Este documento proporciona información sobre el agar bismuto-sulfito según WILSON-BLAIR, un medio de cultivo selectivo para el aislamiento y diferenciación de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de muestras clínicas, alimentos y agua. El medio inhibe bacterias de acompañamiento y permite identificar colonias de Salmonella mediante la producción de sulfuro de hidrógeno, que causa un ennegrecimiento del medio. Se describen las instrucciones de preparación, almacenamiento, siembra e interpret

1. IVD Diagnóstico in vitro - Sólo para uso profesional
Agar bismuto-sulfito según WILSON-BLAIR
Agar bismuto-sulfito según WILSON-BLAIR Art. Núm. 1.05418.0500/5000
(500 g, 5 kg)
Agar selectivo para aislamiento y diferenciación de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de
material clínico, alimentos y agua según WILSON y BLAIR (1927). Corresponde a las
recomendaciones de la United States Pharmacopeia
Ver también Modo general de empleo
Para advertencias y precauciones, ver www.merck-chemicals.com
Principio
Método microbiológico.
Modo de acción
El Verde brillante y el bismuto-sulfito inhiben considerablemente los gérmenes de acompañamiento.
El sulfato de hierro (III) es un indicador del sulfuro de hidrógeno que producen las colonias de
Salmonella H2S-positivas. Habitualmente, esta reacción produce una precipitación marrón o negra en
el medio de cultivo así como colonias de color negro o verde con brillo metálico.
Composición típica (g/litro)
Extracto de carne 5,0; peptona de carne 5,0; peptona de caseína 5,0; D (+)-glucosa 5,0; hidrogeno
fosfato di sódico 4,0; sulfato de hierro (III) 0,3; Verde brillante 0,025; indicador bismuto-sulfito 8,0;
Agar agar 15,0.
Preparación y almacenamiento
Guardado en un lugar seco y estando bien cerrado, es utilizable hasta la fecha de caducidad si se
conserva entre +15 y +25 °C. Proteger de la luz.
Una vez abierto el frasco por primera vez, es utilizable hasta la fecha de caducidad si se conserva
entre +15 y +25 °C en un lugar seco y bien cerrado.
Disolver 47,5 g en 1 litro de agua desmineralizada. Mezclar bien y calentar hasta la ebullición
agitando continuamente. Dejar enfriar a 45 - 50 °C.
Remover y vaciar realizando placas de capa gruesa (25 ml).
No tratar en autoclave.
pH: 7,6 ± 0,2 a 25 °C
Las placas de cultivo preparadas son turbias y presentan una precipitación coposa así como
un color gris verdoso.
El medio de cultivo fresco es fuertemente inhibitorio, por lo que se recomienda su uso
especialmente para muestras con una contaminación importante (p. ej. heces).
Según la FDA-BAM, los medios de cultivo deberían ser preparados 1 día antes de su uso y
guardados en un lugar oscuro. Después de 48 horas se reduce el efecto selectivo.
Uso y evaluación
Sembrar finamente la superficie de las placas con el material objeto de prueba o con material
procedente de un cultivo de enriquecimiento.
Incubación: hasta aprox. 48 horas a 35 °C, ambiente aerobio.
Colonias Microorganismos
Colonias negras con brillo
metálico, rodeadas de zonas
parduzcas-negras
Salmonella typhi

2. Colonias Microorganismos
Colonias negras o verdosas-
grises, algunas veces con brillo
metálico, con o sin
ennegrecimiento del medio de
cultivo rodeante
Salmonella spp.
Pequeñas, verdes hasta marrones,
algunas veces mucosas
Bacterias coliformes,
Proteus y otras
Restricciones
1. Es importante extender de tal manera que se produzcan colonias bien aisladas.
2. Si se presentan solapamientos de las colonias, no se desarrollarán las características de
colonia típicas de Salmonella spp.
3. Algunas cepas de Salmonella son inhibidas con especial rigor, p. ej. Salmonella gallinarum, S.
sendai, S. berta, S. abortus-equi. (Hajna 1951, Pub. Hlth. Rep. 9, 48-51)
Por consiguiente, se debería someter en caso de duda casi todo crecimiento en el medio de cultivo a
más pruebas, p. ej. producir un subcultivo en un medio menos selectivo para obtener colonias bien
aisladas.
Utilizar cultivos puros para la confirmación bioquímica y serológica.
Información para realizar pedidos
Producto N°de pedido Tamaño de
envase
Agar bismuto-
sulfito WILSON-
BLAIR
1.05418.0500 500 g
Agar bismuto-
sulfito WILSON-
BLAIR
1.05418.5000 5 kg
Control de calidad del medio de cultivo
Cepas de prueba Crecimiento
Colonias
negras
Brillo metálico
Salmonella typhimurium ATCC 14028 Bueno/muy bueno + +
Salmonella choleraesius ATCC 13312 Bueno/muy bueno + +
Salmonella enteritidis NCTC 5188 Bueno/muy bueno + +
Salmonella arizonae ATCC 13314 Bueno/muy bueno + +
Salmonella aboni NCTC 6017 Bueno/muy bueno + +
Escherichia coli ATCC 25922 Escaso/moderado - -
Proteus mirabilis ATCC 29906 Bueno/muy bueno ± -
Shigella sonnei ATCC 11060 Ninguno
Staphylococcus aureus ATCC 25923 Ninguno
Bacillus cereus ATCC 1 778 Ninguno

3. Salmonella typhimurium
Bibliografía
American Public Health Association: Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 3ª Edición, 1992.
McCOY, J.H.: The isolation of Salmonellae. - J. Appl. Bact., 25; 213-224 (1962).
United States Pharmacopoeia XXIII, Capítulo "Microbial Limit Tests", 1995.
WILSON, W.J., a. BLAIR, E.M. McV.: Use of glucose bismuth sulfite iron medium for the isolation of Bacillus typhosus and
Bacillus proteus. - J. Hyg., 26; 374-391 (1927).
WILSON, W.J., a. BLAIR, E.M. McV.: Further experience of the bismuth sulfite media in the isolation of Bacillus typhosus and
Bacillus paratyphosus B from faeces, sewage and water. - J. Hyg., 31; 138-161 (1931).
HAJNA, A.A.: (1951) Pub. Hlth. Rep. 9 48-51.
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