2. Las proteínas son largas cadenas de aminoácidos unidas por
enlaces peptídicos entre el grupo carboxilo (-COOH) y el grupo
amino (-NH2) de residuos de aminoácido adyacentes.
Las Proteínas son biopolímeros
(macromoléculas orgánicas), de elevado peso
molecular, constituidas básicamente por
carbono (C), hidrógeno (H), oxígeno (O) y
nitrógeno (N); aunque pueden contener
también azufre (S) y fósforo (P) y, en menor
proporción, hierro (Fe), cobre (Cu), magnesio
(Mg), yodo (Y), etc...
3. Los aminoácidos son
compuestos sólidos;
incoloros;
cristalizables; de
elevado punto de
fusión (habitualmente
por encima de los 200
ºC); solubles en agua;
con actividad óptica y
con un comportamiento
anfótero.
Son las unidades
básicas que
forman las
proteínas. Su
denominación
responde a la
composición
química general
que presentan, en
la que un grupo
amino (-NH2) y
otro carboxilo o
ácido (-COOH)
Para la especie
humana son
esenciales ocho
aminoácidos:
treonina, metionina,
lisina, valina,
triptófano, leucina,
isoleucina y
fenilalanina (además
puede añadirse la
histidina como
esencial durante el
crecimiento, pero no
para el adulto)
4. Oligopéptidos (AA<10)
Dipéptidos (AA=2)
Tripéptidos (AA=3)
Tetrapéptidos (AA=4)
Es un enlace covalente y
se establece entre el
Grupo Carboxilo
(-COOH) de un AA
y el grupo Amino (-NH2)
del AA contiguo.
Polipéptidos (AA>10)
Son cadenas lineales de aminoácidos enlazados
por enlaces químicos de tipo amídico a los que
se denomina Enlace Peptídico
con el desprendimiento
de una molécula de agua
5. Escleroproteínas
Ejemplos: Colágenos,
queratina, etc.
Esferoproteínas
Ejemplos: Albuminas,
Globulinas, Glutelinas,
Prolaminas e Histonas.
SIMPLES (HOLOPROTEINAS): Al hidrolizarse producen
únicamente aminoácidos.
CONJUGADAS (HETEROPROTEINAS): Al
hidrolizarse producen aminoácidos y otras
sustancias no proteicas
Glucoproteínas
Ejemplos: Ribonucleasa,
mucoproteinas,
anticuerpos, etc.
Lipoproteínas
Ejemplos: LDL, HDL y
VLDL.
Cromoproteínas
Ejemplos:Hemoglobina,
Mioglobina,
Hemocianina
6. Catálisis:
Enzimas proteicas que se encargan de realizar
reacciones químicas.
Reguladora:
Las hormonas son un tipo de proteínas las cuales
ayudan a que exista un equilibrio entre las funciones que
realiza el cuerpo.
Estructural:
Función de dar resistencia y elasticidad que permite
formar tejidos así como la de dar soporte a otras
estructuras.
Defensiva:
Encargadas de defender al organismo como la
glicoproteínas que se encargan de producir
inmunoglobulinas.
Transporte:
La función de estas proteínas es llevar sustancias a través
del organismo a donde sean requeridas.
Receptora:
Llevan a cabo la función de recibir señales para que la
célula pueda realizar su función.
Contráctil:
Responsables de la contracción muscular
7. DESNATURALIZACION
La desnaturalización de una proteína se refiere a la ruptura de los enlaces que mantenían sus estructuras
cuaternaria, terciaria y secundaria, conservándose solamente la primaria. Se desnaturalizan por efecto
del calor o frio.
CAPACIDAD AMORTIGUADORA
Las proteínas tienen un comportamiento anfótero y ésto las hace capaces de neutralizar las variaciones
de pH del medio, ya que pueden comportarse como un ácido o una base y por tanto liberar o retirar
protones (H+) del medio donde se encuentran.
SOLUBILIDAD
Las proteínas son solubles en agua cuando adoptan una conformación globular. La solubilidad es debida a
los radicales (-R) libres de los aminoácidos que, al ionizarse, establecen enlaces débiles (puentes de
hidrógeno) con las moléculas de agua.
8.
9. Las proteínas son compuestos orgánicos
macromoleculares, ampliamente distribuidos
en el organismo, esenciales para la vida.
Actúan como elementos estructurales y de
transporte y aparecen bajo la forma de
enzimas, hormonas, anticuerpos, factores
de coagulación, etc. Se sintetizan
principalmente en el hígado, además de las
células plasmáticas, bazo, medula espinal y
ganglios linfáticos.
Las proteínas totales son el resultado de sumar los
distintos componentes proteicos presentes en el
organismo tales como: Alfa1, alfa2, beta gamma
globulina y albúmina. Las proteínas fraccionadas, al
contrario que las proteínas totales, miden la
cantidad específica de cada proteína. Ambas
pruebas, proteínas totales y fraccionadas, son
útiles a la hora de determinar estados anormales y
enfermedades que pueden afectar a nuestro
organismo.
10. - Estar en ayuno de 8 horas
- Si el paciente está acostado durante la
extracción el resultado será menor (0,4-0.8 g/dl)
- Evitar la aplicación prolongada del torniquete
durante la extracción de la muestra.
- Evitar la Hemolisis.
- Preguntar si esta ingiriendo algún medicamento ya
que pueden elevar la concentración de proteínas
como los esteroides anabolizantes, los
corticoides, los andrógenos, la hormona de
crecimiento, la insulina y la progesterona.
- Hay otros medicamentos que pueden disminuir la
concentración de proteínas totales, como los
estrógenos, los anticonceptivos y otros
medicamentos hepatotóxicos.
- Analizar antes de las tres o cuatro horas.
11. Es en la actualidad el método colorimétrico más exacto y
simple para la determinación de proteínas totales.
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión
cúprico en medio alcalino, para dar un complejo color violeta
con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad es
proporcional a la concentración de proteínas totales en la
muestra. El color depende de la naturaleza de las proteínas;
proteínas y péptidos dan un color violeta.
Proteína + Cu+2 Complejo Cu-Proteína (púrpura)
12. No deben utilizarse muestras hemolizadas (salvo una
hemolisis ligera), ya que la hemoglobina elevará
falsamente los valores de proteína total al ser considerado
como PT.
Puede usarse plasma como muestra, pero el resultado de
la proteinemia estará incrementado en 0,2 g/dl debido a
la presencia de fibrinógeno, que no está considerado
dentro de la definición de Proteínas Totales.
No se observa interferencia por bilirrubina hasta 100 mg/l,
y en ningún caso se presenta turbiedad por
quilomicrones.
13. Las proteínas totales pueden estar aumentadas en el
embarazo.
Los medicamentos que pueden elevar la concentración de
proteínas son los esteroides anabolizantes, los
corticoides, los andrógenos, la hormona de crecimiento,
la insulina y la progesterona.
Hay otros medicamentos que pueden disminuir la
concentración de proteínas totales, como los estrógenos,
los anticonceptivos y otros medicamentos hepatotóxicos.
14. Estabilidad
• Si no se procesa inmediatamente el suero
puede conservarse hasta 3 días en
refrigerador (2-10 °C) o una semana en
congelador.
Linealidad
• Cuando se realiza según las
recomendaciones, el ensayo resulta lineal
entre 0 y 150 g/L (0 - 15 g/dl)
• Para valores superiores diluir las muestras
con el blanco o agua destilada y repetir la
lectura multiplicando el resultado final por 2.
15. ValoresNormales
• Los valores normales
en adultos son entre 6
y 8,3 gr/dl.
• Los valores normales
en prematuros son
entre 4,2 y 7,6 gr/dl.
• Los valores normales
en recién nacidos son
entre 4,6 y 7,3 gr/dl.
• Los valores normales
en lactantes son entre
6 y 6,7 gr/dl.
• Los valores normales
en niños son entre 6,2
y 8 gr/dl.
ValoresDisminuidos
• Agammaglobulinemia,
• Ascitis,
• Hemorragias,
• Enfermedades renales
(glomerulonefritis,
síndrome nefrótico),
• Enfermedades del
hígado (hepatitis,
cirrosis, etc.),
• Enfermedades
intestinales con
malabsorción
(Enfermedad de
Crohn, enfermedad de
Whipple),
• Enfermedades por
deficiencit de
inmunoglobulinas,
• Enteropatías con
pérdida de proteínas,
• Quemaduras,
• Malnutrición.
ValoresAumentados
• Enfermedades
inflamatorias crónicas,
• Enfermedades
infecciosas crónicas,
• Enfermedad de
Waldenstrom,
• Mieloma múltiple.
16. La albúmina es una de las más importantes proteínas
plasmáticas producidas en el hígado. Entre sus
múltiples funciones se incluye nutrición,
mantenimiento de la presión osmótica y transporte
de sustancias como Ca++, bilirrubina, ácidos grasos,
drogas y esteroides.
La albúmina es fundamental para el mantenimiento de la
presión osmótica, necesaria para la distribución correcta
de los líquidos corporales entre el compartimento
intravascular y el extravascular, localizado entre los
tejidos. La albúmina tiene carga eléctrica negativa. La
membrana basal del glomérulo renal, también está
cargada negativamente, lo que impide la filtración
glomerular de la albúmina a la orina.
17. - Estar en ayuno de 8 horas.
- Suspensión de los medicamentos que
puedan afectar los resultados del
examen. Las drogas que pueden
aumentar las mediciones de albúmina
incluyen los esteroides anabólicos, los
andrógenos, la hormona del crecimiento
y la insulina.
- Obtener suero o plasma.
- Evitar la aplicación prolongada del
torniquete durante la extracción de la
muestra porque podría provocar un
aumento en su nivel.
- Analizar antes de las tres o cuatro
horas.
18. Los procedimientos utilizados
más habitualmente son los
métodos de ligación a tintes,
de los cuales el verde de
Bromocresol es el más
popular. No obstante, uno de
los mayores inconvenientes
de este método es su falta de
especificidad.
La albúmina reacciona
específicamente (sin
separación previa) con la
forma aniónica de la 3,3',5,5'-
tetrabromo cresolsulfon
ftaleína (BCG). El aumento de
absorbancia a 625 nm
respecto del Blanco de
reactivo, es proporcional a la
cantidad de albúmina
presente en la muestra.
19. Suero ictérico con bilirrubina ≥ 60.0 mg/dl.
Hemólisis: HB ≥ 10.0 g/dl.
Lipemia: ≥ 2000 mg/l.
Acetona: ≥ 50.0 mg/dl.
Fármacos que interfieren: Progesterona produce un aumento
de la albúmina. Alopurinol, clorpropamida, cisplatino,
estrógenos, ibuprofeno, nitrofurantoína, anticonceptivos
orales, fenitoina, prednisona, ácido valproico, fenilbutazona,
producen una disminución de la albúmina.
20. Estabilidad
• Si no se procesa inmediatamente el
suero puede conservarse 3 días en
refrigerador (2-10°C) o una semana en
congelador (-4°C).
Linealidad
• La reacción es lineal hasta 7 g/dl.
• Para valores superiores diluir las
muestras con el blanco o agua
destilada y repetir la lectura
multiplicando el resultado final por 2.
21. ValoresNormales
• Albúmina:
3,5 a 4,8
g/dl ValoresDisminuidos
• Ascitis,
• Enfermedades
renales
(glomerulonefritis,
síndrome
nefrótico),
• Enfermedades del
hígado (hepatitis,
cirrosis, etc.)
• Enfermedades
intestinales con
malabsorción
(Enfermedad de
Crohn, enfermedad
de Whipple)
• Quemaduras,
Malnutrición.
ValoresAumentados
• Deshidratación
• Dieta rica en
proteína
22. La electroforesis es una
técnica de separación que
se basa en el transporte
de iones a través de una
disolución por la acción de
un campo eléctrico.
Se aplica una diferencia de
potencial entre dos
electrodos de carga
opuesta de forma que los
cationes, con carga
positiva, se mueven hacia
el electrodo negativo o
cátodo y los aniones, con
carga negativa, se
mueven hacia el electrodo
positivo o ánodo.
Este principio se puede
aplicar para separar las
fracciones de proteínas
puesto que los
aminoácidos son
compuestos anfóteros que
se comportan como ácidos
(ceden protones y quedan
con carga negativa) o
bases (captan protones y
quedan con carga
positiva) dependiendo del
medio en el que estén.
23.
24. Es una representación gráfica de la distribución de las distintas
fracciones de las proteínas plasmáticas. Se basa en la separación de las
proteínas en función de su masa y su carga, tras someterlas a un campo
eléctrico. Es una representación densitométrica de las bandas obtenidas tras
someter al suero a electroforesis y es complementario a la determinación de
proteínas totales en suero.
RANGOS DE NORMALIDAD
Albúmina -------------- 55-68%
Globulinas ------------ 32-45%
Alfa-1 globulina -------- 1.5-5%
Alfa-2 globulina -------- 6.5-11%
Beta globulina --------9-13%
Gamma globulina -------- 14-19%