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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA
DE MÉXICO
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
Nombre del alumno: Santos Melo María de Jesús
Practica #3: Preparación de material para microbiología,
limpieza y esterilización
Materia: Microbiología General I
Modalidad: Laboratorio
Carrera: Químico Farmacéutico Biológico
Grupo: 2602
Semestre 22-2
Asesor: María del Carmen Camacho Venegas
Apartado 1: Mapa conceptual
Apartado 2: Diagrama de flujo
Apartado 3: Cuestionario
1. ¿Qué es esterilización?
La esterilización es el procedimiento mediante el cual a un objeto o sustancia
se eliminarán microorganismos y posterior a ello se encuentran libres de
microorganismos vivos (bacterias, hongos o protozoarios), el cual es un
término NO relativo, es decir el objeto o sustancia se encuentra estéril sí o
no, no hay intermedios. H2SO4
2. ¿Qué métodos de esterilización existen?
Existen cuatro métodos de esterilización, los métodos por calor (ya sea seco
o húmedo), filtración, radiaciones y agentes químicos.
3. Mencione por lo menos tres métodos de esterilización por agentes físicos.
Agentes físicos:
Calor seco: se emplea en un horno o estufa para material de vidrio
Calor húmedo: Se emplea en una autoclave para objetos termo sensibles
(temperaturas menores de 135 °C)
Radiación: Se puede hacer con rayos gamma, beta y UV, por lo regular solo
se hace en superficies, por ejemplo, instrumental quirúrgico.
4. ¿En qué consiste la pasteurización y qué finalidad tiene?
La pasteurización consiste en proceso térmico, en el cual una sustancia es
llevada a altas temperaturas (hervir) por un tiempo determinado,
posteriormente se somete a un proceso de enfriamiento rápido, una vez
hecho se sella herméticamente. Tiene la finalidad de esterilizar la sustancia
para evitar la proliferación de microorganismos en él, así como su
conservación, dado que las altas temperaturas desnaturalizan proteínas de
los microorganismos y con ello lo elimina.
5. ¿Qué tipo de esterilización se efectúa en la autoclave?
Esterilización por física, por medio de una alta presión y altas temperaturas
(vapor), este es el principal agente que causa la coagulación de las bacterias
y su eliminación.
6. ¿En qué principio se basa el funcionamiento de la autoclave?
En el uso de presiones altas y temperaturas elevadas (vapor) para eliminar
microorganismos, dado su alta penetración y difusión del vapor dentro de la
cámara eliminando el aire dentro de ella.
7. ¿Qué método de esterilización es el más recomendado para el siguiente
material:
a. un medio de cultivo termolábil:
Se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los componentes
después de que estos hayan sido previamente esterilizados en el
autoclave y enfriados a temperatura ambiente o a 40-50ºC si se trata
de medios con agar.
b. un medio de cultivo termoestable
Se esteriliza por calor húmedo dado que afecta la estabilidad
estructural de los microorganismos.
c. jeringa de vidrio
Al ser un material de vidrio se recomienda su esterilización por medio
de autoclave.
d. un medicamento termolábil cuya vía de administración es intravenosa
Al ser una sustancia termolábil solo permite su esterilización mediante
la filtración para la eliminación de microrganismos gracias a filtros
empleados.
e. instrumental quirúrgico
Se realiza en autoclave de vapor en un ciclo estándar de esterilizado a
una temperatura de ciento treinta y cuatro grados centígrados.
No se pueden usar esterilizadores por calor seco, ya que esto podría
afectar el corte.
f. material de curación contaminado
Consiste en un tratamiento previo de descontaminación del
instrumental y luego un ciclo especial de esterilización por vapor de
agua (134º-138º C, 18 minutos). Aunque también existen otras
alternativas como es la esterilización por Peróxido de Hidrógeno
8. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por calor seco?
La oxidación de los constituyentes químicos presentes en los
microorganismos gracias a sus altas temperaturas por tiempos prolongados.
9. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por medio del óxido de etileno?
Basado en un proceso de difusión de gases, el óxido de etileno (OE u OET)
es capaz de esterilizar y dejar los productos libres de microorganismos
viables. La esterilización se produce cuando una molécula de gas de OE
reacciona con un ADN microbiano y lo destruye.
10.¿Cuál es el fundamento de la esterilización por medio de radiaciones (UV,
infrarroja, radiaciones ionizantes)?
Producen la ionización del ADN de los microorganismos. Bajo ciertas
condiciones, esto puede afectar al proceso de multiplicación celular. De esta
manera, se pueden destruir, inactivar o reducir microorganismos en
materiales sólidos o líquidos sin generar calor
Apartado 4: Puntos extra
I. Un cuadro donde anoten para cada método de esterilización:
Nombre del método
físico
Mecanismo de
acción
Condiciones
de trabajo
Controles Aplicación
Calor seco
Oxida los constituyentes
químicos de los
microorganismos
180°C x 1h
Indicador
biológico
Todo material cuya
resistencia térmica
sea superior a los
150 °C (material de
vidrio o metal con
cierre hermético,
cera, vaselina,
aceite, talco)
Calor húmedo
Coagula las proteínas
de los microorganismos,
desnaturalización de
sus proteínas.
15 LB, 121 °C x
15-20 min
Físico:
-Presión
(medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo
(termógrafo)
Químico
-Interno
-Externo cinta
Biológico:
-Esporas de
Geobacillus
stearothermophil
us
Prueba de vacío
-Bowie-Dick
Todo material que
no resiste
temperaturas
arriba de135° C
(material de vidrio
con torunda de
algodón, jeringas
desarmadas –no
agujas-,
recipientes con
tapón de rosca –no
cerrados
fuertemente-,
tapones de hule
envueltos en
papel)
Radiación UV
Cuando las bacterias,
los virus y los protozoos
se exponen a las
longitudes de onda
germicidas de la luz UV,
se vuelven incapaces de
reproducirse e infectar.
Los microorganismos se
desactivan por medio
de la luz UV como
resultado del daño a los
ácidos nucleicos.
Para esterilizar
instrumentos
quirúrgicos de
medio tamaño 5
-10 min, lugares
de 2.5 m o
menos 30 min.
Indicador químico
y biológico
Soluciones
intravenosas,
suturas
quirúrgicas,
material de
implantación
(prótesis),
instrumental
quirúrgico,
jeringas, agujas,
catéteres y
sondas.
Nombre del método
químico
Mecanismo de
acción
Condiciones
de trabajo
Controles Aplicación
Óxido de etileno
Alquilación de la
pared celular del
microorganismo
Concentración
menor a 3%,
tiempo de rx
10 -16 ha 25
°C, empleo en
cámaras.
Físico:
-Presión (medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo (termógrafo)
Químico
-Interno
-Externo
Biológico:
-Esporas de Bacillus
atropheus
Esteriliza
productos
termolábiles
como plástico,
drogas,
equipamiento
electrónico
Gas plasma de H2O2
al 58%
Los radicales
libres interactúan
con las
membranas
celulares, las
enzimas o los
ácidos nucleicos
y destruyen los
microorganismos.
Presión a 300
mm Hg
(vacío), 50°C
Físico:
-Presión (medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo (termógrafo)
Químico
-Interno o externo
Biológico:
-Esporas de Bacillus
atropheus
-Testigo
Esteriliza
instrumental
sensible a la
humedad,
equipos
electrónicos,
material
cortante,
instrumentos
delicados e
incluso cargas
con diferentes
productos
(vidrio, metal,
plásticos
Vapor de
formaldehido
Desnaturalización
de proteínas,
membrabas de
los
microorganismos
Concentración
38 %, 18 h
Físico:
-Presión (medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo (termógrafo)
Químico
-Interno
-Externo
Biológico:
-Esporas de Bacillus
atropheus
-Testigo
Helix
-Integrador en
dispositivo
Esteriliza
materiales
termosensibles.
II. Que es, como y para que se usa el Bacilo: Geobacillus
stearothermophillus.
Es una bacteria Gram-positiva con forma de bacilo, es usada como
organismo de validación en los estudios de esterilización, debido a que
su degradación como organismo es cuando se alcanza una temperatura
de 121 °C, presenta una alta resistencia a temperaturas menores.
En los autoclaves de vapor se utiliza una ampolla con esta bacteria para
hacer una prueba de validación biológica del proceso de esterilización
respecto a las condiciones teóricas de 15 minutos a 121 °C con 1 atm de
presión.
La o las ampollas se distribuyen en el autoclave (se trata de demostrar
una esterilización uniforme de todo el equipo). Se le da el ciclo a validar
de esterilizado efectivo (por ejemplo: 15, 17, 20, etc. minutos). El ciclo
puede o no incluir carga si queremos validar el ciclo y distribución del
equipo y si queremos validar la carga de trabajo. Concluido el ciclo, la o
las ampollas son incubadas a 60 °C por 48 horas para ver si se desarrolla
la bacteria de control. Normalmente las ampollas tienen un indicador de
fenolftaleína o algún tipo de indicador que varía de color por desarrollo de
la bacteria que modifica el pH de la ampolla. El viraje habitual es de violeta
a amarillo, si luego de la incubación permanece violeta el ciclo de
esterilizado ha sido efectivo. Se debe incubar un control positivo sin
esterilizar para verificar el correcto el resultado por cambio de color.
En caso de viraje de la o las ampollas se deberá aumentar el tiempo de
esterilizado, revisión de fugas, presión obtenida, cantidad de carga, etc.
para volver a realizar la validación del proceso.
Bibliografía
1. Esterilización. Procedimientos realizados. [Citado febrero 15, 2022].
Disponible en:
https://www.mheducation.es/bcv/guide/capitulo/8448164180.pdf
2. ¿Qué es una autoclave? [internet]. Tuttnauer. Marzo 2016. [Citado febrero
15, 2022]. Disponible en:
https://tuttnauer.com/blog/esterilizacion-por-autoclave/que-es-un-
autoclave#:~:text=La%20esterilizaci%C3%B3n%20por%20vapor%20en,par
a%20matar%20a%20los%20microorganismos.&text=El%20vapor%20en%2
0el%20interior,que%20se%20coagulen%20y%20mueran.
3. Indicadores biológicos para el control de la esterilización [internet]. La
autoclave; enero 2019. [cito febrero 15, 2022]. Disponible en:
https://elautoclave.wordpress.com/2019/01/21/indicadores-biologicos-para-
el-control-de-la-
esterilizacion/#:~:text=Los%20indicadores%20biol%C3%B3gicos%20para%
20%C3%B3xido,en%20el%20proceso%20a%20comprobar.
4. Métodos de esterilización [internet]. Laboratorio de microbiología; octubre
2001. [cito febrero 15, 2022]. Disponible en:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10
_M%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf
5. Métodos de esterilización [internet]. Cuba: Universidad Virtual de la salud,
Cátedra de la facultad de Ciencias Médicas; septiembre 2013. [Cito febrero
15, 2022]. Disponible en: http://uvsfajardo.sld.cu/tema-7-metodos-de-
esterilizacion
6. Montes, Y., Hidalgo, C, y Mayo, O. Esterilización de soluciones para
productos parenterales. Análisis de la problemática. Tecnología Química
[internet]. 2017.[citado en febrero 15, 2022]; 37 (3). Disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224-
61852017000300001
7. Arrufat, T. Taller: esterilización de material sanitario en atención primaria.
[internet]. [citado en febrero 15, 2022]. Disponible en:
https://www.aragon.es/documents/20127/674325/04-2-
Taller_4.pdf/c9e87264-a088-385b-f67a-d02db5e901e0

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Grupo 2602_Esterilización #3.pdf

  • 1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO Facultad de Estudios Superiores Zaragoza Nombre del alumno: Santos Melo María de Jesús Practica #3: Preparación de material para microbiología, limpieza y esterilización Materia: Microbiología General I Modalidad: Laboratorio Carrera: Químico Farmacéutico Biológico Grupo: 2602 Semestre 22-2 Asesor: María del Carmen Camacho Venegas
  • 2. Apartado 1: Mapa conceptual
  • 4. Apartado 3: Cuestionario 1. ¿Qué es esterilización? La esterilización es el procedimiento mediante el cual a un objeto o sustancia se eliminarán microorganismos y posterior a ello se encuentran libres de microorganismos vivos (bacterias, hongos o protozoarios), el cual es un término NO relativo, es decir el objeto o sustancia se encuentra estéril sí o no, no hay intermedios. H2SO4
  • 5. 2. ¿Qué métodos de esterilización existen? Existen cuatro métodos de esterilización, los métodos por calor (ya sea seco o húmedo), filtración, radiaciones y agentes químicos. 3. Mencione por lo menos tres métodos de esterilización por agentes físicos. Agentes físicos: Calor seco: se emplea en un horno o estufa para material de vidrio Calor húmedo: Se emplea en una autoclave para objetos termo sensibles (temperaturas menores de 135 °C)
  • 6. Radiación: Se puede hacer con rayos gamma, beta y UV, por lo regular solo se hace en superficies, por ejemplo, instrumental quirúrgico. 4. ¿En qué consiste la pasteurización y qué finalidad tiene? La pasteurización consiste en proceso térmico, en el cual una sustancia es llevada a altas temperaturas (hervir) por un tiempo determinado, posteriormente se somete a un proceso de enfriamiento rápido, una vez hecho se sella herméticamente. Tiene la finalidad de esterilizar la sustancia para evitar la proliferación de microorganismos en él, así como su conservación, dado que las altas temperaturas desnaturalizan proteínas de los microorganismos y con ello lo elimina.
  • 7. 5. ¿Qué tipo de esterilización se efectúa en la autoclave? Esterilización por física, por medio de una alta presión y altas temperaturas (vapor), este es el principal agente que causa la coagulación de las bacterias y su eliminación. 6. ¿En qué principio se basa el funcionamiento de la autoclave? En el uso de presiones altas y temperaturas elevadas (vapor) para eliminar microorganismos, dado su alta penetración y difusión del vapor dentro de la cámara eliminando el aire dentro de ella. 7. ¿Qué método de esterilización es el más recomendado para el siguiente material: a. un medio de cultivo termolábil: Se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los componentes después de que estos hayan sido previamente esterilizados en el autoclave y enfriados a temperatura ambiente o a 40-50ºC si se trata de medios con agar.
  • 8. b. un medio de cultivo termoestable Se esteriliza por calor húmedo dado que afecta la estabilidad estructural de los microorganismos. c. jeringa de vidrio Al ser un material de vidrio se recomienda su esterilización por medio de autoclave. d. un medicamento termolábil cuya vía de administración es intravenosa Al ser una sustancia termolábil solo permite su esterilización mediante la filtración para la eliminación de microrganismos gracias a filtros empleados. e. instrumental quirúrgico Se realiza en autoclave de vapor en un ciclo estándar de esterilizado a una temperatura de ciento treinta y cuatro grados centígrados. No se pueden usar esterilizadores por calor seco, ya que esto podría afectar el corte. f. material de curación contaminado Consiste en un tratamiento previo de descontaminación del instrumental y luego un ciclo especial de esterilización por vapor de agua (134º-138º C, 18 minutos). Aunque también existen otras alternativas como es la esterilización por Peróxido de Hidrógeno
  • 9. 8. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por calor seco? La oxidación de los constituyentes químicos presentes en los microorganismos gracias a sus altas temperaturas por tiempos prolongados. 9. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por medio del óxido de etileno? Basado en un proceso de difusión de gases, el óxido de etileno (OE u OET) es capaz de esterilizar y dejar los productos libres de microorganismos viables. La esterilización se produce cuando una molécula de gas de OE reacciona con un ADN microbiano y lo destruye. 10.¿Cuál es el fundamento de la esterilización por medio de radiaciones (UV, infrarroja, radiaciones ionizantes)? Producen la ionización del ADN de los microorganismos. Bajo ciertas condiciones, esto puede afectar al proceso de multiplicación celular. De esta manera, se pueden destruir, inactivar o reducir microorganismos en materiales sólidos o líquidos sin generar calor Apartado 4: Puntos extra I. Un cuadro donde anoten para cada método de esterilización:
  • 10. Nombre del método físico Mecanismo de acción Condiciones de trabajo Controles Aplicación Calor seco Oxida los constituyentes químicos de los microorganismos 180°C x 1h Indicador biológico Todo material cuya resistencia térmica sea superior a los 150 °C (material de vidrio o metal con cierre hermético, cera, vaselina, aceite, talco) Calor húmedo Coagula las proteínas de los microorganismos, desnaturalización de sus proteínas. 15 LB, 121 °C x 15-20 min Físico: -Presión (medidor) -temperatura (termómetro) -Tiempo (termógrafo) Químico -Interno -Externo cinta Biológico: -Esporas de Geobacillus stearothermophil us Prueba de vacío -Bowie-Dick Todo material que no resiste temperaturas arriba de135° C (material de vidrio con torunda de algodón, jeringas desarmadas –no agujas-, recipientes con tapón de rosca –no cerrados fuertemente-, tapones de hule envueltos en papel) Radiación UV Cuando las bacterias, los virus y los protozoos se exponen a las longitudes de onda germicidas de la luz UV, se vuelven incapaces de reproducirse e infectar. Los microorganismos se desactivan por medio de la luz UV como resultado del daño a los ácidos nucleicos. Para esterilizar instrumentos quirúrgicos de medio tamaño 5 -10 min, lugares de 2.5 m o menos 30 min. Indicador químico y biológico Soluciones intravenosas, suturas quirúrgicas, material de implantación (prótesis), instrumental quirúrgico, jeringas, agujas, catéteres y sondas.
  • 11. Nombre del método químico Mecanismo de acción Condiciones de trabajo Controles Aplicación Óxido de etileno Alquilación de la pared celular del microorganismo Concentración menor a 3%, tiempo de rx 10 -16 ha 25 °C, empleo en cámaras. Físico: -Presión (medidor) -temperatura (termómetro) -Tiempo (termógrafo) Químico -Interno -Externo Biológico: -Esporas de Bacillus atropheus Esteriliza productos termolábiles como plástico, drogas, equipamiento electrónico Gas plasma de H2O2 al 58% Los radicales libres interactúan con las membranas celulares, las enzimas o los ácidos nucleicos y destruyen los microorganismos. Presión a 300 mm Hg (vacío), 50°C Físico: -Presión (medidor) -temperatura (termómetro) -Tiempo (termógrafo) Químico -Interno o externo Biológico: -Esporas de Bacillus atropheus -Testigo Esteriliza instrumental sensible a la humedad, equipos electrónicos, material cortante, instrumentos delicados e incluso cargas con diferentes productos (vidrio, metal, plásticos Vapor de formaldehido Desnaturalización de proteínas, membrabas de los microorganismos Concentración 38 %, 18 h Físico: -Presión (medidor) -temperatura (termómetro) -Tiempo (termógrafo) Químico -Interno -Externo Biológico: -Esporas de Bacillus atropheus -Testigo Helix -Integrador en dispositivo Esteriliza materiales termosensibles.
  • 12. II. Que es, como y para que se usa el Bacilo: Geobacillus stearothermophillus. Es una bacteria Gram-positiva con forma de bacilo, es usada como organismo de validación en los estudios de esterilización, debido a que su degradación como organismo es cuando se alcanza una temperatura de 121 °C, presenta una alta resistencia a temperaturas menores. En los autoclaves de vapor se utiliza una ampolla con esta bacteria para hacer una prueba de validación biológica del proceso de esterilización respecto a las condiciones teóricas de 15 minutos a 121 °C con 1 atm de presión. La o las ampollas se distribuyen en el autoclave (se trata de demostrar una esterilización uniforme de todo el equipo). Se le da el ciclo a validar de esterilizado efectivo (por ejemplo: 15, 17, 20, etc. minutos). El ciclo puede o no incluir carga si queremos validar el ciclo y distribución del equipo y si queremos validar la carga de trabajo. Concluido el ciclo, la o las ampollas son incubadas a 60 °C por 48 horas para ver si se desarrolla la bacteria de control. Normalmente las ampollas tienen un indicador de fenolftaleína o algún tipo de indicador que varía de color por desarrollo de la bacteria que modifica el pH de la ampolla. El viraje habitual es de violeta a amarillo, si luego de la incubación permanece violeta el ciclo de esterilizado ha sido efectivo. Se debe incubar un control positivo sin esterilizar para verificar el correcto el resultado por cambio de color. En caso de viraje de la o las ampollas se deberá aumentar el tiempo de esterilizado, revisión de fugas, presión obtenida, cantidad de carga, etc. para volver a realizar la validación del proceso. Bibliografía 1. Esterilización. Procedimientos realizados. [Citado febrero 15, 2022]. Disponible en: https://www.mheducation.es/bcv/guide/capitulo/8448164180.pdf 2. ¿Qué es una autoclave? [internet]. Tuttnauer. Marzo 2016. [Citado febrero 15, 2022]. Disponible en:
  • 13. https://tuttnauer.com/blog/esterilizacion-por-autoclave/que-es-un- autoclave#:~:text=La%20esterilizaci%C3%B3n%20por%20vapor%20en,par a%20matar%20a%20los%20microorganismos.&text=El%20vapor%20en%2 0el%20interior,que%20se%20coagulen%20y%20mueran. 3. Indicadores biológicos para el control de la esterilización [internet]. La autoclave; enero 2019. [cito febrero 15, 2022]. Disponible en: https://elautoclave.wordpress.com/2019/01/21/indicadores-biologicos-para- el-control-de-la- esterilizacion/#:~:text=Los%20indicadores%20biol%C3%B3gicos%20para% 20%C3%B3xido,en%20el%20proceso%20a%20comprobar. 4. Métodos de esterilización [internet]. Laboratorio de microbiología; octubre 2001. [cito febrero 15, 2022]. Disponible en: http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10 _M%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf 5. Métodos de esterilización [internet]. Cuba: Universidad Virtual de la salud, Cátedra de la facultad de Ciencias Médicas; septiembre 2013. [Cito febrero 15, 2022]. Disponible en: http://uvsfajardo.sld.cu/tema-7-metodos-de- esterilizacion 6. Montes, Y., Hidalgo, C, y Mayo, O. Esterilización de soluciones para productos parenterales. Análisis de la problemática. Tecnología Química [internet]. 2017.[citado en febrero 15, 2022]; 37 (3). Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2224- 61852017000300001 7. Arrufat, T. Taller: esterilización de material sanitario en atención primaria. [internet]. [citado en febrero 15, 2022]. Disponible en: https://www.aragon.es/documents/20127/674325/04-2- Taller_4.pdf/c9e87264-a088-385b-f67a-d02db5e901e0