Este documento describe el método para determinar bacterias coliformes, coliformes fecales y Escherichia coli mediante la técnica de diluciones en tubo múltiple. Explica los objetivos de este método, las generalidades sobre estos microorganismos como indicadores de contaminación, y los detalles sobre la identificación y recuento de estas bacterias en muestras de alimentos y agua.
Este documento describe Bacillus cereus, una bacteria Gram positiva formadora de esporas que puede causar intoxicaciones alimentarias. B. cereus puede crecer en condiciones aeróbicas o anaeróbicas y la mayoría son mesofilos. Produce dos tipos de toxinas que causan vómitos o diarrea. La industria alimentaria debe mantener estrictos controles de temperatura para prevenir el crecimiento de esta bacteria.
Este documento describe la clasificación de las levaduras desde diferentes perspectivas taxonómicas. Se dividen principalmente en ascomicetos, basidiomicetos y deuteromicetos. Los ascomicetos se subdividen en clases, órdenes y familias como la Saccharomycetaceae, que incluye géneros como Saccharomyces. También se explican los sistemas de identificación de levaduras basados en su morfología, reproducción y requerimientos metabólicos. Finalmente, se detallan diversos géneros y especies de
Este resumen habla sobra la bacteria Escherichia Coli sus características, transmisión, patogenia sabrás los grupos que la dividen y en que medios crecen
Espero que te sirva
Campylobacter jejuni y Campylobacter coli son bacterias patógenas humanas frecuentes que causan enteritis. Se transmiten principalmente a través de alimentos como pollo mal cocido y leche. Helicobacter pylori es una bacteria espiralada que infecta el estómago y se asocia con úlceras pépticas y cáncer gástrico. Ambos patógenos pueden causar diarrea y malestar general.
Este documento describe un procedimiento experimental para realizar un recuento de bacterias en placa. Se toma una muestra de agua potable y se preparan diluciones seriadas en solución salina fisiológica para obtener concentraciones de 10-1 y 10-2. Luego, 1 ml de cada dilución se siembra en placas con agar y se incuban. El recuento final es de 51 UFC/ml.
Este documento describe tres géneros de bacterias gramnegativas que pueden causar enfermedades gastrointestinales: Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas. Vibrio cholerae es el agente causante del cólera y produce una toxina que causa una diarrea grave y potencialmente mortal. Aeromonas spp. pueden causar gastroenteritis aguda o diarrea crónica, mientras que Plesiomonas shigelloides generalmente causa una gastroenteritis autolimitada. El tratamiento incluye rehidratación y antibióticos como doxiciclina o tri
Este documento describe diferentes microorganismos indicadores que se utilizan para evaluar la calidad microbiológica y seguridad de los alimentos. Explica que los microorganismos indicadores son fáciles de contar y que su presencia en los alimentos más allá de límites normales puede indicar exposición a condiciones que introduzcan organismos no deseados o permitan el crecimiento de patógenos. Luego procede a describir ejemplos como bacterias mesófilas aerobias, coliformes, coliformes fecales, E. coli,
Este documento describe Bacillus cereus, una bacteria Gram positiva formadora de esporas que puede causar intoxicaciones alimentarias. B. cereus puede crecer en condiciones aeróbicas o anaeróbicas y la mayoría son mesofilos. Produce dos tipos de toxinas que causan vómitos o diarrea. La industria alimentaria debe mantener estrictos controles de temperatura para prevenir el crecimiento de esta bacteria.
Este documento describe la clasificación de las levaduras desde diferentes perspectivas taxonómicas. Se dividen principalmente en ascomicetos, basidiomicetos y deuteromicetos. Los ascomicetos se subdividen en clases, órdenes y familias como la Saccharomycetaceae, que incluye géneros como Saccharomyces. También se explican los sistemas de identificación de levaduras basados en su morfología, reproducción y requerimientos metabólicos. Finalmente, se detallan diversos géneros y especies de
Este resumen habla sobra la bacteria Escherichia Coli sus características, transmisión, patogenia sabrás los grupos que la dividen y en que medios crecen
Espero que te sirva
Campylobacter jejuni y Campylobacter coli son bacterias patógenas humanas frecuentes que causan enteritis. Se transmiten principalmente a través de alimentos como pollo mal cocido y leche. Helicobacter pylori es una bacteria espiralada que infecta el estómago y se asocia con úlceras pépticas y cáncer gástrico. Ambos patógenos pueden causar diarrea y malestar general.
Este documento describe un procedimiento experimental para realizar un recuento de bacterias en placa. Se toma una muestra de agua potable y se preparan diluciones seriadas en solución salina fisiológica para obtener concentraciones de 10-1 y 10-2. Luego, 1 ml de cada dilución se siembra en placas con agar y se incuban. El recuento final es de 51 UFC/ml.
Este documento describe tres géneros de bacterias gramnegativas que pueden causar enfermedades gastrointestinales: Vibrio, Aeromonas y Plesiomonas. Vibrio cholerae es el agente causante del cólera y produce una toxina que causa una diarrea grave y potencialmente mortal. Aeromonas spp. pueden causar gastroenteritis aguda o diarrea crónica, mientras que Plesiomonas shigelloides generalmente causa una gastroenteritis autolimitada. El tratamiento incluye rehidratación y antibióticos como doxiciclina o tri
Este documento describe diferentes microorganismos indicadores que se utilizan para evaluar la calidad microbiológica y seguridad de los alimentos. Explica que los microorganismos indicadores son fáciles de contar y que su presencia en los alimentos más allá de límites normales puede indicar exposición a condiciones que introduzcan organismos no deseados o permitan el crecimiento de patógenos. Luego procede a describir ejemplos como bacterias mesófilas aerobias, coliformes, coliformes fecales, E. coli,
Determinación de actividad de peroxidasa y de su regeneraciónWilmer Peña
1) El documento describe los métodos para determinar la actividad y regeneración de la peroxidasa, una enzima que cataliza la oxidación de compuestos usando peróxidos. 2) Incluye procedimientos para medir la actividad peroxidásica en vegetales y alimentos usando guayacol o fenilendiamina como sustratos y midiendo la formación de color. 3) También cubre cómo la peroxidasa se puede usar para evaluar la eficiencia del escaldado de verduras y la pasteurización de leche.
Este documento describe cuatro pruebas químicas para determinar la calidad de pescado: la prueba de Eber, la prueba de Nessler, la prueba de ácido sulfhídrico y la prueba reductasa. Se realizaron las pruebas en una muestra de pescado descompuesto y todos los resultados indicaron que la muestra no era apta para el consumo humano.
Este documento describe varias pruebas bioquímicas utilizadas para identificar bacterias, incluyendo las pruebas IMVIC (indol, rojo de metilo, Voges-Proskauer y citrato), la prueba de TSI, y la prueba de ureasa. Explica los fundamentos bioquímicos, protocolos e interpretación de los resultados de cada prueba.
Listeria monocytogenes es un bacilo Gram-positivo anaerobio facultativo que causa la enfermedad de la listeriosis. Afecta principalmente a embarazadas, inmunocomprometidos y ancianos. Se transmite por el consumo de alimentos contaminados como quesos blandos, carnes frías y verduras crudas. Los síntomas incluyen fiebre, dolores musculares y en casos graves, meningitis o septicemia.
Este documento presenta información sobre dos pruebas de laboratorio (TSI y LIA) utilizadas para identificar dos bacterias importantes: E. coli y Salmonella typhi. En la prueba TSI, E. coli da resultados de K/A, H2S-, CO2+ mientras que Salmonella typhi da A/A, H2S-, CO2+. Ambas bacterias dan resultados positivos en la prueba LIA. El documento también proporciona detalles sobre las características y patogenicidad de estas dos bacterias.
Estas bacterias crecen en una variedad de ambientes acuáticos y terrestres a diferentes temperaturas. Algunas son patógenas y causan infecciones en humanos y animales, mientras que otras desempeñan papeles ecológicos importantes en la descomposición de materia orgánica. La mayoría son gramnegativas y se encuentran ampliamente distribuidas.
1) El documento describe varios medios de cultivo usados en microbiología como el agar EMB, agar Sabouraud, agar MacConkey y agar cetrimide para el aislamiento de diferentes microorganismos. 2) También presenta información sobre métodos como el recuento de placas para determinar la contaminación bacteriana de alimentos y el uso de caldos y agar para pruebas de sensibilidad a antibióticos. 3) Finalmente, menciona otros reactivos como la prueba de oxidasa para la identificación bacteriana.
Aislamiento e identiicacion de bacillus cereus.Froylan Avila
En la práctica se intentó determinar la presencia de Bacillus cereus en una muestra de harina de arroz mediante técnicas de aislamiento e identificación. Sin embargo, las pruebas bioquímicas no mostraron crecimiento, por lo que no fue posible identificar Bacillus cereus u otros microorganismos en la muestra.
Características de calidad en la lecheSofia Acosta
El documento describe las características de calidad de la leche. Explica que la leche de buena calidad es indispensable para producir productos lácteos de alta calidad. Detalla las pruebas fisicoquímicas y microbiológicas que se realizan para evaluar la calidad de la leche, así como los posibles contaminantes bacterianos. También cubre métodos para detectar si la leche ha sido sometida a un proceso adecuado de pasteurización.
El documento describe las características de Shigella, una bacteria Gram negativa inmóvil que pertenece al Serogrupo D y causa shigelosis. Shigella fermenta la lactosa lentamente, no forma esporas, es anaerobia facultativa y es muy sensible al pH ácido. Puede producir brotes por alimentos o aguas contaminadas. Las complicaciones incluyen síndrome de Reiter y SHU. Se transmite por la vía fecal-oral directa o indirectamente a través de alimentos o fómites contaminados.
Este documento proporciona guías para realizar análisis microbiológicos de alimentos y agua. Incluye información sobre pruebas para detectar coliformes totales y fecales en agua y leche, así como sobre métodos de muestreo, diluciones y recuentos microbiológicos. Describe pruebas como el número más probable y métodos basados en la formación de colonias para cuantificar microorganismos viables totales en muestras líquidas u homogeneizadas. El objetivo es conocer los procedimientos estandarizados para evalu
Este documento describe las pruebas de identificación de Enterobacterias. Resume que las Enterobacterias son bacterias Gram negativas, anaerobias facultativas que se encuentran comúnmente en el tracto intestinal. Explica que las pruebas de identificación incluyen cultivos en agar selectivo, pruebas bioquímicas como IMViC y TSI, y técnicas moleculares como PCR. Proporciona detalles sobre tres géneros comunes: Escherichia coli, Salmonella y Shigella.
La coccidiosis aviar es una enfermedad intestinal de importancia veterinaria causada por el protozoario de phylum Apicomplexa, Eimeria sp., dicha enfermedad es importante debido a su gran impacto económico en las granjas de producción de pollo de engorda y gallina ponedora.
Escherichia coli es una bacteria Gram negativa que puede causar diversas enfermedades como diarrea. Existen cinco grupos principales de E. coli basados en sus características patogénicas: enteropatógena, enteroinvasiva, enterohemorrágica, enteroagregativa y enterotoxigénica. Cada grupo se caracteriza por su epidemiología, cuadro clínico y síntomas como diarrea y fiebre. El diagnóstico incluye pruebas de laboratorio como coprocultivos, bioquímica y té
El documento describe varias pruebas bioquímicas de identificación para bacterias Gram positivas. Incluye pruebas rápidas como catalasa y coagulasa, así como pruebas para identificar especies de cocos Gram positivos como DNasa, manitol salado, bilis esculina, CAMP y hidrólisis del hipurato. También describe pruebas de sensibilidad a antibióticos.
El documento describe la familia de las Enterobacteriaceae, que incluye géneros como Escherichia, Salmonella y Klebsiella. Se detalla la clasificación, características generales, factores de virulencia, enfermedades causadas y tratamiento de especies importantes como E. coli. Las Enterobacteriaceae son bacilos gramnegativos anaerobios facultativos que habitan el tracto intestinal y pueden causar infecciones gastrointestinales o sistémicas.
E. coli es un parásito intestinal común encontrado en humanos en todo el mundo. Aunque no es patogénico, su presencia indica contaminación fecal. Se transmite a través de quistes ingeridos que se desarrollan en trofozoitos en el intestino. Su frecuencia puede reducirse mediante mejoras en la higiene personal y en la eliminación de desechos.
Este documento describe un medio de cultivo de agar extracto de levadura con glucosa y cloranfenicol que se usa para contar e aislar levaduras y mohos en leche y productos lácteos. Contiene extracto de levadura y glucosa como fuente de nutrientes y energía, y cloranfenicol para inhibir la flora acompañante. Se prepara disolviendo el medio deshidratado en agua destilada y esterilizándolo, y se usa para contar colonias después de incubar muestras durante 4 días a 25°
Este documento describe un medio de cultivo selectivo para el aislamiento de Listeria spp. El medio Oxford Modificado Agar Base contiene nutrientes para el crecimiento de Listeria spp. y es diferencial debido a que la esculina hidrolizada forma un compuesto fenólico negro en presencia de iones de hierro. El medio es selectivo gracias a antibióticos en el suplemento que inhiben la flora acompañante pero permiten el crecimiento de Listeria spp.
El documento proporciona información sobre la preparación y esterilización de material de laboratorio de microbiología. Explica que un laboratorio de microbiología debe ser un lugar limpio donde se puedan manipular microorganismos de forma segura. Describe los cuatro grupos de riesgo de agentes infecciosos y especifica que en un laboratorio de prácticas siempre se deben usar microorganismos del grupo 1, que no suelen causar enfermedades. Además, presenta normas generales para el uso del laboratorio y detalla los procedimientos para preparar y
Determinación de actividad de peroxidasa y de su regeneraciónWilmer Peña
1) El documento describe los métodos para determinar la actividad y regeneración de la peroxidasa, una enzima que cataliza la oxidación de compuestos usando peróxidos. 2) Incluye procedimientos para medir la actividad peroxidásica en vegetales y alimentos usando guayacol o fenilendiamina como sustratos y midiendo la formación de color. 3) También cubre cómo la peroxidasa se puede usar para evaluar la eficiencia del escaldado de verduras y la pasteurización de leche.
Este documento describe cuatro pruebas químicas para determinar la calidad de pescado: la prueba de Eber, la prueba de Nessler, la prueba de ácido sulfhídrico y la prueba reductasa. Se realizaron las pruebas en una muestra de pescado descompuesto y todos los resultados indicaron que la muestra no era apta para el consumo humano.
Este documento describe varias pruebas bioquímicas utilizadas para identificar bacterias, incluyendo las pruebas IMVIC (indol, rojo de metilo, Voges-Proskauer y citrato), la prueba de TSI, y la prueba de ureasa. Explica los fundamentos bioquímicos, protocolos e interpretación de los resultados de cada prueba.
Listeria monocytogenes es un bacilo Gram-positivo anaerobio facultativo que causa la enfermedad de la listeriosis. Afecta principalmente a embarazadas, inmunocomprometidos y ancianos. Se transmite por el consumo de alimentos contaminados como quesos blandos, carnes frías y verduras crudas. Los síntomas incluyen fiebre, dolores musculares y en casos graves, meningitis o septicemia.
Este documento presenta información sobre dos pruebas de laboratorio (TSI y LIA) utilizadas para identificar dos bacterias importantes: E. coli y Salmonella typhi. En la prueba TSI, E. coli da resultados de K/A, H2S-, CO2+ mientras que Salmonella typhi da A/A, H2S-, CO2+. Ambas bacterias dan resultados positivos en la prueba LIA. El documento también proporciona detalles sobre las características y patogenicidad de estas dos bacterias.
Estas bacterias crecen en una variedad de ambientes acuáticos y terrestres a diferentes temperaturas. Algunas son patógenas y causan infecciones en humanos y animales, mientras que otras desempeñan papeles ecológicos importantes en la descomposición de materia orgánica. La mayoría son gramnegativas y se encuentran ampliamente distribuidas.
1) El documento describe varios medios de cultivo usados en microbiología como el agar EMB, agar Sabouraud, agar MacConkey y agar cetrimide para el aislamiento de diferentes microorganismos. 2) También presenta información sobre métodos como el recuento de placas para determinar la contaminación bacteriana de alimentos y el uso de caldos y agar para pruebas de sensibilidad a antibióticos. 3) Finalmente, menciona otros reactivos como la prueba de oxidasa para la identificación bacteriana.
Aislamiento e identiicacion de bacillus cereus.Froylan Avila
En la práctica se intentó determinar la presencia de Bacillus cereus en una muestra de harina de arroz mediante técnicas de aislamiento e identificación. Sin embargo, las pruebas bioquímicas no mostraron crecimiento, por lo que no fue posible identificar Bacillus cereus u otros microorganismos en la muestra.
Características de calidad en la lecheSofia Acosta
El documento describe las características de calidad de la leche. Explica que la leche de buena calidad es indispensable para producir productos lácteos de alta calidad. Detalla las pruebas fisicoquímicas y microbiológicas que se realizan para evaluar la calidad de la leche, así como los posibles contaminantes bacterianos. También cubre métodos para detectar si la leche ha sido sometida a un proceso adecuado de pasteurización.
El documento describe las características de Shigella, una bacteria Gram negativa inmóvil que pertenece al Serogrupo D y causa shigelosis. Shigella fermenta la lactosa lentamente, no forma esporas, es anaerobia facultativa y es muy sensible al pH ácido. Puede producir brotes por alimentos o aguas contaminadas. Las complicaciones incluyen síndrome de Reiter y SHU. Se transmite por la vía fecal-oral directa o indirectamente a través de alimentos o fómites contaminados.
Este documento proporciona guías para realizar análisis microbiológicos de alimentos y agua. Incluye información sobre pruebas para detectar coliformes totales y fecales en agua y leche, así como sobre métodos de muestreo, diluciones y recuentos microbiológicos. Describe pruebas como el número más probable y métodos basados en la formación de colonias para cuantificar microorganismos viables totales en muestras líquidas u homogeneizadas. El objetivo es conocer los procedimientos estandarizados para evalu
Este documento describe las pruebas de identificación de Enterobacterias. Resume que las Enterobacterias son bacterias Gram negativas, anaerobias facultativas que se encuentran comúnmente en el tracto intestinal. Explica que las pruebas de identificación incluyen cultivos en agar selectivo, pruebas bioquímicas como IMViC y TSI, y técnicas moleculares como PCR. Proporciona detalles sobre tres géneros comunes: Escherichia coli, Salmonella y Shigella.
La coccidiosis aviar es una enfermedad intestinal de importancia veterinaria causada por el protozoario de phylum Apicomplexa, Eimeria sp., dicha enfermedad es importante debido a su gran impacto económico en las granjas de producción de pollo de engorda y gallina ponedora.
Escherichia coli es una bacteria Gram negativa que puede causar diversas enfermedades como diarrea. Existen cinco grupos principales de E. coli basados en sus características patogénicas: enteropatógena, enteroinvasiva, enterohemorrágica, enteroagregativa y enterotoxigénica. Cada grupo se caracteriza por su epidemiología, cuadro clínico y síntomas como diarrea y fiebre. El diagnóstico incluye pruebas de laboratorio como coprocultivos, bioquímica y té
El documento describe varias pruebas bioquímicas de identificación para bacterias Gram positivas. Incluye pruebas rápidas como catalasa y coagulasa, así como pruebas para identificar especies de cocos Gram positivos como DNasa, manitol salado, bilis esculina, CAMP y hidrólisis del hipurato. También describe pruebas de sensibilidad a antibióticos.
El documento describe la familia de las Enterobacteriaceae, que incluye géneros como Escherichia, Salmonella y Klebsiella. Se detalla la clasificación, características generales, factores de virulencia, enfermedades causadas y tratamiento de especies importantes como E. coli. Las Enterobacteriaceae son bacilos gramnegativos anaerobios facultativos que habitan el tracto intestinal y pueden causar infecciones gastrointestinales o sistémicas.
E. coli es un parásito intestinal común encontrado en humanos en todo el mundo. Aunque no es patogénico, su presencia indica contaminación fecal. Se transmite a través de quistes ingeridos que se desarrollan en trofozoitos en el intestino. Su frecuencia puede reducirse mediante mejoras en la higiene personal y en la eliminación de desechos.
Este documento describe un medio de cultivo de agar extracto de levadura con glucosa y cloranfenicol que se usa para contar e aislar levaduras y mohos en leche y productos lácteos. Contiene extracto de levadura y glucosa como fuente de nutrientes y energía, y cloranfenicol para inhibir la flora acompañante. Se prepara disolviendo el medio deshidratado en agua destilada y esterilizándolo, y se usa para contar colonias después de incubar muestras durante 4 días a 25°
Este documento describe un medio de cultivo selectivo para el aislamiento de Listeria spp. El medio Oxford Modificado Agar Base contiene nutrientes para el crecimiento de Listeria spp. y es diferencial debido a que la esculina hidrolizada forma un compuesto fenólico negro en presencia de iones de hierro. El medio es selectivo gracias a antibióticos en el suplemento que inhiben la flora acompañante pero permiten el crecimiento de Listeria spp.
El documento proporciona información sobre la preparación y esterilización de material de laboratorio de microbiología. Explica que un laboratorio de microbiología debe ser un lugar limpio donde se puedan manipular microorganismos de forma segura. Describe los cuatro grupos de riesgo de agentes infecciosos y especifica que en un laboratorio de prácticas siempre se deben usar microorganismos del grupo 1, que no suelen causar enfermedades. Además, presenta normas generales para el uso del laboratorio y detalla los procedimientos para preparar y
Este documento presenta un protocolo de investigación para identificar la presencia de la bacteria Escherichia coli en el agua de consumo de pozos en comarcas del municipio de Quezalguaque, Nicaragua. El objetivo principal es determinar la carga bacteriana de E. coli en el agua de los pozos entre julio y octubre de 2014. Se recolectarán muestras de agua de 6 pozos que serán analizadas en el laboratorio para detectar coliformes totales y fecales usando la técnica de tubos múltiples. Los resultados prelim
La implantación de las BPL y el aseguramiento de la calidad, obliga a normalizar todas las operaciones que se realizan en el laboratorio. Por ellos se sugiere la unificación de procedimientos e instrucciones de trabajo que proporcione uniformidad y consistencia a los análisis y en este caso, a los recuentos empleados como técnica para cuantificar microorganismos y disminuir los riesgos de error por parte de personas que realizan el ensayo.
El documento trata sobre la microbiología de los alimentos y los diferentes tipos de contaminación biológica que pueden afectarlos. Explica las bacterias, virus, parásitos y hongos patógenos más comunes que causan enfermedades transmitidas por alimentos, así como sus síntomas, ciclos de vida y formas de prevención. También analiza factores relacionados con el huésped que influyen en la susceptibilidad a dichas infecciones.
Este documento describe varios métodos para realizar recuentos de microorganismos, incluyendo métodos de cultivo, físicos, químicos e inmunológicos. Algunos métodos de cultivo comunes incluyen contaje en placa estándar y reducción de colorantes. Los métodos físicos incluyen microcalorimetría y citometría de flujo. Los métodos químicos incluyen detección de ATP, radiometría y uso de sustratos fluorogénicos y cromogénicos. Los métodos inmunoló
El documento describe los métodos para realizar un recuento bacteriano. Explica que el recuento bacteriano cuantifica las células viables mediante la formación de colonias en placas de Petri. Las colonias se cuentan y expresan como Unidades Formadoras de Colonias (UFC) por mililitro o gramo de muestra. El documento también detalla dos métodos comunes para el recuento - extensión en placa y vertido en placa - y cómo calcular los resultados finales de UFC.
Este documento describe un estudio que busca identificar la presencia de la bacteria Escherichia coli en el agua de consumo de pozos en comarcas del municipio de Quezalguaque, Nicaragua. Se recolectaron muestras de agua de 6 pozos entre julio y octubre de 2014. Los resultados preliminares muestran que el 100% de los pozos contenían coliformes totales y fecales, excediendo los límites establecidos. La distancia entre las letrinas y los pozos y la falta de protección de éstos últimos podrían
Las bacterias coliformes, incluida la Escherichia coli, se encuentran comúnmente en los excrementos humanos y animales. La presencia de coliformes fecales en el agua indica una posible contaminación con heces, lo que representa un riesgo para la salud. Estos microorganismos se usan como indicadores de contaminación fecal debido a que son fáciles de detectar en el laboratorio y siempre están presentes en las heces.
El documento describe los diferentes métodos de esterilización y desinfección, incluyendo el calor, la filtración, las radiaciones y los agentes químicos. También explica los medios de cultivo, su preparación, tipos, pruebas bioquímicas e identificación de microorganismos.
Este documento describe los procedimientos para determinar la calidad bacteriológica del agua subterránea de consumo humano en Tacna, Perú mediante el recuento de heterótrofos, coliformes totales y termotolerantes. Se muestrearon 46 pozos de agua subterránea y se analizaron las muestras para detectar la presencia de estos microorganismos indicadores utilizando medios de cultivo como caldo Brilla y agar cuenta colonias con el fin de evaluar si el agua cumple con las normas nacionales.
1) El análisis microbiológico del agua determina los microorganismos presentes y es importante para evaluar la calidad del agua y detectar posibles patógenos.
2) Los factores que afectan la flora bacteriana del agua incluyen la acidez, materia orgánica, oxígeno disuelto, sales, temperatura, y turbidez.
3) Los análisis comunes incluyen determinar bacterias coliformes totales y fecales, enterococos fecales, y Clostridium perfringens, usando métodos
Este documento describe las características de los coliformes. Son bacterias GRAM negativas que fermentan la lactosa y se encuentran principalmente en el intestino de humanos y animales. Sirven como indicadores de contaminación fecal en el agua y los alimentos. Los niveles recomendados de coliformes fecales son menores a 200 colonias por 100 ml en agua para nadar y menos de 1 colonia por 100 ml en agua potable.
Determinación de coliformes totales y fecalesSonia Burbuja
El documento describe los pasos para determinar la presencia de coliformes totales y fecales en muestras de agua mediante la aplicación de los métodos establecidos en la norma oficial mexicana NMX-AA-42-1987. Se explica que los coliformes son bacterias que habitan en el intestino humano y otros animales, y que tienen baja capacidad de sobrevivir en el agua. El método implica la preparación de caldo lactosado y su inoculación con muestras de agua, incubación a 36°C para detectar coliformes
Centro de estudios tecnológicos del mar n1Sonia Burbuja
Este documento presenta los resultados de un estudio que determinó los niveles de coliformes totales y fecales en muestras de agua de varias fuentes utilizando el método del número más probable. Los resultados mostraron que el agua del invernadero tenía la contaminación más alta, mientras que el agua del mar tenía la menor contaminación. Además, se encontró que el agua del cañón de Doña Petra podría estar contaminada con coliformes fecales, lo que podría explicar las enfermedades gastrointestinales reportadas en la zona.
Este documento contiene resúmenes de 8 prácticas de microbiología general. La Práctica 5 describe cómo medir el diámetro de halos de inhibición y estimar concentraciones de antibióticos mediante bioensayos. La Práctica 6 analiza resultados de antibiogramas midiendo halos. Las Prácticas 7 y 8 explican cómo titular fagos y realizar pruebas bioquímicas para identificar microorganismos, respectivamente.
Este documento describe una práctica de laboratorio realizada por estudiantes para representar la curva de crecimiento bacteriano a través del aislamiento y cuantificación de colonias presentes en muestras de pollo en diferentes medios de cultivo. El procedimiento incluyó la preparación de medios, inoculación de las muestras, conteo y lectura de colonias en un periodo de 48 horas, y tinción de Gram para identificar la morfología bacteriana. Los resultados se presentaron en tablas mostrando las características morfológicas de las colon
Primero, se obtuvieron muestras de agua de diferentes puntos de la ciudad. Luego, se realizó una dilución bacteriana en 7 tubos de ensayo con 9 ml de agua esterilizada y 1 ml de muestra de agua en cada tubo. Después, se inocularon las muestras de cada tubo en 7 cajas Petri. Adicionalmente, se realizó otra dilución bacteriana en 7 tubos con caldo nutritivo. Finalmente, se observó el crecimiento bacteriano en las cajas Petri y los tubos después de la incub
Este documento describe métodos para medir el crecimiento bacteriano, incluyendo métodos directos e indirectos para determinar la masa celular y el número de células. Los métodos directos para medir la masa incluyen peso húmedo y seco, mientras que los métodos indirectos incluyen mediciones de componentes celulares o actividad metabólica. Los métodos directos para contar células usan cámaras de Petri o contadores de partículas, mientras que los métodos indirectos incluyen recuentos en placa o filtros.
Este documento describe un método para determinar bacterias coliformes, coliformes fecales y Escherichia coli en muestras de agua y alimentos. Explica que estos microorganismos son indicadores de contaminación fecal y describe las características y patogenicidad de las principales cepas de E. coli como ETEC, EPEC, EHEC y EIEC. El método implica incubar las muestras en caldos selectivos a diferentes temperaturas para identificar los diferentes grupos bacterianos.
Este documento describe un método para determinar la presencia de bacterias coliformes totales, coliformes fecales y Escherichia coli en muestras de agua o alimentos mediante la técnica de diluciones en tubo múltiple. Explica los objetivos, generalidades, medios de cultivo, materiales y procedimiento requeridos para identificar estos microorganismos indicadores de contaminación fecal y evaluar la calidad sanitaria de las muestras. También describe las características y efectos de las principales cepas patógenas de E
1) El documento describe diferentes virotipos de Escherichia coli como ETEC, EAEC, ECEP y ECEI que causan diarrea. 2) ETEC causa diarrea del viajero mediante la secreción de enterotoxinas termoestables. 3) EAEC se adhiere a células mediante fimbrias y puede producir toxinas como EAST y Pet. ECEP causa diarrea secretora mediante la alteración de microvellosidades, mientras que ECEI usa un sistema de secreción de tipo III para invadir células.
1) El documento describe diferentes virotipos de Escherichia coli como ETEC, EAEC, ECEP y ECEI que causan diarrea. 2) ETEC causa diarrea del viajero mediante la secreción de enterotoxinas termoestables. 3) EAEC se adhiere a células mediante fimbrias y puede producir toxinas como EAST y Pet. ECEP causa lesiones en microvellosidades mediante la adherencia y esfacelamiento, mientras que ECEI utiliza un sistema de secreción de tipo III para invadir células.
El documento resume las características de diferentes virotipos de Escherichia coli como causantes de diarrea, incluyendo Escherichia coli enterotoxigénica, Escherichia coli enteroagregativa, Escherichia coli enteropatógena e Escherichia coli enteroinvasora. Describe sus factores de virulencia, mecanismos de patogenicidad, síntomas, diagnóstico y tratamiento.
Escherichia coli es una bacteria Gram negativa que puede causar diversas enfermedades como diarrea. Existen cinco grupos principales de E. coli basados en sus características patogénicas: enteropatógena, enteroinvasiva, enterohemorrágica, enteroagregativa y enterotoxigénica. Cada grupo se caracteriza por su epidemiología, cuadro clínico y síntomas como diarrea y fiebre. El diagnóstico incluye pruebas de laboratorio como coprocultivos, bioquímica y té
Escherichia coli es una bacteria Gram negativa que puede causar diversas enfermedades como diarrea. Existen diferentes cepas de E. coli como la enteropatógena, enteroinvasiva, enterohemorrágica, enteroagregativa y enterotoxigénica que se distinguen por su epidemiología, cuadros clínicos y métodos de diagnóstico. La clasificación, características y factores de virulencia de estas cepas se describen en el documento.
Este documento trata sobre la intoxicación por E. coli en humanos. Escherichia coli (E. coli) es una bacteria común que vive en el intestino humano y de otros animales, pero ciertas cepas pueden causar enfermedades. Las vías de transmisión más comunes incluyen alimentos crudos o procesados con mal control de higiene. La infección por E. coli puede causar diarrea aguda y fiebre. Un diagnóstico y tratamiento oportunos, incluyendo una alimentación adecuada, pueden mejorar los
Caso clínico e. coli, v. cholerae: Toxinas y su mecanismo de acción Mark2396
El paciente es un varón de 30 años sin antecedentes médicos que presenta diarrea acuosa abundante, cólicos abdominales, náuseas y vómitos. Se encuentra pálido y deshidratado. Las principales bacterias causantes de este cuadro clínico son E. coli y Vibrio cholerae, las cuales producen enterotoxinas que inducen diarrea acuosa.
Descripción de los mecanismos de acción de las principales toxinas producidas por E. Coli y V. Cholerae.
Dudas, algo que no les quede claro, comenten, pregunten y profundizaremos sobre el tema.
La E. coli es una bacteria común que vive en el intestino de los humanos y otros animales. Algunas cepas de E. coli pueden causar enfermedades transmitidas por los alimentos al contaminar productos como la carne y las verduras crudas. Cientos de miles de personas se enferman cada año debido a la E. coli, y la contaminación puede ocurrir a lo largo de toda la cadena alimentaria desde la granja hasta el plato del consumidor si no se implementan buenas prácticas de higiene.
El documento describe la flora normal del cuerpo humano, incluyendo su definición, clasificación e importancia médica. Explica los sitios donde se encuentra la flora normal y los tipos de bacterias que colonizan la boca, intestino, vagina, piel y otros sitios.
Este documento describe el caso de una niña de 6 años que presentó diarrea, espasmos intestinales y fiebre después de comer hamburguesa mal cocinada en un restaurante. El coprocultivo reveló la presencia de Escherichia coli, posiblemente del serotipo enteroinvasiva (EIEC), que causa síndrome diarreico invasivo.
Este documento trata sobre las principales causas de mortalidad en niños menores de 5 años, incluyendo la diarrea acuosa, la diarrea con sangre y la fiebre entérica. Luego describe las manifestaciones clínicas de las infecciones entéricas como la diarrea aguda y la deshidratación, y procede a explicar las bacterias gram negativas causantes de estas infecciones, particularmente las enterobacterias como Shigella, Salmonella y las diferentes categorías de E. coli diarreogénicos. Finalmente, analiza los mecan
Este documento describe diferentes bacterias causantes de diarrea aguda, incluyendo E. coli, Campylobacter, Clostridium y C. difficile. Describe los síntomas, mecanismos de patogenicidad, pruebas de diagnóstico y tratamientos para cada bacteria. Las bacterias más comunes son diversas cepas de E. coli, que pueden causar diarrea por mecanismos como la producción de enterotoxinas o invasión de células intestinales. El diagnóstico incluye análisis de laboratorio de muestras fecales
1) Escherichia coli es una bacteria Gram negativa que forma parte de la flora intestinal normal y establece una relación simbiótica con el huésped. 2) E. coli puede causar diversas enfermedades entéricas como diarrea del viajero, colitis hemorrágica, disentería y diarrea crónica en niños. 3) El diagnóstico bacteriológico de E. coli se realiza mediante técnicas de frotis, tinción de Gram y siembra en medios de cultivo como agar sangre y EMB.
1) Las enterobacterias son bacilos gramnegativos aerobios o facultativos que se encuentran en plantas, animales y el hombre. Incluyen géneros como Escherichia, Klebsiella y Salmonella.
2) Poseen antígenos como O, K y H que permiten su identificación. Sus principales factores de virulencia incluyen endotoxinas, exotoxinas y fimbrias de adherencia.
3) Dentro del género Escherichia se encuentran serogrupos patogénicos como EPEC,
E. coli es una bacteria gramnegativa que habita normalmente en el intestino humano. Sin embargo, algunas cepas como E. coli O157:H7 son patógenas y pueden causar enfermedades como diarrea con sangre. Se transmite principalmente a través de la ingesta de alimentos o agua contaminados. No existe un tratamiento antibiótico efectivo, pero la mayoría de las infecciones se resuelven espontáneamente con hidratación. La prevención requiere medidas de higiene como lavarse las manos y cocinar bien los alimentos.
Este documento describe las diferentes cepas de Escherichia coli (E. coli) y sus asociaciones con varias enfermedades. E. coli es parte de la microbiota intestinal normal pero ciertas cepas patógenas pueden causar infecciones como diarrea, infecciones del tracto urinario, septicemia y meningitis. Las cepas se clasifican y definen por sus mecanismos de patogenicidad y virulencia, como la producción de toxinas o la capacidad de adherirse e invadir tejidos. Las manifestaciones clínicas dependen de la cepa
Similar a Tecnic basicas colif-tot-fecales-ecoli-nmp-6529 (20)
1. Camacho, A., M.Giles, A.Ortegón, M.Palao, B.Serrano y O.Velázquez. 2009. Técnicas para el
Análisis Microbiológico de Alimentos. 2ª ed. Facultad de Química, UNAM. México.
Método para la determinación de bacterias coliformes, coliformes
fecales y Escherichia coli por la técnica de diluciones en tubo
múltiple (Número más Probable o NMP)
OBJETIVOS
• Diferenciar los organismos coliformes totales de los microorganismos
coliformes fecales.
• Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua o alimentos mediante la
búsqueda de microorganismos coliformes totales, coliformes fecales y
Escherichia coli.
• Organizar e interpretar los resultados.
GENERALIDADES
Debido a que un gran número de enfermedades son transmitidas por vía fecal-oral
utilizando como vehículo los alimentos y el agua, es necesario contar con
microorganismos que funcione como indicador de contaminación fecal. Estos
deben de ser constantes, abundantes y exclusivos de la materia fecal, deben tener
una sobrevivencia similar a la de los patógenos intestinales y debe de ser capaces
de desarrollarse extraintestinalmente.
El grupo coliforme es constante, abundante y casi exclusivo de la materia fecal, sin
embargo, las características de sobrevivencia y la capacidad para multiplicarse
fuera del intestino también se observan en aguas potables, por lo que el grupo
coliforme se utiliza como indicador de contaminación fecal en agua; conforme
mayor sea el número de coliformes en agua, mayor será la probabilidad de estar
frente a una contaminación reciente.
Cuando los coliformes llegan a los alimentos, no sólo sobreviven, sino que se
multiplican, por lo que en los alimentos el grupo coliforme adquiere un significado
distinto al que recibe en el agua. En productos alimenticios que han recibido un
tratamiento térmico (pasteurización, horneado, cocción, etc.), se utilizan como
indicadores de malas prácticas sanitarias.
Los microorganismos coliformes constituyen un grupo heterogéneo con hábitat
primordialmente intestinal para la mayoría de las especies que involucra.
El grupo de bacterias coliformes totales comprende todos los bacilos Gram-
negativos aerobios o anaerobios facultativos, no esporulados, que fermentan la
lactosa con producción de gas en un lapso máximo de 48 h. a 35° ± 1ºC. Este
C
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grupo esta conformado por 4 géneros principalmente: Enterobacter, Escherichia,
Citrobacter y Klebsiella.
El grupo de coliformes fecales, está constituido por bacterias Gram-negativas
capaces de fermentar la lactosa con producción de gas a las 48 h. de incubación a
44.5 ± 0.1° Este grupo no incluye una especie determinada, sin embargo la más
C.
prominente es Escherichia coli.
La demostración y el recuento de organismos coliformes, puede realizarse
mediante el empleo de medios de cultivo líquidos y sólidos con características
selectivas y diferenciales.
Escherichia coli es un bacilo corto Gram negativo que se encuentra clasificado
dentro de la familia Enterobacteriaceae (bacterias entéricas), existe como
comensal en el intestino delgado de humanos y animales. Sin embargo, hay
algunas cepas de E. coli patógenas que provocan enfermedades diarreicas. Estas
E. coli se clasifican con base en las características que presentan sus factores de
virulencia únicos, cada grupo provoca la enfermedad por un mecanismo diferente.
Las propiedades de adherencia a las células epiteliales de los intestinos grueso y
delgado son codificadas por genes situados en plásmidos. De manera similar las
toxinas son mediadas por plásmidos o fagos.
Este grupo de bacterias se encuentra constituido por las siguientes cepas: E. coli
enterotoxigénica (ETEC), E. coli enteropatógena (EPEC), E. coli
enterohemorrágica (EHEC), E. coli enteroinvasiva (EIEC), E. coli enteroagregativa
(EAEC) E. coli enteroadherente difusa (DAEC). Existen otras cepas que no han
sido perfectamente caracterizadas; de las cepas anteriores, las 4 primeras están
implicadas en intoxicaciones causadas por el consumo de agua y alimentos
contaminados.
Escherichia coli enterotoxigénica ETEC es reconocida como el agente causal
de la diarrea del viajero, la cual se caracteriza por diarreas acuosas con o sin
fiebre. Este tipo de infecciones es muy frecuente en países subdesarrollados y
afecta principalmente a los niños.
Patogénesis: El microorganismo es capaz de producir dos tipos de toxina. Una
toxina termolábil de aproximadamente 89 kDa cuya secuencia, antigenicidad y
función es similar a la toxina del cólera, la otra toxina que produce es termoestable
y es de bajo peso molecular (4 kDa) y es capaz de resistir temperaturas de
ebullición hasta por 30 minutos.
La infección puede ser adquirida por el consumo de alimentos como vegetales
frescos (lechuga en ensaladas) y agua. La dosis infectiva para adultos ha sido
calculada en aproximadamente 108 bacterias, por otra parte en jóvenes y ancianos
la dosis infectiva puede ser más baja.
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Escherichia coli enteropatógena ECEP. Es causa importante de diarrea en los
lactantes particularmente en los países en vías de desarrollo. La ECEP se adhiere
a las células de la mucosa del intestino delgado. Sus factores de virulencia
favorecen la adhesión y en ocasiones penetra a las células mucosas. La infección
por ECEP provoca diarrea acuosa generalmente autolimitada aunque en
ocasiones puede ser crónica.
Patogénesis. El microorganismo produce dos proteínas: la intimina que es
codificada por el gen eae y un factor de adherencia que es codificado por un
plásmido, ambas proteínas permite su unión a los enterocitos y la destrucción de
las microvellosidades intestinales.
Las epidemias causadas por este microorganismo se deben al consumo de agua
contaminada y productos cárnicos. En estudios con voluntarios se encontró que la
dosis infectiva es de 106 microorganismos. La diarrea por ECEP se ha vinculado
con múltiples serotipos específicos de E. coli los cuales pueden ser identificados
mediante la tipificación del antígeno O (somático) y en ocasiones del antígeno H
(flagelar).
Escherichia coli enteroinvasiva EIEC. Este microorganismo se encuentra
estrechamente relacionado con el género Shigella, produce una enfermedad
similar a la shigelosis. La enfermedad se presenta comúnmente en niños de
países subdesarrollados y en personas que viajan a dichos lugares. La EIEC
provoca la enfermedad (diarrea disentérica invasiva) al invadir las células
epiteliales de la mucosa intestinal.
A pesar de que la dosis infectiva para Shigella es de 10 a 100 microorganismos,
en el caso de EIEC la dosis infectiva es de aproximadamente 106 bacterias.
Algunas características importantes de este microorganismo que permiten
diferenciarlo de la cepa típica de E. coli son: No utiliza la lactosa como fuente de
carbono, no descarboxilan la lisina, es inmóvil y anaerogenicos.
La patogenicidad de este organismo se debe a su capacidad para invadir y
destruir el epitelio del colon debido a que es capaz de evadir la lisis en los
fagolisosomas.
Escherichia coli enterohemorrágica EHEC produce verotoxina, denominada así
por su efecto citotóxico sobre las células Vero, una línea de células renales de
monoverde africano. Existen al menos dos variantes antigénicas de la toxina. La
ECEH se ha asociado con colitis hemorrágica, una variedad grave de diarrea; y
con el síndrome urémico hemolítico, enfermedad capaz de producir insuficiencia
renal aguda, anemia hemolítica microangiopática y trombocitopenia. La verotoxina
tiene muchas propiedades similares a la toxina shiga producida por algunas cepas
de Shigella dysenteriae tippo 1; De los serotipos de E. coli que producen la
verotoxina el más común y el único que puede identificarse en muestras clínicas
es el O157:H7. La E. coli O157:H7 no emplea sorbitol y es negativa a la prueba
de MUG.
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La causa más común de esta infección es el consumo de carne sin cocinar o poco
cocinada, particularmente carne picada procesada en grandes cantidades. Los
casos de colitis hemorrágica y sus complicaciones asociadas pueden prevenirse
mediante la cocción completa de la carne
En la siguiente tabla se resumen algunas propiedades y síntomas causados por
las cepas de Escherichia coli antes descritas.
Propiedades y síntomas causados por algunas cepas de Escherichia coli
patógenas
ETEC EPEC EHEC EIEC
Toxina Lábil/estable - Shiga o vero -
Invasiva
- - - +
Intiminas
- + + -
Enterohemolisina - - + -
Aspecto de las Aguadas Aguadas Aguadas muy Mucoides y
heces sanguinolentas sanguinolentas sanguinolentas
Presencia de
leucocitos en - - - +
heces
Fiebre baja + - +
Intestino Colon y parte
involucrado Delgado Delgado Colon baja del
delgado
Dosis infectiva Alta Alta baja Alta
Serotipos O26, O111 y O157:H7, O26,
varios Varios
otros O111 y otros
FUNDAMENTO
La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del
Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo
microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos a
35° ± 1°C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales
C
biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase
confirmativa.
En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo lauril sulfato de
sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos dañados que se
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encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de utilizar a la lactosa
como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se emplea como medio de
cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es selectivo y solo permite el
desarrollo de aquellos microorganismos capaces de tolerar tanto las sales biliares
como el verde brillante.
La determinación del número más probable de microorganismos coliformes
fecales se realiza a partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se
fundamenta en la capacidad de las bacterias para fermentar la lactosa y producir
gas cuando son incubados a una temperatura de 44.5 ± 0.1°C por un periodo de
24 a 48 h.
La búsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de los tubos positivos de caldo
EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y diferenciales
(Agar Mac Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente realizando las
pruebas bioquímicas básicas (IMViC) a las colonias típicas.
MEDIOS DE CULTIVO Y DILUYENTES
1. Para análisis de agua
Para la preparación del medio de cultivo utilizado en la prueba presuntiva de
muestras de agua o hielo, consultar el cuadro 1.
• 5 ó 10 tubos de 22 x 175 mm con 10.0 mL de caldo lauril sulfato de sodio o
caldo lactosado concentración doble o triple con campana de Durhama.
• 5 ó 10 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo bilis verde brillante con
campana de Durhamb.
• 5 ó 10 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo EC y campana de Durham
o caldo EC MUG con campana de Durham b.
• 2 cajas Petri con agar para métodos estándar d
• 2 cajas Petri con agar Eosina azul de metileno c
• 6 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo RM-VPe
• 3 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo triptona o agar SIM (opcional)e
• 3 tubos de 13 x 100 con 3.5 mL c/u de caldo citrato de Koser o citrato de
Simmons (opcional)e
2. Para análisis de alimentos
• 1 matraz de 250 mL con 90.0 mL de agua peptonada 0.1 % o solución
amortiguadora de fosfatosa
• 2 tubos de 16 x 150 mm con 9.0 mL de agua peptonada 0.1 % o solución
amortiguadora de fosfatosa
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• 15 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo lauril sulfato de sodio
concentración sencilla o caldo lactosado concentración sencilla con campana
de Durhama
• 15 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo bilis verde brillante con
campana de Durhamb.
• 15 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo EC o EC-MUG con campana
de Durhamb.
• 2 cajas Petri con agar para métodos estándard
• 2 cajas Petri con agar Mac Conkeyc
• 6 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo RM-VPe
• 3 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo triptona o agar SIMe
• 3 tubos de 13 x 100 con 3.5 mL c/u de citrato de Simmons, o caldo citrato de
Kosere
SOLUCIONES, REACTIVOS E INDICADORES
• Frascos gotero con reactivo de Erlich o Kovace
• Frascos gotero con indicador rojo de metiloe
• Frascos gotero con reactivo alfa naftol VP1e
• Frascos gotero con solución de hidróxido de potasio al 40 % VP2e
• COLORANTES PARA TINCIÓN DE GRAMd
MATERIAL Y EQUIPO
• Mechero, a,b,c,d,e.
• Propipetaa.
• Gradillaa,b,c,e.
• Balanza granatariaa.
• Stomachera
• Bolsas para stomacher .
• Lámpara de luz ultravioleta de longitud amplia 4 watts. (366 nm)c
• Lentes de seguridadc
• Pipetas de 10.0 mL estériles con tapón de algodóna.
• Pipetas de 1.0 mL estériles con tapón de algodóna.
• Pipetas Pasteur estériles a, b, c, d
• Asa bacteriológicab,c,d,e
• Portaobjetosd
• Microscopio ópticod
• Termómetro calibradob
• Baño de agua a 44.5° ± 0,1° b C.
a
• Incubadora a 35° ± 2,0ºC .
• Horno para esterilizar material de vidrio a 160-180° a
C
• Autoclavea
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NOTAS
a
Material necesario al inicio de la práctica.
b
Material necesario a las 48 h. de iniciada la práctica.
c
Material necesario a las 96 h. de iniciada la práctica.
d
Material necesario a las 120 h. de iniciada la práctica.
e
Material necesario a las 144 h. de iniciada la práctica.
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DETERMINACIÓN DEL NMP DE COLIFORMES EN AGUA Y HIELO POTABLES
37°C
24 - 48 h
Siembra con asa bacteriológica de los tubos
Tubos con 10.0 mL de caldo lauril sulfato
CLSS + 20.0 mL de muestra positivos (producción de gas) en caldo lactosa
de sodio (CLSS) triple concentración (3X)
verde brillante bilis 2% y caldo EC
2 a 3 asadas/tubo 2 a 3 asadas/tubo
37°C 44.5°C
24 – 48 h
24 – 48 h
Lectura de tubos positivos en Tubos con 10.0 mL de Lectura de tubos positivos en
Tubos con 10.0 mL de
tablas. NMP de coliformes Caldo EC o EC-MUG tablas. NMP de coliformes
Caldo Lactosa verde
totales /100 ml de muestra fecales /100 ml de muestra.
brillante bilis 2%
Siembra de tubos positivos en
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placas de Agar EMB para la
búsqueda de Escherichia
coli
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DETERMINACIÓN DEL NMP DE COLIFORMES EN MUESTRAS SÓLIDAS O ALIMENTOS
Pesar 10.0 g de muestra Homogenizar la muestra Realizar 2 diluciones decimales más en
en condiciones de asepsia con 90.0 mL de solución diluyente tubos con 9.0 mL de solución diluyente
1.0 mL 1.0 mL
Sembrar por triplicado
cada dilución en tubos
de caldo lauril sulfato de
sodio (1X)
10-1 10-2 10-3
35°C
24 - 48 h
10-1 10-2 10-3 10-1 10-2 10-3
Siembra con asa bacteriológica de los tubos
Tubos con 10.0 mL de CLSS concentración positivos (producción de gas) en caldo lactosa
sencilla (1X) + 1.0 mL de muestra verde brillante bilis 2% y caldo EC
35°C 44.5°C
24 - 48 h 24 - 48 h
10-1 10-2 10-1 10-2 10-1 10-2 10-1 10-2
Tubos con 10.0 mL de Lectura de tubos positivos en Tubos con 10.0 mL de Lectura de tubos positivos en
Caldo Lactosa verde tablas. NMP de coliformes Caldo EC o EC-MUG tablas. NMP de coliformes
brillante bilis 2% totales /g de muestra fecales /g de muestra.
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Siembra de tubos positivos en
agar Mac Conkey para
búsqueda de Escherichia coli
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PROCEDIMIENTO
1. Agua y hielo
1.1 Prueba presuntiva
• Agitar la muestra y transferir volúmenes de acuerdo con el cuadro 1, a cada uno de
los tubos con caldo lauril sulfato de sodio que se hayan seleccionado. Agitar los
tubos para homogeneizar la muestra.
CUADRO 1. Preparación de inóculo con caldo lauril sulfato de sodio
INOCULO CANTIDAD DE VOLUMEN DE CALDO LAURIL CONCENTRACIÓN
(mL) MEDIO POR MEDIO MAS TRIPTOSA
TUBO (mL) INOCULO REQUERIDO g/L
(mL)
1 10 o más 11 o más 35,6 1X
10 10 20 71,2 2X
10 20 30 53,4 1.5 X
20 10 30 106,8 3X
100 50 150 106,8 3X
100 35 135 137,1 3.5 X
100 20 120 213,6 4X
• Incubar los tubos a 35 ± 0,5° Examinar los tubos a las 24 h. y observar si hay
C.
formación de gas (desplazamiento del medio en la campana de Durham); si no se
observa producción de gas, incubar 24 h. más.
1.2 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes totales
• Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba
presuntiva, a otro tubo de 16 x150 mm que contiene caldo de bilis verde brillante
(brila), con campana de Durham.
• Agitar los tubos para su homogeneización.
• Incubar a 35 ± 2°C durante 24 a 48 h..
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• Registrar como positivos aquellos tubos en donde se observe turbidez (crecimiento)
y producción de gas después de un período de incubación de 24 a 48 h..
• Consultar la tabla 1 ó 2 de NMP para conocer el número más probable de
organismos coliformes totales/100 mL.
1.3 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes fecales.
• Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba
presuntiva (caldo lauril sulfato de sodio) a un tubo de 16 x 150 mm, con caldo EC
conteniendo campana de Durham.
• Agitar los tubos para su homogeneización.
• Incubar a 44.5 ± 0.1°C en incubadora o un baño de agua durante 24 a 48 h.
• Registrar como positivos todos los tubos en donde se observe crecimiento y
producción de gas después de un período de incubación de 24 a 48 h.
• Consultar la tabla 1 ó 2 de NMP para conocer el número más probable de
organismos coliformes fecales/ 100 mL.
Control de calidad
1. Inocular a dos tubos con caldo EC una cepa de E. coli como control positivo y una de
Enterobacter aerogenes como control negativo e incubar con las muestras.
1.4 Prueba confirmativa para Escherichia coli
• Tomar una asada de cada uno de los tubos positivos en caldo EC y sembrar por
estría cruzada en agar eosina azul de metileno para su aislamiento.
• Incubar las placas invertidas a 35° por 18-24 h.
C
• Seleccionar dos colonias de cada placa con la siguiente morfología colonial:
Colonias con centro negro, planas con o sin brillo metálico. Si no hay colonias con
morfología típica, probar una o más colonias lo más parecido E. coli de cada placa y
sembrarlas en agar cuenta estándar para realizar las pruebas de morfología
microscópica y pruebas bioquímicas.
• Incubar las placas a 35° por 18-24 h.
C
• Hacer un frotis y teñirlo por Gram. Observar al microscopio la presencia de bacilos
cortos o cocobacilos Gram-negativos.
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1.4.1 Identificación bioquímica de Escherichia coli mediante pruebas (IMViC).
a. Producción de indol (I)
• Inocular un tubo en caldo triptona e incubarlo a 35° por 24 ± 2 h.
C
• Adicionar entre 0.2 y 0.3 mL de reactivo de Kovacs.
• La presencia de una coloración roja en la superficie del tubo se considera una
prueba positiva.
b. Producción de ácidos mixtos (Rojo de metilo, RM)
• Inocular un tubo adicional con caldo RM-VP e incubar a 35° por 48 ± 2 h.
C
• Adicionar 5 gotas de solución de rojo de metilo.
• Se considera una prueba positiva cuando se desarrolla un color rojo. Un color
amarillo es una prueba negativa.
c. Producción de metabolitos neutros (Voges-Proskauer VP)
• Inocular un tubo con caldo RM-VP e incubar a 35° por 48 ± 2 h.
C
• Adicionar 0.6 mL de solución VP1 y 0.2 mL de solución VP2 y agitar.
• Dejar reposar durante 10 minutos sin agitar el tubo; se considera una prueba
positiva cuando se desarrolla un color rosa en la superficie.
d. Utilización del citrato (C)
• Inocular un tubo con caldo citrato de Koser o Simmons un inóculo ligero para evitar
turbiedad en el tubo (opcional: puede utilizarse citrato de Simmons)
• Incubar a 35° por 96 h.
C
• El desarrollo del cultivo que se observa con la turbiedad del medio, se considera una
prueba positiva.
NOTAS
Para determinar la producción de indol, en lugar del caldo triptona puede utilizarse al
agar SIM. Este medio se inocula por picadura con el asa bacterioogíca de forma recta.
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Se incuba a 35° por 24± 2 h. Finalizado el periodo de incubación se adiciona el
C
reactivo de Kovac o Erlich cuyo fundamento es el mismo.
Para determinar la utilización del citrato de sodio como única fuente de carbono,
también se puede utilizar el agar citrato de Simmons en forma inclinada, el cual se
inocula en la superficie (pico de flauta). Se incuba a 35° de 24 a 48 h. La presencia
C
de una coloración azul debida al vire del indicador que contiene el medio, indica prueba
positiva
1.4.2 Prueba confirmativa opcional para Escherichia coli utilizando caldo EC-MUG
(4 metil-umbeliferil-β-D-glucuronido)
β
FUNDAMENTO
Alrededor del 94% de las cepas de Escherichia coli incluso las cepas no productoras de
gas producen la enzima beta-glucuronidasa (GUD), la cual rompe el sustrato específico
4-metilumbeliferil-beta-D-glucurónido (MUG) en 4-metilumbeliferona (MU); el cual al ser
expuesto a una fuente de luz ultravioleta (UV) de onda larga (365 nm) produce una
fluorescencia azul fácil de observar. Cuando el MUG es incorporado al caldo EC se
puede identificar Escherichia coli.
a. Prueba confirmativa
• A partir de la fase presuntiva (inciso 1.1.) y de cada tubo que muestre formación de
gas , tomar una asada y sembrar en un número igual de tubos con medio de
confirmación EC-MUG.
• Incubar a 44,5 ± 0,2° en baño de agua durante 24 h., observar si hay formación de
C
gas; si no se observa la formación de gas continuar la incubación 24 h. más.
• Irradiar los tubos con una fuente de luz UV, observar fluorescencia y hacer la
lectura.
• Utilizar estos resultados para calcular el número más probable (NMP) de E. coli.
Control de calidad
Inocular en dos tubos con caldo EC-MUG una cepa de E. coli como control positivo y K.
pneumoniae como control negativo.
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2. Alimentos
2.1 Preparación de la muestra.
• Moler 10.0 gramos de la muestra en un picador 2 veces o con cubiertos estériles y
mezclar.
• Adicionar el alimento a 90.0 mL de agua peptonada al 0.1 %, licuar y dejar en
reposo de 2-3 minutos.
• Realizar diluciones hasta 10- 3 g/mL con agua peptonada al 0.1 %. En caso de
trabajar con muestras congeladas, descongelarlas previamente entre 2° y 5 ° C.
2.1.1 Prueba presuntiva.
• Añadir 1.0 mL de la dilución 10- 1 g/mL a cada uno de 3 tubos con 10.0 mL de caldo
lauril sulfato de sodio.
• Añadir 1.0 mL de las diluciones 10- 2 g/mL y 10- 3 g/mL a dos series de 3 tubos cada
una con caldo lauril sulfato de sodio.
• Incubar a 35-37° durante 24-48 h.
C
• Los tubos después de la incubación, se registrarán como positivos si presentan
crecimiento y producción de gas.
2.2 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes totales
• Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba
presuntiva a otro tubo de 16 x 150 mm que contiene caldo de bilis verde brillante
(brila), con campana de Durham.
• Agitar los tubos para su homogeneización.
• Incubar a 35 ± 2°C durante 24 a 48 h.
• Registrar como positivos aquellos tubos en donde se observe crecimiento y
producción de gas, después de un período de incubación de 24 a 48 h.
• Consultar las tablas de NMP que se encuentran en el anexo para conocer el
número más probable de organismos coliformes totales por mL.
2.3 Prueba confirmativa de microorganismos coliformes fecales.
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15. Camacho, A., M.Giles, A.Ortegón, M.Palao, B.Serrano y O.Velázquez. 2009. Técnicas para el Análisis
Microbiológico de Alimentos. 2ª ed. Facultad de Química, UNAM. México.
• Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba
presuntiva (caldo lauril sulfato de sodio) a un tubo de 16 x 150 mm, con caldo EC
conteniendo campana de Durham.
• Agitar los tubos para su homogeneización.
• Incubar a 44.5 ± 0.1°C en incubadora o un baño de agua durante 24 a 48 h.
• Registrar como positivos todos los tubos en donde se observe turbidez y producción
de gas después de un período de incubación de 24 a 48 h.
• Consultar la tabla de NMP (ANEXO) para conocer el número más probable de
organismos coliformes fecales por mL.
Control de calidad
• Inocular a dos tubos con caldo EC una cepa de E. coli como control positivo y
una de Enterobacter aerogenes como control negativo e incubar con las
muestras.
2.4 Prueba confirmatoria de Escherichia coli.
• Confirmar la presencia de Escherichia coli en por lo menos el 10% de las pruebas
con resultados positivos de coliformes fecales; sembrar en placas de agar
McConkey a partir de los tubos que demostraron la presencia de gas en la prueba
confirmativa.
• Incubar las placas a 35 ± 0.5° durante 24 ± 2 h., observar las colonias típicas
C
fermentadoras de color rojo rodeadas de un halo opaco de precipitación de sales
biliares.
• Hacer tinción de Gram para observación de la morfología de las bacterias.
• Seleccionar 1 o más colonias aisladas para realizar pruebas IMViC.
Todos los cultivos que:
• Fermenten la lactosa con producción de gas dentro de las 48 h. a 35°C.
• Sean bacilos o cocobacilos Gram-negativos no esporulados
• Se obtenga las siguientes combinaciones para el IMVIC: Biotipo 1(++--) o Biotipo 2 (-
+--) son consideradas como Escherichia coli.
• Calcular el NMP de E. coli basándose en la proporción de los tubos positivos de
caldo EC.
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Microbiológico de Alimentos. 2ª ed. Facultad de Química, UNAM. México.
CÁLCULOS Y EXPRESIÓN DE RESULTADOS
Calcular la densidad microbiana con base en el número más probable conforme al
procedimiento señalado en la tabla 1, (que se muestra a continuación y es utilizado para
el análisis de agua), para estimar la población de bacterias coliformes totales, bacterias
coliformes fecales y Escherichia coli de acuerdo con las diluciones empleadas.
Expresar en NMP/g o mL para alimentos y NMP/100 mL para agua. En el caso de usar
volúmenes de 20 mL de muestras de agua en 5 tubos o 10 mL de muestras de agua en
10 tubos, utilizar las siguientes tablas:
TABLA 1. Índice del NMP con 95% de límite de confianza para varias
combinaciones de resultados positivos y negativos cuando se usan 5 tubos con
20 mL de muestra de agua o hielo.
No. de Tubos 95% de Límite de Confianza (aproximado)
positivos NMP/100 mL Inferior Superior
0 <1,1 0 3,0
1 1,1 0,05 6,3
2 2,6 0,3 9,6
3 4,6 0,8 14,7
4 8,0 1,7 26,4
5 >8,0 4,0 Infinito
TABLA 2. Índice del NMP con 95% de límite de confianza para varias
combinaciones de resultados positivos y negativos cuando se usan 10 tubos con
10 mL de muestra de agua o hielo.
No. de Tubos 95% de Límite de Confianza (aproximado)
Positivos NMP/100 mL Inferior Superior
0 <1,1 0,0 3,0
1 1,1 0,03 5,9
2 2,2 0,26 8,1
3 3,6 0,69 10,6
4 5,1 1,3 13,4
5 6,9 2,1 16,8
6 9,2 3,1 21,1
7 12,0 4,3 27,1
8 16,1 5,9 36,8
9 23,0 8,1 59,5
10 >23,0 13,5 Infinito
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Análisis Microbiológico de Alimentos. 2ª ed. Facultad de Química, UNAM. México.
BIBLIOGRAFÍA
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troceados y curados. Productos cárnicos curados y madurados. Disposiciones
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CCAYAC-M-004 (2006) “Estimación de la densidad microbiana por la técnica
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