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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Narcisa Macanchi Procel
Curso: Quinto Paralelo: B
Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 24 de Junio del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 1 de Julio del 2014
PRÁCTICA N° 4
Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO.
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Vía Parenteral
 OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta la rata ante la Intoxicación por cloroformo.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el
cloroformo.
3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de hidróxido de sodio.
 MATERIALES SUSTANCIAS
 Jeringuilla de 10cc Ac. Tartarico
 Campana NaOH AL 20%
 Cronómetro Destilado obtenido del cobayo
 Equipo de disección Cloroformo
 Bisturí
 Vaso de precipitación
 Erlenmeyer
 Equipo de destilación.
 Tubos de ensayo
 Pipetas
 Guantes de látex
 Mascarilla
 Mandil
10
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2
20CC de metanolpor vía
peritoneal
Cobayo en la campana,
y observar todas sus
manifestaciones
diseccion de el cobayo
extraer las visceras y
picarlas
Se destila
Destilado obtenido
para las reacciones
 PROCEDIMIENTO
1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo
2. Pesar la rata blanca
3. Administrar 20cc de cloroformo por vía peritoneal
4. Colocar al cobayo en la campana.
5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su
muerte.
6. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir a la rata
7. Colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente
adecuado (Vaso de precipitación).
8. Armar el equipo y proceder a la destilación por 30 minutos
9. Se practican las diferentes reacciones de reconocimiento
GRÁFICOS
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
Reconocimiento en Medios Biológicos
• Reacción a la llama. Positivo no característico
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 3
• Reaccion de Duma s
Reacción percloruro de hierro Positivo característico color rojo
Nitrato de plata Positivo característico precipitado
 Reacción de Lustgarten
Reacción B Naftol Positivo no característico franco color azul
Reacción Timol Positivo característico franco color amarillo
Reacción Resorcinol Positivo característico franco color rojo
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 4
• Reacción de Roseboom Positivo no característico amarillo
rojizo
• Reacción de Benedict Negativo no se produjo coloración
 OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar cloroformo por vía intraperitoneal se presentaron
perdida de actividad motora un estado de sueño profundo hginchazon abdominal e
hipoxia, en la campana de observación, manifestando su muerte en 8 minuto 21
segundos, denotando la presencia de cloroformo por medio de las pruebas en medios
biológicos.
 CONCLUSIONES
Al final de esta práctica la reacción que presenta la rata blanca ante la intoxicación con
cloroformo fue inchazon abdominal por lo que se puede concluir que el metanol es una
sustancia toxica provocando así una muerte rápida en el animal y mediante las
reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de
metanol en estos medios biológicos. Todas las reacciones de reconocimiento de
metanol son indispensables para la verificación de una intoxicación, muerte por este
tóxico.
 RECOMENDACIONES
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 5
 Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
 Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
 Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.
 Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida
 CUESTIONARIO
Mecanismo de acción tóxico
El cloroformo puede producir la muerte celular por dos mecanismos bioquímicos:
1.- Alteración de la homeostasis del calcio. El cloroformo forma enlaces covalentes
con la bomba Ca2+
ATPasa situada en la membrana plasmática y en la membrana de
retículo endoplasmático liso. Esta bomba tiene como función almacenar calcio dentro
del retículo endoplasmático, y expulsar calcio fuera del citosol. Por tanto, el cloroformo
inhibe estas funciones, y como consecuencia, aumentan los niveles de calcio
intracelulares.14
2.- Estrés oxidativo. El cloroformo está implicado en la hiperproducción de especies
reactivas del oxígeno (ROS) y especies reactivas de nitrógeno (RON). Estas especies
son generadas en el proceso de biotransformación del cloroformo en los seres vivos.1
Tratamiento de la intoxicación
En vista de que el cloroformo sufre conjugación mercaptúrica en su paso por el
organismo, algunos autores proponen a la N-acetilcisteína como un posible
tratamiento de las intoxicaciones con cloroformo. La N-acetilcisteína, por su capacidad
de inhibir la formación de radicales libres generados por el cloroformo y sus
metabolitos, ha presentado efectividad en algunos casos en el tratamiento de
intoxicaciones por cloroformo, incluso combinado con otros antioxidantes naturales,
como la vitamina E.31
Información toxicológica
El cloroformo es un depresor del sistema nervioso central y produce efectos tóxicos
sobre el hígado y los riñones. Se absorbe bien tanto por vía inhalatoria como por vía
oral y dérmica. La principal ruta de eliminación es la exhalación. El dióxido de carbono
“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 6
es su metabolito principal, aunque también puede formarse fosgeno. El cloroformo
presenta una toxicidad de leve a moderada, si bien la muerte puede sobrevenir por
depresión respiratoria durante la anestesia, o bien con posterioridad debido a su
hepato toxicidad.
El cloroformo líquido es altamente irritante, pero no se ha descrito irritación para el
vapor
BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA
 Cloroformo. Consultado el 01 de julio del 2014. Disponible en:
http://es.wikipedia.org/wiki/Cloroformo
 instituto nacional de higiene y seguridad en el trabajo. documentación
toxicológica para el establecimiento del límite de exposición profesional del
cloroformo. Consultado el24 de junio del 2014. Disponible en:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valores
_Limite/Doc_Toxicologica/FicherosSerie2/DLEP%2026.pd
 FIRMA
________________
Narcisa Macanchi
ANEXOS:
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Practica 5

  • 1. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1 UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumno: Narcisa Macanchi Procel Curso: Quinto Paralelo: B Fecha de Elaboración de la Práctica: Martes 24 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Martes 1 de Julio del 2014 PRÁCTICA N° 4 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO. Animal de Experimentación: Cobayo. Vía de Administración: Vía Parenteral  OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Observar la reacción que presenta la rata ante la Intoxicación por cloroformo. 2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el cloroformo. 3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de hidróxido de sodio.  MATERIALES SUSTANCIAS  Jeringuilla de 10cc Ac. Tartarico  Campana NaOH AL 20%  Cronómetro Destilado obtenido del cobayo  Equipo de disección Cloroformo  Bisturí  Vaso de precipitación  Erlenmeyer  Equipo de destilación.  Tubos de ensayo  Pipetas  Guantes de látex  Mascarilla  Mandil 10
  • 2. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 2 20CC de metanolpor vía peritoneal Cobayo en la campana, y observar todas sus manifestaciones diseccion de el cobayo extraer las visceras y picarlas Se destila Destilado obtenido para las reacciones  PROCEDIMIENTO 1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Pesar la rata blanca 3. Administrar 20cc de cloroformo por vía peritoneal 4. Colocar al cobayo en la campana. 5. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte. 6. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir a la rata 7. Colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación). 8. Armar el equipo y proceder a la destilación por 30 minutos 9. Se practican las diferentes reacciones de reconocimiento GRÁFICOS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO Reconocimiento en Medios Biológicos • Reacción a la llama. Positivo no característico
  • 3. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 3 • Reaccion de Duma s Reacción percloruro de hierro Positivo característico color rojo Nitrato de plata Positivo característico precipitado  Reacción de Lustgarten Reacción B Naftol Positivo no característico franco color azul Reacción Timol Positivo característico franco color amarillo Reacción Resorcinol Positivo característico franco color rojo
  • 4. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 4 • Reacción de Roseboom Positivo no característico amarillo rojizo • Reacción de Benedict Negativo no se produjo coloración  OBSERVACIONES Hemos observado que al administrar cloroformo por vía intraperitoneal se presentaron perdida de actividad motora un estado de sueño profundo hginchazon abdominal e hipoxia, en la campana de observación, manifestando su muerte en 8 minuto 21 segundos, denotando la presencia de cloroformo por medio de las pruebas en medios biológicos.  CONCLUSIONES Al final de esta práctica la reacción que presenta la rata blanca ante la intoxicación con cloroformo fue inchazon abdominal por lo que se puede concluir que el metanol es una sustancia toxica provocando así una muerte rápida en el animal y mediante las reacciones para el reconocimiento de éste podemos concluir que si hubo presencia de metanol en estos medios biológicos. Todas las reacciones de reconocimiento de metanol son indispensables para la verificación de una intoxicación, muerte por este tóxico.  RECOMENDACIONES
  • 5. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 5  Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla.  Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.  Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.  Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida  CUESTIONARIO Mecanismo de acción tóxico El cloroformo puede producir la muerte celular por dos mecanismos bioquímicos: 1.- Alteración de la homeostasis del calcio. El cloroformo forma enlaces covalentes con la bomba Ca2+ ATPasa situada en la membrana plasmática y en la membrana de retículo endoplasmático liso. Esta bomba tiene como función almacenar calcio dentro del retículo endoplasmático, y expulsar calcio fuera del citosol. Por tanto, el cloroformo inhibe estas funciones, y como consecuencia, aumentan los niveles de calcio intracelulares.14 2.- Estrés oxidativo. El cloroformo está implicado en la hiperproducción de especies reactivas del oxígeno (ROS) y especies reactivas de nitrógeno (RON). Estas especies son generadas en el proceso de biotransformación del cloroformo en los seres vivos.1 Tratamiento de la intoxicación En vista de que el cloroformo sufre conjugación mercaptúrica en su paso por el organismo, algunos autores proponen a la N-acetilcisteína como un posible tratamiento de las intoxicaciones con cloroformo. La N-acetilcisteína, por su capacidad de inhibir la formación de radicales libres generados por el cloroformo y sus metabolitos, ha presentado efectividad en algunos casos en el tratamiento de intoxicaciones por cloroformo, incluso combinado con otros antioxidantes naturales, como la vitamina E.31 Información toxicológica El cloroformo es un depresor del sistema nervioso central y produce efectos tóxicos sobre el hígado y los riñones. Se absorbe bien tanto por vía inhalatoria como por vía oral y dérmica. La principal ruta de eliminación es la exhalación. El dióxido de carbono
  • 6. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 6 es su metabolito principal, aunque también puede formarse fosgeno. El cloroformo presenta una toxicidad de leve a moderada, si bien la muerte puede sobrevenir por depresión respiratoria durante la anestesia, o bien con posterioridad debido a su hepato toxicidad. El cloroformo líquido es altamente irritante, pero no se ha descrito irritación para el vapor BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA  Cloroformo. Consultado el 01 de julio del 2014. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Cloroformo  instituto nacional de higiene y seguridad en el trabajo. documentación toxicológica para el establecimiento del límite de exposición profesional del cloroformo. Consultado el24 de junio del 2014. Disponible en: http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valores _Limite/Doc_Toxicologica/FicherosSerie2/DLEP%2026.pd  FIRMA ________________ Narcisa Macanchi ANEXOS:
  • 7. “Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 7