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INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
ÍNDICE
ÍNDICE …………………………………………………….. 01
I. INTRODUCCIÒN……………………………………………….. 02
II. MATERIALES Y MÉTODOS…………………………………. 04
III. RESULTADOS ……………………………………………….. 09
IV. GRAFICOS ……………………………………………….. 13
V. FUNDAMENTO TEÓRICO……………………………………… 17
VI. DISCUSIÓN……………………….……………………….… 19
VII.CONCLUSION……………………………………………….. 22
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………. 23
ANEXOS …………………………………………………………. 24
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 1
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
I. INTRODUCCIÓN
Desde épocas pasadas se conoce la existencia de campos eléctricos en el
cuerpo humano a partir de entonces fueron decenas de miles de experimentos
que confirmaron que la excitación de cualquier órgano de los sentidos se codifican
en impulsos eléctricos y llegan hasta el encéfalo. Además, estos fenómenos
influyen en todos los niveles de organización biológica; un claro ejemplo es las
diferencias de concentraciones de iones por ambos lados de la membrana que es
indispensable para la existencia de campos eléctricos en los seres vivos.
1. Importancia del estudio:
Este experimento nos va a tratar de explicar a través de la observación y
experimentación los procesos de excitación nerviosa, respuesta a estímulos e
incluso a situaciones críticas o lesiones severas originadas por una sobre
estimulación. Además, conocer los efectos analgésicos producidos por diferentes
fármacos en este tipo de casos.
2. Planteamiento del Problema:
Este experimento nos lleva a buscar respuestas a las siguientes interrogantes:
¿Es el ser vivo un buen conductor de la corriente eléctrica?
¿Por qué en el experimento dado se utiliza específicamente ratas albinas?
¿Cómo actúa los distintos fármacos a nivel corporal?
¿Por qué los pelos funcionan como aisladores eléctricos?
¿Por qué se produjo el reflejo de micción en la rata que se le aplico Ketorolaco
a un voltaje de 40v?
¿Qué mecanismos desencadenan las reacciones de la rata ante un estímulo
eléctrico?
¿Por qué la morfina fue más efectiva que el resto de analgésicos?
3. Objetivos:
• Demostrar que los organismos biológicos son buenos conductores de la
electricidad.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 2
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
• Comprobar la efectividad de los diferentes analgésicos (morfina, tramadol y
ketorolaco), aplicados en un organismo que metaboliza diez veces más
rápido que el nuestro.
• Conocer la posible potencia de la droga en el ser humano ante estímulos
eléctricos de pequeña a gran escala comparándolos con los aplicados a la
especie Rattus norvegicus cuyo genoma es cercano al nuestro.
• Aprender a aplicar correctamente las dosis de cada fármaco según la masa
del individuo experimental.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 3
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
II. MATERIALES Y MÉTODOS
A. MATERIALES
• 4 ratas albinas
• Jaula algisimétrica
• Estimulador eléctrico (Voltímetro)
• Jeringas de tuberculina
• Fármacos: ketorolaco, tramadol y morfina
DESCRIPCIÓN DE LOS MATERIALES
• Rata Albina: Es un roedor, que se utiliza para la investigación científica. Su
cariotipo está compuesto por 40 cromosomas. Para cada experimento se escogen
ratones de laboratorio que pertenezcan a una misma cepa pura o endogámica.
Los individuos de una misma cepa llevan los mismos genes, por lo cual se facilita
la comparación de los efectos de los diferentes tratamientos experimentales
(fármacos, entorno físico, etc.), sin que se produzca confusión debido a las
diferencias genéticas. Además, tiene un metabolismo 10 veces más rápido que el
humano.
• Jaula Algisimétrica: Constituida por vidrios sujetados en cada una de sus
aristas por maderas y en la base presenta alambres de cobre (lo que permite
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 4
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
propiedades de conducción de la electricidad debido a que es un metal). Sirve
para medir los distintos tipos de umbrales de excitación a un determinado
voltaje. (Dimensiones: 30 x 30 x 30 cm)
Partes:
a) Madera: Es un dieléctrico (seco es un mal conductor de calor y
electricidad, todo lo contrario cuando está húmedo) .Forma parte del
soporte o armazón de la jaula algisimétrica.
b) Vidrio: Es un mal conductor del calor y la electricidad. Por lo que
resulta práctico para el aislamiento térmico y eléctrico, cuyas
propiedades lo hacen óptimo para su uso en este experimento,
constituyendo las paredes de la jaula. Brinda además la capacidad de
visualizar lo que está sucediendo dentro del compartimiento
experimental.
c) Varillas de cobre: Es un metal cuya gran característica es su alta
conductividad eléctrica, se usa como base de la jaula. Las varillas van
dispuestas en paralelo para obtener un potencial eléctrico uniforme en
cada una de ellas. (Conductividad: 5,96 × 107
S/m)
• Estimulador Eléctrico (voltímetro): Es un estimulador de tipo condensador de
descarga que sirve igualmente como fuente de impulsos eléctricos. Aparato
eléctrico cuya ventaja permite que la frecuencia, duración e intensidad de estos
estímulos puedan ser variadas a voluntad del observador en forma precisa y
fácil, permitiendo de este modo un mejor manejo de una serie de fenómenos
fisiológicos en un experimento biomédico.
• Jeringa de Tuberculina: Instrumento de un centímetro cúbico de capacidad
destinado a la inyección de sustancias liquidas en pequeñas cantidades
(décimas) en conductos, cavidades o tejidos de un cuerpo. Consta
esencialmente de un tubo, uno de sus extremos termina en pico, al que se
adapta una boquilla y dentro del cual funciona un embolo u otro mecanismo
que aspira e impide el paso del líquido.
Voltímetro Jeringa
de tuberculina
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 5
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
Jaula
Algisimétrica
• Medicamentos:
 Tramadol: Es un analgésico que pertenece al grupo de analgésicos
opiáceos (narcótico), su acción recae principalmente en el sistema
nervioso central, sobre los receptores específicos que disminuyen la
intensidad del dolor.
 Ketorolaco: Es una droga antiinflamatoria no esteroidea con gran
actividad analgésica, en diversos tipos de dolor agudo, de leves a
severos siendo su eficacia analgésica semejante a la morfina. Su
mecanismo de acción al igual que el de otros AINES es por
inhibición de las prostaglandinas.
 Morfina: Es una potente droga opiácea usada frecuentemente en
medicina como analgésico, es un polvo blanco y cristalino, insoluble
en agua. La morfina es una sustancia controlada utilizada en pre
medicación, anestesia, analgesia, tratamientos del dolor asociado a
la isquemia y para la disnea asociada ala fracaso ventricular
izquierdo y edema pulmonar.
B. MÉTODOS
Se trabajó con cuatro ratas albinas, destinada una de ellas a ser “grupo
control”, y los tres restantes a “grupo experimental” de tres distintos
analgésicos de menor a mayor intensidad de reacción (ketorolaco,
tramal y morfina).
1º Se determinó el peso de las 4 ratas:
- La primera rata: 174 g
- La segunda rata: 123.5 g
- La tercera rata: 146 g
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 6
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
- La cuarta rata control: 154.5 g
2º Tres analgésicos distintos fueron asignados a 3 ratas (experimentales), y
la cuarta rata fue de control. Las inyecciones fueron intraperitoneales.
- La primera rata pesaba 174 g ………….. MORFINA
- La segunda rata pesaba 123.5 g………….TRAMAL
- La tercera rata pesaba 146 g…… KETORALACO
- La cuarta rata pesaba 154.5 g……….. CONTROL
3º A la rata CONTROL, se le administró una dosis de solución salina al 9%
de NaCl de 0,3ml. ¿Por qué se inyecto suero fisiológico? Para que la rata
de control sintiera la misma estimulación producida por los efectos de los
analgésicos, lo cual es llamado PLACEBO.
4º El analgésico KETOROLACO fue administrado a la rata de 146 g, para lo
cual se siguió el siguiente cálculo: (Posología humana: 0,5 mg/kg)
5 mg-----------1000 g
X ----------- 146 g 2 ml ------------- 60 mg
x =0,73 mg x ---------- 0,73mg
x =0,02 ml
5º El analgésico TRAMADOL fue administrada a la rata de 123,5 g, para lo
cual se siguió el siguiente cálculo: (Posología humana: 0,83 mg/kg)
8,3 mg ----------- 1000 g
X ----------- 123,5g 2 ml ------------- 100 mg
x = 1,02mg x ---------- 1, 02 mg
x=0,02 ml
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 7
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
6º El analgésico MORFINA fue administrada a la rata de 174 g, para lo cual se
siguió el siguiente calculo: (Posología humana: 0,3 mg/kg)
3mg ----------- 1000 g
X ----------- 174 g 1 ml ------------- 10mg
x = 0,52 mg x ---------- 0,52mg
x= 0,05 ml
7º Esperamos a que la dosis aplicada alcance su concentración máxima, de
acuerdo al fármaco administrado:
Ketorolaco………..45 min
Tramal…………….2 horas
Morfina…………….1 hora
8º Colocamos cada rata de manera independiente en la jaula algisimétrica,
siguiendo el orden de inyección ya establecido.
9º Las cuatro ratas fueron sometidas a descargas eléctricas que variaron
desde 5v, 15v, 20v, 25v, 40v, 50v, 75v y 100v.
10º Observamos y comparamos las reacciones de las 4 ratas con las
diferentes intensidades de voltaje tomando como patrones a observar:
•Retiro de extremidades
•Sacudidas musculares
•Salto
•Carrera
•Chillido
•Shock respiratorio
11º: Anotamos el comportamiento de cada rata en el cuadro de doble
entrada comparando los efectos analgésicos y las reacciones fisiológicas
que ocurren en cada caso.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 8
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 9
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
III. RESULTADOS
Rata con Ketorolaco
MANIFESTACIONES
ESTIMULACION ELECTRICA
5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V.
RETIRAMIENTO DE
EXTREMIDADES ---- + ++ ++ ++ ++ + + + ++++
SACUDIDA
MUSCULAR ---- + + ++ ++ +++ + + + ++++
CARRERA
--- --- + --- + ++ + + + ++++
SALTO
--- --- --- + ++ ++ + ++ ++++
CHILLIDO
--- --- --- --- + ++ +++ ++++
SHOCK
RESPIRATORIO --- --- --- ---- ----- --- --- -----
OBSERVACIONES Leve contracción Prurito Contracción Taquipnea Relajación de
esfínteres
Taquipnea
Taquicardia
Desesperación por
salir
Pánico
Rata con Tramadol
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 10
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
MANIFESTACIONES
ESTIMULACION ELECTRICA
5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V.
RETIRAMIENTO DE
EXTREMIDADES ---- + + ++ ++ + + +++ ++++
SACUDIDA
MUSCULAR ---- + + ++ ++ +++ ++++ ++++
CARRERA
---- --- --- --- + ++ +++ ++++
SALTO
---- --- --- + ++ ++ ++ ++++
CHILLIDO
---- --- --- --- ---- + +++ ++++
SHOCK
RESPIRATORIO ---- --- --- ---- ----- --- --- ++
OBSERVACIONES Ligero espasmo Leve aumento
de frec. Resp.
Retraimiento Erizacimento de
pelos
--------- Aumento del
instinto de
supervivencia
----------- Shock cardiogénico
Inestabilidad
Riego sanguíneo insuficiente
Rata con Morfina
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 11
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
MANIFESTACIONES
ESTIMULACION ELECTRICA
5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V.
RETIRAMIENTO DE
EXTREMIDADES --- --- --- --- + ++ + + + +++
SACUDIDA
MUSCULAR --- --- --- + ++ + + + + ++++
CARRERA
--- --- --- --- + ---- + + + +++
SALTO
--- --- --- --- + ---- ++ +++
CHILLIDO
--- --- --- --- --- ---- ++ +++
SHOCK
RESPIRATORIO --- --- --- ---- ---- ---- --- -----
OBSERVACIONES -------- Prurito Sensando Retrocede
buscando salida
-------- Erizamiento de pelo
Resistencia a ser
movido
Taquipnea
Miosis
Quiere escapar
Rata Control
ESTIMULACION ELECTRICA
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 12
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
MANIFESTACIONES
5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V.
RETIRAMIENTO DE
EXTREMIDADES ---- --- + ++ ++ + + + + + ++++
SACUDIDA
MUSCULAR ---- --- + --- ++ +++ + + + ++++
CARRERA
--- --- --- --- + ++ + + + ++++
SALTO
--- --- --- --- --- + + ++ +++
CHILLIDO
--- --- --- --- --- + +++ +++
SHOCK
RESPIRATORIO --- --- --- ---- ----- --- --- -----
OBSERVACIONES --------- Sensando Está inquieto Leve aumento de la
frec. Resp.
Erizamiento Aumenta la
contracción
muscular(se pone
tenso)
Relajación de la
ampolla rectal
Taquicardia y
contracción
corporal total
+ : Intensidad baja ++: Intensidad regular
+++ : Intensidad
moderada ++++: Intensidad alta
IV.GRÁFICOS
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 130
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5 15 20 25 40 50 75 100
V
ketorolaco
tramal
morfina
control
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
IV.GRÁFICOS
RETIRAMIENTO DE EXTREMIDADES
DISCUSIÓN
¿Es el ser vivo un buen conductor de la corriente eléctrica?
Si, porque
¿Por qué en el experimento dado se utiliza específicamente ratas albinas?
¿Cuál es el nivel de influencia de los fármacos a las respuestas
nocirreceptoras producidas por la corriente eléctrica?
¿Cómo actúa los distintos fármacos a nivel corporal?
¿Cuál de los fármacos utilizados tiene mayor eficacia analgésica?
SALTO
SACUDIDAS MUSCULARES
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0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
4
4.5
5 15 20 25 40 50 75 100
V
Ketorolaco
tramal
morfina
control
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SALTO
CARRERA
CHILLIDO
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 15
0
1
2
3
4
5
5 15 20 25 40 50 75 100
V
Ketorolaco
tramal
morfina
control
0
1
2
3
4
5
5 15 20 25 40 50 75 100
V
Ketorolaco
Tramal
Morfina
Control
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SHOCK RESPIRATORIO
+Ninguna de las ratas sometidas a experimentación manifestó un
shock respiratorio.
V. FUNDAMENTO TEÓRICO
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 16
0
1
2
3
4
5
5 15 20 25 40 50 75 100
V
Ketorolaco
tramal
morfina
control
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
• Electricidad: La electricidad es un fenómeno físico, cuyo propulsor
son las cargas eléctricas y la energía que estas promueven puede
manifestarse ya sea en fenómenos mecánicos, térmicos, luminosos o
físicos.
• Corriente eléctrica: La corriente eléctrica consiste en el movimiento
ordenado de cargas eléctricas por un material. Las cargas que se
mueven por los aparatos eléctricos que usamos a diario son las cargas
negativas
• Efectos de la corriente eléctrica en el ser humano:
Dentro de los factores técnicos mencionaremos los siguientes:
Intensidad de la corriente que pasa por el cuerpo humano: Se ha
demostrado experimentalmente que es la intensidad que atraviesa el
cuerpo humano y no la tensión la que puede ocasionar lesiones debido
al accidente eléctrico.
En este sentido comentar que a partir de 1 mA de corriente alterna ya se
comienzan a percibir hormigueos, y que hasta intensidades de 10 mA
del mismo tipo de corriente, la persona aún es capaz de soltar un
conductor.
Tiempo de exposición al riesgo: No podemos hablar de valores de
intensidad sin relacionarlos con el tiempo de paso por el cuerpo humano.
De esta forma, para cada intensidad de corriente se establecen, según
el tiempo de contacto, tres niveles:
 Nivel de seguridad: Abarca desde la mínima percepción de
corriente hasta el momento en que no es posible soltarse
voluntariamente del conductor. En dicho periodo no se produce
afectación cardiaca ni nerviosa.
 Nivel de intensidad soportable: Se produce aumento de la presión
sanguínea y alteraciones del ritmo cardiaco, pudiéndose llegar a
parada cardiaca reversible. Además, el nivel de consciencia va
disminuyendo llegándose al coma por encima de 50 mA.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 17
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
 Nivel de intensidad insoportable: Estado de coma persistente y
parada cardiaca.
Recorrido de la corriente eléctrica por el cuerpo humano: Las
consecuencias del contacto dependerán de los órganos del cuerpo
humano que atraviese la corriente. Las mayores lesiones se producen
cuando la corriente circula en las siguientes direcciones:
 Mano izquierda - pie derecho
 Mano derecha - pie izquierdo
 Manos - cabeza
 Mano derecha - toráx (corazón) - mano izquierda
 Pie derecho - pie izquierdo
Resistencia eléctrica del cuerpo humano: Entre los factores
determinantes tenemos la edad, el sexo, las tasas de alcohol en sangre,
el estado de la superficie de contacto (humedad, suciedad, etc.), la
presión de contacto, etc.
La sudoración también es un factor que puede disminuir la resistencia de
la piel.
La resistencia en el interior del organismo es, en general, 1000 veces
menor que la de la piel, siendo menor para la corriente alterna. En el
interior del organismo la resistencia disminuye en proporción directa a la
cantidad de agua que presentan los distintos tejidos; así, de mayor a
menor resistencia tenemos los huesos, el tendón, la grasa, la piel, los
músculos, la sangre y los nervios.
• Transporte activo de iones en la membrana celular: Un mecanismo
de equilibrio en la membrana celular es la conocida bomba de sodio –
potasio. Los flujos netos de Na+ hacia el interior y de K+ hacia el exterior
de la célula debidos a la fuerza eléctrica se denominan flujos pasivos,
porque no se necesita suministrar energía para que se produzca. El
proceso inverso, es decir la extracción de Na+ del interior de la célula y
la devolución de K+ atreves de la membrana requiere consumo
constante de energía metabólica y se denomina transporte activo de
Na+ - K+ o bomba de Na+ - K+.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 18
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
• Potencial de acción: Son cambios rápidos en el potencial de membrana
que se extiende con celeridad por la membrana. Un potencial de acción
es la inversión del potencial de membrana.
• Excitabilidad: Depende de la existencia de distintas concentraciones
de iones a ambos lados de la membrana celular y de la capacidad de
transporte activo a través de estas membranas. La excitación neuronal
se acompaña de un flujo de partículas cargadas a través de la
membrana, lo cual genera una corriente eléctrica.
• Dolor: La función fisiológica del dolor es señalar al sistema nervioso que
una zona del organismo está expuesta a una situación que puede
provocar una lesión.
• Solución electrolítica: Una solución electrolítica también se conoce
como "iónica", ya que contiene iones, o sea partículas cargadas
eléctricamente; esto hace que estas soluciones sean conductoras de la
electricidad.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 19
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
VI. DISCUSION
¿Es el ser vivo un buen conductor de la corriente eléctrica?
Sí, porque el ser vivo es una solución electrolítica. La solución electrolítica es
la disolución de compuestos iónicos en solución acuosa; donde el solvente
actúa como un dieléctrico impidiendo que se unan las cargas eléctricas y
generando el transporte de electrones libres.
¿Por qué en el experimento dado se utiliza específicamente ratas
albinas?
Las características que han hecho del ratón de laboratorio el modelo
biológico y biomédico más utilizado en las investigaciones científicas son:
1. Su fácil manejo.
2. Su tamaño apropiado para la crianza y manipulación.
3. No requieren demasiados cuidados.
4. Tienen un sistema inmune similar al de los seres humanos.
5. Al ser mamíferos euterios, poseen un genoma muy similar al de los
seres humanos.
¿Cómo actúa los distintos fármacos a nivel corporal?
• Ketorolaco: Su mecanismo de acción es la inhibición de las
ciclooxigenasas, y por tanto, la síntesis de prostaglandinas, actuando
principalmente a nivel periférico; pero también a nivel central.
• Tramal: Posee una actividad agonista sobre los receptores opiáceos
centrales u; también reduce al AMPc intracelular inhibiendo la adenilato-
ciclasa, que, a su vez, modula la liberación de neurotransmisores
nociceptivos como la sustancia P, la dopamina, la acetilcolina y la
noradrenalina. El resultado final es la inhibición del estímulo nociceptivo
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 20
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
• Morfina: Los opiodes imitan la acción de las endorfinas, produciendo una
inhibición de la actividad de la adenil-ciclasa. Esto se manifiesta por
hiperpolarización neuronal con supresión de la descarga espontánea y
respuestas evocadas. Los opiodes también interfieren en el transporte
transmembrana de iones Ca+2
y actúa en la membrana presináptca
interfiriendo con la liberación de la acetilcolina.
¿Por qué la morfina fue más efectiva que el resto de analgésicos?
La actividad agonista que los dos primeros analgésicos poseen sobre los
receptores opiáceos situados en el SNC hacen que su inhibición sobre el
mecanismo del dolor sea mayor y general, esto se produce debido a que su
acción evitara que las bombas de iones hagan contacto con los receptores
sinápticos de la membrana celular, bloqueando así los canales de iones y
permitirá que la rata tenga una mejor resistencia al dolor.
Naturalmente existe un umbral de resistencia por lo que si se incrementa el
voltaje y la duración, las manifestaciones serán más notorias y prolongadas.
Tal es así que la rata reacciona aplicados 75v y 100v resistiendo muy bien los
voltajes de menor intensidad que los anteriores.
¿Qué mecanismos desencadenan las reacciones de la rata ante un
estímulo eléctrico?
1ero: El estímulo de la corriente llega a través del estimulador y se conduce a
través de los alambres de cobre (de la celda algisimétrica) llegando al cuerpo
de la rata (la corriente fluye de positivo a negativo).
2do: El estímulo provoca en la terminales nerviosas (inicialmente en reposo o
mejor dicho levemente en reposo - debido al nerviosismo y temor lo cual trajo
consigo una relajación de esfínteres) de la rata una despolarización, la cual
genera la activación de los nociceptores.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 21
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
3ero: La activación de los nociceptores genera un potencial de acción
(permeabilidad de la membrana frente al Na+
) y posteriormente un impulso
nervioso.
4to: El estímulo nociceptivo iniciado en uno de sus receptores será
vehiculizado mediante unas fibras nerviosas hacia el asta dorsal de médula, la
cual modulará y transformará ese impulso, para enviar información a través
diversos haces nociceptivos hasta la corteza cerebral, donde tendrá lugar la
percepción y localización concreta del dolor.
5to: Finalmente el impulso nervioso motor regresa hacia el origen del
estímulo mediante las neuronas eferentes, donde los neurotransmisores
provocaran una respuesta en el órgano efector (en este caso el retiramiento
de las extremidades y la sacudida muscular, los saltos y carrera).
¿Por qué se produjo el reflejo de micción en la rata que se le aplico
Ketorolaco a un voltaje de 40v?
A través de la médula espinal, los núcleos encefálicos estimulan los
centros parasimpáticos sacros para que, por medio del nervio pudendus,
relajen el músculo esfínter externo. Además se produce contracción
abdominal y relajación del suelo pélvico, que facilitan la micción.
¿Por qué los pelos funcionan como aisladores electricos?
El cabello seco no es un buen conductor de la electricidad y presentan una
alta resistencia eléctrica.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 22
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
VII. CONCLUSIONES
 Este experimento nos permitió reafirmar que los seres vivos poseen y
conducen corrientes eléctricas, y que muchas de las funciones vitales
como sólo mover algún músculo o pensar, o reaccionar ante diversas
situaciones, se relacionan con la transmisión de impulsos generados por
la intervención de pequeñas cantidades de corriente.
 La biodisponibilidad y efectos de las drogas está concatenada a la dosis
utilizada, el tiempo estimado de acción y a la masa corporal.
 Después de este experimento hemos aprendido las dosis a escala, los
efectos y el tiempo de respuesta de cada fármaco para que más
adelante sea aplicado a un humano y así medir los riesgos.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 23
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
BIBLIOGRAFÍA
o ARTHUR C. GUYTON, Tratado de fisiología Medica ,8a
Edición,
Editorial Interamericana. McGraw-Hill.España, 1992, pag.54-68
o Diccionario de Especialidades Farmaceuticas,7a
Edición, EditorialPLM,
1994, Colombia, pág. 741.
o ALICIA C.LOPEZ CASTELLANO, LUCRECIA MORENO ROYO,
VICTORIA VILLAGRASA SEBASTIÁN. Manual de Farmacología, Guía
para el uso racional del medicamento. Año de edición 2005, Madrid.
Pág. 241-243
o ELVAR QUEZADA CASTILLO, WILDER AGUILAR CASTRO. Física
aplicada a las Ciencias de la vida y la salud. Editorial: CONCYTEC. Perú
1994. Pág. 283, 284, 285
o R. MONTOREANO. Manual de Fisiología y Biofísica.
LINCOGRAFÍA
• http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/t050.htm
• http://es.wikipedia.org/wiki/Wikipedia:Portada
• http://www.vademecum.es/principios-activos-ketorolaco
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 24
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
Anexos
MECANISMO DE ACCIÓN DEL TRAMADOL
El tramadol es un analgésico de acción central cuyo mecanismo de
acción se basa predominantemente en el incremento de la transmisión
serotoninérgica. Como tal, su eficacia analgésica puede bloquearse mediante
la administración conjunta del antagonista del receptor de serotonina (5-HT3),
ondansetrón. El tramadol también inhibe la función del transportador de
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 25
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
norepinefrina, y es un agonista débil del receptor “µ” dado que su efecto es
antagonizado solo en parte por la naloxona. La dosis reconmendada es de 50 a
100 mg VO cuatro veces al día. La toxicidad está determinada por la aparición
de crisis convulsivas; el medicamento está relativamente contraindicado en
pacientes con antecedentes de epilepsia y para usarse con otros
medicamentos que disminuyan el umbral convulsivo. Otros efectos adversos
incluyen náuseas y mareo, pero los síntomas típicamente se abaten después
de varios días de tratamiento. De manera sorprendente, no se han reportado
efectos clínicos relevantes sobre la respiración o el sistema cardiovascular.
Dado el hecho de que la acción analgésica del tramadol es independiente de la
acción del receptor µ, este medicamento puede ser de utilidad en el tratamiento
del dolor atípico, como el de la neuropatía crónica.
MECANISMOS DE ACCIÓN DE LA MORFINA
La morfina es un potente agonista de los receptores opiáceos µ. Los receptores
opiáceos incluyen los µ (mu), k (kappa), y d (delta), todos ellos acoplados a los
receptores para la proteína G y actuando como moduladores, tanto positivos como
negativos de la transmisión sináptica que tiene lugar a través de estas proteínas. Los
sistemas opioides-proteína C incluyen el AMP-cíclico y el fosfolipasa3C-inositol-1,4,5-
trifosfato. Los opioides no alteran el umbral del dolor de las terminaciones de los
nervios aferentes a los estímulos nociceptivos, ni afectan la transmisión de los
impulsos a lo largo de los nervios periféricos. La analgesia se debe a los cambios en la
percepción del dolor a nivel espinal que ocasionan al unirse a los receptores m2, d y k,
y a un nivel más elevado, a los receptores m1 y k3. La morfina, al igual que otros
opiáceos no muestra un efecto "techo" analgésico.
Los opioides actúan como agonistas de los receptores k cerrando los canales de
potasio voltage-dependientes y abriendo los canales de potasio calcio-dependientes
(agonistas de los receptores m y d) lo que ocasiona una hiperpolarización y una
reducción de la excitabilidad de la neurona. La unión de los opiáceos a sus receptores
estimula el intercambio de guanosina trifosfato (GPT) del complejo de la proteína G,
liberándose una subunidad de dicho complejo que actúa sobre el sistema efector. En
el caso de la analgesia inducida por los opioides, el sistema efector es la adenilato
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 26
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
ciclasa y el AMP-cíclico localizado en la parte interna de la membrana plasmática
neuronal. De esta forma, los opioides disminuyen el AMP-cíclico intracelular inhibiendo
la adenilato ciclasa, una enzima que modula la liberación de neurotransmisores
nociceptivos como la sustancia P, el GABA o la dopamina.
Los opioides también actúan como moduladores de los sistemas endocrino e
inmunológico. Así, inhiben la liberación de vasopresina, somatostatina, insulina y
glucagón, todo ello debido al bloqueo de los neurotransmisores GABA y acetilcolina.
No se sabe muy bien como los agonistas opiáceos estimulan al mismo tiempo
procesos estimulantes e inhibitorios.
Desde del punto de vista clínico, la estimulación de los receptores m producen
analgesia, euforia, depresión circulatoria, disminución del peristaltismo, miosis y
dependencia. Los mismos efectos son producidos por la estimulación de los
receptores k, que ademas producen disforia y algunos efectos psicomiméticos (p.j.
desorientación). La miosis es producida por un efecto excitador del segmento
autonómico del núcleo del nervio oculomotor, mientras que la depresión respiratoria se
debe a un efecto directo sobre el centro que, en el cerebro, regula la respiración.
Los agonistas opiáceos aumentan el tono muscular de la porción antral del estómago,
el duodeno y intestino grueso y los esfínteres. Al mismo tiempo, reducen las
secreciones gástricas, pancreáticas y biliares todo lo cual resulta en constipación y
retraso de la digestión. El tono de la vejiga urinaria también aumenta con los agonistas
opiáceos, al igual que el del músculo detrusor, uréteres y esfinter vesical lo que puede
ocasionar retención urinaria. Otros efectos clínicos que pueden producir los opiáceos
son supresión de la tos, hipotensión y naúseas/vómitos. Los efectos antitusivos de los
agonistas opiáceos se deben a una acción directa sobre los receptores del centro de la
tos de la médula y se consiguen con dosis menores que las necesarias para la
analgesia. La hipotensión se debe a un aumento de la liberación de histamina y a una
depresión del centro vasomotor de la médula. La inducción de la nausea es el
resultado de una estimulacion directa del sistema vestibular.
MECANISMO DE ACCIÓN DEL KETOROLACO
Los efectos antiinflamatorios de ketorolaco pueden ser consecuencia de la inhibición
periférica de la síntesis de prostaglandinas mediante el bloqueo de la enzima
ciclooxigenasa. Las prostaglandinas sensibilizan los receptores del dolor, y su
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 27
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
inhibición se cree que es responsable de los efectos analgésicos del ketorolac. La
mayoría de los AINEs no modifican el umbral del dolor ni afectan a las prostaglandinas
existentes, por lo que el efecto analgésico es más probablemente periférico. La
antipiresis puede ocurrir a través de la dilatación periférica causada por una acción
central sobre el hipotálamo. Esto se traduce en un flujo creciente de la sangre cutánea
y pérdida subsiguiente de calor. Otros efectos debidos a la inhibición de las
prostaglandinas son la disminución de la citoprotección de la mucosa gástrica, las
alteraciones de la función renal, y la inhibición de la agregación plaquetaria. El
ketorolac presenta una débil actividad como bloqueante anticolinérgico y alfa-
adrenérgico.
Las gotas oftálmicas de ketorolac reducen la prostaglandina E2 en el humor acuoso
secundaria a la inhibición de la biosíntesis de prostaglandinas. No causa efectos
significativos sobre la presión intraocular.
ELECTROLOGÍA
° Electroestimulación de Efecto Motor: Estimula las fibras musculares.
° Electroestimulación sobre nervios sensitivos: Estimula fibras nerviosas para
trasmitir las sensaciones nociceptivas.
Algunos términos de Electroestimulación
a.) Electroestimulación transcutánea: se realiza a través de la piel por medio
de electrodos (de contacto y percutáneo)
b.) Electroestimulación nerviosa transcutánea: estimulación transcutánea de
fibra nerviosa.
c.) Electroestimulación eléctrica neuromuscular: estimulación de la fibra
nerviosa motora.
Corrientes utilizadas en Electroestimulación:
Generalmente se emplean corrientes de baja frecuencia (0 – 1000 Hz) y media
frecuencia (1000 – 10 000 Hz). Desde el punto de vista clínico práctico pueden
ser ininterrumpidas (circula en forma continua, e emplea en electroterapia) o
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 28
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
interrumpidas o pulsadas (circulan en períodos breves de tiempo en forma de
pulsos).
a.) Corriente galvánica (directa): Corriente continua, se usa en galvanización e
iontoforesis.
b.) Corriente Diadinámicas (o de Bernard): Se genera por rectificación de la
corriente alterna.
c.) Corriente pulsada: Corriente transmitida mediante paquetes o pulsos. Se
utiliza en la actualidad en estimulación neuronal.
BASES ELECTROFISIOLÓGICAS
Los tejidos vivos poseen la capacidad de reaccionar frente a cambios en
su medio interno o frente a variaciones energéticas del medio externo
(estímulo). Existen diferentes tipos de estímulos: mecánicos, térmicos,
químicos, eléctricos y luminosos. Los estímulos más empleados en
experimentación son los eléctricos, pero también son los más adecuados por la
naturaleza misma de la excitación, ya que son fáciles de medir, no provocan
alteraciones duraderas en las estructuras que atraviesan (reversibles) y
requieren poca energía.
Los tejidos nervioso y muscular son los más aptos para recibir estímulos
y reaccionar frente a ellos por lo que se les califica como excitables o dotados
de excitabilidad.
Existe una unidad funcional en el sistema neuromuscular llamada unidad
motora. El agrupamiento de un elevado número de estas unidades puede
realizar una función concreta al formar parte de un sistema (nervio – músculo).
La célula nerviosa reacciona ante el estímulo transmitiendo el impulso
eléctrico, mientras que el músculo reacciona contrayéndose y originando
energía mecánica. En ambos casos, la reacción se produce como
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 29
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
consecuencia del cambio de iones entre el medio intracelular y el extracelular.
Dicho cambio tiene lugar a través de la membrana celular de los tejidos
excitables, por medio de modificaciones en su permeabilidad.
Los principales iones que regulan estos cambios son el potasio, en el
medio intracelular, y el sodio, en el extracelular. Hay un equilibrio continuo
entre ambos iones al traspasar la membrana de modo que se establece una
diferencia de potencial entre los dos medios. Cuando esta diferencia está
establecida se dice que la membrana está polarizada.
El estímulo eléctrico produce un cambio en la permeabilidad de la
membrana celular y, con ello, un aumento del paso de iones. Así se crea un
potencial de acción, que se propaga por medio de las fibras nerviosas. De este
modo se produce la despolarización de la membrana.
NIVELES DE ESTIMULACIÓN
Las tres respuestas o niveles de electroestimulación transcutánea se
perciben en el nivel sensible – umbral de sensibilidad (parestesia eléctrica:
ligero cosquilleo, hormigueo o vibración). Cuando la intensidad o duración del
estímulo adquiere un nivel adecuado, la estimulación alcanza el nivel motor –
umbral motor (contracciones musculares palpables o visibles). Si el estímulo se
hace más intenso, la estimulación se encuentra en el nivel doloroso – umbral
doloroso (la percepción del estímulo se hace molesta, dolorosa e incluso puede
llegar a ser insoportable)
1. Estimulación en el nivel sensible
Con bajas intensidades o duraciones de estímulo no se obtiene ninguna
respuesta por parte del individuo, por lo que a este nivel se le denomina
estimulación subsensorial o subumbral.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 30
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
2. Estimulación en el nivel motor
Conforme se eleva la amplitud de la estimulación aparecen contracciones
musculares palpables que llegarán a hacerse visibles.
3. Estimulación en el nivel doloroso
Al llegar a este nivel, la intensidad de la estimulación es tan elevada que se
activan muchas fibras A & C, que transmiten impulsos nociceptivos, se
alcanza una estimulación dolorosa en ausencia de contracción muscular.
La aparición de esta respuesta varía de persona a persona y con los
diferentes parámetros de estimulación y disposición de los electrodos.
PRINCIPIOS DE INSTRUMENTACIÓN
1. Electroestimuladores
Con el término genérico de estimuladores eléctricos o electroestimuladores
se designan a los generadores utilizados en medicina y biología para
aplicar estímulos eléctricos a los seres vivos. Se trata de generadores
destinados a actuar sobre un circuito exterior, constituido por los tejidos
orgánicos.
2. Electrodos
Pueden ser de diverso tamaño y están en relación con los sistemas que
hay que estimular. Los electrodos de contacto pueden clasificarse en fijos y
móviles.
Electrodos fijos: los electrodos debe ser buenos conductores, de forma que
presenten muy oca resistencia al paso de la corriente. Los electrodos de
contacto más empleados son los de goma impregnada con partículas de
carbono, conocidos comúnmente como electrodos flexibles de goma.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 31
INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica
Electrodos móviles: Estos electrodos pueden desplazarse manualmente, de
forma que puede posibilitarse la localización y tratamiento de puntos
motores, puntos dolorosos, trayectos dolorosos, etc.
Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 32

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Informe de laboratorio 1

  • 1. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica ÍNDICE ÍNDICE …………………………………………………….. 01 I. INTRODUCCIÒN……………………………………………….. 02 II. MATERIALES Y MÉTODOS…………………………………. 04 III. RESULTADOS ……………………………………………….. 09 IV. GRAFICOS ……………………………………………….. 13 V. FUNDAMENTO TEÓRICO……………………………………… 17 VI. DISCUSIÓN……………………….……………………….… 19 VII.CONCLUSION……………………………………………….. 22 VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS………………………. 23 ANEXOS …………………………………………………………. 24 Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 1
  • 2. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica I. INTRODUCCIÓN Desde épocas pasadas se conoce la existencia de campos eléctricos en el cuerpo humano a partir de entonces fueron decenas de miles de experimentos que confirmaron que la excitación de cualquier órgano de los sentidos se codifican en impulsos eléctricos y llegan hasta el encéfalo. Además, estos fenómenos influyen en todos los niveles de organización biológica; un claro ejemplo es las diferencias de concentraciones de iones por ambos lados de la membrana que es indispensable para la existencia de campos eléctricos en los seres vivos. 1. Importancia del estudio: Este experimento nos va a tratar de explicar a través de la observación y experimentación los procesos de excitación nerviosa, respuesta a estímulos e incluso a situaciones críticas o lesiones severas originadas por una sobre estimulación. Además, conocer los efectos analgésicos producidos por diferentes fármacos en este tipo de casos. 2. Planteamiento del Problema: Este experimento nos lleva a buscar respuestas a las siguientes interrogantes: ¿Es el ser vivo un buen conductor de la corriente eléctrica? ¿Por qué en el experimento dado se utiliza específicamente ratas albinas? ¿Cómo actúa los distintos fármacos a nivel corporal? ¿Por qué los pelos funcionan como aisladores eléctricos? ¿Por qué se produjo el reflejo de micción en la rata que se le aplico Ketorolaco a un voltaje de 40v? ¿Qué mecanismos desencadenan las reacciones de la rata ante un estímulo eléctrico? ¿Por qué la morfina fue más efectiva que el resto de analgésicos? 3. Objetivos: • Demostrar que los organismos biológicos son buenos conductores de la electricidad. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 2
  • 3. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica • Comprobar la efectividad de los diferentes analgésicos (morfina, tramadol y ketorolaco), aplicados en un organismo que metaboliza diez veces más rápido que el nuestro. • Conocer la posible potencia de la droga en el ser humano ante estímulos eléctricos de pequeña a gran escala comparándolos con los aplicados a la especie Rattus norvegicus cuyo genoma es cercano al nuestro. • Aprender a aplicar correctamente las dosis de cada fármaco según la masa del individuo experimental. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 3
  • 4. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica II. MATERIALES Y MÉTODOS A. MATERIALES • 4 ratas albinas • Jaula algisimétrica • Estimulador eléctrico (Voltímetro) • Jeringas de tuberculina • Fármacos: ketorolaco, tramadol y morfina DESCRIPCIÓN DE LOS MATERIALES • Rata Albina: Es un roedor, que se utiliza para la investigación científica. Su cariotipo está compuesto por 40 cromosomas. Para cada experimento se escogen ratones de laboratorio que pertenezcan a una misma cepa pura o endogámica. Los individuos de una misma cepa llevan los mismos genes, por lo cual se facilita la comparación de los efectos de los diferentes tratamientos experimentales (fármacos, entorno físico, etc.), sin que se produzca confusión debido a las diferencias genéticas. Además, tiene un metabolismo 10 veces más rápido que el humano. • Jaula Algisimétrica: Constituida por vidrios sujetados en cada una de sus aristas por maderas y en la base presenta alambres de cobre (lo que permite Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 4
  • 5. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica propiedades de conducción de la electricidad debido a que es un metal). Sirve para medir los distintos tipos de umbrales de excitación a un determinado voltaje. (Dimensiones: 30 x 30 x 30 cm) Partes: a) Madera: Es un dieléctrico (seco es un mal conductor de calor y electricidad, todo lo contrario cuando está húmedo) .Forma parte del soporte o armazón de la jaula algisimétrica. b) Vidrio: Es un mal conductor del calor y la electricidad. Por lo que resulta práctico para el aislamiento térmico y eléctrico, cuyas propiedades lo hacen óptimo para su uso en este experimento, constituyendo las paredes de la jaula. Brinda además la capacidad de visualizar lo que está sucediendo dentro del compartimiento experimental. c) Varillas de cobre: Es un metal cuya gran característica es su alta conductividad eléctrica, se usa como base de la jaula. Las varillas van dispuestas en paralelo para obtener un potencial eléctrico uniforme en cada una de ellas. (Conductividad: 5,96 × 107 S/m) • Estimulador Eléctrico (voltímetro): Es un estimulador de tipo condensador de descarga que sirve igualmente como fuente de impulsos eléctricos. Aparato eléctrico cuya ventaja permite que la frecuencia, duración e intensidad de estos estímulos puedan ser variadas a voluntad del observador en forma precisa y fácil, permitiendo de este modo un mejor manejo de una serie de fenómenos fisiológicos en un experimento biomédico. • Jeringa de Tuberculina: Instrumento de un centímetro cúbico de capacidad destinado a la inyección de sustancias liquidas en pequeñas cantidades (décimas) en conductos, cavidades o tejidos de un cuerpo. Consta esencialmente de un tubo, uno de sus extremos termina en pico, al que se adapta una boquilla y dentro del cual funciona un embolo u otro mecanismo que aspira e impide el paso del líquido. Voltímetro Jeringa de tuberculina Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 5
  • 6. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica Jaula Algisimétrica • Medicamentos:  Tramadol: Es un analgésico que pertenece al grupo de analgésicos opiáceos (narcótico), su acción recae principalmente en el sistema nervioso central, sobre los receptores específicos que disminuyen la intensidad del dolor.  Ketorolaco: Es una droga antiinflamatoria no esteroidea con gran actividad analgésica, en diversos tipos de dolor agudo, de leves a severos siendo su eficacia analgésica semejante a la morfina. Su mecanismo de acción al igual que el de otros AINES es por inhibición de las prostaglandinas.  Morfina: Es una potente droga opiácea usada frecuentemente en medicina como analgésico, es un polvo blanco y cristalino, insoluble en agua. La morfina es una sustancia controlada utilizada en pre medicación, anestesia, analgesia, tratamientos del dolor asociado a la isquemia y para la disnea asociada ala fracaso ventricular izquierdo y edema pulmonar. B. MÉTODOS Se trabajó con cuatro ratas albinas, destinada una de ellas a ser “grupo control”, y los tres restantes a “grupo experimental” de tres distintos analgésicos de menor a mayor intensidad de reacción (ketorolaco, tramal y morfina). 1º Se determinó el peso de las 4 ratas: - La primera rata: 174 g - La segunda rata: 123.5 g - La tercera rata: 146 g Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 6
  • 7. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica - La cuarta rata control: 154.5 g 2º Tres analgésicos distintos fueron asignados a 3 ratas (experimentales), y la cuarta rata fue de control. Las inyecciones fueron intraperitoneales. - La primera rata pesaba 174 g ………….. MORFINA - La segunda rata pesaba 123.5 g………….TRAMAL - La tercera rata pesaba 146 g…… KETORALACO - La cuarta rata pesaba 154.5 g……….. CONTROL 3º A la rata CONTROL, se le administró una dosis de solución salina al 9% de NaCl de 0,3ml. ¿Por qué se inyecto suero fisiológico? Para que la rata de control sintiera la misma estimulación producida por los efectos de los analgésicos, lo cual es llamado PLACEBO. 4º El analgésico KETOROLACO fue administrado a la rata de 146 g, para lo cual se siguió el siguiente cálculo: (Posología humana: 0,5 mg/kg) 5 mg-----------1000 g X ----------- 146 g 2 ml ------------- 60 mg x =0,73 mg x ---------- 0,73mg x =0,02 ml 5º El analgésico TRAMADOL fue administrada a la rata de 123,5 g, para lo cual se siguió el siguiente cálculo: (Posología humana: 0,83 mg/kg) 8,3 mg ----------- 1000 g X ----------- 123,5g 2 ml ------------- 100 mg x = 1,02mg x ---------- 1, 02 mg x=0,02 ml Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 7
  • 8. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica 6º El analgésico MORFINA fue administrada a la rata de 174 g, para lo cual se siguió el siguiente calculo: (Posología humana: 0,3 mg/kg) 3mg ----------- 1000 g X ----------- 174 g 1 ml ------------- 10mg x = 0,52 mg x ---------- 0,52mg x= 0,05 ml 7º Esperamos a que la dosis aplicada alcance su concentración máxima, de acuerdo al fármaco administrado: Ketorolaco………..45 min Tramal…………….2 horas Morfina…………….1 hora 8º Colocamos cada rata de manera independiente en la jaula algisimétrica, siguiendo el orden de inyección ya establecido. 9º Las cuatro ratas fueron sometidas a descargas eléctricas que variaron desde 5v, 15v, 20v, 25v, 40v, 50v, 75v y 100v. 10º Observamos y comparamos las reacciones de las 4 ratas con las diferentes intensidades de voltaje tomando como patrones a observar: •Retiro de extremidades •Sacudidas musculares •Salto •Carrera •Chillido •Shock respiratorio 11º: Anotamos el comportamiento de cada rata en el cuadro de doble entrada comparando los efectos analgésicos y las reacciones fisiológicas que ocurren en cada caso. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 8
  • 9. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 9
  • 10. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica III. RESULTADOS Rata con Ketorolaco MANIFESTACIONES ESTIMULACION ELECTRICA 5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V. RETIRAMIENTO DE EXTREMIDADES ---- + ++ ++ ++ ++ + + + ++++ SACUDIDA MUSCULAR ---- + + ++ ++ +++ + + + ++++ CARRERA --- --- + --- + ++ + + + ++++ SALTO --- --- --- + ++ ++ + ++ ++++ CHILLIDO --- --- --- --- + ++ +++ ++++ SHOCK RESPIRATORIO --- --- --- ---- ----- --- --- ----- OBSERVACIONES Leve contracción Prurito Contracción Taquipnea Relajación de esfínteres Taquipnea Taquicardia Desesperación por salir Pánico Rata con Tramadol Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 10
  • 11. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica MANIFESTACIONES ESTIMULACION ELECTRICA 5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V. RETIRAMIENTO DE EXTREMIDADES ---- + + ++ ++ + + +++ ++++ SACUDIDA MUSCULAR ---- + + ++ ++ +++ ++++ ++++ CARRERA ---- --- --- --- + ++ +++ ++++ SALTO ---- --- --- + ++ ++ ++ ++++ CHILLIDO ---- --- --- --- ---- + +++ ++++ SHOCK RESPIRATORIO ---- --- --- ---- ----- --- --- ++ OBSERVACIONES Ligero espasmo Leve aumento de frec. Resp. Retraimiento Erizacimento de pelos --------- Aumento del instinto de supervivencia ----------- Shock cardiogénico Inestabilidad Riego sanguíneo insuficiente Rata con Morfina Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 11
  • 12. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica MANIFESTACIONES ESTIMULACION ELECTRICA 5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V. RETIRAMIENTO DE EXTREMIDADES --- --- --- --- + ++ + + + +++ SACUDIDA MUSCULAR --- --- --- + ++ + + + + ++++ CARRERA --- --- --- --- + ---- + + + +++ SALTO --- --- --- --- + ---- ++ +++ CHILLIDO --- --- --- --- --- ---- ++ +++ SHOCK RESPIRATORIO --- --- --- ---- ---- ---- --- ----- OBSERVACIONES -------- Prurito Sensando Retrocede buscando salida -------- Erizamiento de pelo Resistencia a ser movido Taquipnea Miosis Quiere escapar Rata Control ESTIMULACION ELECTRICA Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 12
  • 13. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica MANIFESTACIONES 5 V. 15 V. 20 V. 25 V. 40 V. 50 V. 75 V. 100V. RETIRAMIENTO DE EXTREMIDADES ---- --- + ++ ++ + + + + + ++++ SACUDIDA MUSCULAR ---- --- + --- ++ +++ + + + ++++ CARRERA --- --- --- --- + ++ + + + ++++ SALTO --- --- --- --- --- + + ++ +++ CHILLIDO --- --- --- --- --- + +++ +++ SHOCK RESPIRATORIO --- --- --- ---- ----- --- --- ----- OBSERVACIONES --------- Sensando Está inquieto Leve aumento de la frec. Resp. Erizamiento Aumenta la contracción muscular(se pone tenso) Relajación de la ampolla rectal Taquicardia y contracción corporal total + : Intensidad baja ++: Intensidad regular +++ : Intensidad moderada ++++: Intensidad alta IV.GRÁFICOS Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 130 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 15 20 25 40 50 75 100 V ketorolaco tramal morfina control
  • 14. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica IV.GRÁFICOS RETIRAMIENTO DE EXTREMIDADES DISCUSIÓN ¿Es el ser vivo un buen conductor de la corriente eléctrica? Si, porque ¿Por qué en el experimento dado se utiliza específicamente ratas albinas? ¿Cuál es el nivel de influencia de los fármacos a las respuestas nocirreceptoras producidas por la corriente eléctrica? ¿Cómo actúa los distintos fármacos a nivel corporal? ¿Cuál de los fármacos utilizados tiene mayor eficacia analgésica? SALTO SACUDIDAS MUSCULARES Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 14 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 15 20 25 40 50 75 100 V Ketorolaco tramal morfina control
  • 15. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica SALTO CARRERA CHILLIDO Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 15 0 1 2 3 4 5 5 15 20 25 40 50 75 100 V Ketorolaco tramal morfina control 0 1 2 3 4 5 5 15 20 25 40 50 75 100 V Ketorolaco Tramal Morfina Control
  • 16. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica SHOCK RESPIRATORIO +Ninguna de las ratas sometidas a experimentación manifestó un shock respiratorio. V. FUNDAMENTO TEÓRICO Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 16 0 1 2 3 4 5 5 15 20 25 40 50 75 100 V Ketorolaco tramal morfina control
  • 17. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica • Electricidad: La electricidad es un fenómeno físico, cuyo propulsor son las cargas eléctricas y la energía que estas promueven puede manifestarse ya sea en fenómenos mecánicos, térmicos, luminosos o físicos. • Corriente eléctrica: La corriente eléctrica consiste en el movimiento ordenado de cargas eléctricas por un material. Las cargas que se mueven por los aparatos eléctricos que usamos a diario son las cargas negativas • Efectos de la corriente eléctrica en el ser humano: Dentro de los factores técnicos mencionaremos los siguientes: Intensidad de la corriente que pasa por el cuerpo humano: Se ha demostrado experimentalmente que es la intensidad que atraviesa el cuerpo humano y no la tensión la que puede ocasionar lesiones debido al accidente eléctrico. En este sentido comentar que a partir de 1 mA de corriente alterna ya se comienzan a percibir hormigueos, y que hasta intensidades de 10 mA del mismo tipo de corriente, la persona aún es capaz de soltar un conductor. Tiempo de exposición al riesgo: No podemos hablar de valores de intensidad sin relacionarlos con el tiempo de paso por el cuerpo humano. De esta forma, para cada intensidad de corriente se establecen, según el tiempo de contacto, tres niveles:  Nivel de seguridad: Abarca desde la mínima percepción de corriente hasta el momento en que no es posible soltarse voluntariamente del conductor. En dicho periodo no se produce afectación cardiaca ni nerviosa.  Nivel de intensidad soportable: Se produce aumento de la presión sanguínea y alteraciones del ritmo cardiaco, pudiéndose llegar a parada cardiaca reversible. Además, el nivel de consciencia va disminuyendo llegándose al coma por encima de 50 mA. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 17
  • 18. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica  Nivel de intensidad insoportable: Estado de coma persistente y parada cardiaca. Recorrido de la corriente eléctrica por el cuerpo humano: Las consecuencias del contacto dependerán de los órganos del cuerpo humano que atraviese la corriente. Las mayores lesiones se producen cuando la corriente circula en las siguientes direcciones:  Mano izquierda - pie derecho  Mano derecha - pie izquierdo  Manos - cabeza  Mano derecha - toráx (corazón) - mano izquierda  Pie derecho - pie izquierdo Resistencia eléctrica del cuerpo humano: Entre los factores determinantes tenemos la edad, el sexo, las tasas de alcohol en sangre, el estado de la superficie de contacto (humedad, suciedad, etc.), la presión de contacto, etc. La sudoración también es un factor que puede disminuir la resistencia de la piel. La resistencia en el interior del organismo es, en general, 1000 veces menor que la de la piel, siendo menor para la corriente alterna. En el interior del organismo la resistencia disminuye en proporción directa a la cantidad de agua que presentan los distintos tejidos; así, de mayor a menor resistencia tenemos los huesos, el tendón, la grasa, la piel, los músculos, la sangre y los nervios. • Transporte activo de iones en la membrana celular: Un mecanismo de equilibrio en la membrana celular es la conocida bomba de sodio – potasio. Los flujos netos de Na+ hacia el interior y de K+ hacia el exterior de la célula debidos a la fuerza eléctrica se denominan flujos pasivos, porque no se necesita suministrar energía para que se produzca. El proceso inverso, es decir la extracción de Na+ del interior de la célula y la devolución de K+ atreves de la membrana requiere consumo constante de energía metabólica y se denomina transporte activo de Na+ - K+ o bomba de Na+ - K+. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 18
  • 19. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica • Potencial de acción: Son cambios rápidos en el potencial de membrana que se extiende con celeridad por la membrana. Un potencial de acción es la inversión del potencial de membrana. • Excitabilidad: Depende de la existencia de distintas concentraciones de iones a ambos lados de la membrana celular y de la capacidad de transporte activo a través de estas membranas. La excitación neuronal se acompaña de un flujo de partículas cargadas a través de la membrana, lo cual genera una corriente eléctrica. • Dolor: La función fisiológica del dolor es señalar al sistema nervioso que una zona del organismo está expuesta a una situación que puede provocar una lesión. • Solución electrolítica: Una solución electrolítica también se conoce como "iónica", ya que contiene iones, o sea partículas cargadas eléctricamente; esto hace que estas soluciones sean conductoras de la electricidad. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 19
  • 20. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica VI. DISCUSION ¿Es el ser vivo un buen conductor de la corriente eléctrica? Sí, porque el ser vivo es una solución electrolítica. La solución electrolítica es la disolución de compuestos iónicos en solución acuosa; donde el solvente actúa como un dieléctrico impidiendo que se unan las cargas eléctricas y generando el transporte de electrones libres. ¿Por qué en el experimento dado se utiliza específicamente ratas albinas? Las características que han hecho del ratón de laboratorio el modelo biológico y biomédico más utilizado en las investigaciones científicas son: 1. Su fácil manejo. 2. Su tamaño apropiado para la crianza y manipulación. 3. No requieren demasiados cuidados. 4. Tienen un sistema inmune similar al de los seres humanos. 5. Al ser mamíferos euterios, poseen un genoma muy similar al de los seres humanos. ¿Cómo actúa los distintos fármacos a nivel corporal? • Ketorolaco: Su mecanismo de acción es la inhibición de las ciclooxigenasas, y por tanto, la síntesis de prostaglandinas, actuando principalmente a nivel periférico; pero también a nivel central. • Tramal: Posee una actividad agonista sobre los receptores opiáceos centrales u; también reduce al AMPc intracelular inhibiendo la adenilato- ciclasa, que, a su vez, modula la liberación de neurotransmisores nociceptivos como la sustancia P, la dopamina, la acetilcolina y la noradrenalina. El resultado final es la inhibición del estímulo nociceptivo Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 20
  • 21. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica • Morfina: Los opiodes imitan la acción de las endorfinas, produciendo una inhibición de la actividad de la adenil-ciclasa. Esto se manifiesta por hiperpolarización neuronal con supresión de la descarga espontánea y respuestas evocadas. Los opiodes también interfieren en el transporte transmembrana de iones Ca+2 y actúa en la membrana presináptca interfiriendo con la liberación de la acetilcolina. ¿Por qué la morfina fue más efectiva que el resto de analgésicos? La actividad agonista que los dos primeros analgésicos poseen sobre los receptores opiáceos situados en el SNC hacen que su inhibición sobre el mecanismo del dolor sea mayor y general, esto se produce debido a que su acción evitara que las bombas de iones hagan contacto con los receptores sinápticos de la membrana celular, bloqueando así los canales de iones y permitirá que la rata tenga una mejor resistencia al dolor. Naturalmente existe un umbral de resistencia por lo que si se incrementa el voltaje y la duración, las manifestaciones serán más notorias y prolongadas. Tal es así que la rata reacciona aplicados 75v y 100v resistiendo muy bien los voltajes de menor intensidad que los anteriores. ¿Qué mecanismos desencadenan las reacciones de la rata ante un estímulo eléctrico? 1ero: El estímulo de la corriente llega a través del estimulador y se conduce a través de los alambres de cobre (de la celda algisimétrica) llegando al cuerpo de la rata (la corriente fluye de positivo a negativo). 2do: El estímulo provoca en la terminales nerviosas (inicialmente en reposo o mejor dicho levemente en reposo - debido al nerviosismo y temor lo cual trajo consigo una relajación de esfínteres) de la rata una despolarización, la cual genera la activación de los nociceptores. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 21
  • 22. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica 3ero: La activación de los nociceptores genera un potencial de acción (permeabilidad de la membrana frente al Na+ ) y posteriormente un impulso nervioso. 4to: El estímulo nociceptivo iniciado en uno de sus receptores será vehiculizado mediante unas fibras nerviosas hacia el asta dorsal de médula, la cual modulará y transformará ese impulso, para enviar información a través diversos haces nociceptivos hasta la corteza cerebral, donde tendrá lugar la percepción y localización concreta del dolor. 5to: Finalmente el impulso nervioso motor regresa hacia el origen del estímulo mediante las neuronas eferentes, donde los neurotransmisores provocaran una respuesta en el órgano efector (en este caso el retiramiento de las extremidades y la sacudida muscular, los saltos y carrera). ¿Por qué se produjo el reflejo de micción en la rata que se le aplico Ketorolaco a un voltaje de 40v? A través de la médula espinal, los núcleos encefálicos estimulan los centros parasimpáticos sacros para que, por medio del nervio pudendus, relajen el músculo esfínter externo. Además se produce contracción abdominal y relajación del suelo pélvico, que facilitan la micción. ¿Por qué los pelos funcionan como aisladores electricos? El cabello seco no es un buen conductor de la electricidad y presentan una alta resistencia eléctrica. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 22
  • 23. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica VII. CONCLUSIONES  Este experimento nos permitió reafirmar que los seres vivos poseen y conducen corrientes eléctricas, y que muchas de las funciones vitales como sólo mover algún músculo o pensar, o reaccionar ante diversas situaciones, se relacionan con la transmisión de impulsos generados por la intervención de pequeñas cantidades de corriente.  La biodisponibilidad y efectos de las drogas está concatenada a la dosis utilizada, el tiempo estimado de acción y a la masa corporal.  Después de este experimento hemos aprendido las dosis a escala, los efectos y el tiempo de respuesta de cada fármaco para que más adelante sea aplicado a un humano y así medir los riesgos. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 23
  • 24. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS BIBLIOGRAFÍA o ARTHUR C. GUYTON, Tratado de fisiología Medica ,8a Edición, Editorial Interamericana. McGraw-Hill.España, 1992, pag.54-68 o Diccionario de Especialidades Farmaceuticas,7a Edición, EditorialPLM, 1994, Colombia, pág. 741. o ALICIA C.LOPEZ CASTELLANO, LUCRECIA MORENO ROYO, VICTORIA VILLAGRASA SEBASTIÁN. Manual de Farmacología, Guía para el uso racional del medicamento. Año de edición 2005, Madrid. Pág. 241-243 o ELVAR QUEZADA CASTILLO, WILDER AGUILAR CASTRO. Física aplicada a las Ciencias de la vida y la salud. Editorial: CONCYTEC. Perú 1994. Pág. 283, 284, 285 o R. MONTOREANO. Manual de Fisiología y Biofísica. LINCOGRAFÍA • http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/t050.htm • http://es.wikipedia.org/wiki/Wikipedia:Portada • http://www.vademecum.es/principios-activos-ketorolaco Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 24
  • 25. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica Anexos MECANISMO DE ACCIÓN DEL TRAMADOL El tramadol es un analgésico de acción central cuyo mecanismo de acción se basa predominantemente en el incremento de la transmisión serotoninérgica. Como tal, su eficacia analgésica puede bloquearse mediante la administración conjunta del antagonista del receptor de serotonina (5-HT3), ondansetrón. El tramadol también inhibe la función del transportador de Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 25
  • 26. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica norepinefrina, y es un agonista débil del receptor “µ” dado que su efecto es antagonizado solo en parte por la naloxona. La dosis reconmendada es de 50 a 100 mg VO cuatro veces al día. La toxicidad está determinada por la aparición de crisis convulsivas; el medicamento está relativamente contraindicado en pacientes con antecedentes de epilepsia y para usarse con otros medicamentos que disminuyan el umbral convulsivo. Otros efectos adversos incluyen náuseas y mareo, pero los síntomas típicamente se abaten después de varios días de tratamiento. De manera sorprendente, no se han reportado efectos clínicos relevantes sobre la respiración o el sistema cardiovascular. Dado el hecho de que la acción analgésica del tramadol es independiente de la acción del receptor µ, este medicamento puede ser de utilidad en el tratamiento del dolor atípico, como el de la neuropatía crónica. MECANISMOS DE ACCIÓN DE LA MORFINA La morfina es un potente agonista de los receptores opiáceos µ. Los receptores opiáceos incluyen los µ (mu), k (kappa), y d (delta), todos ellos acoplados a los receptores para la proteína G y actuando como moduladores, tanto positivos como negativos de la transmisión sináptica que tiene lugar a través de estas proteínas. Los sistemas opioides-proteína C incluyen el AMP-cíclico y el fosfolipasa3C-inositol-1,4,5- trifosfato. Los opioides no alteran el umbral del dolor de las terminaciones de los nervios aferentes a los estímulos nociceptivos, ni afectan la transmisión de los impulsos a lo largo de los nervios periféricos. La analgesia se debe a los cambios en la percepción del dolor a nivel espinal que ocasionan al unirse a los receptores m2, d y k, y a un nivel más elevado, a los receptores m1 y k3. La morfina, al igual que otros opiáceos no muestra un efecto "techo" analgésico. Los opioides actúan como agonistas de los receptores k cerrando los canales de potasio voltage-dependientes y abriendo los canales de potasio calcio-dependientes (agonistas de los receptores m y d) lo que ocasiona una hiperpolarización y una reducción de la excitabilidad de la neurona. La unión de los opiáceos a sus receptores estimula el intercambio de guanosina trifosfato (GPT) del complejo de la proteína G, liberándose una subunidad de dicho complejo que actúa sobre el sistema efector. En el caso de la analgesia inducida por los opioides, el sistema efector es la adenilato Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 26
  • 27. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica ciclasa y el AMP-cíclico localizado en la parte interna de la membrana plasmática neuronal. De esta forma, los opioides disminuyen el AMP-cíclico intracelular inhibiendo la adenilato ciclasa, una enzima que modula la liberación de neurotransmisores nociceptivos como la sustancia P, el GABA o la dopamina. Los opioides también actúan como moduladores de los sistemas endocrino e inmunológico. Así, inhiben la liberación de vasopresina, somatostatina, insulina y glucagón, todo ello debido al bloqueo de los neurotransmisores GABA y acetilcolina. No se sabe muy bien como los agonistas opiáceos estimulan al mismo tiempo procesos estimulantes e inhibitorios. Desde del punto de vista clínico, la estimulación de los receptores m producen analgesia, euforia, depresión circulatoria, disminución del peristaltismo, miosis y dependencia. Los mismos efectos son producidos por la estimulación de los receptores k, que ademas producen disforia y algunos efectos psicomiméticos (p.j. desorientación). La miosis es producida por un efecto excitador del segmento autonómico del núcleo del nervio oculomotor, mientras que la depresión respiratoria se debe a un efecto directo sobre el centro que, en el cerebro, regula la respiración. Los agonistas opiáceos aumentan el tono muscular de la porción antral del estómago, el duodeno y intestino grueso y los esfínteres. Al mismo tiempo, reducen las secreciones gástricas, pancreáticas y biliares todo lo cual resulta en constipación y retraso de la digestión. El tono de la vejiga urinaria también aumenta con los agonistas opiáceos, al igual que el del músculo detrusor, uréteres y esfinter vesical lo que puede ocasionar retención urinaria. Otros efectos clínicos que pueden producir los opiáceos son supresión de la tos, hipotensión y naúseas/vómitos. Los efectos antitusivos de los agonistas opiáceos se deben a una acción directa sobre los receptores del centro de la tos de la médula y se consiguen con dosis menores que las necesarias para la analgesia. La hipotensión se debe a un aumento de la liberación de histamina y a una depresión del centro vasomotor de la médula. La inducción de la nausea es el resultado de una estimulacion directa del sistema vestibular. MECANISMO DE ACCIÓN DEL KETOROLACO Los efectos antiinflamatorios de ketorolaco pueden ser consecuencia de la inhibición periférica de la síntesis de prostaglandinas mediante el bloqueo de la enzima ciclooxigenasa. Las prostaglandinas sensibilizan los receptores del dolor, y su Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 27
  • 28. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica inhibición se cree que es responsable de los efectos analgésicos del ketorolac. La mayoría de los AINEs no modifican el umbral del dolor ni afectan a las prostaglandinas existentes, por lo que el efecto analgésico es más probablemente periférico. La antipiresis puede ocurrir a través de la dilatación periférica causada por una acción central sobre el hipotálamo. Esto se traduce en un flujo creciente de la sangre cutánea y pérdida subsiguiente de calor. Otros efectos debidos a la inhibición de las prostaglandinas son la disminución de la citoprotección de la mucosa gástrica, las alteraciones de la función renal, y la inhibición de la agregación plaquetaria. El ketorolac presenta una débil actividad como bloqueante anticolinérgico y alfa- adrenérgico. Las gotas oftálmicas de ketorolac reducen la prostaglandina E2 en el humor acuoso secundaria a la inhibición de la biosíntesis de prostaglandinas. No causa efectos significativos sobre la presión intraocular. ELECTROLOGÍA ° Electroestimulación de Efecto Motor: Estimula las fibras musculares. ° Electroestimulación sobre nervios sensitivos: Estimula fibras nerviosas para trasmitir las sensaciones nociceptivas. Algunos términos de Electroestimulación a.) Electroestimulación transcutánea: se realiza a través de la piel por medio de electrodos (de contacto y percutáneo) b.) Electroestimulación nerviosa transcutánea: estimulación transcutánea de fibra nerviosa. c.) Electroestimulación eléctrica neuromuscular: estimulación de la fibra nerviosa motora. Corrientes utilizadas en Electroestimulación: Generalmente se emplean corrientes de baja frecuencia (0 – 1000 Hz) y media frecuencia (1000 – 10 000 Hz). Desde el punto de vista clínico práctico pueden ser ininterrumpidas (circula en forma continua, e emplea en electroterapia) o Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 28
  • 29. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica interrumpidas o pulsadas (circulan en períodos breves de tiempo en forma de pulsos). a.) Corriente galvánica (directa): Corriente continua, se usa en galvanización e iontoforesis. b.) Corriente Diadinámicas (o de Bernard): Se genera por rectificación de la corriente alterna. c.) Corriente pulsada: Corriente transmitida mediante paquetes o pulsos. Se utiliza en la actualidad en estimulación neuronal. BASES ELECTROFISIOLÓGICAS Los tejidos vivos poseen la capacidad de reaccionar frente a cambios en su medio interno o frente a variaciones energéticas del medio externo (estímulo). Existen diferentes tipos de estímulos: mecánicos, térmicos, químicos, eléctricos y luminosos. Los estímulos más empleados en experimentación son los eléctricos, pero también son los más adecuados por la naturaleza misma de la excitación, ya que son fáciles de medir, no provocan alteraciones duraderas en las estructuras que atraviesan (reversibles) y requieren poca energía. Los tejidos nervioso y muscular son los más aptos para recibir estímulos y reaccionar frente a ellos por lo que se les califica como excitables o dotados de excitabilidad. Existe una unidad funcional en el sistema neuromuscular llamada unidad motora. El agrupamiento de un elevado número de estas unidades puede realizar una función concreta al formar parte de un sistema (nervio – músculo). La célula nerviosa reacciona ante el estímulo transmitiendo el impulso eléctrico, mientras que el músculo reacciona contrayéndose y originando energía mecánica. En ambos casos, la reacción se produce como Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 29
  • 30. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica consecuencia del cambio de iones entre el medio intracelular y el extracelular. Dicho cambio tiene lugar a través de la membrana celular de los tejidos excitables, por medio de modificaciones en su permeabilidad. Los principales iones que regulan estos cambios son el potasio, en el medio intracelular, y el sodio, en el extracelular. Hay un equilibrio continuo entre ambos iones al traspasar la membrana de modo que se establece una diferencia de potencial entre los dos medios. Cuando esta diferencia está establecida se dice que la membrana está polarizada. El estímulo eléctrico produce un cambio en la permeabilidad de la membrana celular y, con ello, un aumento del paso de iones. Así se crea un potencial de acción, que se propaga por medio de las fibras nerviosas. De este modo se produce la despolarización de la membrana. NIVELES DE ESTIMULACIÓN Las tres respuestas o niveles de electroestimulación transcutánea se perciben en el nivel sensible – umbral de sensibilidad (parestesia eléctrica: ligero cosquilleo, hormigueo o vibración). Cuando la intensidad o duración del estímulo adquiere un nivel adecuado, la estimulación alcanza el nivel motor – umbral motor (contracciones musculares palpables o visibles). Si el estímulo se hace más intenso, la estimulación se encuentra en el nivel doloroso – umbral doloroso (la percepción del estímulo se hace molesta, dolorosa e incluso puede llegar a ser insoportable) 1. Estimulación en el nivel sensible Con bajas intensidades o duraciones de estímulo no se obtiene ninguna respuesta por parte del individuo, por lo que a este nivel se le denomina estimulación subsensorial o subumbral. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 30
  • 31. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica 2. Estimulación en el nivel motor Conforme se eleva la amplitud de la estimulación aparecen contracciones musculares palpables que llegarán a hacerse visibles. 3. Estimulación en el nivel doloroso Al llegar a este nivel, la intensidad de la estimulación es tan elevada que se activan muchas fibras A & C, que transmiten impulsos nociceptivos, se alcanza una estimulación dolorosa en ausencia de contracción muscular. La aparición de esta respuesta varía de persona a persona y con los diferentes parámetros de estimulación y disposición de los electrodos. PRINCIPIOS DE INSTRUMENTACIÓN 1. Electroestimuladores Con el término genérico de estimuladores eléctricos o electroestimuladores se designan a los generadores utilizados en medicina y biología para aplicar estímulos eléctricos a los seres vivos. Se trata de generadores destinados a actuar sobre un circuito exterior, constituido por los tejidos orgánicos. 2. Electrodos Pueden ser de diverso tamaño y están en relación con los sistemas que hay que estimular. Los electrodos de contacto pueden clasificarse en fijos y móviles. Electrodos fijos: los electrodos debe ser buenos conductores, de forma que presenten muy oca resistencia al paso de la corriente. Los electrodos de contacto más empleados son los de goma impregnada con partículas de carbono, conocidos comúnmente como electrodos flexibles de goma. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 31
  • 32. INFORME DE LABORATORIO N°02 Biofísica Electrodos móviles: Estos electrodos pueden desplazarse manualmente, de forma que puede posibilitarse la localización y tratamiento de puntos motores, puntos dolorosos, trayectos dolorosos, etc. Efecto de la estimulación eléctrica en ratas albinas 32