Explicación minuciosa del papel de oncoproteinas virales, y fisiología para génesis de cáncer cervicouterino

2. Nombre: Human Papillomavirus
Alias: HPV, papiloma
Descripción:
 Talla: 0.052- 0.055 μm
 Peso: 0.052- 0.055 μm
 Reservorio: Epitelio Escamoso
 Familia: Papillomaviridae
Cáncer cérvicouterino y el virus del papiloma humano: La historia que no termina. INCAN 2006

3. Rasgos físicos:
 Una cápside de 72 capsómeros
 60 hexámeros - 12 pentámeros
 Dos proteínas estructurales:
 L1 continente de L2.
Permanece infeccioso en un ambiente
húmedo por meses
Cáncer cérvicouterino y el virus del papiloma humano: La historia que no termina. INCAN 2006

5. 1
2
3
4
DIFERENCIACION EPITELIAL
1 Capa cornificada Unión transversal de queratinas
Escámasmetabólicamente
inhertes
Ensamble de viriónes en el núcleo
Liberación de escamas infectadas
2 Capa granulosa Formación de gránulo de
queratohialina
Metabolismo reducido
Destrucción nuclear
Expresión de proteínas de cápside
Amplificación del DNA PV
3 Capa espinosa Inicio de diferenciación
Síntesis de queratina de alto
peso molecular
Mayor tamaño celular
Conservación del DNA de PV
Producción de proteínas
tempranas
4 Capa basal División y proliferación celulares
Replicación activa de RNA
Replicación baja de copias de DNA
de PV
Expresión temprana de gen

6.  Secuencia de sucesos que conducen
primeramente al crecimiento y la división
celular
 Comprende:
 Interfase
 Etapas G1 – S y G2
 División celular
 Etapa M
 Mitosis o meiosis

7. Interfase
Período entre
divisiones
celulares
• [95% del
ciclo]
Entre dos mitosis
Tres subetapas: • G1, S y G2.

8. G1: Primera fase del ciclo
Crecimien
to celular
Síntesis
proteínas
y de ARN
Entre fin
de mitosis
e inicio de
síntesis
de ADN
Duración:
Entre 6 y
12 horas
La célula
duplica su
tamaño

9. Segunda
fase de ciclo
Replicación
o síntesis de
ADN
Cada
cromosoma
se duplica
Forma dos
cromátidas
idénticas
Duración de
unos 6-8
horas

10. Etapa G2
Entre fase S
e inicio de
mitosis
Duración: 3 -
4 horas
Termina al
inicio de la
mitosis

11. La regulación
Cinasas (kdc) y Ciclinas (ciclinas A ó B)

12. DNA circular de doble cadena
 8 mil pares de bases
 Tres regiones:
 Región larga de control [LCR]
 Región de proteínas tempranas: [E1 - E8]
 Región de proteínas tardías: [L1 - L2]
HPV HAND BOOK. 1: Human Papillomavirus and cervical cáncer. 2004

13.  Tempranas:
 E1
 E2
 E3
 E4
 E5
 E6
 E7
 Tardías:
 L1
 L2
Colposcopía. Principios y Practica. Apgar. 2012

14.  Gen: 450 a 500 pares
 Codifica: Proteína de 150 aa
 Peso molecular: 16 a 18 kDa
 Funciones:
 Potencia a E7
 Bajo potencial oncogénico sola
 Transformante e inmortalizante
 Degrada p53
 Impide apoptosis
Colposcopía. Principios y Practica. Apgar. 2012

15. Inhibe Función
P53
Interacción P300
Interacción CBP
E6AP reemplaza
Mdm2
Retiene P53
En Citoplasma
Altera transcripción
Disminuye apoptosis
Protege material genético
Activando BAK
Intracitoplasmático
Activa Telomerasa

16. Cáncer cérvicouterino y el virus del papiloma humano: La historia que no termina. INCAN 2006

17.  Gen: 300 a 320 pares
 Codifica: Proteína de 100 aa
 Peso molecular: 10 kDa
 Funciones:
 Unión a proteínas supresoras tumorales PRB
 La unión de E7 a E2F
 Factores de transcripción
 Promueve el progreso de la fase S (Replicación)
Colposcopía. Principios y Practica. Apgar. 2012

18. PRB Familia de supresores
tumorales
E2F Familia de proteínas de
transcripción
E7
Se suprime PRB
Inicia transcripción sin
necesidad de factores de
crecimiento
Se activa la Fase S

19.  Proteína de membrana hidrofóbica en RER
 Gen: 230 a 250 pares
 Codifica: Proteína de 90 aa
 Peso molecular: 14 kDa
 Funciones:
 Regular actividad de:
 Inhibe actividad de ATPasa
 Receptores de factores de crecimiento
 Función de MHCII
Colposcopía. Principios y Practica. Apgar. 2012

20. PH Ácido
Endosómas
E5
Aumentan receptores EGF
ATPasa Corta suministro de H+
Feedback Positivo
Aumenta
PH
Interfiere con
subunidad li MCHII
EL MHCII no presenta
antígeno
Inmunidad

21.  Gen: 2000 pares
 Peso molecular: 67.5 a 76.2 kDa
 Codifica: Proteína nuclear de 593 a 681 aa
 Se divide en tres regiones:
 Dominio amino terminal: regula E1 en el C-terminal,
 Dominio espaciador: Función a las ATPasas y
helicasas
 Dominio replicador: Origen de replicación
Colposcopía. Principios y Practica. Apgar. 2012

22. Estabilizan la cadena
sencilla del duplex
abierto
RFC (factor de replicación C)
HPV HAND BOOK. 1: Human Papillomavirus and cervical cáncer. 2004
RPA
Topoisomerasas I y II
Cofactor PCNA

23.  Gen: 1100 pares
 Codifica: Proteína nuclear de 100 aa
 Peso molecular: 45 kDa
 Se divide en tres dominios:
 Dominio extremo amino terminal:
 Activación y de regular la transcripción
 Dominio de bisagra o central:
 Replicación viral
 Dominio extremo carboxilo terminal:
 Dimerización y de unión a E2
 Función: Antiproliferación
Cáncer cérvicouterino y el virus del papiloma humano: La historia que no termina. INCAN 2006

24.  Gen: 260 pares
 Peso molecular: 10 a 44 kDa
 Función:
 Replicación vegetativa del DNA viral
 Causa colapso de citoqueratinas
 Liberación de los viriones
 Causa arresto en la fase G2
 Inhibir la división celular junto con E1 y E2
 Durante la infección regula la proteína nuclear E2
Cáncer cérvicouterino y el virus del papiloma humano: La historia que no termina. INCAN 2006

25.  Resultado de fusión del producto del marco de lectura
E8 con parte de la proteína E2.
 Gen: 311 pares
 Peso molecular: 20 kDa
 Función:
 Reprime replicación Viral
 Reprime transcripción
Cáncer cérvicouterino y el virus del papiloma humano: La historia que no termina. INCAN 2006

26.  Gen: 1700 pares
 Peso molecular: 3 a 53 kDa
 Características:
 L2 minoritaria de la cápside viral
 Se produce en células que expresan E4
 La proteína mayoritaria L1
 Peso molécular: 57 kDa
 Conforma cerca del 80 % de la cápside
HPV HAND BOOK. 1: Human Papillomavirus and cervical cáncer. 2004

27. 360 copias de L1
12 copias de L2
Partícula Icosaedral
72 Capsómeros
[Dominios Oncogénicos]
Proteína (PML)
Atrae a L1 hacia estos dominios
Sitio de la replicación
del DNA Viral
Las proteínas de la Cápside se acumulan
Empaquetamiento
Capsómera
HPV HAND BOOK. 1: Human Papillomavirus and cervical cáncer. 2004

28.  Segmento genómico sin marco de lectura
 Elementos de respuesta en cis
 De un 7 a 11% del genoma
 Gen: 850 pares
 La LCR se divide en 3 partes:
 El promotor temprano
 El amplificador o enhancer
 Región restante, más alejada del 5´
HPV HAND BOOK. 1: Human Papillomavirus and cervical cáncer. 2004

29. Heparán – sulfato
VPH Integrina α-6
El promotor temprano
Proteínas del aparato basal de transcripción
LCR

30. FASE
PROLIFERATIVA
AMPLIFICACIÓN
DEL GENOMA
SÍNTESIS DE LOS
VIRIONES
INFECCIÓN
DESENSAMBLE
DEL VIRIÓN
MANTENIMIENTO
DEL GENOMA

31. VPH
Células
Basales
Abertura en
el epitelio
estratificado
Complejo
Integrina
α6 – β4
Desensamble
Endocitosis
Rompimient
o de enlaces
disulfuro en
cápside
Transporte del DNA a núcleo
Depende de proteglicanos de sulfato de heparina
Vesículas cubiertas de Clatrina

32. Expresan E1 - E2
• Mantenimiento de
cifras de replicación
bajas
• Segregación correcta
del genomas
Si E1 no se expresa
• Se pierde el estado
episomal
• El genoma viral se
integra al de la célula
CÁNCER
Fase
proliferativa
Incremento
del número de
células
basales
Expresión de
las proteínas
E6 y E7
Progreso de la
fase de ciclo
celular G1 a S

33. Expresión de E6 y E7
ARNm bicistrónico
Control del promotor
temprano LCR
Retardan la
diferenciación
celular
Proliferación

34. Para la replicación viral se necesita que
E2 se una a la LCR y promueva unión a E1
Producir
viriones
VPH
Amplifica su
genoma
Mediante L1 – L2
Transcribe E1,
E2, E4, E5, L1, L2
Empaquetamien
to en estrato
espinoso
Actividad
transcripcional
E7
Células
infectadas
Se descaman de
la capa superior
El virus
queda
libre

35. HPV HAND BOOK. 1: Human Papillomavirus and cervical cáncer. 2004

36. Imaginemos que la célula basal es una manzana…
Y que a esta manzana se la come un gusano (El VPH)
Las integrinas son
proteínas que están en la
Los dientes del gusano son los cascara de la manzana
proteoglicanos de sulfato de
heparina
El gusano desea
reproducirse en la
manzana
El gusano muerde la
cascara de la manzana
El gusano queda dentro
de la manzana
En este momento, la cascara de la
manzana genera clatrina y envuelve al
gusano

37. Ahora el gusano debe reproducirse dentro de la manzana
¿Qué pasos debe seguir?
PASO 1
Fragmentarse
Activar LCR
Expresar E6
Mantener viva a la manzana (célula)
Activar cistina (producto de ARNm cistrónico)
Se rompen los enlaces disulfuro por oxidación
Romper enlaces disulfuro en L1 – L2
Sustitución, degradación o bloqueo de
función de P53
El gusano (VPH) queda fragmentado

38. Paso 2 Reproducirse
Expresar E7
Crecer
Unión de E7 a E2F
Transcripción
Unión de E7 a PRB
Inhibir supresor tumoral
Se activa fase S
Inicia la síntesis de nuevos gusanos
Proteger el crecimiento (cadenas de bases de VPH)

39. Paso 3
Protegerse Activar E5 Inmunidad
Inhibir ATPasa Inhibir MHC II
Paso 4
Madurar Activar E1 Replicación
Activar E2 Regulación de la replicación
Paso 5
Empaquetar nuevos gusanos Activar L1-L2
Empaquetar nuevos gusanos
(cadenas de pares)