publico

1. “AÑO DEL DIALOGO Y LA RECONCILIACIÓN NACIONAL”
POLICÍA NACIONAL DEL PERÚ
PUCALLPA – UCAYALI
TEMA : AGENTE QUÍMICO REACTIVO NINHIDRINA.
ASIGNATURA : DOCTRINA Y LEGISLACIÓN.
CATEDRÁTICO : SS PNP GILBERTO HUAYABAN ORBE.
PARTICIPANTES: S1 PNP MAYKO VARGAS CASTRO
S2 PNP JOSE RENGIFO PEREZ
S2 PNP JESUS ALEXIS. AREVALO GARCIA
S3 PNP HEILI JESBI TALANCHA PEREZ
S3 PNP MARIA LUISA JIMENEZ BOBADILLA
S3 PNP MENLLY SINARAHUA SINARAHUA
S3 PNP DEYNER GUEVARA LINARES
S3 PNP ROQUELIN ANIBAL CAMPOS ROJAS
PUCALLPA – PERÚ
2018

2. 2
DEDICATORIA
A mi familia por estar siempre
apoyándome en mi formación como
profesional; a los catedráticos por
impartirme sus conocimientos y
permitirme ser parte de la PNP.

3. 3
ÍNDICE
CARÁTULA ............................................................................................................................1
DEDICATORIA ......................................................................................................................2
ÍNDICE....................................................................................................................................3
INTRODUCCIÓN ..................................................................................................................4
AGENTE QUÍMICO REACTIVO - LA NINHIDRINA........................................................5
Definición................................................................................................................................6
Reactividad. ...........................................................................................................................6
Mecanismo de reacción de la Ninhidrina. .........................................................................7
¿Qué es?................................................................................................................................7
Reacción.................................................................................................................................8
CRIMINALÍSTICA. ................................................................................................................8
El mecanismo de reacción se da de la siguiente manera: ...........................................10
CONCLUSIONES ...............................................................................................................11
REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA......................................................................................12
ANEXOS...............................................................................................................................13

4. 4
INTRODUCCIÓN
La ninhidrina es específica para aminoácidos y proteínas, para diferenciar entre
carbohidratos y aminoácidos y proteínas. Reacciona con todos los α-aminoácidos
contenidos en la proteína dando lugar a la formación de un complejo color purpura
cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, a excepción de la prolina e hidroxi-prolina que dan
lugar a complejos de color amarillo. Este complejo colorido (llamado púrpura de
Ruhemann) se estabiliza por resonancia, el cual es independiente de la coloración
original del aminoácido y/o proteína.
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. Por ejemplo,
en aquellos casos donde la prueba de Biuret es negativa y positiva la de Ninhidrina,
indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres

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AGENTE QUÍMICO REACTIVO - LA NINHIDRINA
La Ninhidrina se ha usado en todos los avances en análisis de aminoácidos desde
que en 1949 Stein y Moore, desarrollaron las bases de los métodos cromatográficos.
Así los procedimientos más actuales y los instrumentos más sensibles necesitan la
excelente respuesta de color y blancos limpios que sólo la ninhidrina puede ofrecer.
La Ninhidrina es estable indefinidamente y no necesita refrigeración o cuidados
especiales para su almacenamiento: es suficiente mantener la botella bien cerrada,
evitar el sol directo y el amoníaco en la atmósfera del laboratorio.
La reacción entre los compuestos que contengan aminoácidos y la ninhidrina es muy
sensible. McCaldin ha estudiado todas las fases de la química de la Nihidrina y ha
propuesto un mecanismo para la reacción con los aminoácidos, teniendo en cuenta
los aldehídos, dióxido de carbono, amoniaco e hidridantina. Con los aminoácidos
secundarios prolina e hidroxiprolina, se forma un compuesto amarillo (detectable a
440 nm). La Ninhidrina decarboxila y deamina los aminoácidos primarios formando
el compuesto púrpura conocido como Púrpura de Ruhemann6, que absorbe a 570
nm.
En 1958 Spackman, Stein y Moore, adaptaron esta reacción a un sistema totalmente
automático de análisis de aminoácidos con dos columnas. Moore y Stein definieron
las necesidades de un agente reductor (como el cloruro de estaño) para obtener
valores de color reproducibles para el análisis de aminoácidos con nihnidrina. James
sugirió el uso de cloruro de titanio para eliminar los precipitados causados por el uso

6. 6
del cloruro de estaño. Los solventes más usuales son el metilcellosolve (etilénglicol
monometil éter) tamponado a pH 5.5 con Acetato Sódico 4M, y el DMSO tamponado
a pH 5.2 con acetato de Litio, éste último permitiendo una mayor estabilidad que el
metilcellosolve (Kirschenbaum). El rol de la hidridantina en el análisi de aminoácidos
fue descrito por Lamonthe y McCormick.
La sensibilidad de un sistema con ninhidrina depende de varios factores. Los
aminoácidos producen rendimientos de color ligeramente diferentes y estos valores
pueden variar de una preparación de reactivos a otra. La ninhidrina también es
sensible a la luz, al oxígeno atmosférico y a cambios de pH y temperatura. Cundo la
ninhidrina empieza a oxidarse, su color no se desarrolla bien a 570nm, mientras que
la adsorción a 440nm se mantiene bastante constante. Una altura del pico de la
Prolina a 440 nm cercana a la altura del pico del ácido glutámico a 570nm, para
cantidades iguales de ambos, indica una degradación del reactivo.
Definición.
La ninhidrina es un poderoso agente reactivo común para visualizar las bandas de
separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es utilizada
con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos Reacciona con todos
los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que
varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de
Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es
independiente de la coloración original del aminoácido.
Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos
casos donde no da positiva la prueba de Biuret, da positiva la de ninhidrina, e indica
que no hay proteínas pero sí hay aminoácidos libres de un ph 4 y 8.4
Reactividad.
El átomo de carbono de un carbonilo tiene una carga positiva parcial, por lo que el
C central de un 1,2,3-tricarbonilo es menos estable y más electrofílico que una
cetona simple. En la mayoría de los compuestos, un carbonilo es más estable que
la forma dihidroxi (hidrato). Sin embargo, la ninhidrina es un hidrato de carbono
estable del C central porque esta forma no tiene el efecto desestabilizador de los

7. 7
centros adyacentes de carbonilo parciales positivos. El indano-1,2,3-triona reacciona
rápidamente con nucleófilos.
Tenga en cuenta que con el fin de generar la ninhidrina cromóforo, la amina se
condensa con una molécula de ninhidrina para dar una base de Schiff. Así pues,
sólo amonia y aminas primarias proceden más allá de este paso. En este paso, debe
haber también un protón alfa (* H en el diagrama) para la transferencia de base de
Schiff, por lo que una amina adyacente a un carbono terciario no puede ser
detectada por la prueba de ninhidrina. La reacción de ninhidrina con aminas
secundarias da una sal de iminio, que es también de color, y esto es generalmente
de color amarillo-anaranjado en color.
Mecanismo de reacción de la Ninhidrina.
Es una de las reacciones más sensibles para identificar aminoácidos en general, ya
que detecta una parte de aminoácido en 1 500 000 partes de agua. Aminoácidos y
muchas aminas primarias dan un color violeta característico. La prolina da coloración
amarilla. Por su sensibilidad esta reacción se emplea para valoración cuantitativa de
amonoacidos por colorimetria. La valoración de aminoácidos en orina, por ejemplo,
tiene importancia en medicina ya que en algunas enfermedades como hepatopatías,
infecciones agudas o diabetes mellitus en las que se presente hiperaminoacidemia,
estas se ven acompañadas por aminoaciduria paralela. Algunas enfermedades
metabolicas congenitas dan lugar a la eliminación anormal de algunos aminoácidos
en la orina (p ej fenilcetonuria).
¿Qué es?
La ninhidrina es un poderoso agente y reactivo común para visualizar las bandas de
separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es utilizada
con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos. Reacciona con todos
los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que
varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de
Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es
independiente de la coloración original del aminoácido esta prueba es positiva tanto
para proteínas como para aminoácidos. en aquellos casos donde no da positiva la

8. 8
prueba de biuret y da positiva la de ninhidrina, indica que no hayproteinas, pero si
hay aminoácidos libres.
Reacción.
La ninhidrina reacciona específicamente con el grupo de a-amino de los
aminoácidos, ya sean libres o bien unidos mediante enlaces peptídicos.
La ninhidrina a pH entre 4 y 8 es un oxidante muy fuerte y siempre reacciona con los
grupos de a-amino libreando amonio, el cual se condensa con la ninhidrina reducida
y con otra molécula de ninhidrina formando un compuesto coloreado que varía de
azul a violeta púrpura.
La ninhidrina es un compuesto químico que se utiliza en el mundo de la
cromatografía sobre capa ficna para visualizar las proteínas. Esta sustancia tiene la
particularidad de colorear los aminoácidos (secundarios o primarios) en amarillo o
en rojo. También denominada nihidrina se utilizó durante mucho tiempo en medicina
legal para visualizar las huellas digitales sobre materiales como el papel o el cartón
antes de ser destronada por otras técnicas más modernas y más rápidas.
CRIMINALÍSTICA.
Otro buen reactivo para el revelado de huellas latentes sobre superficies como el
papel es el empleo de ninhidrina o hidrato de tricetohidrindeno, que es una sustancia

9. 9
conocida por su reacción con los aminoácidos, descubierta en el año de 1954. Este
químico fue también usado primariamente en superficies porosas.
Tiene la reputación de revelar huellas antiguas (15 años). La Ninhidrina es un
químico que reacciona con los aminoácidos hallados en la transpiración y forma un
producto azul-violeta que es conocido como púrpura de Ruhemann. Es un polvo que
necesita ser disuelto en un solvente y luego puede aplicarse sobre el papel. El
revelado ocurre después de unas horas o puede ser acelerado incrementando la
temperatura y humedad mediante la utilización del horno de convección. Utilizando
especiales combinaciones de solventes puede ser utilizado para aplicaciones
específicas, por ejemplo, para evitar que el solvente disuelva la tinta de un
documento. En el mercado suele hallarse disponible en viales con solución
concentrada lista para usar y solución premezclada con base de metanol o acetona.
Los viales contienen una cantidad pre-medida de ninhidrina que se mezcla con 1 litro
de solvente, dándole la concentración de solución exacta que se necesita para
trabajar.
La ninhidrina o hidrato de tricetohidrindeno, como ya se mencionó, reacciona con los
aminoácidos provenientes de la transpiración de la piel revelando impresiones
lofoscópicas en un período de reacción que oscila de una o cinco horas, pero si se
aplica calor, puede acelerarse el proceso hasta en menos de diez minutos.
"La reacción de la ninhidrina cuantifica la reacción de los aminoácidos del grupo alfa
amino. La ninhidrina reacciona rápidamente con el grupo amino, lo oxida y libera
amonio el cual se condensa con la ninhidrina reducida, y con otra molécula de
ninhidrina libre, para producir un aducto púrpura."
En la técnica de revelado se usará la ninhidrina en una solución con alcohol etílico o
acetona (Ninhidrina 0.5 gramos, en 10 ml. de acetona), aplicándose con un
atomizador, lo cual hará que aparezca una fina neblina que permita embeber en
forma completa y uniforme el documento; posteriormente se deja a luz solar, o bien
se puede acelerar el proceso aplicándolo calor, a través de una fuente productora
del mismo como puede ser una plancha u horno de convección, teniendo especial
cuidado en no dañar (quemar) el objeto de estudio.
Si se utiliza la técnica de revelado por luz solar, es recomendable esperar varios
días, con el fin de obtener mejores resultados; las huellas van a adquirir con el
transcurso del tiempo una profunda sombra rosa. Se debe evitar toda contaminación

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con las huellas dactilares del perito, aún cuando el papel esté ya seco, pues se corre
el riesgo de que aparezcan nuevas huellas lofoscópicas reveladas; por lo anterior es
imprescindible que siempre se haga uso de guantes de látex para la protección de
las manos.
Cuando se aplica la técnica de ninhidrina en unión de otros reactivos, tales como
vapores de yodo o nitrato de plata, el uso de la ninhidrina limita el subsiguiente
revelado con vapores de yodo, pero aparentemente no decrece la sensibilidad de
las huellas latentes al uso del nitrato de plata. La ninhidrina también puede utilizarse
en su presentación en cristales. Es importante mencionar que las huellas dactilares
frescas, responden mejor al reactivo del nitrato de plata, mientras que las huellas
antiguas lo hacen al reactivo de la ninhidrina.
El mecanismo de reacción se da de la siguiente manera:
- Los aminoácidos al contado con la ninhidrina producen una reacción colorida.
- El alfa aminoácido, es hidrolizado para formar el alfa-ceto-ácido el cual se
descarboxila bajo condiciones de reacción.
- El aminoácido, produce la reacción con cantidades equimoleculares de ninhidrina
reducida y oxidada, para formar un compuesto azul púrpura, el cual es
proporcional a la cantidad de aminoácidos presentes.

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CONCLUSIONES
La ninhidrina reacciona específicamente con el grupo de a-amino de los
aminoácidos, ya sean libres o bien unidos mediante enlaces peptídicos.
La ninhidrina a pH entre 4 y 8 es un oxidante muy fuerte y siempre reacciona
con los grupos de a-amino libreando amonio, el cual se condensa con la
ninhidrina reducida y con otra molécula de ninhidrina formando un compuesto
coloreado que varía de azul a violeta púrpura

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REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
http://blog.pucp.edu.pe/blog/quimicaalimentos/2017/10/31/reacciones-de-
reconocimiento-de-proteinas/
http://www.cromlab.es/reac_der_aa_ninhydrin.htm
https://es.wikipedia.org/wiki/Ninhidrina
http://bioquimicatm2.blogspot.com/2015/02/aminoacidos-y-proteinas_3.html
http://www.mailxmail.com/curso-criminalistica-huellas-dactilares/ninhidrina
http://www.academia.edu/28698417/Experimento_1_reacci%C3%B3n_con_
ninhidrina
http://studyres.es/doc/622412/reacci%C3%B3n-de-la-ninhidrina-para-
amino%C3%A1cidos

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ANEXOS