Este documento describe un experimento para determinar el contenido de vitamina C (ácido ascórbico) en jugo de naranja a través de valoración con 2,6-diclorofenolindofenol. Dos equipos realizaron el análisis y obtuvieron contenidos de 49.29 y 46.49 mg de ácido ascórbico por 100g de naranja respectivamente. El equipo 2 tuvo desviaciones estándar más cercanas a la media, indicando que llevó a cabo el método de mejor manera. El contenido encontrado está dentro del

1. Práctica 1: Manejo de datos
analíticos A: Determinación de
vitamina C en jugo de naranja
Hernández Andrea
Ramírez José
Villanueva Gala

2. Objetivos:
Llevar a cabo tres protocolos de
análisis cuantitativo que involucren
el uso de los conceptos de molaridad,
normalidad, concentración en partes
por millón, curva patrón,
estandarización de soluciones para
extraer conclusiones sucintas de los
resultados que se obtengan de cada
una de ellas y de manera rutinaria,
para que de la misma manera pueda
hacerse esto en experimentación
posterior que involucre estos mismos
parámetros analíticos.

3. Introducción
Ácido ascórbico
Es una vitamina que a falta de L-
gulono-gamma-lactone oxidase, los
humanos no la sintetizamos. Es
necesaria para la formación de vasos
sanguíneos, cartílagos, músculos y el
colágeno en músculos al igual que en el
proceso de curación. La vitamina C
puede proteger las células frente a los
efectos de los radicales libres, es decir,
moléculas generadas cuando el cuerpo
descompone los alimentos o cuando se
lo expone al humo de tabaco y a la
radiación. Los radicales libres podrían
influir en las enfermedades cardíacas,
el cáncer y otras enfermedades. La
vitamina C también ayuda a que el
cuerpo absorba y almacene hierro.
Fig.1 Estructura del ácido ascórbico
=50mg/100gr

4. Introducción Se descompone con facilidad en el
procesamiento y conservación de los
alimentos, por lo que se utiliza como
indicador de la pérdida vitamínica de
un alimento durante su procesado y
almacenamiento.
Propiedades químicas
● Peso molecular: 176.13 g/mol
● Apariencia: Sólido blanco o
amarillo claro.
● Densidad: 1.694 g/cm³.
● Punto de fusión: 190 - 192 °C.
● Punto de ebullición: 553 °C.
● Solubilidad en agua: Soluble.
Estabilidad
En contacto con oxígeno y luz, el ácido
es susceptible a una degradación
oxidativa a ácido dehidroascórbico y
sigue hasta dar productos inactivos. La
degradación es influenciada por
oxígeno, temperatura, viscosidad y pH
del medio; de misma manera los
cationes metálicos intervienen con su
descomposición: Cu2+, Fe2+, y Zn2+.

5. Enfermedades causadas por hongos
Tabla 1. Enfermedades vegetales relacionadas con los cítricos
Gomosis Antracnosis Fumagina
Hongo Phytophthora Citrophthora Colletorichum,
Gloesporium y
Coniothyriu
>200 especies de hongos.
Sintomatología El tronco secreta
sustancias de carácter
gomoso de color ámbar.
Las hojas adoptan un color
verde claro, con su nervio
de un torno amarillo.
Aparición de manchas
marrones en las hojas,
necrosis
Las superficies afectadas
presentan costras o
películas fáciles de
remover de color negro.
Condiciones que lo
favorecen
El calor 18-25ºC y la
humedad.
El calor y la humedad. Abundante secreción
azucarada, humedad y la
poca iluminación.
Medidas a tomar Fungicidas como el Fosetil
o el oxicloruro de cobre.
Aplicar extracto de cola de
caballo, o cortar la parte
dañada.
Combatir los insectos que
segregan el azúcar.
Solución jabonosa.

6. Introducción
necesaria para obtener energía a partir
de la grasa, o de una síntesis inferior
del neutransmisor norepinefrina.
Deficiencia
Escorbuto
Los síntomas incluyen tendencia a las
hemorragias y hematomas, pérdida de
cabello y dientes, dolor e hinchazón en
las articulaciones. Estos síntomas
parecen estar relacionados con la
debilitación de los vasos sanguíneos,
tejidos conjuntivos y huesos, que
contienen colágeno. Los síntomas
iniciales del escorbuto, como la fatiga,
pueden provenir de la disminución del
nivel de carnitina,
65-90mg/dia
Fig.2 Síntomas de escorbuto

7. Introducción
2,6-diclorofenolindofenol
El ácido ascórbico se determina por valoración con el colorante 2,6-diclorofenolindofenol
que es reducido por el ácido ascórbico a una forma incolora en medio ácido. La forma
oxidada del reactivo es rojo en medio ácido y la reducida incolora.
Fig.3 Reacción de AA con 2,6-diclorofenolindofenol

8. Desviación estándar
- Mide la dispersión de una
distribución de datos con respecto
a la media
Introducción
Coeficiente de variación
- Mide la proporción de la s con
respecto a la media
- Qué tan grande es el valor de s
con respecto al valor de la media
Para Excel:
Función “DESVESTA”
𝑠 =
𝑥𝑖 − 𝑥 2
𝑛 − 1
c. v. =
𝑠
𝑥

9. Procedimiento A : Preparación de soluciones.
1. Ácido acético al 5%: 100 ml de sol. al 5% v/v.
2. 2, 6 diclorofenolindofenol: 250 ml
3. Estándar de ácido ascórbico: 50 ml
Vsoluto=0.05*100
Vsoluto=5ml
1
42 mg NaHCO3 + 50 ml H2O
+ 50 mg 2,6-
diclorofenolindofenol
(Aforar a 250 ml)
3
- 50 mg de ac. ascórbico en
matraz aforado de 50 mL
- Aforar c/CH3COOH 5%
2

10. Procedimiento B : Estandarización de la solución
de 2,6-diclorofenolindofenol
1. Llenar bureta con 2,6 diclorofenol y cubrir con aluminio.
2. 8ml de CH3COOH al 5% en MEM de 125 ml.
3. Agregar 2 ml de solución estándar de vitamina C.
4. Titular hasta que vire (rosa claro por 15 s).
5. Repetir todo el procedimiento 2 veces.
Tabla 2. ml de 2,6
diclorofenolindofenol
37.8
31.2
34.5
promedio ( x )

11. 1. Pesar naranjas y obtener aproximadamente 50 ml de jugo.
2. Filtrar con gasas.
3. Determinar pH.
4. 5ml del filtrado en un MEM de 125ml.
5. Agregar 5ml de CH3COOH al 5%.
6. Titular con solución estandarizada 2,6-diclorofenolindofenol
hasta viraje (rosa claro por 15 s)
Repetir todo el proceso 4 veces.
Procedimiento C : Análisis de la muestra
Peso - 229.3 g
↓
Jugo - 71 ml
pH = 4

12. Resultados
Tabla 3. Análisis de jugo de naranja (Equipo 1)
Muestra
jugo
ml de
jugo
ml de 2,6 -
diclorofenolindofenol
empleados
mg de ácido
ascórbico en
muestra
mg de ácido
ascórbico /
100 g de
naranja
Contenido promedio de
ácido ascórbico en 100 g
de naranja
1 5 27.5 1.594 9.873
8.374
2 5 23.8 1.380 8.544
3 5 22 1.275 7.898
4 5 20 1.159 7.180
23.32 1.352 8.374

13. Cálculos
→ mg de ácido ascórbico en muestra
= ml 2,6 diclorofenolindofenol empleados /
17.25 (promedio de estandarización)
Muestra 1
mg ácido ascórbico en muestra = 27.5/17.25
= 1.594 mg
→ mg de ácido ascórbico en 100 g de naranja
Muestra 1
5 ml de muestra – 1.594 mg ácido ascórbico
71 ml totales – 22.6348 mg ácido ascórbico
229.3 g naranja – 22.6348 mg ácido ascórbico
100 g naranja – 9.873 mg ácido ascórbico
9.873 mg ac. ascórbico / 100 g naranja

14. Contenido promedio de ácido ascórbico en 100 g de naranja (Equipo 1)
Resultados
Equivalentes → 17.25 ml 2,6-
diclorofenolindofenol / 50.5 mg
estándar de ácido ascórbico
= 0.3415 ml/mg
mg ácido ascórbico = (0.3415)(23.32)
mg ácido ascórbico = 7.96 mg
5 ml muestra → 7.96 mg ac. ascórbico
71 ml totales → 113.032 mg ac. ascórbico
229.3 g naranja → 113.032 mg ac. ascórbico
100 g naranja → 49.29 mg ac. ascórbico
49.29 mg ac. ascórbico / 100 g naranja

15. Resultados
Tabla 4. Desviaciones estándar de análisis de
jugo de naranja (Equipo 1)
ml de 2,6 diclorofenolindofenol
empleados
3.187
mg de ácido ascórbico en la muestra 0.185
mg de ácido ascórbico en 100 g de
naranja
1.144
Tabla 5. Coeficientes de variación de
análisis de jugo de naranja (Equipo 1)
ml de 2,6 diclorofenolindofenol
empleados
0.1366
mg de ácido ascórbico en la
muestra
0.1366
mg de ácido ascórbico en 100 g de
naranja
0.1366

16. 0.900
1.000
1.100
1.200
1.300
1.400
1.500
1.600
1.700
19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
mgdeácidoascórbicoenmuestra
ml de 2,6-diclorofenolindofenol
Gráfica 1. Desviación estandar de ml de 2,6-diclorofenolindofenol empleados (Equipo 1)
Punto final de valoración de ácido ascórbico
Linear (Punto final de valoración de ácido
ascórbico)

17. Resultados
Tabla 6. Análisis de jugo de naranja (Equipo 2)
Muestra
jugo
mL de
jugo
ml de 2,6 -
diclorofenolindofenol
empleados
mg de ácido
ascórbico en
muestra
mg de ácido
ascórbico / 100 g
de naranja
1 5 25.9 2.106 13.040
2 5 24.3 1.976 12.234
3 5 25.4 2.065 12.788
4 5 22.2 1.805 11.177
24.45 1.988 12.310
Peso - 183.016 g
↓
Jugo - 71.5 ml
- pH = 4
- Promedio estándar
= 12.3 ml

18. Contenido promedio de ácido ascórbico en 100 g de naranja (Equipo 2)
Resultados
Equivalentes → 12.3 ml 2,6
diclorofenolindofenol / 50.5 mg
estándar ácido ascórbico
= 0.2435 ml/mg
mg ácido ascórbico = (0.2435)(24.45)
mg ácido ascórbico = 5.95 mg
5 ml muestra → 5.95 mg ac. ascórbico
71.5 ml totales → 85.085 mg ac. ascórbico
183.016 g naranja → 85.085 mg ac. ascórbico
100 g naranja → 46.49 mg ac. ascórbico
46.49 mg ac. ascórbico / 100 g
naranja

19. Resultados
Tabla 7. Desviaciones estándar de análisis de
jugo de naranja (Equipo 2)
ml de 2,6 diclorofenolindofenol
empleados
1.642
mg de ácido ascórbico en la muestra 0.134
mg de ácido ascórbico en 100 g de
naranja
0.827
Tabla 8. Coeficientes de variación de
análisis de jugo de naranja (Equipo 2)
ml de 2,6 diclorofenolindofenol
empleados
0.067
mg de ácido ascórbico en la
muestra
0.067
mg de ácido ascórbico en 100 g de
naranja
0.067

20. 1.750
1.800
1.850
1.900
1.950
2.000
2.050
2.100
2.150
22 22.5 23 23.5 24 24.5 25 25.5 26 26.5
mgdeácidoascórbicoenmuestra
ml de 2,6-diclorofenolindofenol
Gráfica 2. Desviación estandar de ml de 2,6-diclorofenolindofenol empleados (Equipo 2)
Punto final de valoración de ácido ascórbico
Linear (Punto final de valoración de ácido
ascórbico)

21. Conclusiones
- El contenido de ácido ascórbico (Vitamina C) en la naranja va de los 50 a los 53
mg/100 g. Los resultados de los equipos 1 y 2 fueron de 49.29 y 46.49
respectivamente.
- La variación de los resultados obtenidos con respecto a aquellos reportados en la
lectura puede deberse al tiempo de exposición del jugo en el medio (rico en O2).
- Al tomar en cuenta la diferencia de las desviaciones estándar entre los equipos
se concluye que el equipo 2 llevó a cabo de mejor manera el método, pues las
desviaciones estándar de sus resultados se encontraron más cercanas a la media.

22. Referencias
- Mayo Clinic. (2018). Vitamina C. ART-20363932. Recuperado de la base de datos de Mayo
Clinic de https://www.mayoclinic.org/es-es/drugs-supplements-vitamin-c/art-20363932
- Ali Sheraz, M.; et. al. (2015). Stability and stabilization of Ascorbic Acid. H&PC Today -
Household and Personal Care Today Vol. 10(3), 22. Recuperado de
https://www.researchgate.net/publication/321148774_Stability_and_Stabilization_of_Ascorb
ic_Acid