula
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50. Klebsiella
pneumoniae
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51. Proteus
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52. Proteus.
• Género que contiene varias especies, de
las cuales dos tienen importancia médica:
– P. mirabais. INDOL (-)
– P. vulgaris. INDOL (+)
• Mac Conkey.
– NFL.
– Swarning.
– Olor a podrido.
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53. Enterobacter
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54. Enterobacter.
• Mac Conkey.
– LF.
– Pueden ser Mucoides.
MIO:
*MOVILIDAD (+)
*INDOL: (+) E. agglomeras.
*INDOL: (-)
E. aerogenas (LIA +),
E. cloacae (LIA-).
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55. Enterobacter
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56. Shigella
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57. Shigella
S. dysenteriae
S. flexneri
S. sonnei
S. boydii
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58. Shigella
• Mac Conkey:
– NLF.
• TSI: alcalina/ácida, H2S negativo.
• LIA: K/A o A/A.
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59. Crecimiento de Shigella
en medio MacConkey
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60. Salmonella
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61. Salmonella
Clasificación
• S. enteritidis
• S. typhimurium
• S. typhi
• S. paratyphi A
• S. paratyphi B (Salmonella schottmuelleri)
• S. typhi C (Salmonella hirschfeldii)
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62. Salmonella enteritidis
• Mac Conkey: NFL.
• TSI: alcalina/ácida y H2S +
S. typhimurium.
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• INDOL (-)

63. SALMONELLA SSA
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64. Salmonella XLD
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65. Bibliografía:
• MANUAL DE TÉCNICAS EN MICROBIOLOGÍA
CLÍNICA. M. V. Álvarez, E. Boquet, I. De Fez. AEFA.
1990.
• DIAGNÓSTICO Y TRATAMIENTO CLÍNICOS POR EL
LABORATORIO. John Bernard Henry, Todd-Sanford-
Davidsohn. Tomo I y II. 8ª Edición. Salvat Editores. 1988.
• DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO. TEXTO Y ATLAS
COLOR. Koneman, Allen, Dowell, Sommers. Editorial
Médica Panamericana. 2ª Reimpresión. 1990.
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