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ALERGIA MOLECULAR
Dr. Carlos Macouzet Sánchez
Residente de Primer Año
Dr. José Antonio Buenfil López
Profesor
CENTRO REGIONAL DE ALERGIA E INMUNOLOGÍA CLÍNICA
DEFINICIONES
 Fuente alergénica
 Tejido, partícula, comida, u organismo capaz de producir alergia
 Extracto alergénico
 Mezcla cruda no fraccionada de proteínas, polisacáridos y lípidos
alergénicos y no alergénicos obtenidos de una fuente alergénica.
 Molécula alergénica
 Molécula derivada de una fuente alergénica que es identificada por un
anticuerpo IgE específico.
 Naturales
 Recombinante
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
DEFINICIONES
 Cosensibilización
 Sensibilización genuina de más de una fuente alergénica no
relacionada con reactividad cruzada.
 CCD
 Determinante de reactividad cruzada de carbohidratos.
 MUXF3
 Epítopo
 La región de la proteína reconocida y sitio de unión de un anticuerpo.
 Alérgeno recombinante
 Molécula alergénica producida por clonación del ADN y purificación de
proteínas.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013Dr. Macouzet
CRAIC Mty
DEFINICIONES
 Alérgeno genuino
 Causa de sensibilización específica correspondiente a su
fuente alergénica.
 Alérgeno mayor
 Une a la IgE en mas del 50% de los pacientes con la
misma alergia
 La cantidad de moléculas presentes en la fuente
alergénica es también un parámetro para tomar en
consideración.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
Afinidad de los receptores
de la IgE
 Alta afinidad (FcεRI)
 Mastocitos
 Basófilos
 Eosinófilos
 Monocitos
 Células de Langerhans
 Células dendríticas
 La cadena alfa del receptor es responsable de la unión a la IgE
 La cadena beta aumenta la estabilidad de la unión y la
señalización
 El dímero de cadenas gamma tiene secuencias de activación
basadas en tirosina (ITAM) que participan en la conducción de la
señal al interior de la célula. Lichtman AH, Abbas AK (2003). Cellular and molecular
immunology. Philadelphia: Saunders. pp. 324–325.Dr. Macouzet
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 Baja afinidad (FcεRII)
 Es una lectina tipo C, dependiente del calcio, presente en dos
formas: CD23a y CD23b.
 El CD23a se expresa en forma constitutiva en linfocitos B y se
asocia con la endocitosis de partículas cubiertas por IgE.
 El CD23b se encuentra en linfocitos T, células de Langerhans,
monocitos, macrófagos, plaquetas y eosinófilos.
 Su expresión aumenta básicamente en respuesta a la IL-4; es
capaz de liberar formas solubles (CD23s) que también
participan en la regulación de la respuesta inmunológica.
Lichtman AH, Abbas AK (2003). Cellular and molecular
immunology. Philadelphia: Saunders. pp. 324–325.
Afinidad de los receptores
de la IgE
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Dr. Macouzet
CRAIC Mty
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Historia
 1930, Alexander Francis
 “Las pruebas cutáneas son simples y fascinantes; y las
vacunas utilizadas para inmunizar contra la proteína que
puede ser la causa de los síntomas se volvieron tan
populares como un tratamiento universal, que se cree
que la cura para todas las formas de asma está a la
mano”
 sIgE reemplazará rápidamente a las pruebas cutáneas
en la práctica.
Kniker WT. Is the choice of allergy skin testing versus in vitro
determination of specific IgE no longer a scientific issue? Ann
Allergy. 1989 May;62(5):373-4.
Dr. Macouzet
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Historia
 1960s,
 Descubrimiento de la IgE
 Biomarcador específico
 Pruebas cutáneas
 In vitro
Valenta R, Kraft D: Recombinant allergen molecules: tools to
study effector cell activation. Immunol Rev 2001, 179:119–127.
Dr. Macouzet
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Historia
 1980s,
 Primer alérgeno clonado
 Alérgenos recombinantes purificados
 Diagnóstico y tratamiento de enfermedades alérgicas.
 Diagnóstico molecular
 Definir el perfil de sensibilización del paciente
 Qué partes del alergéno son reconocidas por cada
paciente de manera indvidual.
Gonzalez-Buitrago JM, Ferreira L, Isidoro-Garcia M, Sanz C,
Lorente F, Davila I. Proteomic approaches for identifying new
allergens and diagnosing allergic diseases. Clin Chim Acta. 2007
Oct;385(1-2):21-7.
Dr. Macouzet
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Historia
 Desde 1990, los microarreglos o biochips fueron
desarrollados como una herramienta de análisis de
expresión genética.
J Investig Allergol Clin Immunol 2009; Vol. 19, Suppl. 1: 19-24
© 2009 Esmon Publicidad
Dr. Macouzet
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ISAC
 Immuno-Solid phase Allergen Chip
 El diagnóstico de alergia molecular ha estado disponible en plataformas
sencillas como el ImmunoCAP, ImmuLite, y HyTech.
 Se utilizan paneles de un solo alergéno junto con el extracto alergénico.
 En la actualidad se ha desarrollado tecnología que permite medir anticuerpo
sIgE contra múltiples alergénos en un solo ensayo.
 Mayor cantidad de alergénos con una cantidad reducida de suero (30 μl ).
 Cuando existen valores bajos de sIgE, el ImmunoCap es más sensible que el
ISAC.
 La primera versión de ISAC fue desarrollada en 2003
 Chip original con 23 alérgenos
 2011 -> 112 alérgenos
Hiller R,
Microarrayed allergen molecules: diagnostic gatekeepers for allergy treatment.
FASEB J 2002, 16:414–416.Dr. Macouzet
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ISAC
 El ensayo consiste en un portaobjetos de vidrio recubierto
con polímero que contiene cuatro microarreglos, adecuado
para someter a ensayo cuatro muestras simultáneas.
 Los alérgenos son inmovilizadas covalentemente en el chip.
 El procedimiento consta de las siguientes dos pasos
principales
 Los anticuerpos IgE se unen a partir de una muestra de un
paciente a los alérgenos inmovilizados
 Los anticuerpos IgE unidos a alérgenos se detectan mediante
un anticuerpo anti-IgE marcado con fluorescencia.
Hiller R, :
Microarrayed allergen molecules: diagnostic gatekeepers for allergy treatment.
FASEB J 2002, 16:414–416.Dr. Macouzet
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 La fluorescencia se detecta generalmente por láser.
 Con el fin de calcular y analizar los resultados en una
base semicuantitativo, se necesita un software para
comparar la fluorescencia de los alérgenos de ensayo
con una curva de las concentraciones de IgE conocida,
que se utiliza para extrapolar el resultado de la prueba.
 El procedimiento se puede realizar en un tiempo total
de ensayo de menos de cuatro horas
Harwanegg C, Hiller R. Protein microarrays for the diagnosis of
allergic diseases: State-of-the-art and future development. Eur
Ann Allergy Clin Immunol. 2006 Sep;38(7):232-6Dr. Macouzet
CRAIC Mty
ISAC
Canonica et al. World Allergy Organization Journal
2013, 6:17Dr. Macouzet
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Canonica et al. World Allergy Organization Journal
2013, 6:17Dr. Macouzet
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Canonica et al. World Allergy Organization Journal
2013, 6:17Dr. Macouzet
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Puntos a considerar
 Se necesitan estudios multicéntricos basados en la población para definir aún más
las categorías de diagnóstico.
 El uso práctico y la selección de los alérgenos en el diagnóstico molecular deben
ser evaluados en grandes estudios que incluyan pacientes bien caracterizados y
saludables, además de controles sensibilizados representativos de las diferentes
regiones geográficas.
 La evaluación de los beneficios adicionales en relación con los costos
incrementales para el diagnóstico de la EM, por medio de estudios de costo-
utilidad es necesaria.
 Los esfuerzos de capacitación, tanto en el ámbito clínico y de investigación se
justifican, con un enfoque en el desarrollo de esta nueva era "molecular" en
alergología.
 Desarrollo de apoyo a la decisión clínica para evitar malas interpretaciones y
mejorar el conocimiento como la cantidad de información obtenida desde el
diagnóstico molecular.
Dr. Macouzet
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Ventajas
 La técnica hace que sea posible exponer el mayor
número posible de epítopos reconocibles a IgE.
 La técnica también permite analizar diferentes
fluorescencias, como resultado, en una misma prueba
que podría ser posible medir IgE e IgG específicas .
 La principal ventaja con respecto a otros métodos es
que podemos realizar varias determinaciones de IgE
específica dirigida a un grupo de componentes
alergénicos que se puede ampliar.
Wohrl S, Vigl K, Zehetmayer S, Hiller R, Jarisch R, Prinz M, et
al. The performance of a component-based allergen-microarray
in clinical practice. Allergy. 2006 May;61(5):633-9.
Dr. Macouzet
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Ventajas
 Este hecho ofrece una mayor precisión a la hora de
determinar qué alérgeno es reconocido por un paciente
determinado, y que ayude a explicar las reacciones
cruzadas, y la resolución de enigmas como los pacientes
con positividad a varios pólenes a los que nunca han sido
expuestos y que al parecer son poco significativos.
 Con los métodos tradicionales sería prácticamente
imposible analizar el panel de recombinantes y alérgenos
naturales que garanticen la presentación de un número
significativo de epítopos.
Lidholm J, Ballmer-Weber BK, Mari A, Vieths S. Component-
resolved diagnostics in food allergy. Curr Opin Allergy Clin
Immunol. 2006 Jun;6(3):234-40.
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Ventajas
 Pacientes en donde por condiciones cutáneas no
pueden ser realizadas las pruebas cutáneas.
 Dermatitis atópica
 Dermografismo
 Niños
Lidholm J, Ballmer-Weber BK, Mari A, Vieths S. Component-
resolved diagnostics in food allergy. Curr Opin Allergy Clin
Immunol. 2006 Jun;6(3):234-40.
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Lidholm J, Ballmer-Weber BK, Mari A, Vieths S. Component-
resolved diagnostics in food allergy. Curr Opin Allergy Clin
Immunol. 2006 Jun;6(3):234-40.
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Relación entre concentración y
nivel de sIgE
 Nivel alto:
 Alta concentración de anticuerpos sIgE
 Entre más alto el nivel de sIgE mayor la probabilidad de
reacciones clínicas
 Algunos alérgenos aun con bajos niveles pudieran inducir
reacciones graves.
 Nivel bajo:
 Baja concentración de sIgE
 Sensibilización a sIgE
 Presencia de un anticupero IgE específico en sangre que puede
ocurrir en la auencia de síntomas clínicos.
 Monosensibiliazación
 Polisensibilización
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013Dr. Macouzet
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REACTIVIDAD CRUZADA
 El fenómeno en el cual la IgE reconoce, se une e induce una
respuesta inmune similar a las moléculas alergénicas presentes
en diferentes especies.
 Bet v 1 en el polen del abedul
 Cor a 1 en la avellana
 50%-70% de homología entre las estructuras
 Especies relacionadas
 Pastos o ácaros
 Moléculas que conservan función similar sin pertenecer a la
misma especie
 Familia de la tropomiosina
 Der p 10 en el ácaro
 Pen m 1 en el camarón
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Nomenclatura
 Moléculas en estructura tridimensional
 World Health Organization and International Union of
Immunological Species (WHO/IUIS) Allergen
Nomenclature Subcommittee
 Primeras tres letras de la primera palabra nombre
taxonómico y la primera letra de la segunda palabra.
 Se agrega un número conforme se describen nuevas
moléculas para distinguir alérgenos de la misma
especie.
www.allergen.org.
Dr. Macouzet
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Nomenclatura
 Phl p 4
 Phleum pratense (Pasto Timothy).
 La moléculas de proteínas alergénicas se clasifican en
familias, en función de su estructura y función
biológica.
 Muchas moléculas diferentes comparten epítopos
comunes y el mismo anticuerpo IgE puede unirse e
inducir una respuesta inmune a moléculas con
estructuras de diversas fuentes de alérgenos.
Radauer C, Bublin M, Wagner S, Mari A, Breiteneder H:
Allergens are distributed into few protein families and possess a
restricted number of biochemical functions. J Allergy Clin
Immunol 2008, 121:847–852. e847.
Dr. Macouzet
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 Ara h 2 (cacahuate) y Cor a 9 (avellana)
 Asociado a reacciones graves
 Sensibilización sin una reacción clínica
 Estabilidad
 Ara h 8
 Ara h 2
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
Dr. Macouzet
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 Determinar si la sensibilización es genuina en la
naturaleza o debido a la reactividad cruzada ayuda a
evaluar la probabilidad de reacción sobre la exposición
a diferentes fuentes alergénicas.
 El diagnóstico molecular puede también mejorar la
selección de los pacientes y los alérgenos específicos
para la inmunoterapia específica para la alergia
respiratoria y a veneno de himenópteros.
Sastre J: Molecular diagnosis in allergy. Clin Exp Allergy 2010,
40:1442–1460.
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
 En general, cuanto más cerca es la relación
taxonómica entre las especies, mayor es el grado de
similitud estructural e inmunológica entre los
alérgenos.
 Las proteínas se clasifican en familias de proteínas de
acuerdo con su función y la estructura biológica.
 Las proteínas dentro de la misma familia comparten
epítopos comunes y el mismo anticuerpo IgE pueden
unirse a estructuras similares presentes en alérgenos
de fuentes de alérgenos diferentes .
Radauer C, Bublin M, Wagner S, Mari A, Breiteneder H:
Allergens are distributed into few protein families and possess a
restricted number of biochemical functions. J Allergy Clin
Immunol 2008, 121:847–852. e847.
Reactividad Cruzada
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Diagnóstico molecular en alergia
 Uno de los usos clínicos más importantes del
diagnóstico molecular es su capacidad para identificar
la molécula alergénica causante de síntomas y
distinguir moléculas específicas de los marcadores de
reactividad cruzada.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17Dr. Macouzet
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Diagnóstico molecular en alergia
 En el campo de la alergia a los alimentos relacionada
con el polen, el diagnóstico molecular ha demostrado
su capacidad para desempeñar un papel importante al
aumentar la precisión del diagnóstico .
 Alergia al cacahuate
 Sensibilización a Ara h 2 se considera un marcador
genuino por cacahuate que puede inducir reacciones
sistémicas
 Ara h 8 es un marcador de la reactividad cruzada entre
los alérgenos de los alimentos y el polen de árbol de la
orden Fagales y se asocia principalmente con reacciones
leves, orales.
Nicolaou N, Custovic A: Molecular diagnosis of peanut and
legume allergy. Curr Opin Allergy Clin Immunol 2011, 11:222–
228. 210.1097/ ACI.Dr. Macouzet
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Diagnóstico molecular en alergia
 En pruebas cutáneas, algunos alérgenos pueden estar
mal representados en los extractos debido a la
variabilidad biológica de la fuente de alérgeno.
 Can f 5, un alérgeno de la próstata canina
 Alérgeno de perro responsable de la sensibilidad en
hasta el 38 % de los pacientes alérgicos a perros.
 Los extractos de alérgenos utilizados en las pruebas de
la piel suelen utilizar pelo o epitelio de perro como una
fuente de alérgenos .
 La determinación de la respuesta de IgE a Can f 5 por
diagnóstico molecular puede mejorar la precisión del
diagnóstico de alergia a perro.
Mattsson L, Lundgren T, Everberg H, Larsson H, Lidholm J:
Prostatic kallikrein: a new major dog allergen. J Allergy Clin
Immunol 2009, 123:362–368.
Dr. Macouzet
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Diagnóstico molecular en alergia
 Al probar un panel limitado de moléculas, sólo lo que
se mide se puede detectar
 Phleum pratense
 Phl p 5 y Phl p 1
 Sensibilización genuina
 Phl p 7 y Phl p 12
 Polcalcinas y profilinas.
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 La evaluación del riesgo de las personas alérgicas es
una aplicación potencial del diagnóstico molecular.
 Dado que los perfiles de sensibilización de los
pacientes pueden diferir con respecto a la expresión de
la enfermedad y la gravedad, la detección de
moléculas de “bajo riesgo” frente a las de “alto riesgo”
es un área de gran interés que podría reducir el uso de
los procedimientos de diagnóstico potencialmente
dañinos.
 Alimentos, pólenes y venenos
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Diagnóstico molecular en alergia
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 En general, los alérgenos resistentes al calor y la
digestión a menudo desencadenan reacciones
alérgicas más graves en comparación con los
alérgenos lábiles.
 Síndrome de alergia oral
 Además, la cantidad de una molécula presente en una
fuente de alimento es también un parámetro a tener en
cuenta.
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Diagnóstico molecular en alergia
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Cacahuate
 IgE contra proteínas de almacenaje Ara h 1, 2, y 3 se
han asociado con reacciones alérgicas genuinas.
 Pacientes con sensibilización a la profilina o CCD del
cacahuate no presentan síntomas o síntomas orales
leves.
 En ocasiones cacahuates calientes pueden ser
tolerados.
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Soya
 La sensibilización a Gly m 5 o Gly m 6 se ha asociado
a reacciones graves.
 Mientras que para Gly m 4 (PR-10) se asocia a
síndrome de alergia oral.
 En pacientes alérgicos a polen de abedul en
combinación con Gly m 4 o con una ingesta mayor de
soya procesada pueden inducir reacciones graves.
 Pacientes con sensibilización a profilinas o CCD
presentan síntomas orales leves.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
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Trigo
 Sensibilización a ω-5-gliadin (Tri a 19) es un factor de
riesgo para reacciones alérgicas inmediatas en niños y
reacciones sistémicas asociados con el ejercicio en
adultos.
 La LTP (Tri a 14) muestra un grado de reactividad
cruzada con otros alimentos.
 Pacientes con sensibilización a profilinas o CCD
presentan síntomas orales leves y el trigo caliente
puede ser tolerado en ocasiones.
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Dr. Macouzet
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Huevo
 Niveles altos de sIgE a Gal d 1 se ha identificado como
factor de riesgo para alergia al huevo.
 Alta probabilidad de reacciones al huevo cocido o
caliente.
 Pacientes con niveles indetectables pueden tolerar el
huevo cocido.
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Leche
 La sIgE contra la caseína (Bos d 8) y beta-
lactoglobulina (Bos d 5) son marcadores de alergia
persistente a la leche (caliente y fria).
 Pacientes con niveles indetectables pueden tolerar la
leche cocida.
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Pescado
 Las parvalbúminas (Gad c1 and Cyp c 1) son los
alérgenos mayores del pescado.
 Son típicamente estables al calor y la digestión.
 Las parvalbúminas muestran un alto grado de
reactividad cruzada y pacientes pueden reaccionar al
igual con la carpa, el bacalao, el arenque, el atún, el
salmón, la perca, y la anguila.
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Mariscos
 Las reacciones alérgicas a crustáceos pueden ser
causadas por la tropomiosina.
 Muestra un alto grado de reactividad cruzada a lo largo
de una variedad de especies incluidos los ácaros.
 El camarón y otros mariscos pueden otros alérgenos
clinicamente relevantes como la proteína de unión a
calcio sarcoplásmico y la arginin-cinasa.
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Carnes
 La galactosa-α-1,3-galactosa (α-Gal) es una estructura de
carbohidratos encontrada en las glicoproteínas de mamíferos
excepto los humanos.
 La sIgE para α-Gal (anti-α-Gal-IgE) puede estar asociada a
anafilaxia tardía y reacciones a las carnes rojas (res, puerco,
cabra, y venado.
 La α-Gal se encuentra tambien en el cetuximab pudiendo tener
reacciones anafilácticas a la aplicación de dicho medicamento.
 Se recomienda la prueba específica a α-Gal previo a la aplicación
de cetuximab.
 La albúmina de suero bovino (Bos d 6 ) es un alérgeno lábil al
calor presente tanto en la leche y la carne de res, lo que puede
causar reactividad cruzada entre diferentes carne de mamíferos
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Dr. Macouzet
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Epitelios de mascotas
 Los niveles altos de sIgE contra Fel d 1 se asocian
con asma en los individuos alérgicos a los gatos.
 El reconocimiento de más de tres alérgenos derivados
de animales tales como lipocalinas (Mus m 1, Equ c 1,
Fel d 4, Can f 1, 2, calicreína (Can f 5 ) , y
secretoglobina ( Fel d 1 ) se ha asociado con asma
grave en niños en un estudio con niños suecos.

Nordlund B IgE antibodies to animal-derived lipocalin, kallikrein and secretoglobin
are markers of bronchial inflammation in severe childhood asthma. Allergy 2012,
67:661–669.Dr. Macouzet
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Pólenes
 Algunas sensibilidades a alérgenos específicos pueden ser
marcadores de síntomas más graves en la alergia al polen,
aumentando el riesgo de reacciones sistémicas durante la
inmunoterapia, como Ole e 9 y el polen LTP Ole e 7.
 La sensibilización a la profilina es común entre los pacientes
alérgicos al polen y por lo general se asocia con síntomas
clínicos leves o inexistentes.
 Para una minoría de los pacientes, la profilina puede ser un
factor de riesgo para las reacciones más graves en los
individuos alérgicos al polen de olivo y en pacientes
alérgicos a ciertos alimentos de origen vegetal como el
melón y los cítricos.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
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Hongos
 En reacciones de hipersensibilidad a Aspergillus
fumigatus, la presencia de reactividad a Asp f 2, 4, y 6
puede sugerir aspergilosis broncopulmonar alérgica
(ABPA ).
 Mientras que la sensibilización a Asp f 1 y/o Asp f 3
puede ser más indicativa de asma alérgica.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
Dr. Macouzet
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Cucaracha
 Se ha descrito recientemente que la sensibilización a Per a
2 se correlaciona con la gravedad de la alergia a las vías
respiratorias en pacientes alérgicos a la cucaracha.
 Per a 2 actualmente no está comercialmente disponible
para pruebas in vitro; sin embargo, el Per a 2 homólogo Bla
g 2 está disponible.
 Las cucarachas también contienen tropomiosina de
reacción cruzada ( Bla g 7 ), lo que indica un riesgo de
reacciones alérgicas a los mariscos o al caracol.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
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Ácaros
 Aunque no hay un perfil específico de sensibilización
descrito como un factor de riesgo para la enfermedad
de las vías respiratorias inferiores o gravedad de la
enfermedad , una relación de sIgE/IgG4 superior para
Der p 2 se ha asociado con el asma.
 Der p 10 (tropomiosina) es un alérgeno menor en los
pacientes alérgicos a los ácaros; sin embargo, todavía
puede indicar un riesgo de reacciones alérgicas a los
mariscos o al caracol.
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Látex
 La sensibilización a Hev b 8 (profilina) parece ser
clínicamente irrelevante y no relacionada con las
reacciones clínicas de látex.
 El alérgeno de reacción cruzada responsable del
llamado síndrome de látex-fruta no está totalmente
aclarado, aunque los datos indican que Hev b 5, 6 y 11
desempeñan un papel.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
Dr. Macouzet
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Veneno de himenóptero
 La mayoría de los alérgenos de veneno de
himenópteros poseen los CCD que son responsables
de una parte de reactividad cruzada entre el veneno de
abeja y avispa.
 La detección de alérgenos de veneno recombinante
puede diferenciar entre la sensibilización genuina al
veneno y la reactividad cruzada debido a los CCDs en
pacientes con resultados de doble positivo de IgE de
las pruebas de veneno tradicionales que se basan en
extracto de alérgeno.
Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17
Dr. Macouzet
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Inmunoterapia
 La inmunoterapia con alérgenos es “específica”, lo que
significa que sólo se modifica la respuesta inmune
contra el alérgeno para el que se realiza la vacunación.
 Paradigma
 Una historia clínica detallada y las pruebas
tradicionales a base de extracto de IgE ( SPT y/o en
sIgE in vitro) es suficiente para identificar el alérgeno
relevante.
Jutel M, Akdis CA
Immunological mechanisms of allergen-specific immunotherapy.
Allergy 2011, 66:725–732.Dr. Macouzet
CRAIC Mty
Inmunoterapia
 La complejidad del diagnóstico es cuando el paciente
demuestra una polisensibilización en las pruebas
tradicionales de diagnóstico a base de extractos de
alérgenos y su historia clínica no es suficiente para
aclarar la naturaleza de la sensibilización
Jutel M, Akdis CA
Immunological mechanisms of allergen-specific immunotherapy.
Allergy 2011, 66:725–732.Dr. Macouzet
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Inmunoterapia
 Un paciente sensible a las gramíneas también puede ser positivo
para abedul con las pruebas cutáneas.
 Extracto del abedul contiene profilinas (Bet v 2)
 Similar Phl p 12
 Un paciente que está sensibilizado a un extracto tradicional de
ácaros, pero sus anticuerpos sIgE son contra Der p 10 (tropomiosina)
y no a Der p 1 , 2 / Der f 1 , 2 , no está indicada la inmunoterapia.
 El diagnóstico molecular también pueden mejorar la selección de
pacientes para la IT al veneno de himenópteros .
 La sensibilización a los alérgenos principales del Api m 1 de las
abejas melíferas y Ves v 5 y / o Ves v 1 de las avispas amarillas
puede ser útil para discriminar entre sensibilización genuina y la
reactividad cruzada debida a los CCD
Jutel M, Akdis CA
Immunological mechanisms of allergen-specific immunotherapy.
Allergy 2011, 66:725–732.Dr. Macouzet
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 Se analizaron 162 sueros pertenecientes a niños
diagnosticados con rinitis o asma/rinitis durante el año
2006.
 Se cuantificó la IgE específica a pólenes y a los
alérgenos recombinantes de Phleum pratense,
considerando a Phl p 1+Phl p 5 alérgenos específicos
de grupo y Phl p 7+Phl p 12 alérgenos de reactividad
cruzada.
 Se determinó la relación existente entre los valores de
IgE específica obtenidos frente a Phl p 1+Phl p 5 y los
obtenidos frente a Phl p 7+Phl p 12.
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
 El 99.4% de las muestras fueron positivas frente a los
alérgenos específicos de Phleum, mientras que el 46%
fueron positivas para los alérgenos de reactividad cruzada.
 El 38% de los pacientes estaban polisensibilizados a
pólenes, siendo el polen de Plantago lanceolata el principal
responsable de la polisensibilización.
 Los cálculos de probabilidad condicionada demostraron que
pacientes con valores de IgE específica de 75-80 kU/L
frente a Phl p 1+Phl p 5 tenían una probabilidad mayor del
75% de presentar valores ≥2 kU/L frente a Phl p 7+Phl p 12.
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
 La utilización de alérgenos recombinantes permite
definir el diagnóstico etiológico de la alergia en casos
de polisensibilización y reactividad cruzada, siendo por
lo tanto una prometedora herramienta de ayuda en el
pronóstico y el seguimiento de la población pediátrica
alérgica.
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
 Un joven de 18 años de edad
 Rinoconjuntivitis estacional con sensibilización al polen
de la vid, pastos, olivo, y las Chenopodiaceae
 Dos años anteriores ha desarrollado 2 episodios de
prurito generalizado, erupción maculopapular, y
angioedema facial unos minutos después de comer
uvas.
Dr. Macouzet
CRAIC Mty
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Dr. Macouzet
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Alergia molecular: diagnóstico e implicaciones clínicas

  • 1. ALERGIA MOLECULAR Dr. Carlos Macouzet Sánchez Residente de Primer Año Dr. José Antonio Buenfil López Profesor CENTRO REGIONAL DE ALERGIA E INMUNOLOGÍA CLÍNICA
  • 2. DEFINICIONES  Fuente alergénica  Tejido, partícula, comida, u organismo capaz de producir alergia  Extracto alergénico  Mezcla cruda no fraccionada de proteínas, polisacáridos y lípidos alergénicos y no alergénicos obtenidos de una fuente alergénica.  Molécula alergénica  Molécula derivada de una fuente alergénica que es identificada por un anticuerpo IgE específico.  Naturales  Recombinante Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 3. DEFINICIONES  Cosensibilización  Sensibilización genuina de más de una fuente alergénica no relacionada con reactividad cruzada.  CCD  Determinante de reactividad cruzada de carbohidratos.  MUXF3  Epítopo  La región de la proteína reconocida y sitio de unión de un anticuerpo.  Alérgeno recombinante  Molécula alergénica producida por clonación del ADN y purificación de proteínas. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 4. DEFINICIONES  Alérgeno genuino  Causa de sensibilización específica correspondiente a su fuente alergénica.  Alérgeno mayor  Une a la IgE en mas del 50% de los pacientes con la misma alergia  La cantidad de moléculas presentes en la fuente alergénica es también un parámetro para tomar en consideración. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 5. Afinidad de los receptores de la IgE  Alta afinidad (FcεRI)  Mastocitos  Basófilos  Eosinófilos  Monocitos  Células de Langerhans  Células dendríticas  La cadena alfa del receptor es responsable de la unión a la IgE  La cadena beta aumenta la estabilidad de la unión y la señalización  El dímero de cadenas gamma tiene secuencias de activación basadas en tirosina (ITAM) que participan en la conducción de la señal al interior de la célula. Lichtman AH, Abbas AK (2003). Cellular and molecular immunology. Philadelphia: Saunders. pp. 324–325.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 6.  Baja afinidad (FcεRII)  Es una lectina tipo C, dependiente del calcio, presente en dos formas: CD23a y CD23b.  El CD23a se expresa en forma constitutiva en linfocitos B y se asocia con la endocitosis de partículas cubiertas por IgE.  El CD23b se encuentra en linfocitos T, células de Langerhans, monocitos, macrófagos, plaquetas y eosinófilos.  Su expresión aumenta básicamente en respuesta a la IL-4; es capaz de liberar formas solubles (CD23s) que también participan en la regulación de la respuesta inmunológica. Lichtman AH, Abbas AK (2003). Cellular and molecular immunology. Philadelphia: Saunders. pp. 324–325. Afinidad de los receptores de la IgE Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 10. Historia  1930, Alexander Francis  “Las pruebas cutáneas son simples y fascinantes; y las vacunas utilizadas para inmunizar contra la proteína que puede ser la causa de los síntomas se volvieron tan populares como un tratamiento universal, que se cree que la cura para todas las formas de asma está a la mano”  sIgE reemplazará rápidamente a las pruebas cutáneas en la práctica. Kniker WT. Is the choice of allergy skin testing versus in vitro determination of specific IgE no longer a scientific issue? Ann Allergy. 1989 May;62(5):373-4. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 11. Historia  1960s,  Descubrimiento de la IgE  Biomarcador específico  Pruebas cutáneas  In vitro Valenta R, Kraft D: Recombinant allergen molecules: tools to study effector cell activation. Immunol Rev 2001, 179:119–127. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 12. Historia  1980s,  Primer alérgeno clonado  Alérgenos recombinantes purificados  Diagnóstico y tratamiento de enfermedades alérgicas.  Diagnóstico molecular  Definir el perfil de sensibilización del paciente  Qué partes del alergéno son reconocidas por cada paciente de manera indvidual. Gonzalez-Buitrago JM, Ferreira L, Isidoro-Garcia M, Sanz C, Lorente F, Davila I. Proteomic approaches for identifying new allergens and diagnosing allergic diseases. Clin Chim Acta. 2007 Oct;385(1-2):21-7. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 13. Historia  Desde 1990, los microarreglos o biochips fueron desarrollados como una herramienta de análisis de expresión genética. J Investig Allergol Clin Immunol 2009; Vol. 19, Suppl. 1: 19-24 © 2009 Esmon Publicidad Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 14. ISAC  Immuno-Solid phase Allergen Chip  El diagnóstico de alergia molecular ha estado disponible en plataformas sencillas como el ImmunoCAP, ImmuLite, y HyTech.  Se utilizan paneles de un solo alergéno junto con el extracto alergénico.  En la actualidad se ha desarrollado tecnología que permite medir anticuerpo sIgE contra múltiples alergénos en un solo ensayo.  Mayor cantidad de alergénos con una cantidad reducida de suero (30 μl ).  Cuando existen valores bajos de sIgE, el ImmunoCap es más sensible que el ISAC.  La primera versión de ISAC fue desarrollada en 2003  Chip original con 23 alérgenos  2011 -> 112 alérgenos Hiller R, Microarrayed allergen molecules: diagnostic gatekeepers for allergy treatment. FASEB J 2002, 16:414–416.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 15. ISAC  El ensayo consiste en un portaobjetos de vidrio recubierto con polímero que contiene cuatro microarreglos, adecuado para someter a ensayo cuatro muestras simultáneas.  Los alérgenos son inmovilizadas covalentemente en el chip.  El procedimiento consta de las siguientes dos pasos principales  Los anticuerpos IgE se unen a partir de una muestra de un paciente a los alérgenos inmovilizados  Los anticuerpos IgE unidos a alérgenos se detectan mediante un anticuerpo anti-IgE marcado con fluorescencia. Hiller R, : Microarrayed allergen molecules: diagnostic gatekeepers for allergy treatment. FASEB J 2002, 16:414–416.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 16.  La fluorescencia se detecta generalmente por láser.  Con el fin de calcular y analizar los resultados en una base semicuantitativo, se necesita un software para comparar la fluorescencia de los alérgenos de ensayo con una curva de las concentraciones de IgE conocida, que se utiliza para extrapolar el resultado de la prueba.  El procedimiento se puede realizar en un tiempo total de ensayo de menos de cuatro horas Harwanegg C, Hiller R. Protein microarrays for the diagnosis of allergic diseases: State-of-the-art and future development. Eur Ann Allergy Clin Immunol. 2006 Sep;38(7):232-6Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 17. ISAC Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 18. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 19. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 20. Puntos a considerar  Se necesitan estudios multicéntricos basados en la población para definir aún más las categorías de diagnóstico.  El uso práctico y la selección de los alérgenos en el diagnóstico molecular deben ser evaluados en grandes estudios que incluyan pacientes bien caracterizados y saludables, además de controles sensibilizados representativos de las diferentes regiones geográficas.  La evaluación de los beneficios adicionales en relación con los costos incrementales para el diagnóstico de la EM, por medio de estudios de costo- utilidad es necesaria.  Los esfuerzos de capacitación, tanto en el ámbito clínico y de investigación se justifican, con un enfoque en el desarrollo de esta nueva era "molecular" en alergología.  Desarrollo de apoyo a la decisión clínica para evitar malas interpretaciones y mejorar el conocimiento como la cantidad de información obtenida desde el diagnóstico molecular. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 21. Ventajas  La técnica hace que sea posible exponer el mayor número posible de epítopos reconocibles a IgE.  La técnica también permite analizar diferentes fluorescencias, como resultado, en una misma prueba que podría ser posible medir IgE e IgG específicas .  La principal ventaja con respecto a otros métodos es que podemos realizar varias determinaciones de IgE específica dirigida a un grupo de componentes alergénicos que se puede ampliar. Wohrl S, Vigl K, Zehetmayer S, Hiller R, Jarisch R, Prinz M, et al. The performance of a component-based allergen-microarray in clinical practice. Allergy. 2006 May;61(5):633-9. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 22. Ventajas  Este hecho ofrece una mayor precisión a la hora de determinar qué alérgeno es reconocido por un paciente determinado, y que ayude a explicar las reacciones cruzadas, y la resolución de enigmas como los pacientes con positividad a varios pólenes a los que nunca han sido expuestos y que al parecer son poco significativos.  Con los métodos tradicionales sería prácticamente imposible analizar el panel de recombinantes y alérgenos naturales que garanticen la presentación de un número significativo de epítopos. Lidholm J, Ballmer-Weber BK, Mari A, Vieths S. Component- resolved diagnostics in food allergy. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2006 Jun;6(3):234-40. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 23. Ventajas  Pacientes en donde por condiciones cutáneas no pueden ser realizadas las pruebas cutáneas.  Dermatitis atópica  Dermografismo  Niños Lidholm J, Ballmer-Weber BK, Mari A, Vieths S. Component- resolved diagnostics in food allergy. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2006 Jun;6(3):234-40. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 24. Lidholm J, Ballmer-Weber BK, Mari A, Vieths S. Component- resolved diagnostics in food allergy. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2006 Jun;6(3):234-40. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 25. Relación entre concentración y nivel de sIgE  Nivel alto:  Alta concentración de anticuerpos sIgE  Entre más alto el nivel de sIgE mayor la probabilidad de reacciones clínicas  Algunos alérgenos aun con bajos niveles pudieran inducir reacciones graves.  Nivel bajo:  Baja concentración de sIgE  Sensibilización a sIgE  Presencia de un anticupero IgE específico en sangre que puede ocurrir en la auencia de síntomas clínicos.  Monosensibiliazación  Polisensibilización Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 26. REACTIVIDAD CRUZADA  El fenómeno en el cual la IgE reconoce, se une e induce una respuesta inmune similar a las moléculas alergénicas presentes en diferentes especies.  Bet v 1 en el polen del abedul  Cor a 1 en la avellana  50%-70% de homología entre las estructuras  Especies relacionadas  Pastos o ácaros  Moléculas que conservan función similar sin pertenecer a la misma especie  Familia de la tropomiosina  Der p 10 en el ácaro  Pen m 1 en el camarón Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 27. Nomenclatura  Moléculas en estructura tridimensional  World Health Organization and International Union of Immunological Species (WHO/IUIS) Allergen Nomenclature Subcommittee  Primeras tres letras de la primera palabra nombre taxonómico y la primera letra de la segunda palabra.  Se agrega un número conforme se describen nuevas moléculas para distinguir alérgenos de la misma especie. www.allergen.org. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 28. Nomenclatura  Phl p 4  Phleum pratense (Pasto Timothy).  La moléculas de proteínas alergénicas se clasifican en familias, en función de su estructura y función biológica.  Muchas moléculas diferentes comparten epítopos comunes y el mismo anticuerpo IgE puede unirse e inducir una respuesta inmune a moléculas con estructuras de diversas fuentes de alérgenos. Radauer C, Bublin M, Wagner S, Mari A, Breiteneder H: Allergens are distributed into few protein families and possess a restricted number of biochemical functions. J Allergy Clin Immunol 2008, 121:847–852. e847. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 29.  Ara h 2 (cacahuate) y Cor a 9 (avellana)  Asociado a reacciones graves  Sensibilización sin una reacción clínica  Estabilidad  Ara h 8  Ara h 2 Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 32.  Determinar si la sensibilización es genuina en la naturaleza o debido a la reactividad cruzada ayuda a evaluar la probabilidad de reacción sobre la exposición a diferentes fuentes alergénicas.  El diagnóstico molecular puede también mejorar la selección de los pacientes y los alérgenos específicos para la inmunoterapia específica para la alergia respiratoria y a veneno de himenópteros. Sastre J: Molecular diagnosis in allergy. Clin Exp Allergy 2010, 40:1442–1460. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 33.  En general, cuanto más cerca es la relación taxonómica entre las especies, mayor es el grado de similitud estructural e inmunológica entre los alérgenos.  Las proteínas se clasifican en familias de proteínas de acuerdo con su función y la estructura biológica.  Las proteínas dentro de la misma familia comparten epítopos comunes y el mismo anticuerpo IgE pueden unirse a estructuras similares presentes en alérgenos de fuentes de alérgenos diferentes . Radauer C, Bublin M, Wagner S, Mari A, Breiteneder H: Allergens are distributed into few protein families and possess a restricted number of biochemical functions. J Allergy Clin Immunol 2008, 121:847–852. e847. Reactividad Cruzada Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 34. Diagnóstico molecular en alergia  Uno de los usos clínicos más importantes del diagnóstico molecular es su capacidad para identificar la molécula alergénica causante de síntomas y distinguir moléculas específicas de los marcadores de reactividad cruzada. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 35. Diagnóstico molecular en alergia  En el campo de la alergia a los alimentos relacionada con el polen, el diagnóstico molecular ha demostrado su capacidad para desempeñar un papel importante al aumentar la precisión del diagnóstico .  Alergia al cacahuate  Sensibilización a Ara h 2 se considera un marcador genuino por cacahuate que puede inducir reacciones sistémicas  Ara h 8 es un marcador de la reactividad cruzada entre los alérgenos de los alimentos y el polen de árbol de la orden Fagales y se asocia principalmente con reacciones leves, orales. Nicolaou N, Custovic A: Molecular diagnosis of peanut and legume allergy. Curr Opin Allergy Clin Immunol 2011, 11:222– 228. 210.1097/ ACI.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 36. Diagnóstico molecular en alergia  En pruebas cutáneas, algunos alérgenos pueden estar mal representados en los extractos debido a la variabilidad biológica de la fuente de alérgeno.  Can f 5, un alérgeno de la próstata canina  Alérgeno de perro responsable de la sensibilidad en hasta el 38 % de los pacientes alérgicos a perros.  Los extractos de alérgenos utilizados en las pruebas de la piel suelen utilizar pelo o epitelio de perro como una fuente de alérgenos .  La determinación de la respuesta de IgE a Can f 5 por diagnóstico molecular puede mejorar la precisión del diagnóstico de alergia a perro. Mattsson L, Lundgren T, Everberg H, Larsson H, Lidholm J: Prostatic kallikrein: a new major dog allergen. J Allergy Clin Immunol 2009, 123:362–368. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 37. Diagnóstico molecular en alergia  Al probar un panel limitado de moléculas, sólo lo que se mide se puede detectar  Phleum pratense  Phl p 5 y Phl p 1  Sensibilización genuina  Phl p 7 y Phl p 12  Polcalcinas y profilinas. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 38.  La evaluación del riesgo de las personas alérgicas es una aplicación potencial del diagnóstico molecular.  Dado que los perfiles de sensibilización de los pacientes pueden diferir con respecto a la expresión de la enfermedad y la gravedad, la detección de moléculas de “bajo riesgo” frente a las de “alto riesgo” es un área de gran interés que podría reducir el uso de los procedimientos de diagnóstico potencialmente dañinos.  Alimentos, pólenes y venenos Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Diagnóstico molecular en alergia Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 39.  En general, los alérgenos resistentes al calor y la digestión a menudo desencadenan reacciones alérgicas más graves en comparación con los alérgenos lábiles.  Síndrome de alergia oral  Además, la cantidad de una molécula presente en una fuente de alimento es también un parámetro a tener en cuenta. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Diagnóstico molecular en alergia Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 40. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 41. Cacahuate  IgE contra proteínas de almacenaje Ara h 1, 2, y 3 se han asociado con reacciones alérgicas genuinas.  Pacientes con sensibilización a la profilina o CCD del cacahuate no presentan síntomas o síntomas orales leves.  En ocasiones cacahuates calientes pueden ser tolerados. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 42. Soya  La sensibilización a Gly m 5 o Gly m 6 se ha asociado a reacciones graves.  Mientras que para Gly m 4 (PR-10) se asocia a síndrome de alergia oral.  En pacientes alérgicos a polen de abedul en combinación con Gly m 4 o con una ingesta mayor de soya procesada pueden inducir reacciones graves.  Pacientes con sensibilización a profilinas o CCD presentan síntomas orales leves. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 43. Trigo  Sensibilización a ω-5-gliadin (Tri a 19) es un factor de riesgo para reacciones alérgicas inmediatas en niños y reacciones sistémicas asociados con el ejercicio en adultos.  La LTP (Tri a 14) muestra un grado de reactividad cruzada con otros alimentos.  Pacientes con sensibilización a profilinas o CCD presentan síntomas orales leves y el trigo caliente puede ser tolerado en ocasiones. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 44. Huevo  Niveles altos de sIgE a Gal d 1 se ha identificado como factor de riesgo para alergia al huevo.  Alta probabilidad de reacciones al huevo cocido o caliente.  Pacientes con niveles indetectables pueden tolerar el huevo cocido. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 45. Leche  La sIgE contra la caseína (Bos d 8) y beta- lactoglobulina (Bos d 5) son marcadores de alergia persistente a la leche (caliente y fria).  Pacientes con niveles indetectables pueden tolerar la leche cocida. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 46. Pescado  Las parvalbúminas (Gad c1 and Cyp c 1) son los alérgenos mayores del pescado.  Son típicamente estables al calor y la digestión.  Las parvalbúminas muestran un alto grado de reactividad cruzada y pacientes pueden reaccionar al igual con la carpa, el bacalao, el arenque, el atún, el salmón, la perca, y la anguila. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 47. Mariscos  Las reacciones alérgicas a crustáceos pueden ser causadas por la tropomiosina.  Muestra un alto grado de reactividad cruzada a lo largo de una variedad de especies incluidos los ácaros.  El camarón y otros mariscos pueden otros alérgenos clinicamente relevantes como la proteína de unión a calcio sarcoplásmico y la arginin-cinasa. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 48. Carnes  La galactosa-α-1,3-galactosa (α-Gal) es una estructura de carbohidratos encontrada en las glicoproteínas de mamíferos excepto los humanos.  La sIgE para α-Gal (anti-α-Gal-IgE) puede estar asociada a anafilaxia tardía y reacciones a las carnes rojas (res, puerco, cabra, y venado.  La α-Gal se encuentra tambien en el cetuximab pudiendo tener reacciones anafilácticas a la aplicación de dicho medicamento.  Se recomienda la prueba específica a α-Gal previo a la aplicación de cetuximab.  La albúmina de suero bovino (Bos d 6 ) es un alérgeno lábil al calor presente tanto en la leche y la carne de res, lo que puede causar reactividad cruzada entre diferentes carne de mamíferos Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 49. Epitelios de mascotas  Los niveles altos de sIgE contra Fel d 1 se asocian con asma en los individuos alérgicos a los gatos.  El reconocimiento de más de tres alérgenos derivados de animales tales como lipocalinas (Mus m 1, Equ c 1, Fel d 4, Can f 1, 2, calicreína (Can f 5 ) , y secretoglobina ( Fel d 1 ) se ha asociado con asma grave en niños en un estudio con niños suecos.  Nordlund B IgE antibodies to animal-derived lipocalin, kallikrein and secretoglobin are markers of bronchial inflammation in severe childhood asthma. Allergy 2012, 67:661–669.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 50. Pólenes  Algunas sensibilidades a alérgenos específicos pueden ser marcadores de síntomas más graves en la alergia al polen, aumentando el riesgo de reacciones sistémicas durante la inmunoterapia, como Ole e 9 y el polen LTP Ole e 7.  La sensibilización a la profilina es común entre los pacientes alérgicos al polen y por lo general se asocia con síntomas clínicos leves o inexistentes.  Para una minoría de los pacientes, la profilina puede ser un factor de riesgo para las reacciones más graves en los individuos alérgicos al polen de olivo y en pacientes alérgicos a ciertos alimentos de origen vegetal como el melón y los cítricos. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 51. Hongos  En reacciones de hipersensibilidad a Aspergillus fumigatus, la presencia de reactividad a Asp f 2, 4, y 6 puede sugerir aspergilosis broncopulmonar alérgica (ABPA ).  Mientras que la sensibilización a Asp f 1 y/o Asp f 3 puede ser más indicativa de asma alérgica. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 52. Cucaracha  Se ha descrito recientemente que la sensibilización a Per a 2 se correlaciona con la gravedad de la alergia a las vías respiratorias en pacientes alérgicos a la cucaracha.  Per a 2 actualmente no está comercialmente disponible para pruebas in vitro; sin embargo, el Per a 2 homólogo Bla g 2 está disponible.  Las cucarachas también contienen tropomiosina de reacción cruzada ( Bla g 7 ), lo que indica un riesgo de reacciones alérgicas a los mariscos o al caracol. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 53. Ácaros  Aunque no hay un perfil específico de sensibilización descrito como un factor de riesgo para la enfermedad de las vías respiratorias inferiores o gravedad de la enfermedad , una relación de sIgE/IgG4 superior para Der p 2 se ha asociado con el asma.  Der p 10 (tropomiosina) es un alérgeno menor en los pacientes alérgicos a los ácaros; sin embargo, todavía puede indicar un riesgo de reacciones alérgicas a los mariscos o al caracol. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 54. Látex  La sensibilización a Hev b 8 (profilina) parece ser clínicamente irrelevante y no relacionada con las reacciones clínicas de látex.  El alérgeno de reacción cruzada responsable del llamado síndrome de látex-fruta no está totalmente aclarado, aunque los datos indican que Hev b 5, 6 y 11 desempeñan un papel. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 55. Veneno de himenóptero  La mayoría de los alérgenos de veneno de himenópteros poseen los CCD que son responsables de una parte de reactividad cruzada entre el veneno de abeja y avispa.  La detección de alérgenos de veneno recombinante puede diferenciar entre la sensibilización genuina al veneno y la reactividad cruzada debido a los CCDs en pacientes con resultados de doble positivo de IgE de las pruebas de veneno tradicionales que se basan en extracto de alérgeno. Canonica et al. World Allergy Organization Journal 2013, 6:17 Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 56. Inmunoterapia  La inmunoterapia con alérgenos es “específica”, lo que significa que sólo se modifica la respuesta inmune contra el alérgeno para el que se realiza la vacunación.  Paradigma  Una historia clínica detallada y las pruebas tradicionales a base de extracto de IgE ( SPT y/o en sIgE in vitro) es suficiente para identificar el alérgeno relevante. Jutel M, Akdis CA Immunological mechanisms of allergen-specific immunotherapy. Allergy 2011, 66:725–732.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 57. Inmunoterapia  La complejidad del diagnóstico es cuando el paciente demuestra una polisensibilización en las pruebas tradicionales de diagnóstico a base de extractos de alérgenos y su historia clínica no es suficiente para aclarar la naturaleza de la sensibilización Jutel M, Akdis CA Immunological mechanisms of allergen-specific immunotherapy. Allergy 2011, 66:725–732.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 58. Inmunoterapia  Un paciente sensible a las gramíneas también puede ser positivo para abedul con las pruebas cutáneas.  Extracto del abedul contiene profilinas (Bet v 2)  Similar Phl p 12  Un paciente que está sensibilizado a un extracto tradicional de ácaros, pero sus anticuerpos sIgE son contra Der p 10 (tropomiosina) y no a Der p 1 , 2 / Der f 1 , 2 , no está indicada la inmunoterapia.  El diagnóstico molecular también pueden mejorar la selección de pacientes para la IT al veneno de himenópteros .  La sensibilización a los alérgenos principales del Api m 1 de las abejas melíferas y Ves v 5 y / o Ves v 1 de las avispas amarillas puede ser útil para discriminar entre sensibilización genuina y la reactividad cruzada debida a los CCD Jutel M, Akdis CA Immunological mechanisms of allergen-specific immunotherapy. Allergy 2011, 66:725–732.Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 60.  Se analizaron 162 sueros pertenecientes a niños diagnosticados con rinitis o asma/rinitis durante el año 2006.  Se cuantificó la IgE específica a pólenes y a los alérgenos recombinantes de Phleum pratense, considerando a Phl p 1+Phl p 5 alérgenos específicos de grupo y Phl p 7+Phl p 12 alérgenos de reactividad cruzada.  Se determinó la relación existente entre los valores de IgE específica obtenidos frente a Phl p 1+Phl p 5 y los obtenidos frente a Phl p 7+Phl p 12. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 61.  El 99.4% de las muestras fueron positivas frente a los alérgenos específicos de Phleum, mientras que el 46% fueron positivas para los alérgenos de reactividad cruzada.  El 38% de los pacientes estaban polisensibilizados a pólenes, siendo el polen de Plantago lanceolata el principal responsable de la polisensibilización.  Los cálculos de probabilidad condicionada demostraron que pacientes con valores de IgE específica de 75-80 kU/L frente a Phl p 1+Phl p 5 tenían una probabilidad mayor del 75% de presentar valores ≥2 kU/L frente a Phl p 7+Phl p 12. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 62.  La utilización de alérgenos recombinantes permite definir el diagnóstico etiológico de la alergia en casos de polisensibilización y reactividad cruzada, siendo por lo tanto una prometedora herramienta de ayuda en el pronóstico y el seguimiento de la población pediátrica alérgica. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 64.  Un joven de 18 años de edad  Rinoconjuntivitis estacional con sensibilización al polen de la vid, pastos, olivo, y las Chenopodiaceae  Dos años anteriores ha desarrollado 2 episodios de prurito generalizado, erupción maculopapular, y angioedema facial unos minutos después de comer uvas. Dr. Macouzet CRAIC Mty
  • 65.  Lolium perenne  Olea europaea  Salsola kali  V vinifera  Uvas comerciales (prick to prick)  Durazno  Plátano  Cereza  Kiwi Dr. Macouzet CRAIC Mty