Contenido preparado y resumido para una charla a los estudiantes del Postgrado de Neumonología Pediátrica del Hospital General "Dr. Jose Ignacio Baldo" de El Algodona, Caracas, Venezuela.

1. UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA
FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE BIOANÁLISIS
HOSPTIAL GENERAL “Dr. JOSÉ IGNACIO BALDÓ“
Diagnóstico Micológico
Profa. Yotsabeth Saúl G.
Caracas - 2016

2. Clasificación de las Micosis según la OMS
• Dermatofitosis
• Pitiriasis versicolor
• Pilonodosis
• Candidiasis cutáneas o mucosas.
Superficiales
• Esporotricosis
• Cromoblastomicosis
• Micetomas
Subcutáneas
• Histoplasmosis
• Paracoccidioidomicosis
• Coccidioidomicosis
Profundas
• Candidiasis sistémicas
• Criptococcosis
• Aspergilosis
• Mucormicosis
• Neumocistosis
Oportunistas

3. Micosis Superficiales

4. Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
1. Dermatofitosis o Tineas (Tiñas)
Tinea capitis no inflamatoria
Tinea faciei
Tinea corporis
M. canis, T. rubrum
T. cruris por:
T. rubrum, E. floccosum
Tinea pedis interdigital.
T. rubrum, T. mentagrophytes,
T. interdigitale

5. Subungueal, distal y lateral Blanca superficial
Distrófica total
Agentes T. rubrum, E. floccosum, T. mentagrophytes
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
1. Dermatofitosis o Tineas (Tiñas)
Onicomicosis

6. Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
1. Dermatofitosis o tiñas
• Recolección de la muestra: piel, pelos o uñas.
Raspado, depilación, cepillo, onicotomía.
• Examen directo: KOH 10% - 40%.
Se observan hifas hialinas, de 3 a 15 µm de diámetro, septadas y
ramificadas, con o sin artroconidias.
*Diagnóstico de la enfermedad.
• Cultivo: Lactritmel, Sabouraud. Micosel/ T. Amb./ 7-15 días.
Visualización de las características macroscópicas en placa o en tubo.
Visualización de las características microscópicas: cultivo en lámina.
Identificación del agente causal.
Identificación de hongos dermatofitos. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 12-1 - 12-11.

7. Recolección de la
Muestra:
pelos, piel ,uñas.
Hifas hialinas septadas.
Identificación de especie
Cultivos:
(placas/tubos)
Microcultivos
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
1. Dermatofitosis o tiñas

8. Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
2. Pitiriasis versicolor

9. • Recolección de la muestra: Escamas obtenidas por raspado con bisturí o la técnica
de la cinta adhesiva.
• Examen directo: Azul de metileno 0,05%
Se observan blastoconidias de Malassezia sp, de 3-8 µm de diámetro, de
paredes gruesas y refringentes, aisladas o dispuestas en acúmulos e hifas cortas
y gruesas, poco ramificadas de 2,5 a 4 µm de diámetro.
*Diagnóstico de la enfermedad.
• Cultivo: Medios de cultivo enriquecidos con lípidos.
Ej: Sabouraud + aceite de oliva.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
2. Pitiriasis versicolor

10. Toma de muestra:
método de la cinta adhesiva
Examen directo con Azul de metileno 0,05%:
Levaduras e hifas cortas gruesas de Malassezia spp.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
2. Pitiriasis versicolor

11. Candidosis en el área del pañal Onicomicosis por Candida
Candidosis de la cavidad oral: MuguetVaginitis por Cándida
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
3. Candidiasis cutánea y de mucosas

12. • Recolección de la muestra: Escamas, detrito subungueal, fragmentos de uñas,
exudado de mucosas, secreciones, flujo vaginal.
• Examen directo: KOH al 10%
Se observan blastoconidias ovaladas o redondeadas de diferentes formas y
tamaños (dependiendo de la especie).
• Aislamiento e identificación: Agar Sabouraud con o sin antibióticos sin
cicloheximida.
Características macroscópicas de crecimiento en agar cromogénico.
Bilis-agar: Clamidosporas (+) C. albicans/C.dubliniensis
Filamentización en suero: C. albicans (+)/ Candida no-albicans (-)
Pruebas de asimilación y fermentación de azúcares.
Identificación de levaduras. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 11-1 – 11-20.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
3. Candidiasis cutánea y de mucosas

13. Identificación de levaduras. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 11-1 – 11-20.
Diagnóstico Micológico: Micosis superficiales
3. Candidiasis cutánea y de mucosas

14. Micosis Subcutáneas

15. Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
1. Cromoblastomicosis

16. • Recolección de la Muestra: Escamocostras
• Examen directo: KOH 10% - 40%.
Se observan cuerpos escleróticos o células de Medlar en grupos de dos o
más, esféricos u ovalados, miden de 4 a 8 µm de diámetro, de color café
amarillento y en ocasiones se observan divisiones o filamentos.
*Diagnóstico de la enfermedad.
• Cultivo: Agar Sabouraud, Lactritmel / Tº Amb / 15-21 días.
Visualización de las características macroscópicas en placa o en tubo.
Visualización de las características microscópicas: cultivo en lámina.
Identificación del agente causal.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
1. Cromoblastomicosis

17. Recolección de la
Muestra:
escamocostras.
Cuerpos escleróticos.
Identificación de especie
Cultivos:
(placas/tubos)
Microcultivos
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
1. Cromoblastomicosis

18. Forma cutánea fija
Complejo cutáneo linfático
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
2. Esporotricosis
2.1 Esporotricosis cutánea
2.2. Esporotricosis extracutánea

19. • Recolección de la muestra: raspado, pus, biopsia, esputo.
• Examen directo KOH 10%
No es práctico, en general resulta negativo.
Se observan levaduras o cuerpos asteroides.
• Cultivo: Agar sabouraud, Micosel / 25 y 37ºC / 5-7 días.
Forma filamentosa y levaduriforme
• Inmunodiagnóstico:
Esporotriquina, pruebas serológicas.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
2. Esporotricosis

20. Examen directo de la muestra clínica
Cultivo de la muestra clínica
Identificación del agente causal
Cultivo en tubo, T.Amb Cultivo en lámina
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
2. Esporotricosis

21. Triada del micetoma:
• Aumento de volumen y deformidad del miembro afectado.
• Presencia de fístulas.
• Emisión de granos “ Formación in vivo de colonias de los agentes
causales”.
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
3. Micetoma
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.

22. Los granos son microcolonias compactas que constituyen una
adaptación parasitaria del hongo o bacteria.
MICETOMA
Granos: Negros, Claros, Rojos
Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
3. Micetoma
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.

23. Diagnóstico Micológico: Micosis subcutáneas
3. Micetoma
• Recolección de la muestra: obtención de granos
• Examen directo: KOH 10%
Se observan las características de los granos: tamaño, color, forma,
presencia de clavas.
• Biopsia H&E: verificar presencia de granos.
• Cultivo: Temp. Amb. / días - semanas
Medios especiales para hongos (eumicetomas):
Agar Sabouraud o lactrimel + cloranfenicol
Medios especiales para bacterias (actinomicetomas):
AS, BHI, L-J.
• Examenes complementarios: radiología

24. Micosis Profundas o Sistémicas

25. HISTOPLASMOSIS DIAGNÓSTICO
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
1. Histoplasmosis:

26. • Recolección de la muestra: esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, sangre,
biopsias, exudados de lesiones mucosas y cutáneas, material de ganglios linfáticos,
LCR y otros líquidos corporales.
• Examen directo:
Extendidos coloreados con Giemsa o Wright.
Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata-metnamina).
Calcofluor.
Se observan blastoconidias intracelulares, ovaladas de 2-3 µm, generalmente
con una sola gema.
• Cultivo: 25 y 37 °C / entre 1 y 5 semanas.
Agar sangre, Sabouraud o extracto de levadura
• Inmunodiagnóstico:
Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
HISTOPLASMOSIS DIAGNÓSTICO
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
1. Histoplasmosis
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.

27. Examen directo Médula Ósea:
Levaduras intracelulares
Coloración,Giemsa
Cultivo 25ºC
Micelio y macroconidias
Coloración, azul de lactofenol
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
1. Histoplasmosis

28. Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
2. Paracoccidioidomicosis

29. DIAGNÓSTICO
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
2. Paracoccidioidomicosis
• Recolección de la muestra: esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, sangre,
biopsias, exudados de lesiones mucosas y cutáneas, material de ganglios linfáticos,
LCR y otros líquidos corporales.
• Examen directo: En fresco, entre lamina y laminilla
KOH al 10% con o sin tinta, Negro de clorazol, Calcofluor.
Coloraciones histológicas (PAS, HE, plata-metenamina).
Se observan blastoconidias de diferentes tamaños, entre 3-40 µm de diámetro,
redondeadas, de pared gruesa y refringente. Característicamente se observan
células multigemantes, también es posible ver cadenas de blastoconidias o
células con gemación única o solitarias.
• Cultivo 25 y 37 °C / 15-21 días.
Agar Sabouraud adicionado o no de antibióticos y cicloheximida.
• Inmunodiagnóstico:
Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.

30. Cultivo:
Temp. Amb.
37 ºC
Examen directo:
Levaduras multigemantes
Estudio Histopatológico
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
2. Paracoccidioidomicosis

31. Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
3. Coccidioidomicosis

32. • Recolección de la muestra: esputo, lavado broncoalveolar, médula ósea, sangre,
biopsias, exudados de lesiones mucosas y cutáneas, material de ganglios linfáticos,
LCR y otros líquidos corporales.
• Examen directo: En fresco entre lamina y laminilla.
KOH al 10-20%, con o sin tinta.
Coloraciones histológicas (PAS, HE, Plata-metenamina).
Calcofluor
Se observan esférulasy endosporas de 10 a 80 µm, con pared doble y refráctil
de 2 a 5 µm.
• Cultivo 25 °C / 15-21 días.
Agar Sabouraud adicionado o no de antibióticos y cicloheximida.
• Inmunodiagnóstico:
Intradermorreacción, Inmunodifusión doble.
COCCIDIOIDOMICOSIS: DIAGNÓSTICO
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
3. Coccidioidomicosis

33. Coccidiodes spp. Examen directo
Diagnóstico Micológico: Micosis Profundas o Sistémicas
3. Coccidioidomicosis
Figura 39. Artroconidias de Coccidioides immitis de un
cultivo en forma micelial (preparación con azul de
Lactofenol). Fragmentación del micelio (M) en esporas
(artroconidias) rectangulares. Preparación con Azul de
Lactofenol, 1200 X. tomado de: Restrepo M., A. Rev. Acad.
Colomb. Cienc. 2006; 30 (116):367-386.

34. Micosis Oportunistas

35. Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
1. Candidiasis invasoras

36. • Recolección de la muestra: sangre, orina, secreciones vaginales, secreción
respiratoria, LCR.
• Examen directo: KOH 10%, Si presenta pocas levaduras hay colonización,
grandes cantidades de levaduras y presencia de hifas indica
parasitismo-enfermedad.
• Aislamiento e identificación: Agar Sabouraud con o sin antibióticos sin
cicloheximida.
Características macroscópicas de crecimiento en agar cromogénico.
Bilis-agar: Clamidosporas (+) C. albicans/C.dubliniensis
Filamentización en suero: C. albicans (+)/ Candida no-albicans (-)
Pruebas de asimilación y fermentación de azúcares.
• Estudio inmunológico:
Detección de antígenos en candidosis invasora.
Candidina.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
1. Candidiasis invasoras

37. Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
2. Criptococosis

38. Criptococosis, Diagnóstico
• Recolección de la muestra: LCR, esputo, lavado broncoalveolar, orina, biopsias,
sangre, médula ósea, exudado de úlceras, material purulento, secreción prostática.
• Examen directo:Observación entre lámina y laminilla con KOH al 10-20%. .
Tinta china o nigrosina.
Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata metenamina, mucicarmina de Meyer,
Azul de Alcián).
Se observan blastoconidias provistas de una pared bien definida y una cápsula
refringente, con o sin gemación, redondas u ovaladas de 4-6 µm de diámetro y hasta de
12-20 µm, dependiendo del tamaño de la cápsula
• Cultivo: 32 a 37° C/ 48 horas.
Se realiza en Agar Sabouraud u otros medios de cultivo sin cicloheximida.
• Inmunodiagnóstico: Detección de antígeno capsular, técnica aglutinación de partículas de
latex (LCR).
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
2. Criptococosis

39. Criptococosis, DiagnósticoDiagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
2. Criptococosis
Colonia cremosa y mucoide Blastoconidios encapsulados
(Tinta china, 100X.)

40. Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
3. Aspergilosis

41. Aspergilosis, diagnóstico:
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
3. Aspergilosis
• Recolección de la muestra: escamas, detrito subungueal, esputos, lavado broncoalveolar,
material purulento o necrótico, biopsias, hemocultivos (raramente positivos).
• Examen directo:En fresco, entre lámina y laminilla con KOH al 10-20% con tinta,
Negro de clorazol E, Calcofluor, Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata-metenamina)
Se observan hifas hialinas, septadas, con un diámetro de 3-6 µm, de pared lisa y gruesa, con
ramificaciones dicotómicas en ángulo de 45º.
Otitis y aspergiloma pulmonar y nasal, pueden encontrarse cabezas aspergilares.
Aspergiloma en las cavidades pulmonares y de senos (paranasal, etmoidal y maxilar), se
observan masas o bolas del hongo.
• Cultivo: 25° C/ 3-4 días.
Sabouraud con y sin antibióticos, lactrimel o Czapek.
• Inmunodiagnóstico: ELISA para detectar el antígeno galactomanano.

42. Histopatología Examen directo KOH 10/. Esputo
Cultivo en placa Cultivo en lámina.
A. fumigatus
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
3. Aspergilosis

43. Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
4. Zigomicosis

44. Mucormicosis, diagnóstico
• Recolección de la muestra: biopsias (se debe obtener material abundante y de
buena calidad), tejidos necróticos, secreciones, aspirado de senos nasales y
paranasales, esputos, lavado broncoalveolar.
• Examen directo: En fresco, entre lámina y laminilla con KOH al 10-20% con tinta,
Negro de clorazol E, Calcofluor.
Coloraciones histológicas (HE, PAS, plata-metenamina).
Se observan hifas anchas, aceptadas de 7-15 µm de diámetro, que se ramifican
en ángulo de 90º.
• Cultivo: 37ºC / 12-48 horas.
Agar Sabouraud sin cicloheximida.
Micosis más frecuentes en nuestro medio. Guía Práctica de Identificación y Diagnóstico en Micología Clínica. 2da ed. Rev Iberoam Micol; 2007. pp 2-1 – 2-15.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
4. Zigomicosis

45. Histopatología Cultivo en placa
Cultivo en lámina
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
4. Zigomicosis

46. Aspergilosis
Diagnóstico: cultivo en placa y lámina
• Recolección de la muestra: lavado broncoalveolar, cepillado bronquial,
esputos inducidos, biopsias.
• Examen directo: Giemsa, Wright.
Diff-Quik.
Plata-metenamina, Azul de toluidina O, Calcofluor
Se observan trofozoítos (ascosporas) y quistes (ascas) de P. jiroveci.
• Cultivo: Aun no se ha podido recuperar en cultivo.
• Otros métodos diagnósticos: Amplificación del ADN por PCR.
Diagnóstico Micológico: Micosis Oportunistas
5. Neumocistosis

47. Pneumocystis jirovecii
Quistes de Pneumocystis jiroveci en pulmón
(flechas). Coloración histological Plata-
metenamina. Disponible en:
student.ccbcmd.edu/.../lab9/u1fig32d.html