Pequeña presentacion sobre las practicas 5 y 6 del manual de Bioquimica I, temas a tratar: Enzimas y Ácido Áscórbico.

2. Las enzimasson moléculas de naturaleza proteica y
estructural que catalizan reacciones químicas, siempre que
sean termodinámicamente posibles.
Las enzimas actúan sobre
unas moléculas denominadas sustratos, las
cuales se convierten en moléculas diferentes
denominadas productos.

3. Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas
no son consumidas por las reacciones que catalizan, ni
alteran su equilibrio químico. Sin embargo, las enzimas
difieren de otros catalizadores por ser más específicas.
La actividad de las enzimas puede ser afectada por
• Otras moléculas. (Inhibidores enzimáticos).
• Por su nivel de pH
• Temperatura extrema.
• Concentración propia de enzima o sustrato
• y otros factores fisicoquímicos

4. Los inhibidores son moléculas que regulan la actividad
enzimática, inhibiendo su actividad. A grandes rasgos,
pueden clasificarse en reversibles e irreversibles. Las
irreversibles se unen covalentemente a la enzima sin
posibilidad de revertir la modificación, siendo útiles en
farmacología.

6. • Ligasas: catalizan la degradación o síntesis de los enlaces
denominados "fuertes" mediante el acoplamiento a moléculas de
alto valor energético como el ATP.
• Isomerasas: catalizan los cambios de posición de un grupo en
determinada molécula obteniendo formas isoméricas.
• Liasas: catalizan reacciones en las que se eliminan grupos H2O,
CO2 y NH3 para formar un doble enlace o añadirse a un doble
enlace.
• Hidrolasas: catalizan reacciones de hidrólisis con la consiguiente
obtención de monómeros a partir de polímeros.
• Transferasas: transfieren grupos activos (obtenidos de la ruptura
de ciertas moléculas) a otras sustancias receptoras.
• Oxidorreductasas: catalizan reacciones de oxidorreducción
o redox.

7. Un cofactor es un componente no proteico, termoestable y de baja
masa molecular, necesario para la acción de una enzima. El cofactor
se une a una estructura proteica, denominada apoenzima, y el
complejo apoenzima-cofactor recibe el nombre de holoenzima.
Aquellos cofactores que están covalentemente unidos a la
apoenzima son denominados grupos prostéticos, ya sean orgánicos
(coenzimas) o inorgánicos.
Los cofactores son básicamente de dos tipos, iones metálicos y
moléculas orgánicas, denominadas coenzimas.

8. • Son indispensables en la transducción de señales y en procesos de regulación.
• También son capaces de producir movimiento.
• Los virus también pueden contener enzimas implicadas en la infección celular.
• Una importante función de las enzimas es la que presentan en el sistema
digestivo de los animales.
• Varias enzimas pueden actuar conjuntamente en un orden específico, creando
así una ruta metabólica. En una ruta metabólica, una enzima toma como
sustrato el producto de otra enzima.

10. Equipos:
• Baño María.
• Hot plate.
Materiales:
• Tubos de ensayos.
• Pipetas.
• Termómetros.
• Envase con hielo.
Procedimiento:
• En un Beaker de 25-30mL. Coloque 5mL de
saliva y añada 25mL. De agua destilada,
mezcle bien el contenido.
Reactivos:
• Almidón al 1%.
• Solución de yodo.
• Agua destilada.
• Soluciones amortiguadoras pH=5;
pH=7 y pH=9.
Objetivos:
• Determinar el pH óptimo de la enzima.
• Determinación de la temperatura
óptima de la Enzima.
• Determinación de concentración
óptima de la Enzima.

11. SEGUNDA PARTE

12. Vitaminas
• Son sustancias orgánicas, de naturaleza y
composición variada.
• Se necesitan en pequeñas cantidades,
aunque su presencia es imprescindible
para el desarrollo normal del organismo.
• Las necesidades vitamínicas varían según
las especies, con la edad y con la actividad.
• Los vegetales, hongos y microorganismos
son capaces de elaborarlas por sí mismos.
Los animales, salvo algunas excepciones,
carecen de esta capacidad, por lo que
deben obtenerlas a partir de los alimentos
de la dieta. En algunos casos los animales
obtienen algunas vitaminas a través de sus
paredes intestinales, cuya flora bacteriana
simbionte las producen.

13. Definición
• El ácido ascórbico, o Vitamina C,
es una vitamina hidrosoluble,
emparentada químicamente con
la glucosa.
• Solamente es una vitamina para
el hombre, los primates
superiores, el cobaya, algunos
murciélagos frugívoros y algunas
aves.

14. ¿Por qué ácido?
• La acidez no se debe a un grupo
carboxílico, sino a la posibilidad de
que se ionice el hidroxilo situado
sobre el carbono 3, formando un
anión que queda estabilizado por
resonancia.

15. Fuentes
• El ácido ascórbico solamente se
encuentra en concentraciones
significativas en los vegetales.
• En muchas frutas se encuentra en
concentraciones elevadas (50
mg/100g en los cítricos), pero para
muchas personas el aporte principal
se obtiene de verduras y hortalizas,
como repollo o coliflor.
• Las papas nuevas contienen unos 30
mg/100mg, aunque lo van perdiendo
durante el almacenamiento.

16. Sensibilidad a la oxidación
• El ácido ascórbico es particularmente
sensible a las reacciones de oxidación,
destruyéndose con gran facilidad durante el
procesado de los alimentos en presencia de
oxígeno.
• Inicialmente en la oxidación pasa de
ascorbato a dehidroascorbato, en una
reacción que es reversible, por lo que el
dehidroascorbato mantiene en principio el
valor como vitamina C.
• La lactona correspondiente al dehidroascorbato es mucho menos estable que la del ascorbato,
por lo que se hidroliza con gran facilidad para producir ácido 2, 3 dicetogulónico, que
posteriormente puede degradarse por descarboxilación.

17. Escorbuto
Las consecuencias clínicas van desde la
debilidad de las encías a las hemorragias
diseminadas en todo el organismo.
Descrita en textos del siglo XIII, desde el punto de vista histórico el escorbuto fue muy
importante, especialmente por su incidencia en las flotas de los siglos XVI al XVIII, época en la
que causaba más bajas entre las tripulaciones que las propias batallas navales. Entre otros
casos, tres cuartas partes de los tripulantes de la expedición de Magallanes murieron por causa
del escorbuto
La deficiencia de ácido ascórbico produce
una enfermedad conocida como escorbuto,
con daños relacionados con la síntesis del
colágeno, ya que el ácido ascórbico es un
cofactor esencial en este proceso.

18. Practica de hoy
Objetivo
Determinar le estado nutricional con relación al acido ascórbico mediante la prueba de
saturación del acido ascórbico, se basa en administrar una cantidad estándar de acido
ascórbico al paciente y luego medir la cantidad de acido ascórbico eliminado en orina.
Fundamento:
Cuando la cantidad de la vitamina en la dieta es suficiente se dice que los tejidos del
cuerpo están saturados de esta vitamina. En este caso, la cantidad de acido ascórbico
excretado en la orina depende del ingerido. En una persona normal, la excreción de
vitamina C en 24 horas esta en el orden de 10-60mg, valores por debajo de 10mg/día
indican una deficiencia de la vitamina.

19. Practica de hoy
Fundamento:
La recolección de muestras de orina cada 24 horas no es muy conveniente y es mas
recomendable medir la excreción de acido ascórbico en la orina después de ingerir una
dosis altas de la vitamina.
Después de suministrar el acido ascórbico a la persona se mide la excreción máxima 4
o 6 horas después de ingerida la dosis. Si la excreción es menor de 40-50mg, se repite
la prueba hasta que se logre la saturación.
En el caso de personas adultas normales , la saturación debe lograrse en 2 o 3 días,
pero en casos de escorbuto se necesitan hasta 2-3 semanas. Periodos entre estos dos
indican algún grado de deficiencia de vitamina C.

20. Practica de hoy
Reactivos:
• Solución estándar de
indofenol.
• Solución de acido acético-
meta fosfórico.
Materiales:
• Tubos de ensayo.
• Pipetas.
• Buretas.
• Beaker.
• Ácido ascórbico
(tabletas).
• Colector de orina.

21. Practica de hoy
Colecta de muestra:
1. Se escogerán 4 estudiantes, dos fumadores y dos ni fumadores para evaluar s si
existe alguna diferencia entre ambos grupos (Estos no han debido ingerir frutas o
alimentos que contengas acido ascórbico el día de la practico)
2. Al inicio de la practica se les entregara a los estudiantes un colector de orina
conteniendo 3ml de acido meta fosfórico en el cual deben de orinar antes de ingerir
la vitamina C.
3. Después de ingerir la tableta, en un periodo de 30min se le suministrara otro colector
con acido meta fosfórico para la segunda toma de orina.
4. Transcurrida una hora los estudiantes tomaran de nuevo otro colector para la tercera
y ultima muestra de orina.

22. Practica de hoy
Procesamiento de muestras:
1. En un beaker medir 10ml de orina de cada muestra (V1), proceder a la titulación de
cada muestra con la solución de indofenol (V2).
2. La titulación habrá culminado una vez el color rosado permanezca durante al menos
5 segundos.
Análisis de datos:
[ ]1= Concentración estándar de indofenol
V1=Volumen de orina
V2=Volumen gastado de indofenol
Partiendo que 𝑉1 × [ ]1 = 𝑉2 × [ ]2
Donde [ ]2 es mi incógnita
Donde 𝑚 es la masa de ácido ascórbico
[ ]2=
𝑉2 × [ ]1
𝑉1
𝑚 = 𝑉1 × 2

23. Ya se acabó
A jetudiar