Universidad de Carabobo - Facultad de Ciencias de la Salud sede Carabobo - Bioanálisis. Parasitología. Módulo V, Tema 14: Plasmodios y sus vectores. Aspectos diagnósticos de la malaria.
1. FACULTAD DE CIENCIAS
DE LA SALUD
ESCUELA DE
BIOANÁLISIS
Universidad de Carabobo
Facultad de Ciencias de la Salud
Escuela de Bioanálisis
Asignatura Parasitología
2. MSc. Diana Graterol
Plasmodios y sus vectores.
Aspectos diagnósticos de la
malaria
Malaria o Paludismo.
Taxonomía, Morfología y Ciclo
Evolutivo.
Mecanismos Patogénicos, Patología
y Sintomatología.
Diagnóstico clínico y de laboratorio.
Epidemiología, Tratamiento y
Profilaxis.
Caracteres morfológicos de los
anofelinos.
3. 3
Malaria o Paludismo
Malaria proviene del
italiano medieval
mala aria (mal aire);
en español se le
llama también
Paludismo, del latín
palus, «pantano».
Agente etiológico: Plasmodium.
Es la más mortal de todas las enfermedades parasitarias tropicales,
caracterizada por fiebre, escalofríos, anemia y esplenomegalia
Hay 4 tipos de malaria en el humano:
P. falciparum (Fiebre terciana maligna)
P. vivax (Fiebre terciana benigna)
P. ovale (Fiebre terciana benigna)
P. malariae (Fiebre cuartana)
Hospedador
intermediario
Hospedador
definitivo Anopheles
4. Importancia Epidemiológica
4
La OMS ha estimado que cada año ocurren entre 300 y 500 millones de
nuevos casos clínicos y hasta 2,7 millones de muertes.
Problema de salud en 106 países.
Más de 2.400 millones de personas en zonas endémicas.
Los niños son los más afectados.
Actualmente la transmisión malárica en Venezuela se localiza en tres
focos que ocupan 23% del territorio nacional.
www.malaria.org/background.info.htlm
Enfermedad infecciosa caracterizada por episodios paroxísticos de fiebre,
escalofríos y sudoraciones; evoluciona con anemia y esplenomegalia
7. 7
Morfología Plasmodios
Esporozoíto
Presente en saliva insecto
vector
Forma infectante para el
vertebrado
Complejo apical
Roptrias
Micronemas
Membrana externa
Membrana
interna
Citostoma
Núcleo
Mitocondria
8. 8
Morfología Plasmodios
Trofozoíto
Consta de dos partes:
Citoplasma
Núcleo
Los parásitos jóvenes tienen
forma de anillo y los
maduros ameboides, con
granulaciones en la
superficie propias de la
especie de plasmodio que se
trate.
11. 11
Morfología Plasmodios
Esquizonte
Presenta dos o más masas de
cromatina según el grado de
maduración. Aspecto globoso
de la cromatina (esquizonte
joven) para luego dividirse y
rodearse de citoplasma
(esquizonte maduro).
Están constituidos por un
acúmulo de Merozoítos, a
veces en forma de roseta y
con el pigmento malárico de
color marrón.
14. 14
Morfología Plasmodios
Gametocitos
Ocupan casi todo el eritrocito o
pueden estar libres. Citoplasma
voluminoso. La cromatina se
presenta como masa única,
condensada o dispersa.
Macrogametocitos presenta una
cromatina condensada y el
citoplasma extendido por todo el
glóbulo rojo.
Microgametocitos presenta una
cromatina dispersa, citoplasma
similar al macrogametocito.
17. Ciclo Evolutivo Plasmodios
17
Afinidad por los
eritrocitos
P. vivax ataca
principalmente a
reticulocitos y
eritrocitos jóvenes
P. falciparum ataca a
todos los eritrocitos de
todas las edades
P. ovale ataca
eritrocitos maduros
P. malariae ataca
eritrocitos maduros
18. Ciclo Sexual Anofelino
18
Gametos Zigoto
Femenino Masculino
Matriz
peritrófica
Lámina
basal
Ooquineto
Ooquiste
Lámina
basal
Glándula salival
Hemolinfa
Liberación esporozoítos
desde el ooquiste
19. 19
Mecanismos Patogénicos
Liberación de merozoítos en el torrente sanguíneo.
Aumento de la destrucción de glóbulos rojos.
Grandes cantidades de hemoglobina libre liberada en
la circulación.
Obstrucción vasos sanguíneos.
“Daño provocado depende de la especie, virulencia de la
cepa infectante, resistencia natural y del estado
inmunitario del hospedador”
20. 20
Patología
Sangre:
Hígado y Bazo:
Aumento de tamaño
Acumulación pigmento malárico
Anemia: anoxia tisular, astenia y disnea
Reticulocitosis
Poiquilocitosis
Anisocitosis
Aumento bilirrubina: ictericia
Cerebro:
Obstrucción capilares sanguíneos
Congestión, edema
21. 21
Manifestaciones Clínicas
Etapa pirética
•Cefalea
•Dolor de huesos
•Vómito
•Escalofríos
•Temblor
•Piel seca y pálida
•Pulso acelerado
Duración: 15 a 60 minutos.
•Elevación de
temperatura (40-42°C)
Duración: 2 a 4 horas.
•Sudoración profusa
•Debilidad
•Anemia
•Hepatomegalia
•Esplenomegalia
Duración: 2 a 4 horas.
Etapa premonitoria Etapa de sudor
Acceso malárico
P. vivax: cada 48 horas
P. falciparum: 36 - 48 horas
P. malariae: cada 72 horas
P. ovale: cada 48 horas
22. 22
Manifestaciones Clínicas
Características de las infecciones producidas por las especies de Plasmodium
P. vivax P. falciparum P. malariae
Duración del ciclo preeritrocítico 6 a 8 días 5 a 7 días 12 a 16 días
Periodo prepatente 11 a 13 días 9 a 10 días 15 a 16 días
Periodo de incubación 12 a 17 días 9 a 14 días 18 a 40 días
Ciclo esquizogónico de los hematíes 48 horas 48 horas(irregular) 72 horas
Gravedad del ataque primario Benigno
Grave en los no
inmunes
Benigno
Duración de la crisis febril (en horas) 8 a 12 16 a 36 8 a 10
Recurrencias Medianas Nulas o escasas Abundantes
Lapsos entre recurrencias Largos Cortos Muy largos
Duración de la infección (en años) 2 a 3 1 a 2 3 a 50
27. Diagnóstico
27
Caracteres diferenciales de los parásitos maláricos en extendido
P. vivax P. falciparum P. malariae
Formas en sangre periférica
Trofozoíto
(joven, maduro),
esquizontes y
gametocitos
Trofozoíto joven,
gametocitos
Trofozoíto
(joven, maduro),
esquizontes y
gametocitos
Aspecto GR infectados
Aumentados
tamaño, pálidos.
Abundantes
granulaciones
Schüffner (finas,
regulares, claras)
Normal. Escasas
granulaciones
Maurer (gruesas,
irregulares,
oscuras)
Normal. Escasas
granulaciones
Ziemann (finas,
regulares,
oscuras)
28. Plasmodium vivax
28
Trofozoíto joven: Forma anillo,
citoplasma delgado, núcleo cromatina
densa, Poliparasitismo raro.
Trofozoíto maduro: muy raro en
sangre periférica. Pequeño y
compacto, citoplasma más abundante.
Núcleo con cromatina densa.
Abundantes granulaciones Schüffner.
Esquizonte: forma ameboide,
citoplasma irregular vacuolizado,
cromatina segmentada. Posee 12 a 24
merozoítos.
Macrogametocito: con citoplasma
abundante, redondeado u oval, núcleo
pequeño con cromatina densa. Ocupa
casi todo el volumen del glóbulo rojo.
Microgametocito: citoplasma pálido,
abundante. Núcleo cromatina difusa.
Ocupa casi todo el volumen del
eritrocito.
29. Plasmodium falciparum
29
Trofozoíto joven: Forma anillo,
citoplasma delgado, núcleo cromatina
densa, a veces dos núcleos.
Poliparasitismo frecuente. Escasas
granulaciones Maurer.
Trofozoíto maduro: muy raro en sangre
periférica. Pequeño y compacto,
citoplasma más abundante. Núcleo con
cromatina densa.
Esquizonte: muy raro sangre periférica,
generalmente redondo, citoplasma
contínuo, múltiples núcleos con
cromatina densa. Posee entre 6 y 32
merozoítos.
Macrogametocito: forma media luna,
citoplasma azul intenso, núcleo con
cromatina densa y rodeado por pigmento
malárico.
Microgametocito: forma media luna,
citoplasma pálido, núcleo cromatina
difusa, pigmento malárico diseminado.
30. Plasmodium malariae
30
Trofozoíto joven: Forma anillo,
citoplasma delgado, núcleo
cromatina densa. Poliparasitismo
raro.
Trofozoíto maduro: disposición
de faja ecuatorial. Se conocen
como formas en banda.
Esquizonte: multilobulado, con
aspecto típico de margarita.
Posee de 6 a 12 merozoítos.
Macrogametocito: citoplasma
abundante, redondeado u oval,
núcleo grande con cromatina
densa. Ocupa casi todo el
volumen del glóbulo rojo.
Microgametocito: citoplasma
pálido, abundante. Núcleo
cromatina difusa. Ocupa casi todo
el volumen del eritrocito.
31. Visualización de láminas
31
Glóbulo rojo
Núcleo
Citoplasma
Tienen forma de anillo con un grueso punto
cromático, el cual puede estar en la parte central o
periférica; el circulo citoplasmático del anillo es
grande y teñido de azul, posee una vacuola
definida, estos anillos ocupan alrededor de 1/3 a ¼
del glóbulo rojo.
Plasmodium vivax
Trofozoítos jóvenes
32. Visualización de láminas
32
Son parecidos a los trofozoítos jóvenes, con el
núcleo más grande, citoplasma más abundante y
presenta una o varias vacuolas más pequeñas, las
ramificaciones citoplasmáticas son abundantes y
netas e indican los movimientos ameboides
característicos del crecimiento; se perciben
gránulos de pigmento marrón-amarillento,
pequeños, angulares o en forma de bastoncitos que
crecen con la edad del parásito, el cual en esta etapa
ocupa ¼ a ¾ del glóbulo rojo.
Citoplasma
Núcleo
Glóbulo rojo
Plasmodium vivax
Trofozoíto mediano
33. Visualización de láminas
33
El núcleo está formado por abundante masa de
cromatina, situado en la periferia del parásito,
citoplasma compacto de contorno irregular o
definido, sin ramificaciones citoplasmáticas o
pseudópodos, pigmentos color marrón-oro. Este
estadio parece más pequeño que las formas
ameboides de los trofozoítos medianos, por lo
compacto, se tiñe más intensamente, ocupa casi en
su totalidad el glóbulo rojo hipertrofiado en 1 ó 2
veces el tamaño normal.
Plasmodium vivax
Trofozoítos adultos (maduros)
34. Visualización de láminas
34
Presenta núcleo dividido, primero en dos y luego en
varias masas cromáticas, de forma irregular, que
luego se define; citoplasma conserva el aspecto de
los trofozoítos adultos y el pigmento muestra
tendencia a colectarse en partes del citoplasma.
Plasmodium vivax
Esquizonte inmaduro (pre-segmentado)
Masas
cromáticas
Pigmento malárico
Citoplasma
35. Visualización de láminas
35
Posee de 12 a 14 merozoítos, compuestos de un
punto de cromatina y una porción de citoplasma, el
pigmento se concentra en una o dos masas flojas,
pero definidas, hecho que denota que la
segmentación está ya completa. El parásito llena
casi completamente el glóbulo hipertrofiado.
Plasmodium vivax
Esquizonte maduro (segmentado)
Pigmento malárico
Merozoítos
36. Visualización de láminas
36
El citoplasma es azul oscuro, sin vacuolas, con una
coloración homogénea, en lo cual se diferencia de los
trofozoítos adultos que tienen porciones pálidas y más
intensamente teñidas. Núcleo pequeño, compacto, rojo
oscuro, rodeado frecuentemente de un halo claro y es
generalmente excéntrico. Pigmento marrón, más oscuro que
en microgametocito, distribuido por todo el citoplasma, más
abundante y de gránulos mayores que en los trofozoítos
adultos. Cuando el macrogametocito está maduro, llena casi
todo el glóbulo hipertrofiado, cuyo contorno es circular u
oval y regular, siendo su tamaño 1 ½ a 2 veces el tamaño de
un glóbulo rojo normal.
Núcleo
Citoplasma
Plasmodium vivax
Macrogametocito
37. Visualización de láminas
37
Posee núcleo grande, de cromatina difusa, reticular y
granulosa de color rojo pálido o rosado, situado en el centro
del parásito y rodeado frecuentemente de un área vesicular
clara; algunas veces la forma del núcleo es estelar, en huso o
en banda, a través del citoplasma, el cual se presenta azul
pálido, gris rosado o casi incoloro. Pigmento marrón-
amarillento, menos oscuro que el macrogametocito,
distribuido por todo el citoplasma, menos abundante que el
anterior, pero más que en el trofozoíto. Cuando está maduro
es del tamaño de un glóbulo rojo normal de contorno circular.
Plasmodium vivax
Microgametocito
Citoplasma
Núcleo
40. Visualización de láminas
40
Tienen forma de anillo, con uno o dos puntos cromáticos pequeños
que se proyectan hacia afuera y que pueden estar en un mismo lado o
en lados opuestos. Citoplasma delgado, filiforme. Las situaciones
marginales del parásito, las formas en cometa o las formas en puente
son muy frecuentes. En general son mucho más pequeños que las
otras especies, algunas veces el núcleo es central en el anillo o se
observa como una línea azul atravesando el glóbulo rojo con un punto
cromático central. Las infecciones múltiples se producen
frecuentemente. Llenan apenas 1/6 del glóbulo rojo.
Plasmodium falciparum
Trofozoítos jóvenes
Glóbulo rojo
Núcleo
Citoplasma
41. Visualización de láminas
41
Mantienen la forma del trofozoíto joven, el núcleo y el
citoplasma aumentan hasta alcanzar el anillo del
Plasmodium vivax con los cuales pueden confundirse.
Escasos gránulos de pigmento de tinte amarillento, llenan
¼ a 1/3 del eritrocito. Por lo general este estadio y el
trofozoíto joven de Plasmodium falciparum se encuentra
en sangre periférica, al igual que los gametocitos. Las
otras formas no se observan en sangre periférica, porque
su multiplicación se hace en los capilares internos de
vísceras y encéfalo.
Plasmodium falciparum
Trofozoíto mediano
42. Visualización de láminas
42
Tiene forma de banana, salchicha o de media luna,
núcleo formado por una sola masa cromática
situada en el centro del parásito o ligeramente hacia
uno de los polos, citoplasma más azul que el
microgametocito, pigmento concentrado alrededor
del núcleo, más oscuro que el microgametocito,
pero en las formas jóvenes se encuentra distribuido
por todo el citoplasma. Los polos del
macrogametocito son finos y delgados, 1 a 1 ½ vez
el diámetro del eritrocito.
Plasmodium falciparum
Macrogametocito
43. Visualización de láminas
43
Posee núcleo difuso, rosado pálido, citoplasma
menos coloreado que el anterior, del color azul
grisáceo o rosado, pigmento en forma de gránulos y
bastoncitos, numerosos, agrupados en dos cuartos
centrales del parásito. Las forma del gametocito es
mas ancha, corto, de extremos redondeados, que le
da el aspecto de salchicha.
Plasmodium falciparum
Microgametocito
52. Diagnóstico
52
La técnica del QBC es un poco
más sensible que GG pero como no
es posible identificar especie y
debido al alto costo del
microscopio de fluorescencia, no
se considera que pueda sustituir la
técnica de referencia
Quantitative Buffy Coat (QBC):
Detección antígenos:
Parasitemias hasta de 0,0001%. Pruebas rápidas de captura de
antígenos circulantes de P. falciparum
Pruebas inmunocromatográficas:
PfHRP2 (Proteína-2 rica His P. falciparum)
LDH (Lactato deshidrogenasa)
53. Diagnóstico
53
Origen muestra
Líneas de detección
Almohadilla
absorbente
Anticuerpos
Anti Plasmodium sp
(LDH)
Antígenos
LDH
Anticuerpos
Anti P. falciparum
Pruebas inmunocromatográficas:
54. Diagnóstico
54
Pruebas inmunocromatográficas:
Mezclar la sangre con tampón lisis para provocar
ruptura de los glóbulos rojos.
La sangre lisada difunde a través del soporte
Los antígenos se enlazan a los anticuerpos presentes
en las tiras.
Añadir tampón lavado y solución revelado
Se forman bandas visibles
59. Diagnóstico
59
PCR múltiple anidada: (Identificación de Género y Especies)
ssrDNA
ADN ribosómico Plasmodium
rPLU5 rPLU6
rOVA1
rFAL1
rMAL1
rVIV1 rVIV2 rMAL2 rFAL2 rOVA2
P. ovale
P. falciparum
P. malariae
P. vivax
Amplificación de región del genoma de las especies de Plasmodium:
P. vivax 120 pb, P. malariae 144 pb, P. falciparum 205 pb y P. ovale 800 pb
62. 62
Epidemiología Plasmodios
ÁREA CON MAYOR INCIDENCIA MALÁRICA
ÁREA CON MENOR INCIDENCIA MALÁRICA
Foco
Oriental
Foco
Occidental
Foco
Meridional
Anopheles
emilianus
Anopheles
núñez-tovari
Anopheles
darlingi
Áreas endémicas de Malaria en Venezuela
A. núñez-tovari: Endófago,
exófilo, hábitos nocturnos.
A. emilianus: Endófago,
exófilo, hábitos crepusculares.
A. darlingi: Endófago, endófilo,
hábitos crepusculares.
Monagas, Sucre,
Anzoátegui, Delta
Amacuro
Barinas, Mérida,
Portuguesa,
Apure, Yaracuy,
Zulia, Trujillo,
Táchira
Bolívar,
Amazonas
63. Epidemiología Plasmodios
63
Culicinos
Orden Diptera (1 par de alas membranosas)
Suborden Nematocera (Antenas largas)
Familia Culicidae
Género Anopheles
Género Culex
Género Aedes
(Metamorfosis completa)
Actividad crepuscular o nocturna
1. Aspecto jorobado
2. Tercer par de patas
en el aire en
posición de reposo.
65. Tratamiento
65
Paludismo no complicado:
Prevención de recaídas:
Paludismo complicado:
Cloroquina: 10 mg/Kg/dosis VO y luego 5 mg/Kg/c/6horas, 2 y 3 día (25 mg/Kg/en
3 días)
Esquizonticida hemático, gametocida. Útil para las 4 especies plasmodios.
Primaquina: 15 mg VO/día durante 14 días
Esquizonticida hepático, gametocida. Útil para P. falciparum y P. vivax.
Sulfato de Quinina: 20 mg/Kg/dosis de carga, seguida de 10
mg/Kg/dosis cada 8 horas por 3 días y luego, VO hasta completar
7 días de tto + Doxiciclina 100 mg VO cada 12 h o Clindamicina
900 mg c/8h por 5 días
Esquizonticida hemático y hepático. Útil para las 4 especies plasmodios.
67. Vacunas antimaláricas
67
Proteína circumsporozoítica (esporozoíto):
Impide invasión hepatocito
Vacuna RTS Proteína circumsporozoítica + HBsAg
RESA (Ring infected erithrocyte surface antigen):
Impide invasión eritrocito y fagocitosis glóbulos rojos
infectados
Proteínas de esquizontes (83, 55, 35 kDa):
Impide el desarrollo ciclo eritrocítico
Proteínas de gametocitos: impide exflagelación microgameto y
fecundación macrogameto.
SPf55 SPf83 SPf35
NANP NANP
68. Bibliografía
68
Almeida Andrade HT, Serpa Filho A. (2021). Principios básicos de Entomología médica. Brasil: Kindle edition.
Becerril M. (2008). Parasitología Médica. 2da Edición. México: Editorial McGraw-Hill Interamericana.
Botero D, Restrepo M. (2012). Parasitosis humanas. 5ta Edición. Colombia: Corporación para Investigaciones
Biológicas.
Campuzano-Zuluaga G, Blair-Trujillo S. (2010). Malaria: consideraciones sobre su diagnóstico. Medicina &
Laboratorio. 16: 311-354.
Gállego Berenguer J. (2007). Manual de Parasitología: morfología y biología de los parásitos de interés
sanitario. España: Edicions de la Universitat de Barcelona.
Hómez J, Soto R, De Soto S, Méndez H, Mármol P. (2004). Parasitología, Libro de Texto. 10ma Edición.
Venezuela: Editorial de la Universidad del Zulia (Ediluz).
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Rey L. (2001). Parasitología. 3ra Edición. Brasil: Editorial Guanabara-Koogan.
Rodríguez Pérez EG. (2013). Parasitología médica. 1ra Edición. México: Editorial El Manual Moderno.
Todd A, Sanford L, Davidsohn P. (1988). Diagnóstico y tratamiento clínicos por el laboratorio. 8va Edición.
Tomo I.