Este documento presenta un resumen de los diferentes métodos de esterilización, incluyendo calor seco, calor húmedo, radiación, agentes químicos y filtración. Explica los principios, condiciones y aplicaciones de cada método. También incluye preguntas sobre esterilización y el uso del indicador biológico Geobacillus stearothermophilus para validar el proceso de esterilización.
1. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA
DE MÉXICO
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
Nombre del alumno: Santos Melo María de Jesús
Practica #3: Preparación de material para microbiología,
limpieza y esterilización
Materia: Microbiología General I
Modalidad: Laboratorio
Carrera: Químico Farmacéutico Biológico
Grupo: 2602
Semestre 22-2
Asesor: María del Carmen Camacho Venegas
4. Apartado 3: Cuestionario
1. ¿Qué es esterilización?
La esterilización es el procedimiento mediante el cual a un objeto o sustancia
se eliminarán microorganismos y posterior a ello se encuentran libres de
microorganismos vivos (bacterias, hongos o protozoarios), el cual es un
término NO relativo, es decir el objeto o sustancia se encuentra estéril sí o
no, no hay intermedios. H2SO4
5. 2. ¿Qué métodos de esterilización existen?
Existen cuatro métodos de esterilización, los métodos por calor (ya sea seco
o húmedo), filtración, radiaciones y agentes químicos.
3. Mencione por lo menos tres métodos de esterilización por agentes físicos.
Agentes físicos:
Calor seco: se emplea en un horno o estufa para material de vidrio
Calor húmedo: Se emplea en una autoclave para objetos termo sensibles
(temperaturas menores de 135 °C)
6. Radiación: Se puede hacer con rayos gamma, beta y UV, por lo regular solo
se hace en superficies, por ejemplo, instrumental quirúrgico.
4. ¿En qué consiste la pasteurización y qué finalidad tiene?
La pasteurización consiste en proceso térmico, en el cual una sustancia es
llevada a altas temperaturas (hervir) por un tiempo determinado,
posteriormente se somete a un proceso de enfriamiento rápido, una vez
hecho se sella herméticamente. Tiene la finalidad de esterilizar la sustancia
para evitar la proliferación de microorganismos en él, así como su
conservación, dado que las altas temperaturas desnaturalizan proteínas de
los microorganismos y con ello lo elimina.
7. 5. ¿Qué tipo de esterilización se efectúa en la autoclave?
Esterilización por física, por medio de una alta presión y altas temperaturas
(vapor), este es el principal agente que causa la coagulación de las bacterias
y su eliminación.
6. ¿En qué principio se basa el funcionamiento de la autoclave?
En el uso de presiones altas y temperaturas elevadas (vapor) para eliminar
microorganismos, dado su alta penetración y difusión del vapor dentro de la
cámara eliminando el aire dentro de ella.
7. ¿Qué método de esterilización es el más recomendado para el siguiente
material:
a. un medio de cultivo termolábil:
Se esterilizan por filtración y se añaden al resto de los componentes
después de que estos hayan sido previamente esterilizados en el
autoclave y enfriados a temperatura ambiente o a 40-50ºC si se trata
de medios con agar.
8. b. un medio de cultivo termoestable
Se esteriliza por calor húmedo dado que afecta la estabilidad
estructural de los microorganismos.
c. jeringa de vidrio
Al ser un material de vidrio se recomienda su esterilización por medio
de autoclave.
d. un medicamento termolábil cuya vía de administración es intravenosa
Al ser una sustancia termolábil solo permite su esterilización mediante
la filtración para la eliminación de microrganismos gracias a filtros
empleados.
e. instrumental quirúrgico
Se realiza en autoclave de vapor en un ciclo estándar de esterilizado a
una temperatura de ciento treinta y cuatro grados centígrados.
No se pueden usar esterilizadores por calor seco, ya que esto podría
afectar el corte.
f. material de curación contaminado
Consiste en un tratamiento previo de descontaminación del
instrumental y luego un ciclo especial de esterilización por vapor de
agua (134º-138º C, 18 minutos). Aunque también existen otras
alternativas como es la esterilización por Peróxido de Hidrógeno
9. 8. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por calor seco?
La oxidación de los constituyentes químicos presentes en los
microorganismos gracias a sus altas temperaturas por tiempos prolongados.
9. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por medio del óxido de etileno?
Basado en un proceso de difusión de gases, el óxido de etileno (OE u OET)
es capaz de esterilizar y dejar los productos libres de microorganismos
viables. La esterilización se produce cuando una molécula de gas de OE
reacciona con un ADN microbiano y lo destruye.
10.¿Cuál es el fundamento de la esterilización por medio de radiaciones (UV,
infrarroja, radiaciones ionizantes)?
Producen la ionización del ADN de los microorganismos. Bajo ciertas
condiciones, esto puede afectar al proceso de multiplicación celular. De esta
manera, se pueden destruir, inactivar o reducir microorganismos en
materiales sólidos o líquidos sin generar calor
Apartado 4: Puntos extra
I. Un cuadro donde anoten para cada método de esterilización:
10. Nombre del método
físico
Mecanismo de
acción
Condiciones
de trabajo
Controles Aplicación
Calor seco
Oxida los constituyentes
químicos de los
microorganismos
180°C x 1h
Indicador
biológico
Todo material cuya
resistencia térmica
sea superior a los
150 °C (material de
vidrio o metal con
cierre hermético,
cera, vaselina,
aceite, talco)
Calor húmedo
Coagula las proteínas
de los microorganismos,
desnaturalización de
sus proteínas.
15 LB, 121 °C x
15-20 min
Físico:
-Presión
(medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo
(termógrafo)
Químico
-Interno
-Externo cinta
Biológico:
-Esporas de
Geobacillus
stearothermophil
us
Prueba de vacío
-Bowie-Dick
Todo material que
no resiste
temperaturas
arriba de135° C
(material de vidrio
con torunda de
algodón, jeringas
desarmadas –no
agujas-,
recipientes con
tapón de rosca –no
cerrados
fuertemente-,
tapones de hule
envueltos en
papel)
Radiación UV
Cuando las bacterias,
los virus y los protozoos
se exponen a las
longitudes de onda
germicidas de la luz UV,
se vuelven incapaces de
reproducirse e infectar.
Los microorganismos se
desactivan por medio
de la luz UV como
resultado del daño a los
ácidos nucleicos.
Para esterilizar
instrumentos
quirúrgicos de
medio tamaño 5
-10 min, lugares
de 2.5 m o
menos 30 min.
Indicador químico
y biológico
Soluciones
intravenosas,
suturas
quirúrgicas,
material de
implantación
(prótesis),
instrumental
quirúrgico,
jeringas, agujas,
catéteres y
sondas.
11. Nombre del método
químico
Mecanismo de
acción
Condiciones
de trabajo
Controles Aplicación
Óxido de etileno
Alquilación de la
pared celular del
microorganismo
Concentración
menor a 3%,
tiempo de rx
10 -16 ha 25
°C, empleo en
cámaras.
Físico:
-Presión (medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo (termógrafo)
Químico
-Interno
-Externo
Biológico:
-Esporas de Bacillus
atropheus
Esteriliza
productos
termolábiles
como plástico,
drogas,
equipamiento
electrónico
Gas plasma de H2O2
al 58%
Los radicales
libres interactúan
con las
membranas
celulares, las
enzimas o los
ácidos nucleicos
y destruyen los
microorganismos.
Presión a 300
mm Hg
(vacío), 50°C
Físico:
-Presión (medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo (termógrafo)
Químico
-Interno o externo
Biológico:
-Esporas de Bacillus
atropheus
-Testigo
Esteriliza
instrumental
sensible a la
humedad,
equipos
electrónicos,
material
cortante,
instrumentos
delicados e
incluso cargas
con diferentes
productos
(vidrio, metal,
plásticos
Vapor de
formaldehido
Desnaturalización
de proteínas,
membrabas de
los
microorganismos
Concentración
38 %, 18 h
Físico:
-Presión (medidor)
-temperatura
(termómetro)
-Tiempo (termógrafo)
Químico
-Interno
-Externo
Biológico:
-Esporas de Bacillus
atropheus
-Testigo
Helix
-Integrador en
dispositivo
Esteriliza
materiales
termosensibles.
12. II. Que es, como y para que se usa el Bacilo: Geobacillus
stearothermophillus.
Es una bacteria Gram-positiva con forma de bacilo, es usada como
organismo de validación en los estudios de esterilización, debido a que
su degradación como organismo es cuando se alcanza una temperatura
de 121 °C, presenta una alta resistencia a temperaturas menores.
En los autoclaves de vapor se utiliza una ampolla con esta bacteria para
hacer una prueba de validación biológica del proceso de esterilización
respecto a las condiciones teóricas de 15 minutos a 121 °C con 1 atm de
presión.
La o las ampollas se distribuyen en el autoclave (se trata de demostrar
una esterilización uniforme de todo el equipo). Se le da el ciclo a validar
de esterilizado efectivo (por ejemplo: 15, 17, 20, etc. minutos). El ciclo
puede o no incluir carga si queremos validar el ciclo y distribución del
equipo y si queremos validar la carga de trabajo. Concluido el ciclo, la o
las ampollas son incubadas a 60 °C por 48 horas para ver si se desarrolla
la bacteria de control. Normalmente las ampollas tienen un indicador de
fenolftaleína o algún tipo de indicador que varía de color por desarrollo de
la bacteria que modifica el pH de la ampolla. El viraje habitual es de violeta
a amarillo, si luego de la incubación permanece violeta el ciclo de
esterilizado ha sido efectivo. Se debe incubar un control positivo sin
esterilizar para verificar el correcto el resultado por cambio de color.
En caso de viraje de la o las ampollas se deberá aumentar el tiempo de
esterilizado, revisión de fugas, presión obtenida, cantidad de carga, etc.
para volver a realizar la validación del proceso.
Bibliografía
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a%20matar%20a%20los%20microorganismos.&text=El%20vapor%20en%2
0el%20interior,que%20se%20coagulen%20y%20mueran.
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