Este documento resume las características de identificación de varios patógenos bacterianos importantes, incluyendo Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, Salmonella Typhi, y Neisseria gonorrhoeae. Describe sus requisitos de cultivo, pruebas para diferenciarlos de otros microorganismos similares, y pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos.

2. • Haemophilus influenzae
• Neisseria meningitidis
• Streptococcus pneumoniae
• Neisseria gonorrhoeae
• Salmonella serotipo Typhi
• Shigella
• Vibrio cholerae

3. • Haemophilus influenzae
• Neisseria meningitidis
• Streptococcus pneumoniae

4. Haemophilus influenzae
• Es el agente etiológico más frecuente de
neumonía, meningitis, otitis media y
conjuntivitis.
• La meningitis por H. influenzae se presenta
casi exclusivamente en niños menores de 5
años
• La enfermedad invasiva por H. influenzae es
causada por microorganismos con el
polisacárido capsular tipo b.

5. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN
• La muestra debe ser sembrada en agar
chocolate suplementado y atmosfera de CO2
• H. influenzae se caracterizan por ser bacilos
gram negativos, pequeños o cocobacilos, que
requieren factores de crecimiento X y V.
• La identificación de aislamientos incluye la
prueba de los requerimientos de factores X y
V y serotipificación.

7. Requerimientos de factores de
crecimiento: factores X y V en discos
de papel
La cepa superior (véase la flecha) está creciendo solamente alrededor del disco que
contiene ambos factores X y V;
por ello puede considerarse presuntamente H. influenzae

8. Streptococcus pneumoniae
• Streptococcus pneumoniae es un agente común
de las enfermedades como:
• Neumonía
• Otitis media aguda
• Meningitis
• Conjuntivitis
Afectan a los niños y los adultos en todo el
mundo.

9. IDENTIFICACIÓN
agar sangre y agar chocolate
S. pneumoniae colonias Pequeñas,
grisáceas y mucoides
y están rodeadas de una zona verdosa S. pneumoniae son
de alfa hemólisis (α hemólisis diplococos o cocos en
cadenas Gram positivos

10. IDENTIFICACIÓN
• La diferenciación entre las cepas de
• S. pneumoniae y de S. viridans pruebas de:
Optoquina = SENSIBLE S. pneumoniae
• Solubilidad en bilis = positiva S. pneumoniae
• Streptococcus viridans
• pruebas de optoquina = Resistente
• Solubilidad en bilis = Negativa

11. optoquina
• Susceptibilidad a la optoquina se realiza con
un disco de 6 mm, con 5 μg de optoquina
• Toque la colonia sospechosa α-hemolítica con
un asa bacteriológica estéril y en una placa de
agar sangre estríe para aislamiento en línea
recta.
• Se pueden probar a la vez varias cepas en la
misma placa, estriadas en líneas paralelas y
marcadas apropiadamente.

12. Halo de 16 mm = S

13. SOLUBILIDAD EN BILIS
• La prueba de solubilidad en bilis se desarrolla
en aislamientos con pequeñas zonas de
inhibición en la prueba de susceptibilidad a la
optoquina
• Se requieren dos tubos para la prueba de
solubilidad en bilis por cada cepa sospechosa
de S. pneumoniae

14. SOLUBILIDAD EN BILIS
• Tome una asa de la cepa sospechosa de un
crecimiento fresco en una placa de agar
sangre y prepare una suspensión de células
bacterianas en 0,5 ml de salina estéril.
• Divida la suspensión en dos cantidades iguales
(0,25 ml por tubo). Añada 0,25 ml de salina a uno
de los tubos y 0,25 ml de desoxicolato de sodio al
2% (sales biliares)
• INCUBAR 2 HORAS

15. SOLUBILIDAD EN BILIS
Dexocicolato

17. Neisseria meningitidis
• Neisseria meningitidis es el agente etiológico de
enfermedad meningocócica:
• Bacteriemia
• Meningitis meningocócicas
• Estos dos síndromes clínicos se superponen y
pueden presentarse simultáneamente.
La enfermedad meningocócica se distingue de
otras meningitis bacteriana por el potencial de
generar grandes epidemias

18. • Históricamente, estas epidemias han sido
causadas por el serogrupo A, seguido en
menor propagación por el serogroupo C.
• Recientemente, dos grandes epidemias de
N. meningitidis serogrupo 135.
• En 2000 se produjo un brote de enfermedad
meningocócica en Arabia Saudita (con 253
casos y 70 defunciones) causado por un clon
virulento del serogrupo W135.

19. IDENTIFICACIÓN
• GRAM DE LA MUESTRA = Diplococos gram
negativos
• Siembra en Agar sangre y chocolate El
crecimiento es grisáceo, no hemolítico, redondo,
convexo, liso, húmedo, de colonias relucientes
con bordes claramente definidos
• Prueba de oxidasa: positiva
• Prueba de utilización de carbohidratos

20. Prueba de utilización de
carbohidratos
• Glucosa + (amarillo)
• Maltosa + (amarillo)
• Lactosa – (rojo)
• Sacarosa – (rojo)
• = N. meningitidis
• serotipificación

22. P de oxidasa
Fermentación de azucares

23. Prueba de susceptibilidad a
los antimicrobianos de N.
meningitidis
• N. meningitidis comúnmente no muestran
resistencia a muchos agentes antimicrobianos.
• Por lo regular, hay un bajo nivel de resistencia a la
penicilina
• El cloranfenicol tiende a ser la droga de uso
empírico seleccionada para el tratamiento de los
pacientes con meningitis causada por N.
meningitidis
• para la profilaxis, la rifampicina y las sulfonamidas
se utilizan frecuentemente

24. Salmonella serotipo Typhi
• La Salmonella serotipo Typhi (S. Typhi), agente
etiológico de la fiebre tifoidea
• Los serotipos “paratifoídicos” de Salmonella
causan un síndrome similar a la fiebre tifoidea
• las infecciones por S. Typhi se transmiten por
los alimentos y el agua contaminados con
heces de personas con infección aguda
El ser humano es el único huésped de S. Typhi

25. • Las cepas de S. Typhi se aíslan con mayor
frecuencia de la sangre durante la primera
semana de la enfermedad
• también pueden encontrarse durante la
segunda y tercera semana
• Los cultivos fecales son positivos en la primera
semana con fiebre, pero el mayor número de
cultivos positivos se obtiene en la segunda y
tercera semanas de la enfermedad.

26. • Los cultivos de médula ósea son
frecuentemente positivos (90%de los casos) y
es más probable encontrar en ellos S. Typhi
que en cultivos de cualquier otro sitio,
especialmente cuando el paciente ya ha
recibido tratamiento
• El microorganismo también puede aislarse de
aspirado duodenal
• 25% de cultivos de orina.

27. Identificación de S. Typhi
• Salmonella es un bacilo gram negativo
enteropatogeno
• Si los cultivos de bacilos gram negativos se han
obtenido de muestras de sitios normalmente
estériles o si los cultivos dan colonias incoloras en
agar MacConkey, se debe inocular AHK/AHTA. Los
aislamientos que tienen una reacción típica de
• S. Typhi en AHK/AHTA deben entonces someterse
a prueba con antisueros Vi y D.

28. En agar hierro triple
Colonias de Salmonella .Typhi en
azúcar (AHTA) o en
Agar hierro triple azúcar (AHTA)
agar hierro de Kligler
(AHK), los aislamientos
de S. Typhi producen
característicamente
una
cuña alcalina (roja,“K”),
el extremo (tope)
amarillo (amarillo,“A”) y
una pequeña cantidad
de agar ennegrecido (
H2S, +) en el sitio de
inoculación de la cuña
y en la línea de
inoculación. No
produce gas (G).

29. Serología en lámina para la
identificación de S. Typhi
• Los cultivos de agar hierro de Kligler o agar hierro
triple azúcar que se sospecha que son S. Typhi
deben analizarse serológicamente con antisueros
de Salmonella Vi y “O” del grupo D.
• Vi es un antígeno capsular, si este está presente
puede enmascarar la reacción del grupo somático
“O”.
• Aislamientos de S. Typhi serán normalmente
positivos tanto para Vi como para el antisuero D
(es posible que la positividad sea débil en
ambos).

30. Pruebas de susceptibilidad a los
antimicrobianos de S. Typhi
• Agentes antimicrobianos para pruebas de
susceptibilidad de aislamientos de Salmonella
serotipo Typhi
• Ampicilina
• Cloranfenicol
• Trimetoprima-sulfametoxazol (cotrimoxazol)
• Ácido nalidíxico*
• Si es aislamiento es resistente al ácido nalidíxico, debe
someterse a prueba de susceptibilidad a ciprofloxacino,
• y es probable que exhiba susceptibilidad reducida a ese
antibiótico.

31. Patógenos
Bacterianos de
Transmisión Sexual
Neisseria gonorrhoeae

32. Neisseria gonorrhoeae
IDENTIFICACIÓN CONFIRMATORIA
• Las cepas de Neisseria gonorrhoeae, también
conocida comúnmente como “gonococo”

33. A ESTUDIAR AMIGOS