Leucemis

1. LEUCEMIAS AGUDAS,
CLASIFICACION, DIAGNOSTICO,
TRATAMIENTO Y APORTACION
DE LAS NUEVAS TECNICAS
DIAGNOSTICAS.
Ana Maria Gómez García
FIR 3º año Análisis Clínicos

2. CANCERES INFANTILES

3. LEUCEMIAS
LINFOBLASTICAS
AGUDAS
Expansión clonal de
precursores hematopoyeticos
CRONICAS
Expansión de elementos
maduros de MO
MIELOBLASTICAS
80% L.infantiles son LLA
15% son LMA
Restantes son indiferenciadas o cronicas
(LMC, LMMC JUVENIL)

4. LEUCEMIAS AGUDAS
EN LA INFANCIA

5. ANTECEDENTES HISTORICOS
Virchow, 1845
Ehrich, 1891 Citoquimica
Farber, 1948 empleo Aminopterina

6. ESTRATEGIAS DE ESTUDIO DE
LAS L.A:
L.A.
CLINICA
DATOS
LABORATORIO
MORFOLOGIA
INMUNOFENOTIPO
CITOGENETICA
FISH
BIOLOGIA
MOLECULAR
Complejo diagnostico de las Leucemias en la Actualidad.
METODOS DE LABORATORIO PARA CARACTERIZAR BLASTOS LEUCEMICOS:

7. DEFINICION LEUCEMIA
Proliferación neoplásica a partir de una célula
hematopoyética inmadura que ha perdido la
capacidad de diferenciarse.
Disminución del tejido hematopoyetico normal en
MO y posterior invasión de sangre periférica y
otros órganos.
Enfermedad oncológica más frecuente
diagnosticada en menores de 15 años.

8. ETIOLOGIA
La mayoría carecen de etiología clara
Factores predisponentes:
Factores genéticos
Anomalías cromosómicas
Inmunodeficiencias congénitas
Radiaciones ionizantes
Fármacos mielotóxicos.
Enfermedades inmunológicas
Virus

9. CLINICA
SINTOMAS CONSTITUCIONALES: astenia,
debilidad, perdida peso, sudoración nocturna.
SINTOMAS POR INFILTRACION DE LA MO:
- desplazamiento serie roja: Anemia ( palidez)
- desplazamiento serie blanca: Fiebre (50%),
infecciones 2ª a neutropenia.
- desplazamiento serie plaquetar: diátesis
hemorrágicas
(petequias, sangrado) por la plaquetopenia.

10. CLINICA
SINTOMAS POR INFILTRACION DE ALGUN
ORGANO O TEJIDO:
1. - 50-80% hepatoesplenomegalia
2. - linfoadenopatias
3. - 40% niños dolor óseo o articular
4. - hipertrofia gingival
5. - infiltración piel, mediastino y SNC (5-7% de
niños con L.A.)

11. DATOS DE LABORATORIO
95% Anemia normocítica, normocrómica y
arregenerativa ( ret )
Neutropenia.
90% Trombocitopenia.
16% carecen de blastos en SP.
El compromiso de 2 o mas
series hematopoyeticas
MIELOGRAMA

12. CARACTERISTICAS SERICAS
LDH elevada: Se correlaciona con la masa
tumoral y la gravedad de la enfermedad
Otras menos frecuentes
Hipercalcemia
Hiperuricemia
Aumento de transaminasas
Uremia

13. FROTIS SANGUINEO NORMAL
LINFOCITO
NEUTROFILO
MONOCITO
PLAQUETAS

14. AUTOANALIZADOR : ADVIA 120
SISTEMA AUTOMATIZADO PARA
ESTUDIO DEL HEMOGRAMA

15. ADVIA 120: AUTOANALIZADOR
HEMATOLOGICO
Autoanalizador por citometria de flujo.
Tres sistemas analíticos:
1Citómetro de flujo con lámpara diodo laser para canales:
RBC/PLAQ
BASOLOBULARIDAD
RETICULOCITOS
2.Citometro de flujo con lámpara tungsteno para canal de
PEROXIDASA.
3.Colorimetro para medir HEMOGLOBINA.

16. Autoanalizador hematologico:
Graficas serie blanca
tamaño
mieloperoxidasa Complejidad nuclear
Graficas serie roja
CONCENTRACIO
N DE Hb
TAMAÑO
Serie plaquetar VOLUMEN
DENSIDAD

17. HEMOGRAMA AUTOMATIZADO DE
SANGRE NORMAL

18. DIAGNOSTICO DIFERENCIAL
Reacciones leucemoides linfocitarias:
mononucleosis infecciosa, Bordetella Pertussis….
Hiperplasia linfoide madura en niños 2 años.
Otros: Anemia aplasica, linfoma, neuroblastoma,
síndromes hemorrágicos (purpura
trombocitopenica aguda), síndrome
mielodisplasico…

19. MONONUCLEOSIS INFECCIOSA
MANUAL
AUTOMATIZADO
Atipias linfocitarias

20. LEUCEMIA AGUDA VISTA AL
M.OPTICO
BLASTOS

21. LEUCEMIA AGUDA (SISTEMA
AUTOMATIZADO:

22. LEUCEMIAS
AGUDAS.CLASIFICACION FAB
British Journal of Hematology, 1976 Aug ; 33(4): 451-8
Proposals for the Classification of the Acute Leukaemias
FRENCH-AMERICAN-BRITISH (FAB) CO-OPERATIVE GROUP
Bennett JM , Catovsky D, Daniel MT , Flandrin G, Galton DA, Gralnick HR, Sultan C,
Accepted for publication 26 January 1976
PROBLEMAS CON LA CLASIFICACION FAB:
•No todas las L. Agudas tienen 30% blastos (traslocaciones especificas).
•Excluye leucemias bifenotipicas.
•No incluye L. multilínea u otras poco frecuentes
•Excluye información esencial para tto y pronostico.

23. CLASIFICACION MORFOLOGICA
FAB (1976)
MIELOBLÁSTICA
M0 minimamente diferenciada
M1 Sin maduración
M2 Con maduración
M3 promielocitica
M4 mielomonocitica
M5 monoblástica
M6 eritroleucemia
M7 megacarioblástica
LINFOBLÁSTICA
L1
L2
L3
Tamaño celular
Morfología Nuclear
Nucleolos
Basofilia citoplasmática
Vacuolas citoplasmáticas
L1: cels pequeñas
L2: cels pequeñas y grandes
L3: tipo Burkitt.

24. LEUCEMIA AGUDA
CLASIFICACION OMS ( 2001)
L.MIELOIDES AGUDAS
L.LINFOIDES AGUDAS
L.MIELOIDE CRONICA
L.LINFATICA CRONICA
De precursor de cel B
De precursor de cel T
De Burkit

25. LEUCEMIA AGUDA
CLASIFICACION OMS ( 2001)
CLASIFICACION OMS:
L. AGUDA 20%
BLASTOS
MORFOLOGIA
GENETICA
FENOTIPO

26. EGIL (1995)
Mas usada
LINFOBLASTICAS
AGUDAS
BIFENOTIPICAS AGUDAS
MIELOBLASTICAS
AGUDAS
CLASIFICACION INMUNOFENOTIPICA

27. SCORE INMUNOFENOTIPICO DE LAS LEUCEMIAS BIFENOTIPICAS

28. Paneles de anticuerpos monoclonales empleados para el estudio inicial de las
LAs (FITC/ PE/ ECD/ PC5/ PC7)
ESTUDIO INICIAL DE LA LEUCEMIA.
ESTUDIO INICIAL DE LA LEUCEMIA.
CITOMETRIA DE FLUJO
CITOMETRIA DE FLUJO
cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3
nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34
CD45/ CD4/ CD8/ CD3/ CD19
CD10/ CD20/ CD45/ CD34/ CD19
CD38/ CD22/ CD45/ HLADR/ CD19
CD15/ CD13/ CD45/ CD33/ CD19
KOR-SA/ 7.1/ CD45/ CD24/ CD19
IP (DNA)/ pan-B
cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3
nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34
CD45/ CD4/CD8/ CD3/ CD19
CD7/ CD34/ CD3/ HLADR/ CD5
CD7/ CD1a/ CD45/ CD33/ CD56
CD7/ CD13/ CD45/ CD10/ CD2
CD38/ TCRαβ/ CD45/ TCRγδ/ CD3
LLA de fenotipo B LLA de fenotipo T
INMUNOFENOTIPOS
LEUCÉMICOS
LMA
cMPO/ cCD79a/ CD45/ cCD3
nTdT/ cIgM/ CD45/ CD34
CD45/ CD4/ CD8/ CD3/ CD19
CD15/ CD13/ CD45/ CD33/ CD34
CD7/ CD117/ CD45/ CD34/ CD56
CD65/ CD135/ CD45/ CD2/ CD34
CD64/ CD11b/ CD45/ CD14/ CD16
HLADR/ CD235a/ CD45/ CD34/ CD41
LLA DE FENOTIPO B LLA DE FENOTIPO T LMA

29. LEUCEMIAS 2001-2005
LINFOIDES
MIELOIDES
LEUCEMIA T
LEUCEMIA B
75%
LINFOIDES
MIELOIDES 25%

30. LEUCEMIAS NIÑO JESUS 2005
MIELOIDE M5
LMMJ
LMC
MIELOIDE M4
MIELOIDE M3
MIELOIDE M0
LLA T PRO T
LLA T
INTERMEDIA
LLA PROB
LLA B PROB-
PREB
MIELOIDE M0
CD56+
LLA B
COMUN
MIELOIDES
LINFOIDES

31. LEUCEMIAS LINFOBLÁSTICAS
AGUDAS B (EGIL):
SUBTIPOS MARCADORES
INMUNOLOGICOS
LAL B1 o
pro-B
CD79a+ y/o CD 22+
y/o CD19+,CD34+
LAL B2 o
comun
CD79a+ y/o CD 22+
y/o CD19+,CD34±
CD 10+
LAL B3 o
pre- B
CD79a+ y/o CD 22+
y/o CD19+,
Cad µ
intracitoplasmatica
LAL B4 o
maduros
CD79a+ y/o CD 22+
y/oCD19+,
Ig Sup+
TdT +
CD34+
CD19+
CD22+
TdT+
CD34+/-
CD19+
CD22+
CD10++
IgM+
CD20++
CD19+
CD22+
CD10 +d
IgM+
Ig super+
CD20++
CD19+
CD22++
CD10+/-
5%
60%
15%
3%
FRECUENCIA

32. LEUCEMIAS LINFOBLÁSTICAS
AGUDAS T (EGIL):
SUBTIPOS MARCADORES
INMUNOLOGICOS
LAL T1 o
pro-T
+ CD 7 Y CD3
citoplasmático, CD34+
LAL T2,
pre-T
A lo anterior añadir +
CD 2 y/o CD 5 y/o
CD8.
LAL T3,
tímico-
cortical
+ CD1a
LAL T4,
madura
Demostración de la
existencia de CD 3 de
sup en ausencia de CD
1a.
TdT+
CD3+
CD34 +
CD7+
TdT+
CD3+
CD8+
CD5+
CD7+
CD2+
TdT +
CD3+
CD2
CD5
CD7
CD4+
CD8+
CD1a+
TdT+
CD2+
CD5+
CD7+
CD3+
CD4 o
CD8
FRECUENCIA
15%
MAS
FRECUENTE

33. LEUCEMIAS LINFOBLASTICAS T
Menos frecuentes ( 15% LAL pediátricas).
Mas agresivas (30% recaen a los dos
años).
Menos caracterizadas citogeneticamente
(25-50% presentan cariotipos alterados).
Menos información pronostica.
Ttos menos específicos.

34. CLASIFICACION INMUNOLOGICA-
MORFOLOGICA
TIPO
inmunolog
TdT HLA
DR
CD10
CALLA
CD3 CD1
a
CD7 CD2
CD5
CD8
CD19 CIg SIg Tipo
FAB
proB + + - - - - - + - - L1L2
COMUN + + + - - - - + - - L1L2
PreB + + ± - - - - + + - L1L2
B NEG + ± - - - - + - + L3
ProT + - ± +cit - + - - - - L1L2
PreT + - ± +cit - + + - - - L1L2
TIMICO
CORTICAL
+ - - +cit POS + + - - - L1L2
TIMICO
MADURO
- - - +sup NEG + + - - - L1L2

35. 1. DIAGNOSTICO
2. TRATAMIENTO
3. TRANSPLANTE
4. EMR
LEUCEMIAS AGUDAS

36. COMO SE REALIZA UN
DIAGNOSTICO?
ANALIZADORES AUTOMATICOS.
EXTENSION DE SANGRE PERIFERICA.
EXTENSIONES DE MEDULA OSEA
CITOQUIMICA DE EXTENSIONES MO.
CITOMETRIA DE FLUJO DEL ASPIRADO DE
MEDULA OSEA PARA TIPIFICAR LA LEUCEMIA
CITOGENETICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

37. FROTIS NORMAL MO
megacariocito
eritroblastos

38. MO PATOLOGICA
LEUCEMIA
MIELOIDE AGUDA
LEUCEMIA LINFOIDE AGUDA

39. CONTRIBUCION DE LA CITOQUIMICA
AL DIAGNOSTICO HEMATOLOGICO
La citoquímica estudia la composición qca. de las
células y hace posible detectar y precisar la
localización de algunos principios inmediatos,
enzimas y sust.inorgánicas (metales pesados).
Compuestos:
Carbohidratos: reacción del ác peryódico de Shiff
o reacción del PAS.
Enzs oxidantes: reacción de las peroxidasas.
Enzs hidrolíticas: fosfatasas alcalinas, ácidas, ß-
glucuronidasa, muramidasa, N-acetil- ß-
glucosaminidasa, esterasas inespecíficas.
Componentes inorgánicos: hierro⇒azul de Prusia
o de Perls.

40. CITOQUIMICA
Tipos FAB L1 L2 L3 MO M1 M2 M3 M4 M5 M6
PAS +
GRANO
+
GRANO
- +
MPX - - - - + ++ +++ ++ -+ -
P acida +T +T -
Cloroacetato
esterasa
- - - - -+ ++ +++ -+ - -
ANAE
( naftol
acetato
estarasa)
+T +T - - - - - + ++ -

41. FOTOS CITOQUIMICA
ANAE
PAcida
PAS
MPX

42. GRACIAS