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PRÁCTICA 5
DR. PERCY GENARO SALAS PONCE
DR. CARLOS ANTONIO CALDERÓN DE LA CRUZ
INMUNODIAGNÓSTICO
(DX INMUNOLÓGICO)
REACCIONES ANTÍGENO - ANTICUERPO
ANTÍGENO
• Molécula
• Sitios antigénicos (epítopos)
• Desencadena respuesta
inmunológica
30/05/2020 3
ANTICUERPO
• Molécula
• Funcional y heterogénea
• Unen antígenos mediante
dominio de unión (parátopo)
• Respuesta a estimulaciones
antigénicas
• Inmunoglobulinas (G, M, A, D, E)
30/05/2020 4
Reacción Ag-Ac – FUNDAMENTO
• Reacciones antígeno –
anticuerpo in vitro →
reacciones serológicas
• Detección y cuantificación
de antígenos y/o
anticuerpos (Diagnóstico
de enfermedades
infecciosas)
30/05/2020 5
CARACTERISTICAS SOBRESALIENTES
• Especificidad
• Complejo immune
• Lugar de union
• Afinidad
• Detección de antígenos y anticuerpos
30/05/2020 6
Reacción Ag-Ac – CARACTERÍSTICAS
• Las reacciones Ag-Ac se
producen en 3 etapas:
• Primaria: formación del
complejo Ag-Ac
• Secundaria: conduce a
eventos visibles: aglutinación,
precipitación.
• Terciaria: destrucción del Ag o
su neutralización
30/05/2020 7
Reacción Ag-Ac – CARACTERÍSTICAS
• Enlaces no covalentes
• Unión antígeno – anticuerpo reversible
• Interacción primaria
• Interacción secundaria
30/05/2020 8
Enlaces
no covalentes
30/05/2020 9
TÍTULO
• Inversa de la máxima
dilución de suero que
muestra reacción
observable en una prueba
• Útil para estimar la
concentración del Ac y Ag
• Comparar muestras
• Fenómeno prozona
30/05/2020 10
SEROCONVERSIÓN
• Aparición de anticuerpos o
• Aumento del título de
anticuerpos en cuatro veces
en un período entre 3 y 4
semanas
30/05/2020 11
PRUEBAS SEROLÓGICAS
• Inmunofluorescencia
• Radioinmunoensayo
• Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima
• Inmunocromatografía
• Quimioluminiscencia
• Aglutinación
• Precipitación
• Neutralización toxina - antitoxina
• Neutralización de virus
• Fijación del complemento
• Inmunoelectroblot
30/05/2020 12
TIPOS DE PRUEBAS
INTERACCIÓN SECUNDARIA
• Fase visible de la interacción
antígeno – anticuerpo.
• Económicas
• Sencillas
• Precipitación
• Aglutinación
INTERACCIÓN PRIMARIA
• Interacción antígeno – anticuerpo.
• Mayor sensibilidad
• Mayor especificidad
• ELISA
• Inmunofluorescencia
• Quimioluminiscencia
• Inmunocromatografía
30/05/2020 13
PRUEBAS DE INTERACCIÓN SECUNDARIA
30/05/2020 14
PRECIPITACIÓN
• Antígeno soluble
• Unión con anticuerpo
• Formación de entramado
insoluble (red- precipitado)
• Zona de equivalencia
30/05/2020 15
• Formación de
entramado insoluble
(red- precipitado)
• Zona de equivalencia
30/05/2020 16
FENOMENO DE
PRO-ZONA
FENOMENO DE
POST-ZONA
PRECIPITACIÓN
• En líquidos:
– Tubos de ensayo
30/05/2020 17
• En gel:
– Placas Petri
30/05/2020 18
INMUNODIFUSIÓN RADIAL
• Cuantifica Ig o antígenos solubles
• Difusión de la muestra (Ag ó Ac)
• Matriz semisólida de agar
• Ag ó Ac específico disuelto
• Precipitado visible
• https://www.youtube.com/watch?v=ko3cCY2EHHg
30/05/2020 19
INMUNODIFUSIÓN DOBLE BIDIMENSIONAL
• Método de Ouchterlony
• Placa petri con agar
• Pocillos con Ag y Ac
• Difusión radial
• Bandas de precipitación
• Similitud de antígenos
reaccionantes
• https://www.youtube.com/watch?v=Fnx5CkGRBEM
• https://www.youtube.com/watch?v=hmK7yYr2T54
30/05/2020 20
INMUNOELECTROFORESIS
• Técnica cualitativa (agarosa)
• Identificación de componentes
proteicos
• Dos etapas:
– Separación electroforética
– Difusión y formación de arcos de
precipitación
30/05/2020 21
AGLUTINACIÓN
• Antígeno particulado (insoluble)
• Unión con anticuerpo
• Formación de grumos (aglutinado)
• Zona de equivalencia
• Mayor sensibilidad que precipitación
30/05/2020 22
AGLUTINACIÓN ACTIVA
• Empleo de partícula
aglutinante como antígeno
30/05/2020 23
AGLUTINACIÓN ACTIVA
PARTÍCULA AGLUTINANTE REACCIÓN UTILIDAD DIAGNÓSTICA
GLÓBULOS ROJOS Determinación de grupo sanguíneo y factor RH
GLÓBULOS ROJOS COOMBS INDIRECTO Determinación de sensibilización por incompatibilidad RH
GLÓBULOS ROJOS COOMBS DIRECTO Determinación de Eritroblastosis Fetal
BACTERIAS (BRUCELLA) HUDDLESON Búsqueda de Ac anti Brucella en suero humano
PARÁSITOS (Trypanosoma cruzi) AD – CHAGAS Búsqueda de Ac anti T. cruzi en suero humano
PARÁSITOS (Toxoplasma gondii) AD - Toxo Búsqueda de Ac anti T. gondii en suero humano
30/05/2020 24
AGLUTINACIÓN PASIVA
• Empleo de una partícula
aglutinante inerte a la cual
se le ha unido un antígeno
30/05/2020 25
AGLUTINACIÓN PASIVA
PARTÍCULA AGLUTINANTE REACCIÓN UTILIDAD DIAGNÓSTICA
LÁTEX + gp 120 Búsqueda de anticuerpos anti VIH en suero humano
LÁTEX + sHBV Búsqueda de anticuerpos anti sHBV en suero humano
LÁTEX + estreptolisina O ASTO Búqueda de Ac anti Streptolisina O en suero humano
30/05/2020 26
AGLUTINACIÓN PASIVA DIRECTA
• Basada en la sensibilización de la partícula inerte con el Ag
• Útiles en la detección de Ac en distintos fluidos biológicos
30/05/2020 27
AGLUTINACIÓN PASIVA REVERSA
• Basada en la inmovilización del Ac en la superficie de la partícula inerte
• Útil para la detección de Ag en muestras biológicas
• Anticuerpos monoclonales
30/05/2020 28
FLOCULACIÓN
• Interacción entre Ag soluble y Ac
• Formación de precipitado de partículas muy finas
• Visibles macroscópicamente o microscópicamente
• VDRL
• RPR
30/05/2020 29
AGLUTINACIONES FEBRILES
• Detección semicuantitativa de Ac
• Tifoidea, Paratifoidea y Brucella
• En lámina
• En tubo
• Dilución más alta en que se
observe reacción positiva
• Títulos diagnósticos hasta 8 días
después de la fiebre (Ac Tifoidea)
30/05/2020 30
PROTEÍNA C REACTIVA
• Proteína de fase aguda
• Se incrementa como respuesta
a una inflamación aguda
inespecífica
• Útil en seguimiento y pronóstico
30/05/2020 31
CASO N° 01
• GFR, 60 años, agricultor, presenta
lesiones granulomatosas en
manos, con adenopatías en axilas.
Tiene heridas por espinas en
manos.
• Se ordena toma de muestras para
análisis.
30/05/2020 32
INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección:
------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------Aviso en caso de emergencia: ------------------------------
Antecedentes patológicos familiares: _____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________
Antecedentes patológicos personales: ____________________________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________________________________________________________
Impresión diagnóstica: Micosis subcutánea ________________________________________________________________________________________
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ________________________________________________________________________
Condiciones sanitarias y epidemiológicas: agricultor no usa guantes en sus labores _______________________________________________________
Descripción detallada de las lesiones : granulomatosas en manos, adenopatías axilares ____________________________________________________
FASE PRE ANALÍTICA
33
30/05/2020
Muestra: Raspado??? Aspirado??? Sangre venosa periférica.
Examen: Examen directo, cultivo, inmunodifusión.
Indicaciones para la toma de la muestra:
– Bioseguridad
– Transporte inmediato _________________________________________________________________________________________________________________
Fecha Indicación: _____________________________________________________________________________________________________________
Fecha toma de muestras : ______________________________________________________________________________________________________
Médico Firma
FASE ANALÍTICA
30/05/2020 34
FASE POST ANALÍTICA
REPORTE DE RESULTADOS
• RESULTADOS
• Examen: INMUNODIFUSIÓN DOBLE
• Muestra: Sangre periférica________________________________________________________
• Resultado: Patrón de identidad total para Blastomyces dermatitides
• Fecha y hora de la toma de la muestra: ______________________________________________
• Fecha y tiempo de análisis: _______________________________________________________
• Nombre y firma del analista: ______________________________________________________
• Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada.
• Técnica empleada: ______________________________________________________________
30/05/2020 35
FASE POST ANALÍTICA
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Interpretación
La prueba de Inmunodifusión doble de Ochterlony nos muestra un resultado de patrón de identidad
para Blastomyces dermatitides y nos sugiere que el suero del paciente tiene anticuerpos contra este
hongo.
Correlacionar con la clínica del paciente y el tiempo de enfermedad
La blastomicosis es una enfermedad piogranulomatosa causada por el hongo dimórfico Blastomyces
dermatitides, encontrado con frecuencias en el suelo y sobre la madera. Tiene relación con la
actividad del paciente, quien recibió el tratamiento adecuado y se recuperó.
30/05/2020 36
CASO N° 02
• TGB, 29 años, inicia fiebre de
40°C, nauseas, vómitos,
diarrea y estreñimiento,
cefalea intensa. Antecedente
de ingesta de alimentos de
dudosa preparación.
30/05/2020 37
INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: --------
Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------Aviso en caso de emergencia: ------------------------
Antecedentes patológicos familiares: __________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________________________
Antecedentes patológicos personales: _________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________________________
Impresión diagnóstica: Fiebre tifoidea _________________________________________________________________________________________
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: _____________________________________________________________________
Condiciones sanitarias y epidemiológicas: ingesta de alimentos de dudosa preparación _________________________________________________
Descripción detallada de las lesiones : fiebre, náusea, vómitos, diarrea, estreñimiento, cefalea intensa ____________________________________
FASE PRE ANALÍTICA
38
30/05/2020
Muestra: Sangre venosa periférica.
Examen: Aglutinaciones febriles, hemocultivo, hemograma
Indicaciones para la toma de la muestra:
– Inicio de pico febril
– Mínimo dos muestras ______________________________________________________________________________________________________________
Fecha Indicación: __________________________________________________________________________________________________________
Fecha toma de muestras : ___________________________________________________________________________________________________
Médico Firma
FASE ANALÍTICA
30/05/2020 39
FASE POST ANALÍTICA
REPORTE DE RESULTADOS
RESULTADOS
• Examen: Aglutinaciones febriles
• Muestra: sangre periférica___________________________________________________________
• Resultado:
• Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________________________________________
• Fecha y tiempo de análisis: ___________________________________________________________
• Nombre y firma del analista: __________________________________________________________
• Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada.
• Técnica empleada: _________________________________________________________________
PRUEBA RESULTADO
TÍFICO O 1:160
TÍFICO H 1:320
PARATÍFICO A 1:20
PARATÍFICO B 1:20
BRUCELLA NEG
30/05/2020 40
FASE POST ANALÍTICA
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Interpretación
La prueba muestra títulos elevados para anticuerpos contra el antígeno O y H de Salmonella typhi,
estos títulos son diagnósticos.
Correlacionar con la clínica del paciente y el tiempo de enfermedad pues la positividad y los títulos
elevados se presentan después de la 2da semana de la fiebre.
Optimizar medidas de bioseguridad.
De ser posible se solicitará coprocultivo, hemocultivo y/o mielocultivo para aislamiento e identificación
del agente etiológico, además de pruebas de sensibilidad y resistencia a los antimicrobianos.
30/05/2020 41
CASO N° 03
• HGB, 19 años, consulta porque a
su pareja le ha salido una úlcera
no dolorosa en el glande y ella se
siente preocupada.
• Y ahora ?????????
30/05/2020 42
INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: --------
Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------Aviso en caso de emergencia: ------------------------
Antecedentes patológicos familiares: __________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________________________
Antecedentes patológicos personales: _________________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________________________________________________
Impresión diagnóstica: Sífilis _________________________________________________________________________________________________
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: _____________________________________________________________________
Condiciones sanitarias y epidemiológicas: contacto con pareja infectada con sd de úlcera genital compatible con sífilis primaria
_________________________________________________________________________________________________________________________
Descripción detallada de las lesiones : _________________________________________________________________________________________
FASE PRE ANALÍTICA
43
30/05/2020
Muestra: Sangre venosa periférica.
Examen: VDRL, RPR
Indicaciones para la toma de la muestra:
– Ayunas
– Bioseguridad ______________________________________________________________________________________________________________________
Fecha Indicación: __________________________________________________________________________________________________________
Fecha toma de muestras : ___________________________________________________________________________________________________
Médico Firma
FASE ANALÍTICA
30/05/2020 44
FASE POST ANALÍTICA
REPORTE DE RESULTADOS
RESULTADOS
• Examen: VDRL - RPR
• Muestra: sangre periférica_________________________________________________
• Resultado: POSITIVO!!!!!!!!!!
• Fecha y hora de la toma de la muestra: _______________________________________
• Fecha y tiempo de análisis: _________________________________________________
• Nombre y firma del analista: _______________________________________________
• Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada.
• Técnica empleada: _______________________________________________________
30/05/2020 45
FASE POST ANALÍTICA
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Interpretación
La prueba de VDRL y/o RPR son de tamizaje o screening en la búsqueda de reacción ante infección
por Treponema pallidum pallidum. Cabe mencionar que no es una prueba treponémica, por lo que su
especificidad hay que relacionarla con la clínica del paciente. Esta prueba usa el principio de
floculación y no es de aglutinación.
Correlacionar con la clínica del paciente y el tiempo de enfermedad
Treponema pallidum es una bacteria de la familia de las espiroquetas, causante de la sífilis,
enfermedad de transmisión sexual, que se previene y además tiene tratamiento.
30/05/2020 46
PRUEBAS DE INTERACCIÓN PRIMARIA
INMUNOCROMATOGAFÍA
30/05/2020 48
ELISA
• Ensayo inmunoabsorbente ligado
a enzima
• Detecta antígenos o anticuerpos
• Cambio de color desencadenado
por una enzima
30/05/2020 49
ELISA
• Resultados cualitativos
y/o cuantitativos
• Enzimas utilizadas:
– Peroxidasa
– Fosfatasa alcalina
– Glucosa oxidasa
– Acetilcolinesterasa
– Lisozima
30/05/2020 50
DETECCIÓN DE ANTÍGENO
• Ejemplo: HBsAg
– AcHBsAg ligado a fase sólida
– Suero de paciente
– Conjugado (Ac marcado con
enzima)
– Substrato cromogénico
30/05/2020 51
DETECCIÓN DE ANTICUERPO
• No competitivo
• Competitivo
• Captura
30/05/2020 52
EIA NO COMPETITIVO
• Ag específico ligado a
fase sólida
• Suero del paciente
• Conjugado
• Sustrato
cromogénico
30/05/2020 53
EIA COMPETITIVO
• Ag específico
ligado a fase
sólida
• Suero del
paciente
mezclado con
el conjugado
• Sustrato
cromogénico
30/05/2020 54
EIA DE CAPTURA
• Diseñado para detectar
un tipo específico de Ac
• Ac específico (Ig M ó Ig
G) ligado a fase sólida
• Suero del paciente
• Ag específico
• Sustrato cromogénico
30/05/2020 55
INMUNOFLUORESCENCIA
• Interacción Ag Ac
• Marcaje con sustancia
fluorescente
• Uso de microscopio de
fluorescencia
• Detecta Ag y Ac
– Inmunofluorescencia directa
– Inmunofluorescencia indirecta
30/05/2020 56
INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
• Aplicada a cortes de tejidos, o extendidos de microorganismos
• Detecta Ag
• FITC (isotiocianato de fluoresceína)
30/05/2020 57
INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
• Detecta Ac
• Puede diferenciar Ig M e Ig G
30/05/2020 58
QUIMIOLUMINISCENCIA
• Emisión de luz durante una reacción química
• Excelente sensibilidad
• Los marcadores quimioluminiscentes pueden ser unidos a Ag y/o Ac
• Luminol, ésteres de acridinio, peroxioxalato, dioxietano, tris - rutenio
30/05/2020 59
CASO N° 01
• WDE, 564 años, acude a
consulta prequirúrgica por Ca
de próstata, le indican una
serie de exámenes dentro del
riesgo quirúrgico.
30/05/2020 60
INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. --------------
Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------
Aviso en caso de emergencia: ------------------------------
Antecedentes patológicos familiares: ___________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Antecedentes patológicos personales: __________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Impresión diagnóstica: Cáncer de próstata – RQ __________________________________________________________
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ______________________________________________
Condiciones sanitarias y epidemiológicas: _______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Descripción detallada de las lesiones : __________________________________________________________________
FASE PRE ANALÍTICA
61
30/05/2020
Muestra: Sangre venosa periférica.
Examen: ELISA para VIH
Indicaciones para la toma de la muestra:
– Ayunas
– Bioseguridad
_________________________________________________________________________________________________________
Fecha Indicación: ___________________________________________________________________________________
Fecha toma de muestras : ____________________________________________________________________________
Médico Firma
FASE ANALÍTICA
30/05/2020 62
FASE POST ANALÍTICA
REPORTE DE RESULTADOS
RESULTADOS
• Examen: ELISA para VIH
• Muestra: Sangre periférica_______________________
• Resultado: Positivo, en la primera y segunda muestra
• Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________
• Fecha y tiempo de análisis: ___________________________
• Nombre y firma del analista: _______________________________
• Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada.
• Técnica empleada: _________________________________________
30/05/2020 63
FASE POST ANALÍTICA
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Interpretación
La prueba ELISA para VIH es una prueba de screening, tamizaje, cribado, cuya
sensibilidad está en más del 90% y se utiliza como primera prueba en
poblaciones con riesgo bajo de contaminación y no proporciona diagnóstico
definitivo, el manejo obliga a realizar prebas confirmatorias como el Western Blot
y/o la Inmunofluorescencia.
Se cita al paciente para la toma de una nueva muestra que será procesada con la
metodología de inmunofluorescencia.
30/05/2020 64
INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. --------------
Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------
Aviso en caso de emergencia: ------------------------------
Antecedentes patológicos familiares: ___________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Antecedentes patológicos personales: __________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Impresión diagnóstica: VIH por ELISA ___________________________________________________________________
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ______________________________________________
Condiciones sanitarias y epidemiológicas: _______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Descripción detallada de las lesiones : __________________________________________________________________
FASE PRE ANALÍTICA
65
30/05/2020
Muestra: Sangre venosa periférica.
Examen: Inmunofluorescencia (IFI) para VIH
Indicaciones para la toma de la muestra:
– Ayunas
– Bioseguridad
_________________________________________________________________________________________________________
Fecha Indicación: ___________________________________________________________________________________
Fecha toma de muestras : ____________________________________________________________________________
Médico Firma
FASE ANALÍTICA
30/05/2020 66
FASE POST ANALÍTICA
REPORTE DE RESULTADOS
RESULTADOS
• Examen: Inmunofluorescencia (IFA) para VIH
• Muestra: sangre periférica_______________________
• Resultado: Negativo en la primera y segunda muestra
• Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________
• Fecha y tiempo de análisis: ___________________________
• Nombre y firma del analista: _______________________________
• Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada.
• Técnica empleada: _________________________________________
30/05/2020 67
FASE POST ANALÍTICA
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Interpretación
La prueba de Inmunofluoresecencia (IFA) para VIH es una prueba confirmatoria,
cuya especificidad es de más de 99,9% y se utiliza para confirmar un hallazgo
positivo en ELISA.
Se cita al paciente dentro de 6 meses para un control.
El control salió positivo !!!!!!!
30/05/2020 68
CASO N° 02
• CST, 28 años, consulta por
ictericia, fiebre y dolor en
el Hipocondrio derecho.
Al examen clínico:
Hepatomegalia. Se
ordenan exámenes
30/05/2020 69
INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS
Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. --------------
Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------
Aviso en caso de emergencia: ------------------------------
Antecedentes patológicos familiares: ___________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Antecedentes patológicos personales: cirugía para banda gástrica con transfusión sanguínea en clínica particular _____
__________________________________________________________________________________________________
Impresión diagnóstica: Hepatitis B _____________________________________________________________________
Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ______________________________________________
Condiciones sanitarias y epidemiológicas: _______________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________
Descripción detallada de las lesiones : __________________________________________________________________
FASE PRE ANALÍTICA
70
30/05/2020
Muestra: Sangre venosa periférica.
Examen: Perfil de Hepatitis B por quimioluminiscencia
Indicaciones para la toma de la muestra:
– Ayunas
– Bioseguridad
_________________________________________________________________________________________________________
Fecha Indicación: ___________________________________________________________________________________
Fecha toma de muestras : ____________________________________________________________________________
Médico Firma
FASE ANALÍTICA
30/05/2020 71
FASE POST ANALÍTICA
REPORTE DE RESULTADOS
RESULTADOS
• Examen: Perfil de Hepatitis B por quimioluminiscencia
• Muestra: sangre periférica_______________________
• Resultado:
• Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________
• Fecha y tiempo de análisis: ___________________________
• Nombre y firma del analista: _______________________________
• Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada.
• Técnica empleada: _________________________________________
PRUEBA RESULTADO
HBs Ag Positivo
Hbe Ag Positivo
HBc Ac total Positivo
HBc Ac Ig M Positivo
Ac HBs Ag Negativo
30/05/2020 72
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Interpretación
La quimioluminiscencia es una metodología muy sensible, utilizada en el diagnóstico de muchas
enfermedades infecciosas, entre ellas la Hepatitis B, midiendo diferentes marcadores de infección, sean Ag o
Ac que nos van a permitir diagnosticar la enfermedad y determinar la fase en que se encuentra.
30/05/2020 73
30/05/2020 74

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  • 1. PRÁCTICA 5 DR. PERCY GENARO SALAS PONCE DR. CARLOS ANTONIO CALDERÓN DE LA CRUZ
  • 3. ANTÍGENO • Molécula • Sitios antigénicos (epítopos) • Desencadena respuesta inmunológica 30/05/2020 3
  • 4. ANTICUERPO • Molécula • Funcional y heterogénea • Unen antígenos mediante dominio de unión (parátopo) • Respuesta a estimulaciones antigénicas • Inmunoglobulinas (G, M, A, D, E) 30/05/2020 4
  • 5. Reacción Ag-Ac – FUNDAMENTO • Reacciones antígeno – anticuerpo in vitro → reacciones serológicas • Detección y cuantificación de antígenos y/o anticuerpos (Diagnóstico de enfermedades infecciosas) 30/05/2020 5
  • 6. CARACTERISTICAS SOBRESALIENTES • Especificidad • Complejo immune • Lugar de union • Afinidad • Detección de antígenos y anticuerpos 30/05/2020 6
  • 7. Reacción Ag-Ac – CARACTERÍSTICAS • Las reacciones Ag-Ac se producen en 3 etapas: • Primaria: formación del complejo Ag-Ac • Secundaria: conduce a eventos visibles: aglutinación, precipitación. • Terciaria: destrucción del Ag o su neutralización 30/05/2020 7
  • 8. Reacción Ag-Ac – CARACTERÍSTICAS • Enlaces no covalentes • Unión antígeno – anticuerpo reversible • Interacción primaria • Interacción secundaria 30/05/2020 8
  • 10. TÍTULO • Inversa de la máxima dilución de suero que muestra reacción observable en una prueba • Útil para estimar la concentración del Ac y Ag • Comparar muestras • Fenómeno prozona 30/05/2020 10
  • 11. SEROCONVERSIÓN • Aparición de anticuerpos o • Aumento del título de anticuerpos en cuatro veces en un período entre 3 y 4 semanas 30/05/2020 11
  • 12. PRUEBAS SEROLÓGICAS • Inmunofluorescencia • Radioinmunoensayo • Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima • Inmunocromatografía • Quimioluminiscencia • Aglutinación • Precipitación • Neutralización toxina - antitoxina • Neutralización de virus • Fijación del complemento • Inmunoelectroblot 30/05/2020 12
  • 13. TIPOS DE PRUEBAS INTERACCIÓN SECUNDARIA • Fase visible de la interacción antígeno – anticuerpo. • Económicas • Sencillas • Precipitación • Aglutinación INTERACCIÓN PRIMARIA • Interacción antígeno – anticuerpo. • Mayor sensibilidad • Mayor especificidad • ELISA • Inmunofluorescencia • Quimioluminiscencia • Inmunocromatografía 30/05/2020 13
  • 14. PRUEBAS DE INTERACCIÓN SECUNDARIA 30/05/2020 14
  • 15. PRECIPITACIÓN • Antígeno soluble • Unión con anticuerpo • Formación de entramado insoluble (red- precipitado) • Zona de equivalencia 30/05/2020 15
  • 16. • Formación de entramado insoluble (red- precipitado) • Zona de equivalencia 30/05/2020 16 FENOMENO DE PRO-ZONA FENOMENO DE POST-ZONA
  • 17. PRECIPITACIÓN • En líquidos: – Tubos de ensayo 30/05/2020 17 • En gel: – Placas Petri
  • 19. INMUNODIFUSIÓN RADIAL • Cuantifica Ig o antígenos solubles • Difusión de la muestra (Ag ó Ac) • Matriz semisólida de agar • Ag ó Ac específico disuelto • Precipitado visible • https://www.youtube.com/watch?v=ko3cCY2EHHg 30/05/2020 19
  • 20. INMUNODIFUSIÓN DOBLE BIDIMENSIONAL • Método de Ouchterlony • Placa petri con agar • Pocillos con Ag y Ac • Difusión radial • Bandas de precipitación • Similitud de antígenos reaccionantes • https://www.youtube.com/watch?v=Fnx5CkGRBEM • https://www.youtube.com/watch?v=hmK7yYr2T54 30/05/2020 20
  • 21. INMUNOELECTROFORESIS • Técnica cualitativa (agarosa) • Identificación de componentes proteicos • Dos etapas: – Separación electroforética – Difusión y formación de arcos de precipitación 30/05/2020 21
  • 22. AGLUTINACIÓN • Antígeno particulado (insoluble) • Unión con anticuerpo • Formación de grumos (aglutinado) • Zona de equivalencia • Mayor sensibilidad que precipitación 30/05/2020 22
  • 23. AGLUTINACIÓN ACTIVA • Empleo de partícula aglutinante como antígeno 30/05/2020 23
  • 24. AGLUTINACIÓN ACTIVA PARTÍCULA AGLUTINANTE REACCIÓN UTILIDAD DIAGNÓSTICA GLÓBULOS ROJOS Determinación de grupo sanguíneo y factor RH GLÓBULOS ROJOS COOMBS INDIRECTO Determinación de sensibilización por incompatibilidad RH GLÓBULOS ROJOS COOMBS DIRECTO Determinación de Eritroblastosis Fetal BACTERIAS (BRUCELLA) HUDDLESON Búsqueda de Ac anti Brucella en suero humano PARÁSITOS (Trypanosoma cruzi) AD – CHAGAS Búsqueda de Ac anti T. cruzi en suero humano PARÁSITOS (Toxoplasma gondii) AD - Toxo Búsqueda de Ac anti T. gondii en suero humano 30/05/2020 24
  • 25. AGLUTINACIÓN PASIVA • Empleo de una partícula aglutinante inerte a la cual se le ha unido un antígeno 30/05/2020 25
  • 26. AGLUTINACIÓN PASIVA PARTÍCULA AGLUTINANTE REACCIÓN UTILIDAD DIAGNÓSTICA LÁTEX + gp 120 Búsqueda de anticuerpos anti VIH en suero humano LÁTEX + sHBV Búsqueda de anticuerpos anti sHBV en suero humano LÁTEX + estreptolisina O ASTO Búqueda de Ac anti Streptolisina O en suero humano 30/05/2020 26
  • 27. AGLUTINACIÓN PASIVA DIRECTA • Basada en la sensibilización de la partícula inerte con el Ag • Útiles en la detección de Ac en distintos fluidos biológicos 30/05/2020 27
  • 28. AGLUTINACIÓN PASIVA REVERSA • Basada en la inmovilización del Ac en la superficie de la partícula inerte • Útil para la detección de Ag en muestras biológicas • Anticuerpos monoclonales 30/05/2020 28
  • 29. FLOCULACIÓN • Interacción entre Ag soluble y Ac • Formación de precipitado de partículas muy finas • Visibles macroscópicamente o microscópicamente • VDRL • RPR 30/05/2020 29
  • 30. AGLUTINACIONES FEBRILES • Detección semicuantitativa de Ac • Tifoidea, Paratifoidea y Brucella • En lámina • En tubo • Dilución más alta en que se observe reacción positiva • Títulos diagnósticos hasta 8 días después de la fiebre (Ac Tifoidea) 30/05/2020 30
  • 31. PROTEÍNA C REACTIVA • Proteína de fase aguda • Se incrementa como respuesta a una inflamación aguda inespecífica • Útil en seguimiento y pronóstico 30/05/2020 31
  • 32. CASO N° 01 • GFR, 60 años, agricultor, presenta lesiones granulomatosas en manos, con adenopatías en axilas. Tiene heridas por espinas en manos. • Se ordena toma de muestras para análisis. 30/05/2020 32
  • 33. INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------Aviso en caso de emergencia: ------------------------------ Antecedentes patológicos familiares: _____________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________ Antecedentes patológicos personales: ____________________________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________________________________________________________ Impresión diagnóstica: Micosis subcutánea ________________________________________________________________________________________ Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ________________________________________________________________________ Condiciones sanitarias y epidemiológicas: agricultor no usa guantes en sus labores _______________________________________________________ Descripción detallada de las lesiones : granulomatosas en manos, adenopatías axilares ____________________________________________________ FASE PRE ANALÍTICA 33 30/05/2020 Muestra: Raspado??? Aspirado??? Sangre venosa periférica. Examen: Examen directo, cultivo, inmunodifusión. Indicaciones para la toma de la muestra: – Bioseguridad – Transporte inmediato _________________________________________________________________________________________________________________ Fecha Indicación: _____________________________________________________________________________________________________________ Fecha toma de muestras : ______________________________________________________________________________________________________ Médico Firma
  • 35. FASE POST ANALÍTICA REPORTE DE RESULTADOS • RESULTADOS • Examen: INMUNODIFUSIÓN DOBLE • Muestra: Sangre periférica________________________________________________________ • Resultado: Patrón de identidad total para Blastomyces dermatitides • Fecha y hora de la toma de la muestra: ______________________________________________ • Fecha y tiempo de análisis: _______________________________________________________ • Nombre y firma del analista: ______________________________________________________ • Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada. • Técnica empleada: ______________________________________________________________ 30/05/2020 35
  • 36. FASE POST ANALÍTICA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Interpretación La prueba de Inmunodifusión doble de Ochterlony nos muestra un resultado de patrón de identidad para Blastomyces dermatitides y nos sugiere que el suero del paciente tiene anticuerpos contra este hongo. Correlacionar con la clínica del paciente y el tiempo de enfermedad La blastomicosis es una enfermedad piogranulomatosa causada por el hongo dimórfico Blastomyces dermatitides, encontrado con frecuencias en el suelo y sobre la madera. Tiene relación con la actividad del paciente, quien recibió el tratamiento adecuado y se recuperó. 30/05/2020 36
  • 37. CASO N° 02 • TGB, 29 años, inicia fiebre de 40°C, nauseas, vómitos, diarrea y estreñimiento, cefalea intensa. Antecedente de ingesta de alimentos de dudosa preparación. 30/05/2020 37
  • 38. INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------Aviso en caso de emergencia: ------------------------ Antecedentes patológicos familiares: __________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________________________________ Antecedentes patológicos personales: _________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________________________________ Impresión diagnóstica: Fiebre tifoidea _________________________________________________________________________________________ Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: _____________________________________________________________________ Condiciones sanitarias y epidemiológicas: ingesta de alimentos de dudosa preparación _________________________________________________ Descripción detallada de las lesiones : fiebre, náusea, vómitos, diarrea, estreñimiento, cefalea intensa ____________________________________ FASE PRE ANALÍTICA 38 30/05/2020 Muestra: Sangre venosa periférica. Examen: Aglutinaciones febriles, hemocultivo, hemograma Indicaciones para la toma de la muestra: – Inicio de pico febril – Mínimo dos muestras ______________________________________________________________________________________________________________ Fecha Indicación: __________________________________________________________________________________________________________ Fecha toma de muestras : ___________________________________________________________________________________________________ Médico Firma
  • 40. FASE POST ANALÍTICA REPORTE DE RESULTADOS RESULTADOS • Examen: Aglutinaciones febriles • Muestra: sangre periférica___________________________________________________________ • Resultado: • Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________________________________________ • Fecha y tiempo de análisis: ___________________________________________________________ • Nombre y firma del analista: __________________________________________________________ • Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada. • Técnica empleada: _________________________________________________________________ PRUEBA RESULTADO TÍFICO O 1:160 TÍFICO H 1:320 PARATÍFICO A 1:20 PARATÍFICO B 1:20 BRUCELLA NEG 30/05/2020 40
  • 41. FASE POST ANALÍTICA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Interpretación La prueba muestra títulos elevados para anticuerpos contra el antígeno O y H de Salmonella typhi, estos títulos son diagnósticos. Correlacionar con la clínica del paciente y el tiempo de enfermedad pues la positividad y los títulos elevados se presentan después de la 2da semana de la fiebre. Optimizar medidas de bioseguridad. De ser posible se solicitará coprocultivo, hemocultivo y/o mielocultivo para aislamiento e identificación del agente etiológico, además de pruebas de sensibilidad y resistencia a los antimicrobianos. 30/05/2020 41
  • 42. CASO N° 03 • HGB, 19 años, consulta porque a su pareja le ha salido una úlcera no dolorosa en el glande y ella se siente preocupada. • Y ahora ????????? 30/05/2020 42
  • 43. INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: -------------------Aviso en caso de emergencia: ------------------------ Antecedentes patológicos familiares: __________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________________________________ Antecedentes patológicos personales: _________________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________________________________________ Impresión diagnóstica: Sífilis _________________________________________________________________________________________________ Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: _____________________________________________________________________ Condiciones sanitarias y epidemiológicas: contacto con pareja infectada con sd de úlcera genital compatible con sífilis primaria _________________________________________________________________________________________________________________________ Descripción detallada de las lesiones : _________________________________________________________________________________________ FASE PRE ANALÍTICA 43 30/05/2020 Muestra: Sangre venosa periférica. Examen: VDRL, RPR Indicaciones para la toma de la muestra: – Ayunas – Bioseguridad ______________________________________________________________________________________________________________________ Fecha Indicación: __________________________________________________________________________________________________________ Fecha toma de muestras : ___________________________________________________________________________________________________ Médico Firma
  • 45. FASE POST ANALÍTICA REPORTE DE RESULTADOS RESULTADOS • Examen: VDRL - RPR • Muestra: sangre periférica_________________________________________________ • Resultado: POSITIVO!!!!!!!!!! • Fecha y hora de la toma de la muestra: _______________________________________ • Fecha y tiempo de análisis: _________________________________________________ • Nombre y firma del analista: _______________________________________________ • Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada. • Técnica empleada: _______________________________________________________ 30/05/2020 45
  • 46. FASE POST ANALÍTICA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Interpretación La prueba de VDRL y/o RPR son de tamizaje o screening en la búsqueda de reacción ante infección por Treponema pallidum pallidum. Cabe mencionar que no es una prueba treponémica, por lo que su especificidad hay que relacionarla con la clínica del paciente. Esta prueba usa el principio de floculación y no es de aglutinación. Correlacionar con la clínica del paciente y el tiempo de enfermedad Treponema pallidum es una bacteria de la familia de las espiroquetas, causante de la sífilis, enfermedad de transmisión sexual, que se previene y además tiene tratamiento. 30/05/2020 46
  • 49. ELISA • Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima • Detecta antígenos o anticuerpos • Cambio de color desencadenado por una enzima 30/05/2020 49
  • 50. ELISA • Resultados cualitativos y/o cuantitativos • Enzimas utilizadas: – Peroxidasa – Fosfatasa alcalina – Glucosa oxidasa – Acetilcolinesterasa – Lisozima 30/05/2020 50
  • 51. DETECCIÓN DE ANTÍGENO • Ejemplo: HBsAg – AcHBsAg ligado a fase sólida – Suero de paciente – Conjugado (Ac marcado con enzima) – Substrato cromogénico 30/05/2020 51
  • 52. DETECCIÓN DE ANTICUERPO • No competitivo • Competitivo • Captura 30/05/2020 52
  • 53. EIA NO COMPETITIVO • Ag específico ligado a fase sólida • Suero del paciente • Conjugado • Sustrato cromogénico 30/05/2020 53
  • 54. EIA COMPETITIVO • Ag específico ligado a fase sólida • Suero del paciente mezclado con el conjugado • Sustrato cromogénico 30/05/2020 54
  • 55. EIA DE CAPTURA • Diseñado para detectar un tipo específico de Ac • Ac específico (Ig M ó Ig G) ligado a fase sólida • Suero del paciente • Ag específico • Sustrato cromogénico 30/05/2020 55
  • 56. INMUNOFLUORESCENCIA • Interacción Ag Ac • Marcaje con sustancia fluorescente • Uso de microscopio de fluorescencia • Detecta Ag y Ac – Inmunofluorescencia directa – Inmunofluorescencia indirecta 30/05/2020 56
  • 57. INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA • Aplicada a cortes de tejidos, o extendidos de microorganismos • Detecta Ag • FITC (isotiocianato de fluoresceína) 30/05/2020 57
  • 58. INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA • Detecta Ac • Puede diferenciar Ig M e Ig G 30/05/2020 58
  • 59. QUIMIOLUMINISCENCIA • Emisión de luz durante una reacción química • Excelente sensibilidad • Los marcadores quimioluminiscentes pueden ser unidos a Ag y/o Ac • Luminol, ésteres de acridinio, peroxioxalato, dioxietano, tris - rutenio 30/05/2020 59
  • 60. CASO N° 01 • WDE, 564 años, acude a consulta prequirúrgica por Ca de próstata, le indican una serie de exámenes dentro del riesgo quirúrgico. 30/05/2020 60
  • 61. INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: ------------------- Aviso en caso de emergencia: ------------------------------ Antecedentes patológicos familiares: ___________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Antecedentes patológicos personales: __________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Impresión diagnóstica: Cáncer de próstata – RQ __________________________________________________________ Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ______________________________________________ Condiciones sanitarias y epidemiológicas: _______________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Descripción detallada de las lesiones : __________________________________________________________________ FASE PRE ANALÍTICA 61 30/05/2020 Muestra: Sangre venosa periférica. Examen: ELISA para VIH Indicaciones para la toma de la muestra: – Ayunas – Bioseguridad _________________________________________________________________________________________________________ Fecha Indicación: ___________________________________________________________________________________ Fecha toma de muestras : ____________________________________________________________________________ Médico Firma
  • 63. FASE POST ANALÍTICA REPORTE DE RESULTADOS RESULTADOS • Examen: ELISA para VIH • Muestra: Sangre periférica_______________________ • Resultado: Positivo, en la primera y segunda muestra • Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________ • Fecha y tiempo de análisis: ___________________________ • Nombre y firma del analista: _______________________________ • Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada. • Técnica empleada: _________________________________________ 30/05/2020 63
  • 64. FASE POST ANALÍTICA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Interpretación La prueba ELISA para VIH es una prueba de screening, tamizaje, cribado, cuya sensibilidad está en más del 90% y se utiliza como primera prueba en poblaciones con riesgo bajo de contaminación y no proporciona diagnóstico definitivo, el manejo obliga a realizar prebas confirmatorias como el Western Blot y/o la Inmunofluorescencia. Se cita al paciente para la toma de una nueva muestra que será procesada con la metodología de inmunofluorescencia. 30/05/2020 64
  • 65. INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: ------------------- Aviso en caso de emergencia: ------------------------------ Antecedentes patológicos familiares: ___________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Antecedentes patológicos personales: __________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Impresión diagnóstica: VIH por ELISA ___________________________________________________________________ Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ______________________________________________ Condiciones sanitarias y epidemiológicas: _______________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Descripción detallada de las lesiones : __________________________________________________________________ FASE PRE ANALÍTICA 65 30/05/2020 Muestra: Sangre venosa periférica. Examen: Inmunofluorescencia (IFI) para VIH Indicaciones para la toma de la muestra: – Ayunas – Bioseguridad _________________________________________________________________________________________________________ Fecha Indicación: ___________________________________________________________________________________ Fecha toma de muestras : ____________________________________________________________________________ Médico Firma
  • 67. FASE POST ANALÍTICA REPORTE DE RESULTADOS RESULTADOS • Examen: Inmunofluorescencia (IFA) para VIH • Muestra: sangre periférica_______________________ • Resultado: Negativo en la primera y segunda muestra • Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________ • Fecha y tiempo de análisis: ___________________________ • Nombre y firma del analista: _______________________________ • Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada. • Técnica empleada: _________________________________________ 30/05/2020 67
  • 68. FASE POST ANALÍTICA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Interpretación La prueba de Inmunofluoresecencia (IFA) para VIH es una prueba confirmatoria, cuya especificidad es de más de 99,9% y se utiliza para confirmar un hallazgo positivo en ELISA. Se cita al paciente dentro de 6 meses para un control. El control salió positivo !!!!!!! 30/05/2020 68
  • 69. CASO N° 02 • CST, 28 años, consulta por ictericia, fiebre y dolor en el Hipocondrio derecho. Al examen clínico: Hepatomegalia. Se ordenan exámenes 30/05/2020 69
  • 70. INDICACIÓN U ORDEN DE ANÁLISIS Paciente: (apellido paterno, materno, nombre) Sexo: M --- F ---. Edad: --------- Estado civil: --------- H.C. -------------- Procedencia: -------- Dirección: ------------------------- Teléfonos: ----------- DNI: ------------ Correo electrónico: ------------------- Aviso en caso de emergencia: ------------------------------ Antecedentes patológicos familiares: ___________________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Antecedentes patológicos personales: cirugía para banda gástrica con transfusión sanguínea en clínica particular _____ __________________________________________________________________________________________________ Impresión diagnóstica: Hepatitis B _____________________________________________________________________ Tratamiento con antibióticos o antisépticos u otros de interés: ______________________________________________ Condiciones sanitarias y epidemiológicas: _______________________________________________________________ __________________________________________________________________________________________________ Descripción detallada de las lesiones : __________________________________________________________________ FASE PRE ANALÍTICA 70 30/05/2020 Muestra: Sangre venosa periférica. Examen: Perfil de Hepatitis B por quimioluminiscencia Indicaciones para la toma de la muestra: – Ayunas – Bioseguridad _________________________________________________________________________________________________________ Fecha Indicación: ___________________________________________________________________________________ Fecha toma de muestras : ____________________________________________________________________________ Médico Firma
  • 72. FASE POST ANALÍTICA REPORTE DE RESULTADOS RESULTADOS • Examen: Perfil de Hepatitis B por quimioluminiscencia • Muestra: sangre periférica_______________________ • Resultado: • Fecha y hora de la toma de la muestra: _________________ • Fecha y tiempo de análisis: ___________________________ • Nombre y firma del analista: _______________________________ • Condiciones: muestra aparentemente bien tomada y conservada. • Técnica empleada: _________________________________________ PRUEBA RESULTADO HBs Ag Positivo Hbe Ag Positivo HBc Ac total Positivo HBc Ac Ig M Positivo Ac HBs Ag Negativo 30/05/2020 72
  • 73. INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Interpretación La quimioluminiscencia es una metodología muy sensible, utilizada en el diagnóstico de muchas enfermedades infecciosas, entre ellas la Hepatitis B, midiendo diferentes marcadores de infección, sean Ag o Ac que nos van a permitir diagnosticar la enfermedad y determinar la fase en que se encuentra. 30/05/2020 73