1. Es importante que las muestras se tomen y envíen correctamente para garantizar resultados precisos en el laboratorio. 2. La sangre debe mezclarse con EDTA y refrigerarse dentro de las 24 horas del análisis. 3. Los tejidos deben fijarse en formalina para su evaluación histopatológica.

2. Oncología veterinaria

4.  La confiabilidad en la precisión y emisión de resultados,
depende en gran medida de que el material que reciban en el
laboratorio para ser procesado, se encuentre en las mejores
condiciones.
 Por este motivo, es muy importante que los médicos que
realizan la toma de las muestras conozcan los aspectos más
importantes de una buena toma y envío de las mismas.

5.  Colectar de 1 a 3 mL de sangre periférica en tubos al vacío que
contengan EDTA, homogeneizar suavemente para permitir la mezcla
de la sangre con el anticoagulante. Se debe dejar a temperatura
ambiente por 10 minutos y posteriormente refrigerar.
 Es fundamental respetar la relación anticoagulante sangre.
 Una vez tomada y refrigerada la muestra lo ideal es analizarla lo más
pronto posible, tiene un límite máximo de 24 horas para ser
evaluada, después de transcurrido ese tiempo los resultados no son
confiables.

6.  Tubos sin anticoagulante, más de 3 mL. Conservar en refrigeración
después de 15 a 20 min de haberse tomado, permitir que se forme
el coágulo y que se atempere para evitar choque térmico.
 Si la muestra tardara más de 6 a 12 horas para su análisis, se
recomienda separar el suero. Esperar la retracción del coágulo, lo
cual tarda de 30 a 45 min en perros.
 Centrifugar la muestra a 2500-3500 rpm durante 10 minutos y
separar el suero depositándolo en un tubo sin anticoagulante,
conservar en refrigeración o congelación. La cantidad de suero
requerida es de 1 mL.

7.  Primer orina del día para tener una referencia adecuada en cuanto a
densidad urinaria y otros elementos del urianálisis.
 Colocarse en envases estériles o en frascos perfectamente limpios;
debe estar protegida de la luz solar para evitar alteración en la
determinación de bilirrubinas.
 Debe ser conservada y transportada en refrigeración y el análisis se
debe realizar dentro de las primeras 4 horas para evitar
alteraciones. Si la muestra no se puede enviar al laboratorio antes de
24 h, es ideal dividir la muestra y colocarle una gota de formol al
10% por 10mL de orina en una de las muestras y la otra mantenerla
en congelación.

8.  Liquido abdominal, torácico, cefalorraquídeo, quístico y orina
 Los líquidos corporales deben ser colectados en recipiente
químicamente limpios y se deben mantener en refrigeración.
 Es necesario que sean remitidos al laboratorio en un tiempo no
mayor a 3 horas posteriores a la toma de muestra.
 Alteraciones celulares y físico-químicas por la mala conservación.
 Se sugiere que la muestra, de ser posible, sea mayor a 3 ml. En el
caso particular de líquido cefalorraquídeo se recomienda que la
muestra sea de por lo menos 1 ml.

9.  Liquido abdominal, torácico, cefalorraquídeo, quístico y orina
 Cuando se solicita únicamente la interpretación citológica, la
muestra debe mantenerse en refrigeración y remitirse al laboratorio
a la mayor brevedad; de no ser posible, puede ser conservada en
alcohol etílico al 96% en una relación de 3:1, o en formalina
amortiguada al 10 % en una relación 10:1 muestra :conservador.
 La muestra puede conservar sus características citológicas, siempre
y cuando sea procesada en un periodo no mayor de 24 horas. Se
debe considerar que con esta fijación no se podrán realizar estudios
químicos, físicos ni bacteriológicos.

10.  Se deben puncionar 2 ó 3 sitios diferentes de la lesión, lo que nos
permite obtener material más representativo para diagnóstico.
 Una vez realizado el aspirado, se deposita una gota del material en
el portaobjetos, se extiende de manera uniforme.

13.  Envío de tejidos u órganos sea en frascos o contenedores de plástico
o vidrio de boca ancha y cierre hermético, que contengan formalina
al 10% amortiguada a un pH de 7.4. fijador al menos 10 veces el
volumen de la muestra.
 En caso de tumores voluminosos u órganos completos, éstos
pueden ser remitidos sin fijar, pero deberán conservarse en
refrigeración por un periodo no mayor a 6 horas.

14.  Biopsias de piel, se recomienda que sean adheridas por su cara de la
dermis, sin comprimirlas, a un pedazo de cartón, papel o abate-
lenguas, de tal forma que se conserve la orientación del nacimiento
del pelo para su corte.
 En el caso de neoplasias, es recomendable que los bordes
quirúrgicos sean marcados, con el fin de evaluar la presencia de
células neoplásicas en los bordes del tejido extirpado. Esto se puede
realizar impregnando los bordes con tinta china, la cual debe secar
antes de sumergir el tejido en formalina, o bien, utilizando puntos
de sutura que señalen los diferentes bordes quirúrgicos.

18.  La muestra tisular se obtiene del bloque de parafina. Sin embargo,
cuando los tejidos no han sido procesados previamente para
examen histopatológico y no se encuentran incluidos en parafina, es
necesario fijarlos.
 Deben sumergirse inmediatamente después de la toma en
contenedores de vidrio o plástico con formalina al 10%, amortiguada
a un pH de 7.4, a una razón de 1 parte de tejido por 9 partes de
formalina. Se sugiere que la fijación no sobrepase las 48 horas.

22.  El clínico debe conocer las definiciones
básicas de los diagnósticos citológicos e
histopatológico.

23.  ¿Qué tumor es?
 ¿Qué tipo de tumor es?
 ¿Cuál sería el origen probable?
 ¿Posibilidades de metástasis?
 ¿Cuál es el comportamiento biológico?

25.  Proviene de la evaluación microscópica del cáncer, se
fundamenta en el grado de diferenciación, índice mitósico,
grado de pleomorfismo celular y nuclear, cantidad de
necrosis, invasión y respuesta linfoide.
◦ Grado I (bien diferenciado)
◦ Grado II (moderadamente diferenciado)
◦ Grado III (escasamente diferenciado)

26.  Valorar el éxito de la resección quirúrgica de
un tumor, u obtención de márgenes limpios.
 Se puedes utilizar tintas de color o suturas en
los márgenes del tejido.

28.  El tumor es tan poco diferenciado que no se
puede definir la célula de origen.
 El uso de colorantes especiales pueden ser de
utilidad para determinar el tejido de origen,
lo cual es básico para el tratamiento.
◦ Azul de toluidina
◦ Giemsa
◦ Alcian blue
◦ Tricrómica de Masson

29.  Ayuda al patólogo para determinar la célula o
tejido de origen de la población celular
neoplásica.
 En tumores muy indiferenciados es de mayor
utilidad.
 Ayuda a diferenciar tumores mesenquimales
de tumores de células redondas, por ejemplo.

30.  Permite localizar moléculas en los tejidos
mediante el empleo de anticuerpos
(inmunoglobulinas G).
 Tiene gran especificidad y alta afinidad para
reconocer estas moléculas y unirse a ellas.

31.  1. La muestra tisular se incuba con una dilución
especifica de un anticuerpo primario. Este fija a un
único antígeno tisular (una proteína o una parte de
la misma).
 2. Un anticuerpo secundario que se une a una
enzima marcador se incuba con el tejido y Ac
primario. El 2do Ac se unirá al extremo del Ac
primario.

32.  3. Se añade u sustrato a la mezcla final, que
cambia de color y precipita en la muestra
tisular cuando se activa por la enzima fijada
al Ac.
 4. Se tiñe con H y E, se coloca cubreobjetos y
se observa al microscopio.

34.  Tumores de origen mesenquimal
 Todos los sarcomas son positivos a
vimentina, considerando que la mayoría de
los carcinomas son negativos.

35.  Identifica la mayoría de las células epiteliales.
 La mayoría de los carcinomas son positivos.

36.  Confirmar origen tumoral de origen
muscular.
 También se pueden utilizar Ac contra actinas
y mioglobina y determinar si es de musculo
liso, esquelético o cardiaco.

37.  Marcador que tiene como origen células T.
 Determinar si inmunofenotipo de linfoma.

38.  Tiene como origen células B.
 Determinar inmunofenotipo de linfoma.

39.  Marcador de origen neuroendocrino.
 Tumores de vaina de nervio periférico,
melanomas, condrosarcomas.

40.  Marcador de origen mastocítico.

41.  Marcador específico de diferenciación de
melanocitos.
 Diagnosticar melanoma amelánico

42. Diagnóstico diferencial
histológico
Respuestas a anticuerpos
Melanoma amelánico
contra fibrosarcoma en
cavidad oral
Melanoma amelánicos:
S100 +, Melan A +
Fibrosarcoma: S100 -,
Melan A-
Osteosarcoma contra
fibrosarcoma
OSA: osteocalcin + Fibrosarcoma:
osteocalcin -
Sarcoma sinovial contra
sarcoma histiocitico
Sarcoma sinovial:
vimentina +,
citoqueratina +, CD18 -
Sarcoma histiocítico:
vimentina +,
citoqueratina -, CD18 +
Carcinoma nasal contra
linfoma
Carcinoma: citoqueratina
+, CD18 -, CD79a -,
CD3 -
Linfoma: Citoqueratina -,
CD18+, CD79a/CD3 +/-

43.  El Santo Grial de la terapia contra el cáncer es
identificar las células diana específicas del tumor
que posibilitarán enfocar y matar las células
tumorales, dejando las células normales no
neoplásicas sin dañar.

44.  Expresión de HER2 en el cáncer de mama.
 Tratamiento con Herceptin.
◦ Ejemplo:
◦ Si el resultado es 0 o 1+, el cáncer se considera HER2-
negativo. Estos tumores no responden al tratamiento con
medicamentos que tienen como blanco a la proteína HER2.
◦ Si el resultado es 3+, el cáncer se considera HER2-positivo.
Estos cánceres generalmente se tratan con medicamentos
que tienen como blanco a la proteína HER2.
◦ Si el resultado es 2+, el estado de HER2 del tumor no está
claro, y se le llama “ambiguo”.

45.  Herceptin
 Trastuzumab
 Anticuerpo monoclonal
 Es efectivo contra los
tumores con
sobreexpresión de la
proteína HER2/neu.

47.  La expresión del receptor cKIT tirosina
quinasa (CD117) en mastocitoma.
 Los mastocitos normales expresan el cKIT,
pero los mastocitos neoplásicos lo expresan
de forma variable.
 Mutación KIT – PCR
 30-50%

48.  Una de las características de un tumor es su
crecimiento descontrolado.
 Técnicas de medidas de proliferación celular
las cuales están basadas en los colorantes
histoquímicos o inmunohistoquímicos.

49.  Equipos de 6 personas
 Leer articulo
 Contestar preguntas
 Presentar el tema y preguntas

50.  Regiones argirofílicas organizadoras de
nucléolo, son bucles de ADN que contienen
genes ribosómicos y son las proteínas
asociadas a NOR que unen las moléculas de
plata del colorante.
 Un incremento en el número de proteínas
AgNORs indican una demanda incrementada
para la biogénesis de ribosomas. Relación
alta de proliferación celular.
 Linfoma y mastocitoma

52.  Ki67 es una proteína nuclear muy grande que
se expresa únicamente por células durante el
ciclo celular.
 Mastocitoma, carcinoma mamario

54.  Antígeno proliferante del núcleo celular.
 Es la subunidad delta del ADN polimerasa I.
 El número de núcleos que se tiñen + como un
porcentaje de todos los núcleos neoplásicas
contados.

57.  Visualizar en 10x-20x para identificar la
celularidad en las áreas donde hay mas
concentración, tinción adecuada, intactas
para evaluar.
 Determinar si las células son suficientes para
su evaluación.
 Identificar núcleo y citoplasma.

58.  Células traumatizadas no se evalúan.
 Repetir muestra

59.  Células que no están bien distribuidas son
difícil de evaluar.

60.  Determinar si el frotis se compone de células
inflamatorias.
 Neutrófilos: núcleo se tiñe morado obscuro y
puede tener uno o múltiples segmentos.

61.  Cambios degenerativos en los neutrófilos se
presenta cuando hay algún agente en el
ambiente que esté dañando las células.
 Buscar agente infeccioso como bacterias

62.  Macrófagos: se derivan
de los monocitos de
sangre periférica.
 Con el tiempo el
núcleo se vuelve
redondo y la célula
crece, el citoplasma se
puede expandir de
forma importante y
extremadamente
vacuolado.
 Fagocitosis

63.  Linfocitos: células redondas más pequeñas
que los neutrófilos, núcleo redondo,
citoplasma escaso, nucléolo no visible.

64.  Eosinófilos: son ligeramente más grandes que
los neutrófilos, el núcleo está segmentado,
usualmente en 2, en citoplasma se observan
gránulos de color naranja a rosado.

65.  Las interpretaciones se clasifican en 5 grupos
citodiagnósticos:
1. Tejido normal o hiperplásico
2. Masa quística
3. Inflamación o infiltrado celular
4. Respuesta a daño tisular
5. Neoplasia
*Muestra no diagnóstica

66.  Se compone de células maduras
 Muestran uniformidad celular, nuclear y
nucleolar.
 Relación incrementada núcleo citoplasma.
■ FIGURE 2-3. Canine prostatic
hyperplasia. Tissue aspirate.
Dog. The presenting clinical sign
in this case involves blood
dripping from the prepuce.
Cytologically, the nuclear size is
uniform; however, the nuclear-to-
cytoplasmic ratio is increased
as indicated by the close proximity
of nuclei to each other.

67.  Lesiones quísticas
contiene liquido o
material semisólido.
 El líquido con poca
cantidad de proteína
contiene un pequeño
numero de células.
 Seromas, mucocele,
quistes foliculares,
quistes mamarios o
prostáticos.
■ FIGURE 2-5. Seroma. Tissue aspirate. Dog.
Blood-tinged
fl uid is removed from a swelling on the neck.
Cytologically, low cellularity and low protein
content is visible in the background.
Large mononuclear cells with fine
cytoplasmic granularity predominate along
with low numbers of erythrocytes

68.  Se clasifican de acuerdo al tipo celular
involucrado.
 Al reconocer el tipo celular inflamatorio
sugiere la condición etiológica.

69.  85% neutrófilos
 Neutrófilos no degenerados: ambientes no
tóxicos, procesos inmunomediados, lesiones
neoplásicas, lesiones estériles causados por
irritantes como orina o bilis
■ FIGURE 2-7. Nondegenerate
neutrophils. Synovial fl uid.
Dog. Nonseptic infl ammation
with well-segmented neutrophils
appears secondary to adjacent
neoplasia of the bone.

70.  Neutrófilos
degenerados: indican
rápida muerte
celular.
 Predominan en
infecciones
bacterianas
especialmente en
gram -, condiciones
sépticas, las
bacterias se pueden
encontrar en forma
intracelular. ■ FIGURE 2-11. Bacterial sepsis. Tissue aspirate.
Dog. Markedly
karyolytic neutrophils are present with
intracellular and extracellular
coccoid bacteria. Karyolysis is so severe that the
cells are barely recognizable as neutrophils

71.  Predominan los macrófagos, sugiere
inflamación crónica.
Macrophagic infl ammation.
Tissue imprint.
Dog. Nodular lung disease
with numerous large
mononuclear
cells having abundant gray
cytoplasm and many cells
with
multiple cytoplasmic
vacuoles.

72.  Neutrófilos, macrófagos y puede incrementar
el numero linfocitos y células plasmáticas.
 Se asocia a reacciones por cuerpos extraños,
infecciones micóticas, micobacterianas, etc.
Pyogranulomatous or mixed cell
infl ammation.
Chylous effusion. Dog. Chronic
chylous effusion contains
a variety of cell types, including
nondegenerate neutrophils,
vacuolated macrophages, small
to medium lymphocytes, and two
mature plasma cells.

73.  Contiene más de 10% de eosinófilos más
otras células inflamatorias.
 Granuloma eosinofílico, hipersensibilidad,
alergia, migración parasitaria, mastocitoma.
Eosinophilic infl ammation.
Transtracheal wash.
Cat. Clinical presentation of a
chronic cough in this cat with
suspected
pulmonary allergy. Fluid
contains 95% eosinophils.
Pictured are several eosinophils
that stain pink to blue-green
and adhere to pink mucous
material.

74.  Se diagnostica cuando una población celular
es monomórfica y una inflamación
importante esta ausente.
 Después se divide en benigna o maligna de
acuerdo a las características citomorfológicas.
 Las células benignas muestran uniformidad
en el tamaño, relación núcleo citoplasma y
otras características nucleares.

75.  Las células malignas muestran 3 o más de los
siguientes criterios:
 Pleomorfismo de tamaño, forma, estado de
maduración.
Pleomorphism. Tissue aspirate.
Dog. Transitional
cell carcinoma cells display
variability in size and shape
supportive of malignancy.

76.  Incremento o variable relación núcleo
citoplasma
Anisocytosis,
anisokaryosis. Tissue
aspirate.
Dog. Lung
adenocarcinoma
specimen has several
features of
malignancy. These
features include high
and variable
nuclearto-
cytoplasmic ratio,
anisokaryosis,
binucleation, and
coarse
nuclear chromatin.

77.  Anisocariosis

78.  Aumentado, múltiples o variabilidad del
nucléolo.
Prominent nucleoli.
Tissue aspirate. Dog.
A binucleate cell with
very large single
nucleoli in each
nucleus is present. A
prominent nucleolus is
noted in the adjacent
cell, which also
displays coarse
chromatin
or chromatin
clumping.

79.  Multinucleaciones
Multinucleation.
Tissue imprint. Dog.
Pheochromocytoma
with two multinucleate
cells, one in the lower
left
side with three nuclei
and the other to the
right of center with an
irregularly shaped
nuclear region.
Multinucleation may
be found
also in epithelial,
mesenchymal, and
round cell neoplasms.

80.  Moldeamiento nuclear por el rápido
crecimiento celular.
Nuclear molding.
Tissue aspirate.
Dog. Nasal
chondrosarcoma
pictured with a
binucleate cell in
which one
nucleus is wrapped
around the other.
This feature is
present in
malignant tissues
and is related to the
lack of normal
inhibition
of cell growth.

81.  Firguras mitósicas anormales
Abnormal mitosis.
Tissue aspirate. Dog.
Chromosomal
fragments are
dispersed irregularly
with some isolated
from the rest, termed
lag chromatin.
Increased mitotic
activity may be
suggestive of
malignancy
but abnormal division
is diagnostic for
malignancy.

82.  Se pueden dividir en 3 categorías generales:
 Epitelial: carcinoma de células transicionales,
carcinoma mamario, etc.
 Mesenquimal: Hemangiosarcoma,
osteosarcoma
 Células redondas: linfoma, TVT, mastocitoma,

83.  Arreglo en grupos cohesivos de células,
pueden formar sábanas o formas de pelota.
 Las células exfolian en grupos
 Las células se adhieren una a una a través de
los desmosomas.
 Las células son grandes, de redondas a
poligonales con bordes citoplasmáticos
intactos.
 Núcleo redondo a oval

84.  Epithelial neoplasm. Lung lavage. Dog. Large
 clusters of cohesive cells having distinct cell borders from a case
 of lung adenocarcinoma.

85.  Epithelial neoplasm. Tissue aspirate. Dog.
 Same case as Figure 2-26. Cells are formed into tight balls or as
 sheets. Nuclei are round to oval and cells are large, round to
 polygonal with distinct cytoplasmic borders. Carcinoma de células transicionales

86.  Desmosomes. Tissue aspirate. Dog. Same
 case as Figure 2-24. A sheet of carcinoma cells with prominent
 desmosomes. These clear lines (arrow) between adjacent cells
 represent tight junctions that are characteristic of epithelial cells. Carcinoma
prostático.

87.  Células sueltas, abundante matriz
extracelular.
 Células en forma de huso o estrelladas.
 Neoplasias benignas y malignas se originan
de origen conectivo como fibroblastos,
osteoblastos, adipocitos, miocitos, células de
revestimiento vascular.
 Hemangiosarcoma, osteosarcoma,
hemangiopericitioma, melanoma amelanico.

88.  Las células exfolian de forma individual
 Células ovales o fusiformes con bordes del
citoplasma mal definidos.
 Muestras con poca celularidad
 Células pequeñas comparadas con las
epiteliales
 Núcleos redondos a elípticos

89. Mesenchymal neoplasm. Tissue imprint. Dog.
Neoplastic cells exfoliate individually and appear oval, spindle, or fusiform. This
bone lesion was confi rmed as hemangiosarcoma on histologic examination.
Characteristic of hemangiosarcoma cytology is a poorly cellular sample with
plump mesenchymal cells that contain numerous small punctate cytoplasmic
vacuoles

90. Mesenchymal neoplasm. Tissue aspirate. Dog.
Individualized pleomorphic cells with abundant extracellular eosinophilic
osteoid material is consistent with osteosarcoma. Binucleate and multinucleate
forms are common and seen in this sample.

91. Mesenchymal neoplasm. Tissue imprint. Dog.
Round to oval nuclei, anisokaryosis, high nuclear-to-cytoplasmic ratio,
prominent and variably shaped nucleoli, and individualized cells with poorly
distinct cytoplasmic borders suggest a malignant mesenchymal neoplasm. This
lesion is from a gum mass with a histologically confi rmed diagnosis of
amelanotic melanoma. One cell in the center contains small amounts of melanin
pigment granules.

92.  Celulas redondas usualemnte se asocian a
celulas hematopoyeticas.
 Ejemplos :
◦ Mastocitoma
◦ Linfoma
◦ Histiocitoma
◦ Plasmocitoma
◦ TVT

93.  Las células, exfolian de forma individual,
bordes citoplasmáticos definidos
 Forma redondeada
 Muestras con moderada carga celular
 Células pequeñas en comparacion a las
células eiteliales
 Núcleo redondo a hendido o mellado.

94. Round (discrete) cell neoplasm. Tissue aspirate. Dog. Discrete cells with a round
shape, distinct cytoplasmic
borders, and a very high nuclear-to-cytoplasmic ratio are characteristic of
lymphoid cells. This sample is taken from a lymph node effaced by lymphoma
cells.

95. Round (discrete) cell neoplasm. Tissue aspirate. Dog. This fl eshy vulvar mass is
composed of round cells. bearing a single prominent nucleolus and moderately
abundant cytoplasm with frequent punctate cytoplasmic vacuolation. The
cytologic diagnosis is transmissible venereal tumor.