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Guía de Actividades
Prácticas
Patología General
Universidad San Sebastián, Campus Valdivia
Tutor: Javier Rosas Bahamonde
1er Semestre
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
NORMAS GENERALES AL ENTRAR AL LABORATORIO
I.- De las Prohibiciones.
Está estrictamente prohibido:
* Hablar por celular en clases prácticas.
* Sacar fotografías a las muestras (ya sea con celular o cámara digital).
* Comer en el laboratorio.
* Intercambiarse material en Test de entradas o en Muestra Problema.
II.- De las Obligaciones.
Será de obligatoriedad del estudiante.
* Llegar a la hora a clases prácticas.
* Traer delantal blanco, limpio y presentable.
* Traer croquera o cuaderno de dibujo.
* Traer lápices de colores (de similar color a las tinciones histológicas)
* Traer manual de apoyo o clases teóricas para complementar el estudio.
III.- De las Responsabilidades.
El estudiante al terminar el trabajo práctico:
* Debe sacar la muestra con cuidado desde la platina del microscopio.
* Debe verificar que el microscopio esté apagado y desenchufado antes de guardarlo.
* Debe dejar su área de trabajo limpia y ordenada.
* Debe mostrar su dibujo rotulado a los tutores encargados. (ayudantes y /o profesor)
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
IV.- De las Calificaciones Prácticas.
Estas corresponden al porcentaje real de notas de laboratorio (según programa de la asignatura y/o
syllabus), el porcentaje total de la Prueba Práctica queda a criterio del profesor encargado de la asignatura.
1.- Prueba Práctica. (Muestra Problema)
* Se realizará una sola prueba práctica, o varias pruebas que incluirán todas las muestras vistas antes del
solemne o certamen o todas durante el semestre, mediante la cual Ud. deberá ser capaz de identificar
correctamente las características histopatológicas que se le pidan.
2.- De las Características de la Muestra Problema.
*La muestra problema tiene una ponderación de un 65% de exigencia.
*Tendrá solo una oportunidad para rectificarse de su respuesta, para ello tendrá 5 segundos previo aviso de
los tutores encargados mediante un cronómetro con alarma a utilizar.
*Se preguntará materia teórica, al realizar la prueba práctica.
3.- De las Inasistencias a Prueba Práctica.
* No habrá recuperación de Prueba Práctica, de tal manera que la inasistencia a aquella evaluación se
calificará con nota mínima de 1,0.
* Tampoco rige certificado médico para esta prueba práctica (ya que es avisada con antelación) previo
calendario académico de la asignatura, entregada en la sesión 01 del curso.
* Aquellas personas que se sorprenda en actitudes sospechosas de copia o prestando cualquier tipo de
material durante el transcurso de esta prueba práctica, se calificará con nota mínima de 1,0.
4.- De las Revisiones de las Actividades Prácticas.
* Se realizará 1 revisión global al finalizar el semestrede las muestras, las cuales tienen que estar
correctamente dibujadas y rotuladas, ya que el cuaderno tendrá una nota de calificación de actividades
prácticas.
Atte. Equipo de Trabajo, Histopatología.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
EL MICROSCOPIO
Objetivos:
10X: Amplía la imagen en diez veces, con respecto a su tamaño original.
40X: Amplía la imagen en cuarenta veces, con respecto a su tamaño original.
100X:Amplía la imagen en cien veces, con respecto a su tamaño original; generalmente se utiliza aceite de
inmersión para lograr mayor nitidez en la muestra.
Revólver
Objetivo
Pinza para
sujetar la
muestra
Platina
Condensador
Lámpara
Perilla para ajustar
la intensidad de la
luz
Brazo
Macrométrico
Micrométrico
Base
Ocular
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
ROTULACIÓN EN EL CUADERNO ¿CÓMO REALIZARLA?
Ejemplo.
(Fig.1)
10X :A continuación usted deberá dibujar en aumento 10X, para tener una visión global de la muestra.
40X:Posteriormente, debe dibujar en un aumento de 40X, para definir detalles y rotular.
Una vez realizado sus dibujos, debe colocar:
-ETIOLOGÍA y CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS
- HISTOPATOLOGÍA
(Alteraciones celulares y estructurales, Ej: Hipercromatismo nuclear, Pleomorfismo Celular)
Este esquema representa la hoja de su cuaderno de croquis o croquera, en la cual usted deberá dibujar lo
que observa en el microscopio, con los aumentos correspondientes (10X, 40X), luego de ello rotule lo que
observa y haga las descripciones histológicas correspondientes.
MUESTRA Nº 1: GANGRENA EN PULMÓN
(Ud. deberá colocar siempre el título de la muestra a identificar)
Posteriormente usted deberá dibujar la muestra a nivel
macroscópico tal como la ve en la figura.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
TINCIONES HISTOLÓGICAS
El propósito de una tinción histológica es hacer fácilmente visibles estructuras histológicas. Además, permite
diferenciar los componentes celulares (núcleo, citoplasma, gránulos secretorios, etc.) y la matriz extracelular
(colágeno, etc.). Según la técnica de coloración que escojamos podremos colorear los componentes que
necesitemos observar.
En Histología hay varias técnicas para poder observar las estructuras histológicas, dentro de las cuales se
destacan las siguientes:
1.- Hematoxilina – Eosina (H-E)
Esta técnica opera bajo el principio ácido-base, se combinan dos colorantes (hematoxilina –eosina)
Hematoxilina: Colorante básico, tiñe los componentes ácidos o basófilos de la célula. Ejemplo: núcleo
(contiene acidos nucleicos y citoplasma que contiene RNA, glucosaminoglicanos ácidos de la MEC.
Eosina: Colorante ácido, tiñe los componentes básicos, acidófilos o eosinófilos, Ejemplo: membrana celular,
citoplasma (no especializado y no tiene muchos ribosomas) componentes extracelulares básicos como el
colágeno.
2.- Histoquímica.
La Histoquímica nos permite revelar grupos químicos específicos y enzimas específicas en los
tejidos.
La presencia de enzimas de los tejidos se puede revelar adicionando el corte en el sustrato para esa
enzima. Por lo tanto uno de los productos de la reacción enzimática coloreada (para poder verla al
microscopio) e insoluble (para que precipite y no difunda hacia los costados) que se deposita al lado de la
enzima.
3.- Inmunohistoquímica.
El corte histológico se coloca en un buffer específico que otorgue un pH adecuado para que la reacción del
anticuerpo sea estable, agregamos el anticuerpo a la solución y luego el anticuerpo reconoce la molécula y
se asocia con ella como dos piezas de rompecabezas. Los anticuerpos normalmente se agregan
covalentemente a una enzima (esa es la relación con la histoquímica) que puede ser peroxidasa. Una vez
que los anticuerpos reconocen su molécula, se agrega el sustrato para esa enzima, por lo tanto la enzima
reconoce es sustrato y produce un nuevo producto coloreado e insoluble y se deposita justo en la región en
la que el anticuerpo está interactuando con la molécula que está reconocida.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO INTRODUCTORIO
NORMAS GENERALES
- NORMAS DE MANEJO DEL MICROSCOPIO.
Observaremos una muestra de raíz de cebolla.
Para enfocar paso a paso:
1.- Lea toda esta secuencia antes de proceder a usar el microscopio
2.- Encienda el microscopio y ajuste la luz a una intensidad moderada.
3.- Gire el revolver y seleccione el objetivo menor (el de menor tamaño, 4X).
4.- Baje la platina hasta el tope con el macrométrico.
5.- Coloque la preparación en la platina, centrarla y sujetarla con las pinzas.
6.- Observe por el ocular, eleve la platina con el macrométrico hasta observarla muestra. A partir de este
momento no movemos más el macrométrico.
7.- Sin dejar de observar, gire el micrométrico hasta conseguir la máxima nitidez (la imagen en foco). Ajuste
la intensidad de la luz si es necesario.
8.- Cuando ya hemos observado la imagen con el menor objetivo, cambie a los superiores sucesivamente,
ajuste en cada cambio la intensidad de la luz y elfoco solamente con el micrométrico.
9.- Cada vez que cambie de muestra, debe realizar el mismoprocedimiento. Un mal uso del microscopio
puede dañar el aparato, las muestras, ydificultarnos la observación.
Estudio de la muestra. Raíz de cebolla. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe que la forma de las células varía
de cúbicas regulares a alargadas. Dibuje varias de ellas.
40X: Observe células en división. En ellas se pueden apreciar loscromosomas.
En cada práctico usted deberá de dibujar con lápices de colores todas sus observaciones.
Trate de que los dibujos sean lo mas fiel posible a sus observaciones con en elmicroscopio, ya que ellos
serán una herramienta valiosa en el momento de estudiar paralas evaluaciones prácticas.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 1
ACUMULACIONES INTERCELULARES
01.- MUESTRA N°1 ESTEATOSIS HEPÁTICA
Estudio de la muestra. Esteatosis Hepática. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted debe dibujar su muestra mediante una
vista panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
40X:Observe los hepatocitos característicos de la muestra como verdaderas vacuolas, que en su interior
contienen gotas lipídicas, algunas más pequeñas y otras de mayor tamaño, se cree que el tamaño radica en
que algunas son metabólicamente más activas (las de mayor tamaño), versus las más pequeñas (con un
metabolismo más disminuído)
También en algunos cortes encontrará estructuras propias del tejido hepático como arteriolas de pequeño
espesor.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 2
ACUMULACIONES INTERCELULARES
01.- MUESTRA N°1: QUISTE PERIAPICAL
Estudio de la muestra. Quiste Periapical. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
40X:Observe los cristales de colesterol, también llamados hojales de colesterol, por la apariencia de hoja
que presentan, vea la uniformidad estructural que presentan (de forma fusiforme)
También encontrará estructuras características como los macrófagos.
Observe y dibuje el estroma o el tejido conectivo denso irregular colagenoso con sus elementos
constitutivos
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 3
ACUMULACIONES INTERCELULARES
01.- GANGRENA EN PULMÓN.
Estudio de la muestra. Gangrena en Pulmón. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
40X:Observe el infiltrado bacteriano presente en el preparado. Al igual debe dibujar los macrófagos que
están en la totalidad de la muestra.
También encontrará estructuras características como las células gigantes multinucleadas, llamadas células
de langhans.
Observe y dibuje el tejido conectivo en donde encontrará también estructuras vasculares como vasos
sanguíneos en forma transversal y longitudinal.
Observe los focos necróticos característicos de la muestra.
Distinga y dibuje el tejido cartilaginoso con sus componentes estructurales, grupos isógenos, matriz
territorial, matriz interterritorial, condrocito en la laguna.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 4
ACUMULACIONES INTERCELULARES
01.- MELANINA NEVUS AZUL (NEVUS MELANOCITICO DÉRMICO)
Estudio de la muestra. Melanina Nevus Azul (Nevus Melanocitico Dérmico).
Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
10X:Observe la dermis papilar con las papilas dérmicas, al igual encontrará la dermis reticular presente en
el preparado. Recuerde que éste preparado corresponde a piel y por consiguiente encontrará las
estructuras características del epitelio pluriestratificado (con sus estratos correspondientes).
También encontrará estructuras características como el estrato córneo, para ello identifique esta estructura
con el objetivo menor de 4X, vaya aumentando el objetivo hasta llegar al 40X. Establezca mediante sus
conocimientos previos de Histología si corresponde al estrato córneo paraqueratinizado u ortoqueratinizado.
Observe y dibuje los melanocitos, que presentan su máxima condensación, identifique el tejido conectivo.
Por último ubique el nevus (nido pequeño) que al interior y en su centro presenta la perla de queratina.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 5
INMUNOPATOLOGÍA
01.- PLEURA TBC.
Estudio de la muestra. Pleura Tuberculosis Pulmonar. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
40X:Observe los focos necróticos presente en el preparado. Al igual debe dibujar los macrófagos que están
en la totalidad de la muestra.
También encontrará estructuras características como las células gigantes multinucleadas, llamadas células
de langhans (de gran tamaño), posteriormente ubique las células epiteloideas (usted las verá generalmente
como células alargadas llenas de núcleos)
Observe y dibuje el tejido conectivo en donde encontrará también estructuras vasculares como vasos
sanguíneos en forma transversal y longitudinal.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 7
INMUNOPATOLOGÍA
01.- GRANULOMA DE CUERPO EXTRAÑO
Estudio de la muestra. Granuloma de Cuerpo Extraño Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
40X:Observe los espacios del cuerpo extraño presente en el preparado, que están rodeados por una
cápsula fibrosa.
También encontrará estructuras características del tejido conectivo con sus fibras colágenas en abundancia,
en ella también encontrará infiltrado inflamatorio.
Observe y dibuje los macrófagos en donde encontrará también células musculares cortadas de manera
transversal y longitudinal.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 8
HISTOLOGÍA y FISIOLOGÍA SANGUÍNEA
01.- FROTIS SANGRE HUMANA
Estudio de la muestra.Frotis Sanguíneo, Sangre Humana. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
40X: Identifique y dibuje; Eritrocitos (forma discoidal), Plaquetas (citoplasma violáceo y aspecto granular),
Linfocitos (núcleo redondo, denso y escaso citoplasma).
Neutrófilos (núcleos multilobulados, cada lóbulo conectado por finas bandas de material nuclear),
Eosinófilos (núcleo bilobulado, abundantes gránulos rojos brillantes).
Monocitos (núcleo núcleoexéntrico y escotado o “arriñonado”, posee la cromatina menos condensada de
todos los glóbulos blancos), Basófilos (Núcleo bilobulado, gránulos azules de gran tamaño).
Los basófilos son visibles sólo en algunas preparaciones (menos del 1% del total de leucocitos de la
sangre).
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Escriba en detalle todos los componentes sanguíneos celulares.
Escriba en detalle la función de todos los componentes sanguíneos celulares.
Para ello debe ayudarse, recordarse y complementar la información con la literatura básica de Histología y
Fisiología (Histología; Ross- Pawlina) y Fisiología (Bases Fisiológicas de la Práctica Médica; Best & Taylor)
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 9
TRASTORNOS CIRCULATORIOS
01.- TROMBOS ROJOS.
Estudio de la muestra. Trombos Rojos. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
10X: En este objetivo usted encontrará un entrelazado de fibras muy pequeñas (en red), esta corresponde
a la malla de fibrina que es característica de los procesos coagulativos.
40X:Observe los eritrocitos (glóbulos rojos) presentes en el preparado.
También encontrará linfocitos (núcleo redondo, denso y escaso citoplasma).
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
(Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 10
NECROSIS TISULAR
01.- INFARTO CARDÍACO
Estudio de la muestra.Infarto Cardíaco. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
10X: Encontrará células musculares estriadas cortadas de manera transversal y longitudinal, dibújelas.
40X: Ubique las células características de la muestra y las alteraciones estructurales que presentan,
encontrará células picnóticas (núcleo céntrico y muy condensado), células con estado de cariorrexis (núcleo
en rueda de carreta) y células en estado de cariólisis (muchos núcleos que son muy pequeños)
Encuentre y dibuje células características del preparado, macrófagos, infiltrado inflamatorio y linfocitos.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura
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Guía de Actividades Prácticas Patología General I.
PRÁCTICO 11
NECROSIS TISULAR
01.- INFARTO RENAL
Estudio de la muestra. Infarto Cardíaco. Tinción: hematoxilina-eosina.
Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía.
Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista
panorámica.
Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X.
4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra.
10X: Encontrará células musculares estriadas cortadas de manera transversal y longitudinal, dibújelas.
40X: Ubique las células características de la muestra y las alteraciones estructurales que presentan,
encontrará células picnóticas (núcleo céntrico y muy condensado), células con estado de cariorrexis (núcleo
en rueda de carreta) y células en estado de cariólisis (muchos núcleos que son muy pequeños)
40X:Encuentre y dibuje células características del preparado, macrófagos, infiltrado inflamatorio y linfocitos.
Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno.
Registre en su cuaderno:
Etiología
Características Clínicas
Histopatología
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  • 1. 1 Guía de Actividades Prácticas Patología General Universidad San Sebastián, Campus Valdivia Tutor: Javier Rosas Bahamonde 1er Semestre
  • 2. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. NORMAS GENERALES AL ENTRAR AL LABORATORIO I.- De las Prohibiciones. Está estrictamente prohibido: * Hablar por celular en clases prácticas. * Sacar fotografías a las muestras (ya sea con celular o cámara digital). * Comer en el laboratorio. * Intercambiarse material en Test de entradas o en Muestra Problema. II.- De las Obligaciones. Será de obligatoriedad del estudiante. * Llegar a la hora a clases prácticas. * Traer delantal blanco, limpio y presentable. * Traer croquera o cuaderno de dibujo. * Traer lápices de colores (de similar color a las tinciones histológicas) * Traer manual de apoyo o clases teóricas para complementar el estudio. III.- De las Responsabilidades. El estudiante al terminar el trabajo práctico: * Debe sacar la muestra con cuidado desde la platina del microscopio. * Debe verificar que el microscopio esté apagado y desenchufado antes de guardarlo. * Debe dejar su área de trabajo limpia y ordenada. * Debe mostrar su dibujo rotulado a los tutores encargados. (ayudantes y /o profesor)
  • 3. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. IV.- De las Calificaciones Prácticas. Estas corresponden al porcentaje real de notas de laboratorio (según programa de la asignatura y/o syllabus), el porcentaje total de la Prueba Práctica queda a criterio del profesor encargado de la asignatura. 1.- Prueba Práctica. (Muestra Problema) * Se realizará una sola prueba práctica, o varias pruebas que incluirán todas las muestras vistas antes del solemne o certamen o todas durante el semestre, mediante la cual Ud. deberá ser capaz de identificar correctamente las características histopatológicas que se le pidan. 2.- De las Características de la Muestra Problema. *La muestra problema tiene una ponderación de un 65% de exigencia. *Tendrá solo una oportunidad para rectificarse de su respuesta, para ello tendrá 5 segundos previo aviso de los tutores encargados mediante un cronómetro con alarma a utilizar. *Se preguntará materia teórica, al realizar la prueba práctica. 3.- De las Inasistencias a Prueba Práctica. * No habrá recuperación de Prueba Práctica, de tal manera que la inasistencia a aquella evaluación se calificará con nota mínima de 1,0. * Tampoco rige certificado médico para esta prueba práctica (ya que es avisada con antelación) previo calendario académico de la asignatura, entregada en la sesión 01 del curso. * Aquellas personas que se sorprenda en actitudes sospechosas de copia o prestando cualquier tipo de material durante el transcurso de esta prueba práctica, se calificará con nota mínima de 1,0. 4.- De las Revisiones de las Actividades Prácticas. * Se realizará 1 revisión global al finalizar el semestrede las muestras, las cuales tienen que estar correctamente dibujadas y rotuladas, ya que el cuaderno tendrá una nota de calificación de actividades prácticas. Atte. Equipo de Trabajo, Histopatología.
  • 4. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. EL MICROSCOPIO Objetivos: 10X: Amplía la imagen en diez veces, con respecto a su tamaño original. 40X: Amplía la imagen en cuarenta veces, con respecto a su tamaño original. 100X:Amplía la imagen en cien veces, con respecto a su tamaño original; generalmente se utiliza aceite de inmersión para lograr mayor nitidez en la muestra. Revólver Objetivo Pinza para sujetar la muestra Platina Condensador Lámpara Perilla para ajustar la intensidad de la luz Brazo Macrométrico Micrométrico Base Ocular
  • 5. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. ROTULACIÓN EN EL CUADERNO ¿CÓMO REALIZARLA? Ejemplo. (Fig.1) 10X :A continuación usted deberá dibujar en aumento 10X, para tener una visión global de la muestra. 40X:Posteriormente, debe dibujar en un aumento de 40X, para definir detalles y rotular. Una vez realizado sus dibujos, debe colocar: -ETIOLOGÍA y CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS - HISTOPATOLOGÍA (Alteraciones celulares y estructurales, Ej: Hipercromatismo nuclear, Pleomorfismo Celular) Este esquema representa la hoja de su cuaderno de croquis o croquera, en la cual usted deberá dibujar lo que observa en el microscopio, con los aumentos correspondientes (10X, 40X), luego de ello rotule lo que observa y haga las descripciones histológicas correspondientes. MUESTRA Nº 1: GANGRENA EN PULMÓN (Ud. deberá colocar siempre el título de la muestra a identificar) Posteriormente usted deberá dibujar la muestra a nivel macroscópico tal como la ve en la figura.
  • 6. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. TINCIONES HISTOLÓGICAS El propósito de una tinción histológica es hacer fácilmente visibles estructuras histológicas. Además, permite diferenciar los componentes celulares (núcleo, citoplasma, gránulos secretorios, etc.) y la matriz extracelular (colágeno, etc.). Según la técnica de coloración que escojamos podremos colorear los componentes que necesitemos observar. En Histología hay varias técnicas para poder observar las estructuras histológicas, dentro de las cuales se destacan las siguientes: 1.- Hematoxilina – Eosina (H-E) Esta técnica opera bajo el principio ácido-base, se combinan dos colorantes (hematoxilina –eosina) Hematoxilina: Colorante básico, tiñe los componentes ácidos o basófilos de la célula. Ejemplo: núcleo (contiene acidos nucleicos y citoplasma que contiene RNA, glucosaminoglicanos ácidos de la MEC. Eosina: Colorante ácido, tiñe los componentes básicos, acidófilos o eosinófilos, Ejemplo: membrana celular, citoplasma (no especializado y no tiene muchos ribosomas) componentes extracelulares básicos como el colágeno. 2.- Histoquímica. La Histoquímica nos permite revelar grupos químicos específicos y enzimas específicas en los tejidos. La presencia de enzimas de los tejidos se puede revelar adicionando el corte en el sustrato para esa enzima. Por lo tanto uno de los productos de la reacción enzimática coloreada (para poder verla al microscopio) e insoluble (para que precipite y no difunda hacia los costados) que se deposita al lado de la enzima. 3.- Inmunohistoquímica. El corte histológico se coloca en un buffer específico que otorgue un pH adecuado para que la reacción del anticuerpo sea estable, agregamos el anticuerpo a la solución y luego el anticuerpo reconoce la molécula y se asocia con ella como dos piezas de rompecabezas. Los anticuerpos normalmente se agregan covalentemente a una enzima (esa es la relación con la histoquímica) que puede ser peroxidasa. Una vez que los anticuerpos reconocen su molécula, se agrega el sustrato para esa enzima, por lo tanto la enzima reconoce es sustrato y produce un nuevo producto coloreado e insoluble y se deposita justo en la región en la que el anticuerpo está interactuando con la molécula que está reconocida.
  • 7. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO INTRODUCTORIO NORMAS GENERALES - NORMAS DE MANEJO DEL MICROSCOPIO. Observaremos una muestra de raíz de cebolla. Para enfocar paso a paso: 1.- Lea toda esta secuencia antes de proceder a usar el microscopio 2.- Encienda el microscopio y ajuste la luz a una intensidad moderada. 3.- Gire el revolver y seleccione el objetivo menor (el de menor tamaño, 4X). 4.- Baje la platina hasta el tope con el macrométrico. 5.- Coloque la preparación en la platina, centrarla y sujetarla con las pinzas. 6.- Observe por el ocular, eleve la platina con el macrométrico hasta observarla muestra. A partir de este momento no movemos más el macrométrico. 7.- Sin dejar de observar, gire el micrométrico hasta conseguir la máxima nitidez (la imagen en foco). Ajuste la intensidad de la luz si es necesario. 8.- Cuando ya hemos observado la imagen con el menor objetivo, cambie a los superiores sucesivamente, ajuste en cada cambio la intensidad de la luz y elfoco solamente con el micrométrico. 9.- Cada vez que cambie de muestra, debe realizar el mismoprocedimiento. Un mal uso del microscopio puede dañar el aparato, las muestras, ydificultarnos la observación. Estudio de la muestra. Raíz de cebolla. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe que la forma de las células varía de cúbicas regulares a alargadas. Dibuje varias de ellas. 40X: Observe células en división. En ellas se pueden apreciar loscromosomas. En cada práctico usted deberá de dibujar con lápices de colores todas sus observaciones. Trate de que los dibujos sean lo mas fiel posible a sus observaciones con en elmicroscopio, ya que ellos serán una herramienta valiosa en el momento de estudiar paralas evaluaciones prácticas.
  • 8. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 1 ACUMULACIONES INTERCELULARES 01.- MUESTRA N°1 ESTEATOSIS HEPÁTICA Estudio de la muestra. Esteatosis Hepática. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted debe dibujar su muestra mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 40X:Observe los hepatocitos característicos de la muestra como verdaderas vacuolas, que en su interior contienen gotas lipídicas, algunas más pequeñas y otras de mayor tamaño, se cree que el tamaño radica en que algunas son metabólicamente más activas (las de mayor tamaño), versus las más pequeñas (con un metabolismo más disminuído) También en algunos cortes encontrará estructuras propias del tejido hepático como arteriolas de pequeño espesor. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 9. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 2 ACUMULACIONES INTERCELULARES 01.- MUESTRA N°1: QUISTE PERIAPICAL Estudio de la muestra. Quiste Periapical. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 40X:Observe los cristales de colesterol, también llamados hojales de colesterol, por la apariencia de hoja que presentan, vea la uniformidad estructural que presentan (de forma fusiforme) También encontrará estructuras características como los macrófagos. Observe y dibuje el estroma o el tejido conectivo denso irregular colagenoso con sus elementos constitutivos Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 10. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 3 ACUMULACIONES INTERCELULARES 01.- GANGRENA EN PULMÓN. Estudio de la muestra. Gangrena en Pulmón. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 40X:Observe el infiltrado bacteriano presente en el preparado. Al igual debe dibujar los macrófagos que están en la totalidad de la muestra. También encontrará estructuras características como las células gigantes multinucleadas, llamadas células de langhans. Observe y dibuje el tejido conectivo en donde encontrará también estructuras vasculares como vasos sanguíneos en forma transversal y longitudinal. Observe los focos necróticos característicos de la muestra. Distinga y dibuje el tejido cartilaginoso con sus componentes estructurales, grupos isógenos, matriz territorial, matriz interterritorial, condrocito en la laguna. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 11. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 4 ACUMULACIONES INTERCELULARES 01.- MELANINA NEVUS AZUL (NEVUS MELANOCITICO DÉRMICO) Estudio de la muestra. Melanina Nevus Azul (Nevus Melanocitico Dérmico). Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 10X:Observe la dermis papilar con las papilas dérmicas, al igual encontrará la dermis reticular presente en el preparado. Recuerde que éste preparado corresponde a piel y por consiguiente encontrará las estructuras características del epitelio pluriestratificado (con sus estratos correspondientes). También encontrará estructuras características como el estrato córneo, para ello identifique esta estructura con el objetivo menor de 4X, vaya aumentando el objetivo hasta llegar al 40X. Establezca mediante sus conocimientos previos de Histología si corresponde al estrato córneo paraqueratinizado u ortoqueratinizado. Observe y dibuje los melanocitos, que presentan su máxima condensación, identifique el tejido conectivo. Por último ubique el nevus (nido pequeño) que al interior y en su centro presenta la perla de queratina. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 12. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 5 INMUNOPATOLOGÍA 01.- PLEURA TBC. Estudio de la muestra. Pleura Tuberculosis Pulmonar. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 40X:Observe los focos necróticos presente en el preparado. Al igual debe dibujar los macrófagos que están en la totalidad de la muestra. También encontrará estructuras características como las células gigantes multinucleadas, llamadas células de langhans (de gran tamaño), posteriormente ubique las células epiteloideas (usted las verá generalmente como células alargadas llenas de núcleos) Observe y dibuje el tejido conectivo en donde encontrará también estructuras vasculares como vasos sanguíneos en forma transversal y longitudinal. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 13. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 7 INMUNOPATOLOGÍA 01.- GRANULOMA DE CUERPO EXTRAÑO Estudio de la muestra. Granuloma de Cuerpo Extraño Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 40X:Observe los espacios del cuerpo extraño presente en el preparado, que están rodeados por una cápsula fibrosa. También encontrará estructuras características del tejido conectivo con sus fibras colágenas en abundancia, en ella también encontrará infiltrado inflamatorio. Observe y dibuje los macrófagos en donde encontrará también células musculares cortadas de manera transversal y longitudinal. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 14. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 8 HISTOLOGÍA y FISIOLOGÍA SANGUÍNEA 01.- FROTIS SANGRE HUMANA Estudio de la muestra.Frotis Sanguíneo, Sangre Humana. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 40X: Identifique y dibuje; Eritrocitos (forma discoidal), Plaquetas (citoplasma violáceo y aspecto granular), Linfocitos (núcleo redondo, denso y escaso citoplasma). Neutrófilos (núcleos multilobulados, cada lóbulo conectado por finas bandas de material nuclear), Eosinófilos (núcleo bilobulado, abundantes gránulos rojos brillantes). Monocitos (núcleo núcleoexéntrico y escotado o “arriñonado”, posee la cromatina menos condensada de todos los glóbulos blancos), Basófilos (Núcleo bilobulado, gránulos azules de gran tamaño). Los basófilos son visibles sólo en algunas preparaciones (menos del 1% del total de leucocitos de la sangre). Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Escriba en detalle todos los componentes sanguíneos celulares. Escriba en detalle la función de todos los componentes sanguíneos celulares. Para ello debe ayudarse, recordarse y complementar la información con la literatura básica de Histología y Fisiología (Histología; Ross- Pawlina) y Fisiología (Bases Fisiológicas de la Práctica Médica; Best & Taylor)
  • 15. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 9 TRASTORNOS CIRCULATORIOS 01.- TROMBOS ROJOS. Estudio de la muestra. Trombos Rojos. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 10X: En este objetivo usted encontrará un entrelazado de fibras muy pequeñas (en red), esta corresponde a la malla de fibrina que es característica de los procesos coagulativos. 40X:Observe los eritrocitos (glóbulos rojos) presentes en el preparado. También encontrará linfocitos (núcleo redondo, denso y escaso citoplasma). Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 16. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 10 NECROSIS TISULAR 01.- INFARTO CARDÍACO Estudio de la muestra.Infarto Cardíaco. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 10X: Encontrará células musculares estriadas cortadas de manera transversal y longitudinal, dibújelas. 40X: Ubique las células características de la muestra y las alteraciones estructurales que presentan, encontrará células picnóticas (núcleo céntrico y muy condensado), células con estado de cariorrexis (núcleo en rueda de carreta) y células en estado de cariólisis (muchos núcleos que son muy pequeños) Encuentre y dibuje células características del preparado, macrófagos, infiltrado inflamatorio y linfocitos. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 17. Guía de Actividades Prácticas Patología General I. PRÁCTICO 11 NECROSIS TISULAR 01.- INFARTO RENAL Estudio de la muestra. Infarto Cardíaco. Tinción: hematoxilina-eosina. Dibuje la muestra en su cuaderno, tal como se indica en la página 5 de esta guía. Antes de empezar a revisar su muestra mediante microscopía, usted deberá dibujarla mediante una vista panorámica. Ocupe los objetivos 4X, 10X, 40X. 4X y 10X :Recorra todo el preparado y observe las células características de la muestra. 10X: Encontrará células musculares estriadas cortadas de manera transversal y longitudinal, dibújelas. 40X: Ubique las células características de la muestra y las alteraciones estructurales que presentan, encontrará células picnóticas (núcleo céntrico y muy condensado), células con estado de cariorrexis (núcleo en rueda de carreta) y células en estado de cariólisis (muchos núcleos que son muy pequeños) 40X:Encuentre y dibuje células características del preparado, macrófagos, infiltrado inflamatorio y linfocitos. Recuerde que tiene que rotular todos los componentes celulares en su cuaderno. Registre en su cuaderno: Etiología Características Clínicas Histopatología Para ello debe ayudarse y complementar la información con la literatura básica de la asignatura (Robbins&Cotran, Patología Estructural y Funcional) o bien apuntes de clase.
  • 18. Guía de Actividades Prácticas Patología General I.