Conceptos básicos en espectrofotometría

1. Espectrofotometría
Andrea Carrascal Herazo
Lina Merlano Romero
María José Ortega
Jesús Turizo Hernández
Universidad de Sucre. Facultad de Ciencias de la Salud. Programa de Medicina. Bioestructura III. Bioquímica II. Periodo 02-2013.

2. Espectrofotometría
 La espectrofotometría es un método de análisis óptico que utiliza
la luz para medir concentraciones e identificar compuestos de
manera específica.
 Es una de las técnicas experimentales más usadas en las
investigaciones químicas y biológicas.
 Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y aplicabilidad a
moléculas de distinta naturaleza y estados de agregación.

3. Espectrofotómetro
 El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la
radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene
una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia.

4. Espectro electromagnético
 La luz está compuesta por ondas de diversa frecuencia.
 Cuando un rayo de luz blanca pasa por un prisma se separa en
sus componentes de acuerdo a la longitud de onda.
 La luz visible tiene una longitud de onda entre 400nm y 750nm.
 En la región menor a los 400nm se encuentra la región
ultravioleta y mayor a los 750 es una región infrarroja.

5. Fundamentos
 Tiene su fundamento en la luz, la cual algunas veces se
manifiesta como ondas y otras veces como partícula.
 La longitud de onda determina el color de la luz.
 La energía radiante se encuentra constituida por fotones cada uno
de los cuales tiene como característica una longitud de onda.

6. Principios
 Todas las sustancias pueden absorber energía radiante.
 La absorción de las radiaciones ultravioleta, visible e infrarroja
depende de la estructura de las moléculas.
 Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es
absorbida.
 El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas
longitudes de onda de la luz blanca.

7. Aplicaciones
 Determinar la concentración de un compuesto.
 Determinar de estructuras moleculares.
 Identificar unidades estructurales.