Temas selectos en Biología Molecular e Ingeniería Genética - 2018, Facultad de Medicina y Hospital Universitario UANL

1. M.C.P
. ORLANDO DANIEL SOLIS CORONADO
Importancia pronostica de
ABCB1 en el estadio I del
adenocarcinoma de pulmón
JOURNAL:
FACTOR DE IMPACTO: 1.39
PRESENTA:
(1) Departament of Pulmonary Medicine and Oncology
(2) Departament of Human Pathology
Fenfei Zou (1), Masahiro Seike (1) , Rintaro Noro (1),
Shinobu Kunugi (2) , Kaoru Kubota (1), Akihiko Gemma (1)

2.  7 artículos publicados
 11 citaciones
 Áreas de interés:
• Neumología
• Oncología
FENFEI ZOU
MSc
 94 artículos publicados
 4340 citaciones
 Áreas de interés:
• Neumología
• Oncología
MASAHIRO SEIKE
MD, PhD
 58 artículos publicados
 778 citaciones
 Áreas de interés:
• Oncología
RINTARO NORO
MD, PhD
 375 artículos publicados
 6091 citaciones
 Áreas de interés:
• Neumología
KAORU KUBOTA
MD
 333 artículos publicados
 7476 citaciones
 Áreas de interés:
• Neumo-patología
• Proteómica
AKIHIKO GEMMA
MD
 35 artículos publicados
 194 citaciones
 Áreas de interés:
• Neumo-patología
SHINOBU KUNUGI
PhD
Información de los autores

3. Proliferación o crecimiento anormal del epitelio respiratorio
producto de mutaciones que ocurren en una sola célula.
Cancer pulmonar
• 15% de todos los tipos de cancer
• 30% muertes relacionadas
• Supervivencia: 15% a 5 años
• Alta prevalencia
Importancia
HOMBRES ():
Incidencia: 1o
Mortalidad: 1o
MUJERES ():
Incidencia: 4o
Mortalidad: 1o
Epidemiologia
Introducción
(1) Ausiello, D. A., & Goldman, L. Cecil Tratado de medicina interna. (2013).
(2) Domarus, Rozman, C., & Farreras Valenti, P. Medicina interna (2016).
(4) Siegel, et.al. CA: a cancer journal for clinicians, (2017). 67(3), 177-193.

4. Factores de riesgo
(1) Ausiello, D. A., & Goldman, L. Cecil Tratado de medicina interna. (2013).

5. Cancer de pulmón de
células pequeñas
(microcítico)
Cancer de pulmón de
células NO pequeñas
(no microcítico)
15%
85%
• Carcinoma de células en avena
• Carcinoma de células poligonales
• Carcinoma linfocitico
• Carcinoma de células fusiformes
• Adenocarcinoma (60%)
• Carcinoma epidermoide (25%)
• Carcinoma macrocítico (15%)
Anatomía patológica del cáncer de pulmón
(1) Rubin, Strayer, & Rubin, D. (2012). Rubin: Patología; fundamentos clinicopatológicos en medicina.

6. Tumor confinado a
pulmón
Estadios del cáncer de pulmón no microcítico
ETAPA I
Tumor en pulmón y cercanía
de ganglios linfáticos
ETAPA
II
(1) Ausiello, D. A., & Goldman, L. Cecil Tratado de medicina interna. (2013).
(2) Domarus, Rozman, C., & Farreras Valenti, P. Medicina interna (2016).

7. Estadios del cáncer de pulmón no microcítico
Tumor en pulmón y metástasis
a ganglios linfáticos
ETAPA
III
ETAPA
IV

8. Tratamiento del cáncer de pulmón
CIRUGÍA QUIMIOTERAPIA RADIOTERAPIA INMUNOTERAPIA
TERAPIAS
DIRIGIDAS
INHIBIDORES
ANGIOGÉNICOS
(1) Ausiello, D. A., & Goldman, L. Cecil Tratado de medicina interna. (2013).
(2) Domarus, Rozman, C., & Farreras Valenti, P. Medicina interna (2016).

9. Modelo de progresión del cáncer de pulmón
(1) Ausiello, D. A., & Goldman, L. Cecil Tratado de medicina interna. (2013).

10. Características biológicas de las CMT
(1) Garza-Treviño, Said-Fernández & Martínez-Rodríguez. Cancer cell international. (2015). 15(1), 2.
(2) Zubair, H. (et.al.). Stem Cells in Toxicology and Medicine, (2016). 375.
(3) Aponte, P. M., & Caicedo, A.. Stem Cells International, (2017).
(4) Baccelli, I., & Trumpp, A.. J Cell Biol, (2012). 198(3), 281-293.
Autorenovación
(1,2)
Diferenciación
(1,2,3)
Marcadores de
superficie (1,2)
Resistencia a
apoptosis (2,3)
Transp. de
resistencia a
fármacos (2)
Evasión de
respuesta
antitumoral (2)
Crecimiento
tumoral (1,2,4)
Invasión y
metástasis (1-4)
Resistencia a
terapias (1-4)
Recurrencia
tumoral (1,2)
Iniciación del
tumor (1,2)

11. Supervivencia libre de
enfermedad < a 5 años
MAL
PRONOSTICO
La expresión de ABCB1, ALDHA1 y CD44 y de wild-type-EGFR
se asocia con un mal pronostico en pacientes con
adenocarcinoma de pulmón en etapa I.
H1
Hipótesis

12. Objetivos
Determinar la asociación entre un mal pronostico y
la combinación de la expresión de CMT ABCB1,
ALDHA1 o CD44 y presencia de EGFR wild-type o
mutante en biopsias de adenocarcinoma pulmonar.
OG

13. Obtención de
piezas quirúrgicas
Obtención de
cortes histológicos
Clasificación histológica
e historial clínico
Inmunohistoquímica
Análisis de datos y
correlación de resultados
Estrategia general

14. Muestras
clínicas
1
Pacientes con diagnostico de CPCNP
n = 194
Obtención de piezas quirúrgicas
y clasificación histopatológica
2001-2009
Clasificación por TNM
Adenocarcinoma
n = 128
C. escamoso
n = 66
Seguimiento de pacientes por
5 años
-80oC
Mutaciones
EGFR
PCR
A
B
Material y métodos

15. Material y métodos
Inmunohistoquímica
2
Recuperación de
antígenos
Tejidos embebidos
en parafina
Desparafinar
tejido
Buffer citrato (pH 6.0)
Bloqueo de
proteínas
Incubación de
Ac 1º (Dil. 1:100)
MDR1
ALDH1A1
CD44
Incubación de
Ac 2º (Dil. 1:200)
Sistema de detección ABC
Peroxidase Staining Kit

16. Material y métodos
Evaluación de la expresión de
ABCB1, ALDHA1 y CD44
3
H-score
0 No expresión
1+ Baja expresión
2+ Alta expresión
3+ Alta expresión
CD44
INTENSIDAD DE
TINCIÓN DE CEL.
TUMORALES
0 No tinción
1 Tinción débil
2 Tinción moderada
3 Tinción intensa
PORCENTAJE DE
CEL. TUMORALES
(+)
0: ≤10%
1: 10-39%
2: 40-69%
3: ≥70%
H-score
SEMICUANTITATIVO
p/c MUESTRA
ALDH1A1 ABCB1
EXPRESIÓN ABCB1
Baja expresión: H-score ≤3
Alta expresión: H-score ≥ 3
EXPRESIÓN ALDH1A1
Baja expresión: H-score ≤2
Alta expresión: H-score ≥ 2

17. Material y métodos
Análisis estadístico
3
EXPRESIÓN PROTEICA
 ABCB1
 ALDHA1
 CD44
CARACTERÍSTICAS DE
LOS PACIENTES
C
O
R
R
E
L
A
C
I
Ó
N
Prueba de χ²
SUPERVIVENCIA
GLOBAL (SG)
SUPERVIVENCIA
LIBRE DE
ENFERMEDAD
(SLE)
FECHA DE CIRUGÍA
SG
SLE Log-rank
test
ANALISIS UNI-
MULTI-VARIADO
MODELO DE
REGRESIÓN DE COX
(p <0.05)

18. Expresión y significancia pronostica de ABCB1,
ALDH1A1 y CD44 en CPCNP
Pacientes con
diagnostico de
CPCNP
n = 194
Alta expresión de
marcadores de IHQ
n= 117
(60%)
CD44
n= 25
(13%)
ABCB1
n= 61
(31%)
ALDH1A1
Resultados

19. Resultados
EXPRESIÓN
PROTEICA
 ABCB1
 ALDHA1
 CD44
CARACTERISTICAS
DE PACIENTES
Expresión y significancia pronostica de ABCB1,
ALDH1A1 y CD44 en CPCNP
 Sexo (p= 0.02)
 Tabaquismo (p= 0.02)
 Histología (p <0.01)
CD44
No correlación entre expresión y
características de pacientes
ABCB1
C
O
R
R
E
L
A
C
I
Ó
N
No correlación entre expresión y
características de pacientes
ALDHA1

20. Resultados
Expresión y significancia pronostica de ABCB1,
ALDH1A1 y CD44 en CPCNP
EXPRESIÓN
PROTEICA
 ABCB1
 ALDHA1
 CD44
SIGNIFICANCIA
PRONOSTICA
C
O
R
R
E
L
A
C
I
Ó
N
 ABCB1 + peor sobrevida comparado con
ABCB1 – en Est. I-III de CPCNP
ABCB1
 CD44 – peor sobrevida comparado con
CD44 + en Est. I-III de CPCNP
CD44
 ALDH1 – peor sobrevida comparado
con ALDH1 + en Est. I-III de CPCNP
ALDH1

21. Resultados
Correlación entre la expresión de marcadores CMT y sobrevida en adenocarcinoma pulmonar
No correlación con
características de
pacientes
ABCB1
Correlación con
grado histológico y
edad
ALDHA1
Correlación con
estadio T (TNM) y
estadio patológico
CD44

22. Resultados
No asociación con sobrevida
en adenoca. pulmonar
ALDH1A1
CD44 + mejor sobrevida que
CD44 – en etapas I-III de ACP
CD44 ABCB1 + peor sobrevida que
ABCB1 – en etapa I de ACP
ABCB1
Correlación entre la expresión de marcadores CMT y sobrevida en adenocarcinoma pulmonar

23. Resultados
Significancia pronostica de ABCB1 en adenocarcinoma de pulmón estadio I
Pacientes con
diagnostico de
adenocarcinoma
n = 128
Adenocarcinoma
Estadio I
n = 75
wt-EGFR
n = 56
 ABCB1 + + wt-EGFR peor SG y SLE que ABCB1-
 ABCB1 + mut-EGFR no correlación significativa con
sobrevida (datos no mostrados).
mut-EGFR
n = 19
SG: Supervivencia global
SLE: Supervivencia libre de enfermedad
wt-EGFR: wild-type del rec. factor de crec. epidérmico
mut-EGFR: mutante del rec. factor de crec. epidérmico
ABREVIATURAS RESULTADO

24. Resultados
Análisis univariado y multivariado por modelos proporcionales de Cox para factores asociados a
MORTALIDAD en adenocarcinoma de pulmón estadio I
 Análisis univariado revela que EGFR y ABCB1 están
asociados a mortalidad no así el análisis multivariado.
 No asociación en estadio I
***

25. Resultados
Análisis univariado y multivariado por modelos proporcionales de Cox para factores asociados a
SUPERVIVENCIA LIBRE DE ENFERMEDAD en adenocarcinoma de pulmón estadio I
 Correlación entre la edad y ABCB1 con la SLE en estadio I de
ACP (análisis univariado).
 ABCB1 como marcador pronostico independiente para SLE en
estadio I de ACP con wt-EGFR.
***

26. Biomarcadores en CPCNP
 Selección de pacientes
 Beneficio clínico
 Expresión aumentada en cancer
 Propiedades de CMT
 Altera vías de señalización relacionadas
con CMN
Discusión
Arma de doble filo
 Protección contra xenobióticos tóxicos
 Remoción de agentes de quimioterapia
de células malignas
ABCB1
Estadio I del CPCNP
 Supervivencia a 5 años: 70%
 Recaídas en 20-30% de los pacientes

27. Conclusión
Este estudio demostró que la expresión de ABCB1 puede
tener valor pronostico en pacientes con ACP en etapa I.
Se observó que la sobreexpresión de ABCB1 se asociaba con la
RECIDIVA y se reconocía como un factor de predicción de
RECURRENCIA POST-OPERATORIA en pacientes con ACP con wt-EGFR.

28. Comentarios al articulo
Porque elegí este articulo? Criticas
 Proteína ABCB1 será evaluada en la tesis
 ABCB1 como marcador de CMT y el
pronostico de los pacientes.
 Evaluación de varios marcadores de CMT
en cancer de pulmón.
 Buena cantidad de muestra (total)
 Método de análisis de la
inmunohistoquímica y análisis estadístico
 No incluyen las micrografías de H&E para
determinar el subtipo histológico.
 Inmunohistoquímica para un solo
marcador en una laminilla.
 Pacientes que expresaban un marcador
eran menores a los que no lo expresaban.
 No incluyen los estadios IV
 Varios datos no los muestran en el
articulo.

29. M.C.P
. ORLANDO DANIEL SOLIS CORONADO
Importancia pronostica de
ABCB1 en el estadio I del
adenocarcinoma de pulmón
JOURNAL:
FACTOR DE IMPACTO: 1.39
PRESENTÓ:
(1) Departament of Pulmonary Medicine and Oncology
(2) Departament of Human Pathology
Fenfei Zou (1), Masahiro Seike (1) , Rintaro Noro (1),
Shinobu Kunugi (2) , Kaoru Kubota (1), Akihiko Gemma (1)