2. REACCIONES Ag - Ac
TÉCNICAS SIMPLES
Por: Sofía Jaramillo Q.

3. OBJETIVOS:
GENERAL:
ESPECÍFICOS:
• Conocer las técnicas simples
empleadas para la detección
de la reacción Ag-Ac.
• Recordar los principios de la
interacción Ag-Ac.
• Entender los principios que
rigen la técnica de éstas
pruebas.
• Encontrarles la aplicación
práctica.

4. CONOCIMIENTOS PREVIOS
• Ag y Ac: Características, estructura
circunstancias que median su unión.
y

5. INTERACCIÓN Ag - Ac
PRIMARIA
• No visible
• Análisis
Específico
Cuantitativo
SECUNDARIA*
• Precipitación
• Aglutinación

6. PRINCIPIO
Antígeno
Precipitación
(Cuantitativa)
Aglutinación
(Semicuantitativa)
Hemólisis
Anticuerpo

7. INMUNODIFUSIÓN
Método más simple y directo para la demostración de las reacciones AgAc.
Ha sido sustituida en su objetivo cuantitativo por: Nefelometría, RIA y
ELISA.

8. DETERMINANTES
Buffer
pH
Temperatura
Concentraciones de Ag
Concentraciones de AcFenómeno de la
Prozona

9. INMUNODIFUSIÓN:
CLASIFICACIÓN
SEGÚN LOS
ELEMENTOS
SEGÚN LA FORMA
DE MOVIMIENTO
Inmunodifusión Única
Lineal
Inmunodifusión Doble
Radial

10. INMUNODIFUSIÓN
ÚNICA O SIMPLE
Técnica de Oudin
Técnica de Mancini
(SRID)
DOBLE
Análisis de
Ouchterlony

11. TÉCNICA DE OUDIN
PROCEDIMIENTO
INTERPRETACIÓN
• Zona de equivalencia.

12. TÉCNICA DE MANCINI
PROCEDIMIENTO (48-72h)
INTERPRETACIÓN
• Relación entre la cantidad
de Ag y el grosor del anillo
formado por el precipitado.
• MÉTODO DE FAHEY: La
concentración de Ag es
proporcional al diámetro del
anillo.

13. UTILIDAD
• SENSIBILIDAD: 1-3μg/ml de Ag.
• Medición de las concentraciones de pp.: IgG,
IgA, IgM. (Para las IgE e IgD se hace una
dilución menor del Ac en Agar  ‘placas de
bajo valor’)

14. TÉCNICA DE OUCHTERLONY
PROCEDIMIENTO (18-24h)
INTERPRETACIÓN
• NO IDENTIDAD: Ag’s ≠’s.
• IDENTIDAD
PARCIAL:
Determinantes antigénicos
parcialmente compartidos
por los Ag’s.
• IDENTIDAD TOTAL: =‘s
Ag.

15. UTILIDAD
• Demostrar la identidad de reacciones
serológicas a diversos agentes infecciosos con
anticuerpos testigo positivos humanos.
• Análisis semicuantitativo en los sistemas
serológicos humanos (titulo aproximado de
precipitación)

16. AGLUTINACIÓN

17. AGLUTINACIÓN
DIRECTA
Bacterias,
INDIRECTA O
PASIVA
Eritrocitos lavados
Eritrocitos
(Formalina,
glutaraldehído, aldehído
pirúvico)
Hongos
Partículas de látex

18. UTILIDAD CLÍNICA:
Prueba
Antiglobulínica o
Prueba de Coombs
Prueba de Fijación
(Aglutinación) en
Látex
Prueba de RoseWaaler

19. FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO

20. FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO: PRUEBAS EN LAS QUE SE
UTILIZA
HBsAg
Ac
Antiplaqueta
AntiDNA
Ig’s
Cadenas
L
Prueba de
Wasserma
n para Sf
Ag. de
Coccidiodes
immitis

21. SENSIBILIDAD
PRUEBA
SENSIBILIDAD
Difusión Radial Aislada
<1-2 mg
Técnica de Ouchterlony
<1mg
Aglutinación
1μg
Fijación del Complemento
1μg

22. CONSULTAR
• Investigue al menos un par de microorganismos
de laboratorio que compartan determinantes
antigénicos.
• Averigüe qué sustancias se adsorben de manera
espontánea a los eritrocitos para generar
hemaglutinación y su utilidad en el laboratorio.
• ¿Qué sustancias permiten acoplar Ag a la
superficie eritrocitaria? Mencione 5.
• ¿Cuál es el procedimiento de lavado de
eritrocitos?

23. BIBLIOGRAFÍA:
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Marín. Barcelona – España. 1973.
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Madrid – España. 2010.
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Revisada. Ed. Médica Panamericana. Madrid - España. 2012.
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