2. TINCIÓN KOH (HIDRÓXIDO
POTÁSICO)
Medio de montaje de las muestras clínicas mas universalmente realizado.
Permite clarificar todo tipo de muestras clínicas con abundantes celulas y restos
celulares.
Disuelve queratina y digiere parcialmente proteínas.
No actúa sobre los polisacáridos de las paredes celulares.
Observar morfología y pigmentación fúngica.
Hidróxido de potasio (KOH): inorgánico, es una base fuerte. 2 concentraciones, la
de 20-30% para uñas y del 10-15% para el resto de las muestras.
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
3. TINCIÓN KOH
(HIDRÓXIDO POTÁSICO) El KOH digiere los componentes de la
célula hospedadora (p. ej., células de
la piel) y permite la detección de
hongos Se pueden observar
levaduras, esporas e hifas.
Queratolítico
Mandell Douglas Bennett Enfermedades Infecciosas. 7ª Ed. Principios básicos en el diagnóstico y el tratamiento de las enfermedades infecciosas
5. TINCIÓN KOH (HIDRÓXIDO
POTÁSICO)
Colocar 1 gota de KOH
al 10-30% en
portaobjetos
Extender muestra de
forma homogénea
Cubrir con laminilla
22x22 mm
Se coloca en cámara
humeda a temperatura
ambiente por 60
minutos
El efecto clarificador del
KOH puede demorar
desde 10 min hasta
horas, en el caso de las
muestras de uñas, y
puede reducirse
calentando ligeramente
la preparación.
A la solución de KOH se
le puede añadir
Glicerol, DMSO o algún
colorante
Guía de Procedimiento de examen directo con Hidróxido de Potasio, Servicio de Patología Clínica Unidad de Soporte al Diagnóstico y
Tratamiento, 2019
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
6. TINCIÓN KOH (HIDRÓXIDO
POTÁSICO)
Glicerol: previene la degradación de
los elementos fúngicos, evita
formación de cristales y
deshidratación de la preparación
entre porta objetos y cubreobjetos.
Sol KOH 15%: 15 g de
KOH a 40 ml de SBD,
añadir 20 ml de glicerol
y aforar a 100 ml con
ABD
DMSO (KOH-Dimetilsulfoxido):
Acelera la clarificación, evita la
necesidad de calentamiento,
cristalización y formación de
artefactos.
40 ml de DMSO a 30 ml
de ABD, añadir 10 g de
KOH y aforar 100 ml de
ABD
KOH-colorante: azul de metileno y la
tinta azul-negra Quink Parker.
Una parte de tinta a
dos partes de la
solución de KOH,
mismo procedimiento
que en glicerol.
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
7. Actualización en Medicina de Familia: Habilidades técnicas en la consulta para el diagnóstico de las vaginitis infecciosas, C. Fernández Benítez. Centro
Salud de Laviana. Asturias. España. 2008
8. TINCIÓN KOH (HIDRÓXIDO
POTÁSICO)
Los inconvenientes de las soluciones de KOH son, entre otros, que
su reacción con el material clínico puede crear unos artefactos que
pueden parecerse a los hongos, con lo que se hace necesaria cierta
experiencia en el observador; el carácter corrosivo del KOH en el
equipo y la facilidad de aparición, con el tiempo, de cristales que
dificultan la observación.
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
9. TINTA CHINA
Colorante de contraste para
detectar bactérias
encapsuladas (p. ej.,
Bacillus anthracis) y hongos
(p. ej., Cryptococcus).
Detección de la cápsula
polisacarídica
extracelular de algunos
hongos.
Se utilizan suspensiones
coloidales de partículas
de carbón.
Las más utilizadas son la
Tinta China y la
Nigrosina
La cápsula aparece como
un halo claro y nítido en
torno a una levadura
redonda contra un fondo
negro
Mandell Douglas Bennett Enfermedades Infecciosas. 7ª Ed. Principios básicos en el diagnóstico y el tratamiento de las enfermedades infecciosas
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
10. TINTA CHINA
Reactivos Tinta china de buena calidad (tinta Pelikan India Ink o Parker
Black Ink, entre otras) pues no todas son adecuadas.
Se puede añadir Thimerosal (Sigma) al 0,3% como
conservante
Una gota de detergente para mantener las partículas de
carbón en suspensión.
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
11. Depositar sobre un porta
limpio y desengrasado una
gota de LCR
Colocar una gota de tinta china
Mezclarlas bien evitando
formar burbujas y colocar el
cubreobjetos.
La preparación debe ser fina y
su color marrón, no negro.
La observación se realiza a x100 ó x400.
La presencia de formas redondas rodeadas
de un halo grande y transparente son
sugestivas de C. neoformans
Revista Iberoamericana de Micología, 2007, Diagnóstico microscópico de las micosis
12. TINTA CHINA
Aunque la técnica es
muy rápida y sencilla,
su sensibilidad es del
50% en los pacientes
no-VIH y del 70-88%
en los pacientes VIH
con meningitis
criptocócica.
Cryptococcus neoformans, frotis con tinta
china
de LCR
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13. TINTA CHINA
Los problemas que pueden aparecer con esta técnica tienen, sobre todo, que ver con
la experiencia del observador, ya que puede haber numerosos artefactos (hematíes,
burbujas de aire, leucocitos, partículas de talco y gotas de grasa) que pueden
confundir, y más aún cuando las formas de C. neoformans carecen de cápsula.
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