Este documento describe procedimientos para observar mitocondrias utilizando un microscopio óptico y electrónico. Explica cómo usar el colorante verde Jano para colorear las mitocondrias de verde brillante en muestras frescas de raspado bucal. También describe cómo preparar y observar tejido muscular, riñón de anfibio y hepatopáncreas de anfibio usando técnicas específicas. Finalmente, indica que la observación con microscopio electrónico de transmisión permitirá ver la ultraestr

1. Práctico N°4
MITOCONDRIAS
PARTE I: OBSERVACION CON MICROSCOPIO OPTICO
Preparado en fresco:
1) OBJETIVO: evidenciar mitocondrias con una reacción de coloración específica.
2) MATERIALES:
− porta y cubreobjetos
− microscopio
− espátula
− cuentagotas
− verde Jano.
3) PROCEDIMIENTO:
− realiza un preparado de raspado mucosa bucal (según la técnica ya estudiada),
coloréalo con verde Jano, dejando actuar al colorante 5 minutos.
− quita el exceso de colorante lavando con suero fisiológico.
− coloca la muestra en el microscopio e identifica en las células las mitocondrias de
color verde.
SOBRE EL VERDE JANO: Para evidenciar mitocondrias es utilizado verde Jano al 0,01%. Este
producto al reducirse vira del azul al verde brillante. Es un marcador específico porque al colocarlo en
presencia de mitocondrias, emplea en su reducción los electrones de la cadena respiratoria que se
encuentra emplazada en la membrana mitocondrial interna y las colorea de “verde brillante."
Preparados fijados:
1. Tejido muscular estriado esquelético con técnica de succinato-deshidrogenasa.
2. Riñón de anfibio con técnica de Regaud.
3. Hepatopáncreas de anfibio con técnica de Regaud.
PARTE II: OBSERVACION CON MICROSCOPIO ELECTRONICO DE
TRANSMISION
Observación de micrografías que evidencien: ultraestructura, variaciones morfológicas,
variaciones conformacionales, etc..
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