PRICK TEST Dr. Edgar Matos Benavides Inmunólogo - Alergólogo

1. PRICK TEST
Ig E ESPECIFICA
Dr. Edgar Matos Benavides
Inmunólogo Alergólogo

2. PRICK TEST
Fue introducida por Blackley a finales del
siglo XIX y descrita por primera vez por
Lewis y Grant en 1924 Pero no fue hasta
1959, EBRUSTER H ,publico “El prick test
un Nuevo test cutaneo para el
diagnostico de los desordenes alergicos”
Es una prueba rápida, sencilla, de elevada
especificidad y sensibilidad, de alta
fiabilidad y de bajo coste, que resulta
muy útil para confirmar una sospecha
diagnóstica de alergia.
EBRUSTER H: The prick test, a recent cutaneous test for the diagnosis of allergic disorders. Wien Klin Wochenschr 1959, 71:551–554

3. PRICK TEST
Se basa en la reproducción de la
reacción de HS tipo I (IgE – mediada),
al introducir en la epidermis con una
lanceta adecuada, un extracto del
alérgeno sospechoso que
desencadenara la liberación de
histamina de los mastocitos de la piel
provocando una pápula y eritema en
la zona de punción.
Demoly P, Bousquet J, Manderscheid JC, Dreborg S, Dhivert H, Michel FB. Precisión of skin prick and punture tests
with nine methods.J. Allergy Clin Inmunol. 2001; 88:758-62.

4. PRICK TEST
Es un método fiable para
diagnosticar la enfermedad alérgica
mediada por IgE en pacientes con
rinoconjuntivitis, asma, anafilaxias,
eczema atópico y sospecha de alergia
a medicamentos y alimentos.
Proporciona evidencia de
sensibilización y puede ayudar a
confirmar el diagnóstico de un
paciente sospechoso de Alergia.
The skin prick test – European standardsLucie Heinzerling*, Adriano Mari, Karl-Christian Bergmann, Megon Bresciani, Guido Burbach,
Ulf Darsow,Stephen Durham, Wytske Fokkens, Mark Gjomarkaj, Tari Haahtela, Ana Todo Bom, Stefan Wöhrl, Howard Maibach and Richard
Lockey , Allergy 2013, 3:3

5. Indicaciones
Si se sospecha de una persona con una
reacción de hipersensibilidad tipo I
(tipo inmediato) alergia, basado en la
historia clínica y los síntomas clínicos
SPT debe ser interpretado con cuidado
a la luz de la historia clínica, para que
proceda asesoramiento sobre medidas
de evitación y en caso sea necesario, el
alérgeno correcto (s) recetado para
inmunoterapia específica (SIT).
The skin prick test – European standardsLucie Heinzerling*, Adriano Mari, Karl-Christian Bergmann, Megon Bresciani, Guido Burbach,
Ulf Darsow,Stephen Durham, Wytske Fokkens, Mark Gjomarkaj, Tari Haahtela, Ana Todo Bom, Stefan Wöhrl, Howard Maibach and Richard
Lockey , Allergy 2013, 3:3

8. PRICK TEST

9. PRICK TEST
+
Diámetro
 3 mm
15 minutos

10. PRICK-FILM.
LECTURA DE PRICK TEST CON ESCÁNER

11. PRICK-FILM.
LECTURA DE PRICK TEST CON ESCÁNER

12. VARIANTES DEL PRICK-TEST
PRICK BY PRICK

13. CONDICIONES DE LOS ALERGENOS
Los Alérgenos usados idealmente debe ser
estandarizado basado en el contenido de los
determinantes mayores y menores ,ya que no todos
los pacientes son alérgicos a cada antígeno dentro de
un extracto individual.
Deben tener la consistencia de lote a lote y los
resultados de las pruebas de la piel deben ser
comparables, cuando se utilizan los mismos extractos
de diferentes fabricantes.
The skin prick test – European standardsLucie Heinzerling*, Adriano Mari, Karl-Christian Bergmann, Megon
Bresciani, Guido Burbach, Ulf Darsow,Stephen Durham, Wytske Fokkens, Mark Gjomarkaj, Tari Haahtela, Ana Todo
Bom, Stefan Wöhrl, Howard Maibach and Richard Lockey , Allergy 2013, 3:3

14. CONDICIONES DE LOS ALERGENOS
Cada empresa utiliza su propio material de referencia
interna y unidades únicas para expresar potencias. Tal
variabilidad entre los diferentes fabricantes conduce a
una incapacidad para comparar diferentes productos y
resultados de la prueba
En 2001, un proyecto financiado por la UE, el proyecto
CREATE, se introdujo para fomentar la estandarización de
extractos alergénicos en base a su contenido de alérgeno
principal (s). Evalua alérgenos recombinantes
The skin prick test – European standardsLucie Heinzerling*, Adriano Mari, Karl-Christian Bergmann, Megon Bresciani,
Guido Burbach, Ulf Darsow,Stephen Durham, Wytske Fokkens, Mark Gjomarkaj, Tari Haahtela, Ana Todo Bom, Stefan
Wöhrl, Howard Maibach and Richard Lockey , Allergy 2013, 3:3

15. CONDICIONES DE LOS ALERGENOS
Extractos no debe contener conservantes
que pueden causar reacciones de falsos
positivos, por ejemplo, mertiolato de sodio.
Tampoco deben ser mezclados con otros
alérgenos, por ejemplo, ácaros del polvo
doméstico con extracto de caspa de perro.
Cuando se prueba con alérgenos no
comerciales, existe una verdadera
necesidad de utilizar las pruebas de control
en sujetos no alérgicos al comparar los
resultados con los sujetos que son alérgicas.

16. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL SPT
Específico 70-95%
Sensible 80-97%
Crobach MJ, Hermans J, Kaptein AA, Ridderikhoff J, Petri H, Mulder JD: The diagnosis of allergic rhinitis: how to combine the
medical history with the results of radioallergosorbent tests and skin prick tests. Scand J Prim Health Care 1998, 16(1):30–36
ALERGIAS POR INHALACIÓN

17. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL SPT
El valor predictivo positivo para el diagnóstico de la
rinitis alérgica basado sólo en la historia clínica es
77% Rinitis alérgica persistente
82-85% Rinitis alérgica estacional intermitente
. Esto aumenta al 97-99% si se usa SPT
Crobach MJ, Hermans J, Kaptein AA, Ridderikhoff J, Petri H, Mulder JD: The diagnosis of allergic rhinitis: how to combine the
medical history with the results of radioallergosorbent tests and skin prick tests. Scand J Prim Health Care 1998, 16(1):30–36

18. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL SPT
Específico 20-60%
Sensible 30-90%
Verstege A, Mehl A, Rolinck-Werninghaus C, Staden U, Nocon M, Beyer K,Niggemann B: The predictive value of the skin prick
test weal size for the outcome of oral food challenges. Clin Exp Allergy 2005, 35(9):1220–1226.
ALERGENOS ALIMENTARIOS

19. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS DEL SPT
El valor predictivo positivo para el diagnóstico de
Leche de vaca 76%
Huevo de gallina 89%
.
Verstege A, Mehl A, Rolinck-Werninghaus C, Staden U, Nocon M, Beyer K,Niggemann B: The predictive value of the skin prick
test weal size for the outcome of oral food challenges. Clin Exp Allergy 2005, 35(9):1220–1226.

20. Gal d 1 = Gallus domesticus, alergeno nº 1
Huevo
Gal d 1
Hierba
Timotea
Phl p 1
Abedul
Bet v 1
Cacahuete
Ara h 2
Abeja de la miel
Api m 1
IgE ESPECIFICA

21. ANTECEDENTES
• 1967 Descubrimiento de la Inmunoglobulina IgE.
• 1971 Pharmacia adquiere Allergon, líder en producción de alergenos.
• 1972 PRIST® Phadebas® IgE Test. Primer Test de Alergia en el Mundo.
• 1974 Fue lanzado Phadebas RAST®, primer Test en el mundo IgE
Alergeno-específico.
• 1986 Pharmacia introduce Phadiatop® Primer marcador de ATOPIA en el
Mercado.
• 1989 Pharmacia CAP System: Tecnología ImmunoCAPTM

22. ANTECEDENTES
• 1995 UniCAP 100 ® sistema automatizado para test de alergia.
• 2001 UniCAP® 1000 automatización a gran escala de los test IgE.
• 2002 Phadiatop® Infant El primer test de atopia en niños
pequeños.
• 2002 Mas de 500 alergenos disponibles para test IgE.

23. • 2004 ImmunoCAP 250 Calidad y automatización para laboratorios
medianos.
• 2005 ImmunoCAP Rapid:El primer test para atención primaria.
• 2006 Phadia: Nuevo nombre de la compañía.
• 2007 ISAC (Immuno Solid-phase Allergen Chip ) 23 / 112

24. INMUNOBLOT
“PANELES DE ALERGIA”
FUNDAMENTO : La prueba se basa en
el principio del análisis del
immunoblot. Los alérgenos
especiales están pegados a la
superficie de las membranas de
la nitrocelulosa que se colocan
en un canal de reacción.

25. INMUNOBLOT
“PANELES DE ALERGIA”
B
NBT
B
B
NBT
Comparación con el
método de referencia
(IgE):
Comparación con el skin-
prick test:
Sensibilidad: 84.3 % Sensibilidad: 95.1 %

26. IMMULITE 2500 3gAllergy
FUNDAMENTO
Es un análisis enzimoinmunométrico quimioluminiscente
en fase sólida, en dos pasos,
•Se basa en cinéticas en fase líquida en formato de bola
•Representa un avance significativo sobre los métodos
convencionales basados en la unión de los alérgenos a un
soporte sólido, como los discos de papel.
•Los alérgenos se unen covalentemente a una matriz
polímero/copolímero soluble, la cual a su vez está
marcada con un ligando. El uso de un copolímero
aminoacídico aumenta la cantidad de alérgeno que
puede soportar la matriz.

27. TECNOLOGÍA IMMUNOCAP

28. IgE del paciente
Alergenos (acoplado al ImmunoCAP)
Anti-IgE paciente unido a enzima β-Galactosidasa
Complejo: Alergeno-IgE paciente
Sustrato de la enzima β-Galactosidasa
Complejo: Alergeno-IgE paciente-Anti-IgE
Reacción enzimática: β-Galactosidasa
Sustrato no fluorescente Sustrato fluorescente
Detección
(4 metil umbiliferona)
FEIA: Fluoroenzimoimmunoensayo

29. Fases sólidas
• Capacidad de ligando: tubo recubierto, disco papel activado, esponja
celulosa.
Tubo
recubierto
Disco papel
activado
Esponja
celulosa
activada
50 1501

30. Patrón WHO 75/502 Tecnología ImmunoCAP™
WHO
El primer test alergológico del mundo con calibración
directa según patrones 2º IRP WHO 75/502 para IgE

31. Documento de consenso de la WAO, ARIA y GALEN sobre
el diagnóstico molecular de las alergias
Giorgio Wlter Canonica, Ignacio J. Ansotegui, Ruby Pawankar, Peter Schmid-Grendelmeier, Mariaanne van Hage
VENTAJAS INCONVENIENTES
• Método automático • 40ul de suero por alérgeno
• Ensayo cuantitativo • Un alérgeno por ensayo
• Alta sensibilidad • Detecta anticuerpos de baja afinidad
que pueden ser clínicamente
irrelevantes.
• Bajo coeficiente de variación
• Proteínas naturales o recombinantes o
extractos crudos
• Adecuado para el control de la
sensibilización
Ventajas e inconvenientes de ImmnunoCAP
Canonical et al. Worl Allergy Organization Journall 2013, 6:17

32. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Resultados
cuantitativos
KUA/l
Nivel de Anticuerpo
Alergeno Específico
Resultado Semi
Cuantitativo
(Clase)
< 0.35 Ausente o no detectable 0
0.35 a < 0.7 Bajo 1
0.7 a < 3.5 Moderado 2
3.5 a < 17.5 Elevado 3
17.5 a <50 Muy elevado 4
50 a < 100 Muy elevado 5
100 a más Muy elevado 6
Los valores son expresados en KUA/l, en donde A representa anticuerpos específicos de alérgeno.

33. SIMILITUDES Y DIFERENCIAS ENTRE LA TECNOLOGÍA PHADIA ” IMMUNOCAP™
IN VITRO Y LA PRUEBA CUTÁNEA IN VIVO
Características Tecnología Phadia
ImmunoCAP
Prueba Cutánea
Alta sensibilidad Si Si
Alta especificidad Si Si/No
Alta reproducibilidad Si No
Resultados cuantitativos Si Si/No
Calibrado según OMS Si No
Programa de Garantia de Calidad Si No
Prueba utilizable con independencia del
tratamiento farmaceutico.
Si No
Prueba utilizable con independencia del
estado cutaneo del paciente.
Si No
Canonical et al. Worl Allergy Organization Journall 2013, 6:17

34. TEST DE SCREENING
Diagnóstico
Clínico:
• Síntomas
• HC
• Anamnesis
• Exploracion
Laboratorio:
Phadiatop
Phadiatop
infant
POSITIVO
Posteriores tests:
Ig E específicas
Test iniciales de
screening
Cuantificación detallada
e individualizada

35. Test de screening: Phadiatop infant
De 2 a 5 años:
Phadiatop Infant es un test in vitro que diferencian la enfermedad atópica de la
no atópica. Es el primer paso diagnóstico cuando se sospecha de una alergia
atópica.
Este test desmuestra la presencia de alergia atópica frente a alérgenos
inhalantes y alimentario más prevalentes representativos de esta edad y
patología.
Phadiatop Infant contiene una selección de alérgenos alimentarios como leche,
huevo, cacahuate, soja y gamba; además una mezcla de alérgenos inhalantes
que incluyen ácaros, pólenes, epitelios de perro y gato y hongos. Estos alérgenos
son responsables de más del 98% de los antígenos responsables de la
sensibilización alérgica en niños menores de 5 años.
Phadiatop Infant
Específicidad 89%
Sensibilidad 98%

36. Test de screening: Phadiatop
+ de 5 años:
Si existe sospecha clínica de sensibilización a neumoalergenos la
indicación es Phadiatop.
Phadiatop® contiene una mezcla de alérgenos inhalantes prevalentes,
variables según el entorno geográfico entre los que se incluyen
ácaros, pólenes, epitelios de perro y gato y hongos responsables de
más del 90% de sensibilizaciones en niños mayores de 5 años.
Phadiatop
Especificidad 89.2%
Sensibilidad 97.7%

37. DIAGNOSTICO MOLECULAR DE ALERGIAS

39. Una fuente alergénica…

40. …contains thousands
of molecules…
Molécula alergénica = componente
…de las que sólo
algunas son
alergénicas

41. Componentes alergénicos
Específicos
Marcadores de
reactividad cruzada
Sensibilización GENUINA a una
fuente
Sensibilización a componentes
presentes en varias fuentes

43. De la fuente alergénica al componente

44. Mejorar el diagnóstico en los
pacientes polisensibilizados a
alimentos y/o inhalantes. Detecta
la presencia de anticuerpos de
alergia (IgE) frente a un panel de
113 alérgenos con tan sólo una
mínima cantidad de sangre!
El método ISAC (Immuno Solid-
phase Alleregen Chip) aplica la
tecnología más moderna en
biología molecular para
la detección de reactividad

45. Componentes con reactividad cruzada
La soja, el abedul y el cacahuete contienen
componentes con elevada similitud

47. Documento de consenso de la WAO, ARIA y GALEN sobre el diagnóstico molecular de las alergias
Giorgio Wlter Canonica, Ignacio J. Ansotegui, Ruby Pawankar, Peter Schmid-Grendelmeier, Mariaanne van Hage

48. CONCLUSIÓN Y PERSPECTIVAS

50. GRACIAS

51. GRACIAS