Clase 4 de Fisiología de la Sangre. Facultad de Medicina, UBA, UAI 1. Este material no me pertenece y sólo lo difundo con fines informativos.

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SEMINARIO Nº 4
HEMOSTASIA
Dr. Guillermo Moscatelli
“Conjunto de interacciones entre los componentes de la
sangre y los de la pared vascular, responsables de impedir
la fuga de la sangre del compartimiento cerrado
intravascular.”
El proceso hemostático a menudo es esquematizado en cinco
fenómenos consecutivos que muchas veces se superponen:
vasoconstricción localizada, adhesión de las plaquetas al subendotelio,
formación del tapón plaquetario, reforzamiento de éste a través del
depósito de la fibrina y finalmente degradación del material depositado
a través de la fibrinólisis.
FUNCIONES:
1) Mantener la sangre circulante incoagulable.
2) Evitar extravasaciones espontáneas (hemorragias) y
cohibirlas si se producen.
3) Limitar el área de activación de la coagulación.
4) Recanalizar el vaso trombosado.

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SISTEMA VASCULAR
La CE genera una superficie antitrombótica activa.
Cuando se rompen generan un estado protrombótico y
antifibrinolítico.
Factores antitrombóticos Factores protrombóticos
PGI2
ON
ADPasa
t-PA
TFPI
Proteína C y S
Trombomodulina
FT
Endotelina-1
PAF
von Willebrandt
Receptor de la IIa
PAI
Fibrinógeno
Factor V, XI
Sitios de unión para IX, X y XII

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Endotelio Lesionado
FT
FV
FvW
TPA
PAI1
PC
PS
TM ATIII
LUZ VASCULARLUZ VASCULAR
Subendotelio
Colágeno
FvW
FvW
IL1
+
Dermatán
sulfato Heparán sulfato
(-)
SISTEMA PLAQUETARIO
Se refiere a las plaquetas.
VN: 150.000-400.000/mm3
Circulan como disco biconvexo.
Tienen carga negativa.
Vida ½ : 7-10 días.
Además de participar en la Hemostasia primaria, ellas
intervienen en reacciones de coagulación, inflamación
y reparación de tejidos.

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Stem cell CFU-GEMM CFU-Meg
PromegacarioblastoPromegacarioblasto
-Capta serotonina
-Expresa peroxidasa plaquetaria
MegacarioblastoMegacarioblasto
-Síntesis de ADN
-Ploidización
-Aumento de tamaño
MegacariocitoMegacariocito basófilobasófilo
-Síntesis de proteínas
Megacariocito granularMegacariocito granular
-Almacenamiento en
gránulos
MegacariocitoMegacariocito
plaquetarioplaquetario
-Proplaquetas
-Fragmentación
PLAQUETASPLAQUETAS
TROMBOCITOPOYESISTROMBOCITOPOYESISIL.1, IL-3, G-CSF
IL-6, GM-CSF
TPO, IL-11
IL.1, IL-3
IL-6, GM-CSF
TPO, IL-11
IL.1, IL-3, G-CSF
IL-6, GM-CSF
TPO, IL-11
IL.1, IL-3
IL-6, GM-CSF
TPO, IL-11
IL.1, IL-3, G-CSF
IL-6, GM-CSF
TPO, IL-11
GpIb
TROMBOPOYETINATROMBOPOYETINA
Proteína glicosilada constituida por 332 aminoácidos los
153 desde el N-terminal son los responsables de la
actividad trombopoyética, los 179 restantes cercanos al C-
terminal son útiles para su vida media.
ORIGEN:ORIGEN: Hígado, médula ósea, riñón, testículos y bazo.
REGULACION:REGULACION: por unión a sus receptores en plaquetas y
megacariocitos que la sacan de la circulación. La masa plaquetaria
determina la síntesis de TPO.
-La TPO no sería la única citoquina responsable de la producción de
megacariocitos ni fundamental.

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FUNCIONES:FUNCIONES:
-Proliferación y ploidización de los megacariocitos.
-Inicia la maduración y la sostiene.
-Aumenta la síntesis de GpIIbIIIa.
-Aumenta la síntesis de gránulos y sistema demarcatorio de
membranas.
-Estimula la proliferación de BFU y CFU-Meg.
-Junto con EPO y G-CSF estimula la proliferación de
progenitores eritroides y mieloides, respectivamente.
-Estimula con SCF la producción de neutrófilos de células
CD34+
-Actúa junto a SCF e IL-3 induciendo la proliferación de las
stem cells hemopoyéticas.

6. 27/04/2012
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GLUCOPROTEINAS PLAQUETARIASGLUCOPROTEINAS PLAQUETARIAS
“Son elementos importantes en la membrana plaquetaria que le
permite a la plaqueta la interacción con los agonistas que modulan
sus funciones efectoras. Algunas de ellas pertenecen al grupo de
moléculas de adhesión celular llamadas integrinas”
GpIb-V-IX: es una proteína estructural sintetizada en el megacariocito.
Interviene en la unión y localización de plaquetas en sitios de injuria, a
través la interacción con el factor de von Willebrand.
Deficiencia: síndrome de Bernard-Soulier
Aumento de afinidad: seudo von Willebrand
Aumento de GpIb en membrana: polimorfismo Kozak
GpIIbIIIa: es una b3integrina muy abundante en la membrana plaquetaria.
Presenta los aloantígenos más frecuentes en las reacciones por drogas ó
autoanticuerpos. Une fibrinógeno plasmático y plaquetario para la
agregación plaquetaria. Su déficit produce la tromboastenia de Glanzmann.

7. 27/04/2012
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Subendotelio
Colágeno
FvW
GPIb-V-IX
GP αIIβI
GP VI
Fibronectina
GPIIbIIIa
GP αVβ1
ADHESIÓN PLAQUETARIA
EndotelioPlaquetas
Es el primer paso de una cadena de eventos que llevan a la formación del tapón
hemostático plaquetario. Las sustancias que median la adhesión son fundamentalmente
las fibras de colágeno, el factor de vW, además de la interacción entre ambas, y la
fibronectina. La plaqueta aporta en esta interacción los receptores de membrana
necesarios, como son el complejo glicoproteico Ib-V-IX, la integrina alfa-5-beta-1, alfa-
2-beta-1 y la GpVI y la GpIIbIIIa
FACTOR DE VONFACTOR DE VON WILLEBRANDWILLEBRAND
El factor de Von Willebrand (FvW) media la adhesión de plaquetas
al sitio de injuria vascular con la GpIb y la matriz subendotelial y es
la proteína transportadora del factor VIII, su menor actividad
puede causar sangrado por alterar la adhesión plaquetaria y la
coagulación.
IIa
FvW
Plaquetas
FvW
Fibra de colágenoFibra de colágeno
Adhesión plaquetaria
vía GpIb-FvW
+
Fvw
C1
A1
A2
A3
B
C2
VIII
ADAMTS 13

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ACTIVACIÓN
FLC
IP3 DAG
↑CA++ PKC
AMPcPGI2
NO GMPc -
-
+
+
+
Citoesqueleto
Expresión de
proteínas y
receptores
+
Trombina
Colágeno
Tromboxano A2
Adrenalina
PAF
5-HT
ADP
+
1º Cambia de forma
2º Emite seudópodos
3º Expresión de receptores
La activación se produce cuando estos agonistas se
unen a sus receptores específicos y aumentan el calcio
intraplaquetario.
Por el contrario, el aumento de AMPc lleva a la
inactivación plaquetaria porque disminuye los niveles
de calcio.
ATP AMPc 5’AMP
Adenilciclasa Fosfodiesterasa
Todo lo que estimula la adenilciclasa e inhibe la fosfodiesterasa es
AAP por aumentar los niveles de AMPc.

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Subendotelio
ColágenoFvWFibronectina
Endotelio
AGREGACIÓN
Receptores: IIbIIIa
Fibrinógeno
FvWAgonistas:
Fuertes:
Trombina
Colágeno
Tromboxano A2
PAF
Débiles: ADP
Adrenalina
AGREGACION PLAQUETARIA
Se denomina así a la unión de plaquetas entre sí para formar un
conglomerado denominado tapón plaquetario en respuesta a un
estímulo (agente agregante).
1) TROMBINA: ejerce su efecto clivando un receptor específico en la
membrana de las plaquetas generando la activación y agregación plaquetaria
de un modo TxA2 independiente.
2) ADP: ejerce su acción a través de 2 receptores: uno de ellos (P2Y1) a
través de Gq y FLC aumenta el Ca++ intracelular, el otro (P2Y 12) a través de
Gi inhibe a la adenil ciclasa disminuyendo los niveles de AMPc induciendo
agregación.
3) TxA2: generado en el sistema tubular denso durante la activación
plaquetaria. Induce la movilización de calcio y la degranulación.
4) PAF: liberado por la célula endotelial durante la inflamación. Induce
agregación por una vía diferente a los otros agonistas.
5) COLAGENO Y AAQ
6) ADRENALINA Y NORADRENALINA: actúan a través del receptor alfa-2

10. 27/04/2012
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SECRECION
Liberación del contenido de los gránulos alfa y densos.
La liberación de ADP constituye, junto con la de TXA2
los dos mecanismos de amplificación de la agregación
plaquetaria más importantes.
EXPOSICION DE FOSFOLIPIDOS
Exposición de fosfolípidos aniónicos de la cara
interna de la membrana a la externa.
Permite que los factores de la coagulación se fijen a
ellos a través de calcio.
PLAQUETAS Y COAGULACIÓN SANGUÍNEA
PLAQUETA
ACTIVADA
Exposición de factor tisular en el
subendotelio y en su membrana
Interacción con neutrófilos
Activación del X
por el F3P
Activación del XI y
del IX
Liberación de V y TF
(20% del la concentración
plasmática)
Liberación de QAPM,
TFPI y AT
Liberación de cadena αααα
del factor XIII
Inhibición de unión de
Xa a TF por crecimiento
del trombo (barrera mecánica)
Liberación de fibrinógeno

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PLAQUETAS E INFLAMACIONPLAQUETAS E INFLAMACION
PSGL-1
P-SELECTINA
FIBRINOGENO
CD18/11b GpIIbIIIa
GpIb
ACTIVACION LEUCOCITARIA Y PLAQUETARIA RECIPROCA
IMPORTANCIA EN LA FISIOPATOLOGIA DE TROMBOSIS ARTERIAL
PVH
Globales Específicas
¿Cómo estudio la
hemostasia?

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SISTEMA VASCULAR
Prueba del lazo:
1. Evalúa permeabilidad y fragilidad capilar.
2. Colocar esfingomanómetro a presión media entre
sistólica y diastólica durante 5 minutos.
3. Cara anterior del pliegue del codo: ver petequias.
4. VN: ≤ 5 petequias.
5. Alterada: déficit de vitamina C, vasculitis, vejez, etc.
SISTEMA PLAQUETARIO
Tiempo de sangría:
1. Evalúa función plaquetaria global.
2. Realizar incisión en lóbulo de oreja (Duke), antebrazo
(Ivy, Simplate®).
3. Parar el cronómetro cuando deje de sangrar.
4. VN: 2-6 minutos aprox (Simplate hasta 9.5 minutos).
5. Alterada: plaquetopenia, AAS, ↓ FvW.
Recuento plaquetario: 150.000-400.000/mm3

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Estudio de la agregación plaquetaria (método turbidimétrico):
• Registra la agregación plaquetaria al detectar la diferencia de la densidad
óptica (transmitancia) que existe entre el plasma rico en plaquetas (100%
de densidad óptica = 0% de transmitancia) y el plasma sin plaquetas (0% de
densidad óptica = 100% de transmitancia).
• A medida que las plaquetas se agregan entre sí, disminuye la densidad
óptica (pasa mejor la luz = aumenta la transmitancia).
• El registro se hace en el tiempo se entiende que el gráfico de mayor a
menor densidad óptica se transforme en una curva.
• Se agregan agonistas: epinefrina, ADP, ácido araquidónico, colágeno,
trombina y ristocetina.

14. 27/04/2012
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A mayor agregación plaquetaria, mayor
transmisión de la luz y viceversa
Curva típica de la agregación plaquetaria en PRP con epinefrina o ADP.
El número 1 agregación primaria, el número 2 meseta y número 3
agregación secundaria.
Agonistas fuertes (colágeno, trombina, AA, ristocetina):
CURVA MONOFÁSICA.

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16. 27/04/2012
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¿?
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