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UNIVERSIDAD DE
GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS
MÉDICAS
ESCUELA DE MEDICINA
Tercer Año
Grupo #10
Mercedes A. Robles
Galarza
¿QUÉ ES LA
PATOLOGÍA?
DEFINICIÓN
Pathos
Logos
Se encarga del estudio de las causas de la enfermedad y de los
cambios asociados a nivel celular, tisular y orgánico, que son
responsables de los signos y síntomas que presentan los pacientes
TERMINOLOGÍA
Término
Características de la Enfermedad
Factores Causales
Mecanismos de la Enfermedad
Efectos de la Enfermedad
Significado en Patología
Evolución
Factores Etiológicos/ Etiología
Patogenia
Secuelas
CLASIFICACIÓN
Patología
General
•Cambios Estructurales
Básicos comunes a varias
enfermedades
Especial
•Estudio de los cam
RELACIÓN DE LA
PATOLOGÍA CON
OTRAS ASIGNATURAS
RELACIÓN CON OTRAS
CIENCIAS
Histopatología
•estudio de
enfermedades
desde la
perspectiva de las
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estructurales, en
particular
histológicas, de las
células y tejidos. La
mayor parte de este
libro se centra en la
histopatología.
Hematología
•estudio de las
enfermedades
primarias de la
sangre, así como
de los efectos de
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sobre la sangre.
Patología química
•estudio de
enfermedades
desde la
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primarios como por
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enfermedades
sobre los
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sangre, orina y
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Microbiología
•estudio de
enfermedades
desde el punto de
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cación y
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causadas por
bacterias, hongos,
virus y parásitos.
Con frecuencia, la
microbiología se
divide en virología,
bacteriología y
parasitología.
Inmunopatología
•estudio de
enfermedades
mediante el análisis
de la función
inmunitaria; identifi
cando sobre todo
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Anatomía Patológica
Manejo Integral del Enfermo Clínica
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DIAGNÓSTICO
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Laboratorio
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esta junto al cirujano que
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afectado y se envía al
laboratorio, para que en
aproximadamente una
semana se obtengan los
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Trozo de tejido obtenido de un organismo vivo, para ser
examinado macro y microscópicamente y formular un
diagnostico histopatológico.
BIOPSIA
TiposdeBiopsia
Incisional
Por Aspiración
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Transoperatoria
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Biopsia ecisional: un
órgano o todo un tumor
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Biopsia
incisional:
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parte de un
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endoscópica
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laringoscopia o
broncoscopia
Biopsia por aspiración
con aguja fina: puncionado
un tumor o una masa, es
posible aspirar un buen
número de células
Biopsia por punch: se
obtiene una porción cilíndrica
e piel
Biopsia por trepanación:
se utiliza para obtener
porciones de cartílago o hueso
Biopsia por raspado: es
la remoción de elementos
superficiales de una
neoformación
Biopsia por
expresión: para
ésta se requiere la
aplicación previa de
masaje, para lograr que
el tejido libere material
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Biopsia trans
operatoria: se
realiza durante el acto
quirúrgico y se remite
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patólogo
AUTOPSIA
Autopsia
Clínica
Autopsia
Médico Legal
estudio del cadáver que se hace
generalmente para saber la causa de
muerte.
AUTOPSIA
•necropsia clínica o anatomopatológica o no judicial
•disección del cadáver con el fin de obtener información sobre la
naturaleza, la extensión y las complicaciones de la enfermedad que
sufrió en vida el sujeto autopsiado.
•La iniciativa de realización de la autopsia clínica parte del personal
médico que ha atendido al finado.
•La autopsia clínica debe ser realizada por médicos
anatomopatólogos, con la colaboración de personal auxiliar
cualificado.
AUTOPSIA CLÍNICA
AUTOPSIA
Autopsia Clínica
• Determinar o confirmar la causa de la
muerte.
• Detecta posibles errores diagnósticos o
terapéuticos
• Aclara la rentabilidad y validez de los
nuevos procedimientos diagnósticos y
terapéuticos
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AUTOPSIA
AUTOPSIA MÉDICO-LEGAL
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cadáver, que se
realiza a instancia de
la autoridad judicial
Informar a la
autoridad legal sobre
la causa o causas
que produjeron la
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cadáver puede ser
hospitalaria o
extrahospitalaria.
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determinación de las
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utilización de agujas de gran
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estudio microscópico, respetando
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AUTOPSIA
AUTOPSIAS ALTERNATIVAS O ANÁLISIS
PÓSTUMOS
•Necrotac (Tomografía Computerizada Post mortem) -
1994
•detección de lesiones óseas (vertebrales, costales y
craneales)
•localización de proyectiles y de metralla.
•cadáveres de alto riesgo
•permite descubrir lesiones que no son detectadas con la
autopsia convencional.
•personal especializado en radiodiagnóstico y de equipos
de alto costo.
AUTOPSIA
AUTOPSIAS ALTERNATIVAS O ANÁLISIS
PÓSTUMOS
•Necroresonancia (Resonancia Magnética Post-
mortem)
•detección de anomalías en tejidos blandos.
•estudios post-mortem del cerebro y de la
médula ósea - detectar múltiples procesos
patológicos como la enfermedad de Alzheimer,
la encefalopatía del SIDA o la esclerosis múltiple.
•estudios de muertes intra-útero.
•método complementario en el caso de malos
tratos infantiles.
CITODIAGNÓSTICO
Diagnóstico morfológico basado en los caracteres microscópicos de células y componentes
extracelulares, desprendidos de los órganos espontáneamente u obtenidos por procedimientos que,
en general, son menos invasivos que la biopsia.
Objetivos del Citodiagnóstico
•Colaboración en el diagnóstico y tipificación de neoplasias malignas, mediante la evaluación de las alteraciones de la
morfología del núcleo, del citoplasma y de las relaciones entre las células.
•Diagnóstico específico de algunas lesiones benignas, por ejemplo: tumores benignos, hiperplasias, ciertas infecciones
virales o micóticas.
•Elección de pacientes que deben ser estudiados más profundamente en grupos de alto riesgo para un tipo específico de
cáncer.
•En hematología, examen cualitativo y cuantitativo de los elementos figurados de la sangre periférica (hemograma) y de la
médula ósea (mielograma).
CITODIAGNÓSTICO
Citología
Exfoliativa
Por Aspiración
con Aguja Fina
CITODIAGNÓSTICO
CITODIAGNÓSTICO
Punción directa de lesiones
superficiales palpables
Punción de lesiones profundas no
palpables, dirigida por imágenes.
HISTOLOGÍA
Es la ciencia encargada del estudio morfológico de los tejidos
utilizando para ello como principal herramienta el microscopio óptico
de luz.
HISTOQUÍMICA
Es una variante del estudio histológico que permite la identificación y
localización de compuestos químicos en las células y tejidos. Para
esto provocan reacciones que dan productos insolubles coloreados
visibles al microscopio.
Enfermedades musculares, congénitas, neuromusculares
INMUNOHISTOQUÍMICA E
INMUNOFLUORESCENCIA
La inmuno-histoquímica. Imprescindible en el diagnóstico eficaz de
los linfomas no Hodgkin.
Son técnicas que se basan en la inmunoreactividad específica de
anticuerpos y que permiten detectar antígenos de interés en células y
tejidos. Para lograr ver la unión antígeno-anticuerpo, el anticuerpo
está conjugado a un flouróforo en el caso de la inmunofluorescencia
y a una enzima en la inmunohistoquímica.
MICROSCOPIA
ELECTRÓNICA
Esta técnica permite observar la ultraestructura de tejidos y células
gracias al uso del microscopio electrónico en muestras procesadas
exclusivamente para este fin. En anatomía patológica esta técnica es
imprescindible para el diagnóstico de nefropatías.
Enfermedades respiratorias y metabólicas
CITOMETRÍA DE FLUJOS:
Método rápido objetivo y cuantitativo de análisis de células u
otras partículas en suspensión.
•Dispersión de la luz
•Emisión de luz por los fluorocromos
presentes en la célula al ser excitados por
el rayo luminoso
EL CITOMETRO NECESITA:
FLUIDOS
ÓPTICA
ELECTRÓNICA
Leucemias granulomatosis crónica
SIDA
Infiltracion meningea y cerebral por linfoma no hodgkin
CITOMETRÍA DE FLUJO EN
LEUCEMIA LINFOCÍTICA AGUDA
Citometría de flujo e
inmunohistoquímica
•Determinan el inmunofenotipo de las
células; esto es, la clasificación de las
células de acuerdo con las proteínas
presentes en o sobre las células.
CITOMETRÍA DE FLUJO EN
LEUCEMIA LINFOCÍTICA AGUDA
Este tipo de prueba es muy útil para
determinar el tipo exacto de leucemia
presente. Para el diagnóstico de la
leucemia, se realiza con mayor frecuencia
en las células de la médula ósea, pero
también se puede hacer en las células de
la sangre, los ganglios linfáticos, y otros
fluidos corporales.
BIOLOGÍA MOLECULAR
permite la identificación de alteraciones
génicas en las células tumorales de las
leucemias y linfomas.
El ADN o el ARN para análisis molecular se pueden
extraer, entre otros, de la sangre periférica,
líquidos biológicos, médula ósea, material fijado.
La metodología que aplicamos es la técnica de la reacción en cadena
de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction, PCR) y la de la PCR
inversa (Retro-Transciptional Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)
La medicina molecular es la ciencia biomédica que
utiliza las técnicas de la biología molecular en el
estudio de las enfermedades humanas.
PCR (REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA)
La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una técnica "in vitro" que
imita la habilidad natural de la célula de duplicar el ADN.
La mezcla de reacción se somete a ciclos sucesivos, cada uno correspondiente
a una fase de desnaturalización, una de hibridación y una elongación.
PCR (REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA)
Durante
la desnaturalización, que
se realiza por
calentamiento de la
mezcla a 95ºC, se separan
las dos cadenas del ADN
molde
Durante la hibridación, la
temperatura de incubación
se reduce para permitir el
apareamiento de las bases
de ambos cebadores en el
sitio donde encuentran
una secuencia
complementaria.
Durante la fase de elongación, la
mezcla se calienta a 72ºC y la
enzima Taq ADN polimerasa se
usa para replicar las hebras de
DNA.
La Taq polimerasa comienza el
proceso de extensión de la cadena
complementaria a partir del
extremo 3’ de los cebadores. Al
finalizar cada ciclo, la cantidad de
ADN molde disponible para el ciclo
siguiente aumenta al doble.
PCR (REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA)
Patologías diagnosticadas:
Tuberculosis
Leptospirosis
Por PCR cuantitativa fluorescente
Cromosoma 21: Síndrome de Down (trisomía)
Cromosoma 18: Síndrome de Edwards (trisomía)
Cromosoma 13: Síndrome de Patau (trisomía)
Cromosomas sexuales X e Y:
 Síndrome de Turner: X0 (monosomía)
 Síndrome de Klinefelter: XXY
 Otras aneuploidías: XXX; XYY
INMUNOHISTOQUÍMICA
Es un procedimiento histopatológico que se basa en la utilización de
anticuerpos que se unen específicamente a una sustancia que se quiere
identificar (anticuerpo primario).
Aplicado a un tejido orgánico, el anticuerpo primario se une específicamente
al sustrato y se aprovecha la actividad enzimática para visualizar la unión.
De esta manera se consigue un complejo sustrato-anticuerpos-enzima unido
al lugar donde se encuentre el sustrato y mediante la activación de la enzima
con la adición de su sustrato se genera un producto identificable donde se
encuentre el complejo
EJEMPLOS DE MARCADORES
INMUNOHISTOQUÍMICOS
INMUNOHISTOQUÍMICA
La IHQ es un gran soporte para realizar el diagnóstico diferencial, debido a que el aspecto
espongiforme no es específico de las enfermedades por priones.
enfermedad de Alzheimer (EA)
la enfermedad de Pick´s
la enfermedad de Huntington
demencias del lóbulo frontal
encefalopatías metabólicas
la enfermedad difusa por cuerpos de Lewy
edemas cerebrales y por posibles artefactos del tejido; e incluso se han descrito casos en los que pueden
coexistir la EA y la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob sobre todo en aquellos casos de edad más avanzada
INMUNOFLUORESCENCIA
Inmunofluorescencia
es una propiedad
moléculas
ser irradiadas con energía
electromagnética
emiten radiación de
longitud de onda
característica
permitiendo su
cuantificación.
Corresponde a un grupo de técnicas de inmunotinción
que permiten demostrar una variedad de antígenos
presentes en las células o tejidos utilizando
anticuerpos marcados
Se utilizan como marcadores
compuestos de fluoresceína
que bajo luz ultravioleta
emiten luz de longitud de
onda visible, que depende de
la naturaleza del compuesto
El isotiocianato de
fluoresceína emite
luz verde amarillenta
intensa.
CARACTERÍSTICAS
Cada fluorocromo
tiene un espectro de
emisión y excitación
característicos.
Si se utilizan dos con el
mismo espectro de
excitación pero distinto
espectro de emisión,
se pueden medir dos
características al
mismo tiempo
(fluorescencia de dos
colores).
Una molécula que
fluoresce puede ser
fijada en el anticuerpo
para ser detectada
usando luz UV. (la
Fluoresceína,
Rodamina, Texas Red,
Cy3 y Cy5 )
La
inmunofluorescencia
se utiliza
esencialmente en la
detección de
autoanticuerpos y
anticuerpos contra
antígenos de superficie
de células y tejidos.
PATOLOGÍAS
DIAGNOSTICADAS POR
INMUNOFLUORESCENCIA
Existen 2 tipos de Inmunofluorescencia: la directa (piel) y la indirecta
(suero).
La IF directa permite detectar la presencia y localización de
inmunoglobulinas, componentes del complemento y fibrinógeno.
La IF directa indicada en cualquier tipo de pénfigos, penfigoide
ampollar, herpes gestationes, dermatitis herpetiforme, lupus
eritematoso y otras enfermedades del tejido conectivo.
Detección de virus respiratorios (influenza, parainfluenza, adenovirus,
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Introduccion a la Patología

  • 1. UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS ESCUELA DE MEDICINA Tercer Año Grupo #10 Mercedes A. Robles Galarza
  • 3. DEFINICIÓN Pathos Logos Se encarga del estudio de las causas de la enfermedad y de los cambios asociados a nivel celular, tisular y orgánico, que son responsables de los signos y síntomas que presentan los pacientes
  • 4. TERMINOLOGÍA Término Características de la Enfermedad Factores Causales Mecanismos de la Enfermedad Efectos de la Enfermedad Significado en Patología Evolución Factores Etiológicos/ Etiología Patogenia Secuelas
  • 5. CLASIFICACIÓN Patología General •Cambios Estructurales Básicos comunes a varias enfermedades Especial •Estudio de los cam
  • 6. RELACIÓN DE LA PATOLOGÍA CON OTRAS ASIGNATURAS
  • 7. RELACIÓN CON OTRAS CIENCIAS Histopatología •estudio de enfermedades desde la perspectiva de las anormalidades estructurales, en particular histológicas, de las células y tejidos. La mayor parte de este libro se centra en la histopatología. Hematología •estudio de las enfermedades primarias de la sangre, así como de los efectos de otras entidades sobre la sangre. Patología química •estudio de enfermedades desde la perspectiva de las anormalidades bioquímicas, tanto por trastornos primarios como por los efectos de otras enfermedades sobre los parámetros bioquímicos en la sangre, orina y otros tejidos. Microbiología •estudio de enfermedades desde el punto de vista del aislamiento, identifi cación y tratamiento de infecciones causadas por bacterias, hongos, virus y parásitos. Con frecuencia, la microbiología se divide en virología, bacteriología y parasitología. Inmunopatología •estudio de enfermedades mediante el análisis de la función inmunitaria; identifi cando sobre todo enfermedades primarias del sistema inmunitario, así como los efectos de otras enfermedades sobre dicho sistema.
  • 8. RELACIÓN CON OTRAS CIENCIAS Patología Ramas Causas Etiología Mecanismos de Producción Patogenia Formas de Manifestarse Semiología Alteraciones Funcionales a que da lugar Fisiopatología Alteraciones Morfológicas producidas en las células, tejidos y órganos Anatomía Patológica Manejo Integral del Enfermo Clínica
  • 10. BIOPSIA Biopsia Rápida •Es aquella que el patólogo esta junto al cirujano que esta operando Biopsia Mediata •Es aquella en que se extrae un trozo del tejido afectado y se envía al laboratorio, para que en aproximadamente una semana se obtengan los resultados. Trozo de tejido obtenido de un organismo vivo, para ser examinado macro y microscópicamente y formular un diagnostico histopatológico.
  • 12. Biopsia ecisional: un órgano o todo un tumor es retirado o escindido Biopsia incisional: cuando solo una parte de un tumor es retirado quirúrgicamente
  • 13. Biopsia endoscópica oTracto digestivo- endoscopía oVejiga urinaria-citoscopía oCavidad abdominal- laparoscopia oCavidades articulares- artroscopia oCavidad torácica (parte media)-mediastinoscopia oTráquea y bronquios- laringoscopia o broncoscopia
  • 14. Biopsia por aspiración con aguja fina: puncionado un tumor o una masa, es posible aspirar un buen número de células Biopsia por punch: se obtiene una porción cilíndrica e piel
  • 15. Biopsia por trepanación: se utiliza para obtener porciones de cartílago o hueso Biopsia por raspado: es la remoción de elementos superficiales de una neoformación
  • 16. Biopsia por expresión: para ésta se requiere la aplicación previa de masaje, para lograr que el tejido libere material para su estudio. Biopsia trans operatoria: se realiza durante el acto quirúrgico y se remite inmediatamente al patólogo
  • 17. AUTOPSIA Autopsia Clínica Autopsia Médico Legal estudio del cadáver que se hace generalmente para saber la causa de muerte.
  • 18. AUTOPSIA •necropsia clínica o anatomopatológica o no judicial •disección del cadáver con el fin de obtener información sobre la naturaleza, la extensión y las complicaciones de la enfermedad que sufrió en vida el sujeto autopsiado. •La iniciativa de realización de la autopsia clínica parte del personal médico que ha atendido al finado. •La autopsia clínica debe ser realizada por médicos anatomopatólogos, con la colaboración de personal auxiliar cualificado. AUTOPSIA CLÍNICA
  • 19. AUTOPSIA Autopsia Clínica • Determinar o confirmar la causa de la muerte. • Detecta posibles errores diagnósticos o terapéuticos • Aclara la rentabilidad y validez de los nuevos procedimientos diagnósticos y terapéuticos • Aporta información acerca de las
  • 20. AUTOPSIA AUTOPSIA MÉDICO-LEGAL Estudio sobre el cadáver, que se realiza a instancia de la autoridad judicial Informar a la autoridad legal sobre la causa o causas que produjeron la muerte. La procedencia del cadáver puede ser hospitalaria o extrahospitalaria. Médico forense Obtener datos para la identificación y determinación de las causas y circunstancias de la muerte Obtención de muestras para la realización de análisis complementarios.
  • 21. AUTOPSIA AUTOPSIA MÉDICO- LEGAL estudio del cuerpo del cadáver + todo lo que le rodea (sus ropas, la escena del crimen, etc.). establecer la etiología médico-legal de la muerte (accidental, suicida u homicida) y el esclarecer las circunstancias en las que ésta se produjo.
  • 22. AUTOPSIA AUTOPSIA PSICOLÓGICA determinar la etiología médico-legal de muertes dudosas, donde ni la policía ni el forense tienen suficientes datos para afirmar si se trata de un accidente, de un suicidio o de un homicidio. Consiste en la exploración retrospectiva e indirecta de la personalidad de una persona fallecida. trabajo en equipo, por criminólogos, forenses, psiquiatras y psicólogos.
  • 23. AUTOPSIA AUTOPSIAS ALTERNATIVAS O ANÁLISIS PÓSTUMOS • Autopsia de punciones múltiples: esta técnica permite, mediante la utilización de agujas de gran tamaño, la obtención de muestras de los órganos, para su estudio microscópico, respetando la integridad del cadáver.
  • 24. AUTOPSIA AUTOPSIAS ALTERNATIVAS O ANÁLISIS PÓSTUMOS •Necrotac (Tomografía Computerizada Post mortem) - 1994 •detección de lesiones óseas (vertebrales, costales y craneales) •localización de proyectiles y de metralla. •cadáveres de alto riesgo •permite descubrir lesiones que no son detectadas con la autopsia convencional. •personal especializado en radiodiagnóstico y de equipos de alto costo.
  • 25. AUTOPSIA AUTOPSIAS ALTERNATIVAS O ANÁLISIS PÓSTUMOS •Necroresonancia (Resonancia Magnética Post- mortem) •detección de anomalías en tejidos blandos. •estudios post-mortem del cerebro y de la médula ósea - detectar múltiples procesos patológicos como la enfermedad de Alzheimer, la encefalopatía del SIDA o la esclerosis múltiple. •estudios de muertes intra-útero. •método complementario en el caso de malos tratos infantiles.
  • 26. CITODIAGNÓSTICO Diagnóstico morfológico basado en los caracteres microscópicos de células y componentes extracelulares, desprendidos de los órganos espontáneamente u obtenidos por procedimientos que, en general, son menos invasivos que la biopsia. Objetivos del Citodiagnóstico •Colaboración en el diagnóstico y tipificación de neoplasias malignas, mediante la evaluación de las alteraciones de la morfología del núcleo, del citoplasma y de las relaciones entre las células. •Diagnóstico específico de algunas lesiones benignas, por ejemplo: tumores benignos, hiperplasias, ciertas infecciones virales o micóticas. •Elección de pacientes que deben ser estudiados más profundamente en grupos de alto riesgo para un tipo específico de cáncer. •En hematología, examen cualitativo y cuantitativo de los elementos figurados de la sangre periférica (hemograma) y de la médula ósea (mielograma).
  • 29. CITODIAGNÓSTICO Punción directa de lesiones superficiales palpables Punción de lesiones profundas no palpables, dirigida por imágenes.
  • 30. HISTOLOGÍA Es la ciencia encargada del estudio morfológico de los tejidos utilizando para ello como principal herramienta el microscopio óptico de luz.
  • 31. HISTOQUÍMICA Es una variante del estudio histológico que permite la identificación y localización de compuestos químicos en las células y tejidos. Para esto provocan reacciones que dan productos insolubles coloreados visibles al microscopio. Enfermedades musculares, congénitas, neuromusculares
  • 32. INMUNOHISTOQUÍMICA E INMUNOFLUORESCENCIA La inmuno-histoquímica. Imprescindible en el diagnóstico eficaz de los linfomas no Hodgkin. Son técnicas que se basan en la inmunoreactividad específica de anticuerpos y que permiten detectar antígenos de interés en células y tejidos. Para lograr ver la unión antígeno-anticuerpo, el anticuerpo está conjugado a un flouróforo en el caso de la inmunofluorescencia y a una enzima en la inmunohistoquímica.
  • 33. MICROSCOPIA ELECTRÓNICA Esta técnica permite observar la ultraestructura de tejidos y células gracias al uso del microscopio electrónico en muestras procesadas exclusivamente para este fin. En anatomía patológica esta técnica es imprescindible para el diagnóstico de nefropatías. Enfermedades respiratorias y metabólicas
  • 34. CITOMETRÍA DE FLUJOS: Método rápido objetivo y cuantitativo de análisis de células u otras partículas en suspensión. •Dispersión de la luz •Emisión de luz por los fluorocromos presentes en la célula al ser excitados por el rayo luminoso
  • 36. Leucemias granulomatosis crónica SIDA Infiltracion meningea y cerebral por linfoma no hodgkin
  • 37. CITOMETRÍA DE FLUJO EN LEUCEMIA LINFOCÍTICA AGUDA Citometría de flujo e inmunohistoquímica •Determinan el inmunofenotipo de las células; esto es, la clasificación de las células de acuerdo con las proteínas presentes en o sobre las células.
  • 38. CITOMETRÍA DE FLUJO EN LEUCEMIA LINFOCÍTICA AGUDA Este tipo de prueba es muy útil para determinar el tipo exacto de leucemia presente. Para el diagnóstico de la leucemia, se realiza con mayor frecuencia en las células de la médula ósea, pero también se puede hacer en las células de la sangre, los ganglios linfáticos, y otros fluidos corporales.
  • 39. BIOLOGÍA MOLECULAR permite la identificación de alteraciones génicas en las células tumorales de las leucemias y linfomas. El ADN o el ARN para análisis molecular se pueden extraer, entre otros, de la sangre periférica, líquidos biológicos, médula ósea, material fijado. La metodología que aplicamos es la técnica de la reacción en cadena de la polimerasa (Polymerase Chain Reaction, PCR) y la de la PCR inversa (Retro-Transciptional Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)
  • 40. La medicina molecular es la ciencia biomédica que utiliza las técnicas de la biología molecular en el estudio de las enfermedades humanas.
  • 41.
  • 42.
  • 43. PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA) La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una técnica "in vitro" que imita la habilidad natural de la célula de duplicar el ADN. La mezcla de reacción se somete a ciclos sucesivos, cada uno correspondiente a una fase de desnaturalización, una de hibridación y una elongación.
  • 44. PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA) Durante la desnaturalización, que se realiza por calentamiento de la mezcla a 95ºC, se separan las dos cadenas del ADN molde Durante la hibridación, la temperatura de incubación se reduce para permitir el apareamiento de las bases de ambos cebadores en el sitio donde encuentran una secuencia complementaria. Durante la fase de elongación, la mezcla se calienta a 72ºC y la enzima Taq ADN polimerasa se usa para replicar las hebras de DNA. La Taq polimerasa comienza el proceso de extensión de la cadena complementaria a partir del extremo 3’ de los cebadores. Al finalizar cada ciclo, la cantidad de ADN molde disponible para el ciclo siguiente aumenta al doble.
  • 45. PCR (REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA) Patologías diagnosticadas: Tuberculosis Leptospirosis Por PCR cuantitativa fluorescente Cromosoma 21: Síndrome de Down (trisomía) Cromosoma 18: Síndrome de Edwards (trisomía) Cromosoma 13: Síndrome de Patau (trisomía) Cromosomas sexuales X e Y:  Síndrome de Turner: X0 (monosomía)  Síndrome de Klinefelter: XXY  Otras aneuploidías: XXX; XYY
  • 46. INMUNOHISTOQUÍMICA Es un procedimiento histopatológico que se basa en la utilización de anticuerpos que se unen específicamente a una sustancia que se quiere identificar (anticuerpo primario). Aplicado a un tejido orgánico, el anticuerpo primario se une específicamente al sustrato y se aprovecha la actividad enzimática para visualizar la unión. De esta manera se consigue un complejo sustrato-anticuerpos-enzima unido al lugar donde se encuentre el sustrato y mediante la activación de la enzima con la adición de su sustrato se genera un producto identificable donde se encuentre el complejo
  • 48. INMUNOHISTOQUÍMICA La IHQ es un gran soporte para realizar el diagnóstico diferencial, debido a que el aspecto espongiforme no es específico de las enfermedades por priones. enfermedad de Alzheimer (EA) la enfermedad de Pick´s la enfermedad de Huntington demencias del lóbulo frontal encefalopatías metabólicas la enfermedad difusa por cuerpos de Lewy edemas cerebrales y por posibles artefactos del tejido; e incluso se han descrito casos en los que pueden coexistir la EA y la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob sobre todo en aquellos casos de edad más avanzada
  • 49. INMUNOFLUORESCENCIA Inmunofluorescencia es una propiedad moléculas ser irradiadas con energía electromagnética emiten radiación de longitud de onda característica permitiendo su cuantificación.
  • 50.
  • 51. Corresponde a un grupo de técnicas de inmunotinción que permiten demostrar una variedad de antígenos presentes en las células o tejidos utilizando anticuerpos marcados Se utilizan como marcadores compuestos de fluoresceína que bajo luz ultravioleta emiten luz de longitud de onda visible, que depende de la naturaleza del compuesto El isotiocianato de fluoresceína emite luz verde amarillenta intensa.
  • 52. CARACTERÍSTICAS Cada fluorocromo tiene un espectro de emisión y excitación característicos. Si se utilizan dos con el mismo espectro de excitación pero distinto espectro de emisión, se pueden medir dos características al mismo tiempo (fluorescencia de dos colores). Una molécula que fluoresce puede ser fijada en el anticuerpo para ser detectada usando luz UV. (la Fluoresceína, Rodamina, Texas Red, Cy3 y Cy5 ) La inmunofluorescencia se utiliza esencialmente en la detección de autoanticuerpos y anticuerpos contra antígenos de superficie de células y tejidos.
  • 53. PATOLOGÍAS DIAGNOSTICADAS POR INMUNOFLUORESCENCIA Existen 2 tipos de Inmunofluorescencia: la directa (piel) y la indirecta (suero). La IF directa permite detectar la presencia y localización de inmunoglobulinas, componentes del complemento y fibrinógeno. La IF directa indicada en cualquier tipo de pénfigos, penfigoide ampollar, herpes gestationes, dermatitis herpetiforme, lupus eritematoso y otras enfermedades del tejido conectivo. Detección de virus respiratorios (influenza, parainfluenza, adenovirus, virus herpes, sarampión y parotiditis, así como en bacterias como Bordetella pertussis, Rickettsia rickettsia y Chlamydia trachomatis.