Universidad de Carabobo - Facultad de Ciencias de la Salud sede Carabobo - Bioanálisis. Parasitología. Módulo V, Tema 15: Toxoplasma gondii. Aspectos diagnósticos de la toxoplasmosis.

1. FACULTAD DE CIENCIAS
DE LA SALUD
ESCUELA DE
BIOANÁLISIS
Universidad de Carabobo
Facultad de Ciencias de la Salud
Escuela de Bioanálisis
Asignatura Parasitología

2. MSc. Diana Graterol
Toxoplasma gondii.
Aspectos diagnósticos de la
toxoplasmosis
 Toxoplasmosis.
 Taxonomía, Morfología y Ciclo
Evolutivo.
 Mecanismos Patogénicos, Patología
y Sintomatología.
 Diagnóstico clínico y de laboratorio.
 Epidemiología, Tratamiento y
Profilaxis.

3. 3
Toxoplasmosis
La toxoplasmosis es la
parasitosis más
difundida a nivel
mundial
 Parásito intracelular obligado Eurixeno
 Infección ≠ Enfermedad
 Formas:
 Zoonosis Antropozoonosis
Hospedador
definitivo
Hospedador
intermediario o
accidental
Toxoplasma
gondii
 Aguda o Crónica
 Sintomática o Asintomática
 Adquirida o Congénita

4. Historia
4
Charles Nicolle y Louis Manceaux 1908 describen parásito
parecido a Leishmania en un roedor el Ctenodactylus gundi
1909 dan el nombre de Toxoplasma gondii por toxo (del griego
toxon 'arco') por su forma arqueada​ y gondii por el ratón
Josef Janku 1923, primer caso toxoplasmosis en humanos
(congénita)
Pinkerton y Weinman 1940 primer caso en adultos
Sabin y Feldman 1948 desarrollan los test diagnósticos

5. Importancia Epidemiológica
5
Infección cosmopolita, muy difundida
25-50% de la población mundial (contacto con el parásito)
Ac. Séricos
Ataca fetos y niños pequeños
Parasitosis oportunista Pacientes inmunosuprimidos
Causa mortalidad neonatal de animales de cría
Significación económica

6. Clasificación Taxonómica
6
Toxoplasma gondii
Reino: Protista
Sub-reino: Protozoa
Phylum: Miozoa
Infraphylum: Apicomplexa
Clase: Conoidasida
Orden: Eucoccidiorida
Familia: Sarcocystidae
Género: Toxoplasma
gondii
(presencia complejo apical)
(esquizogonia, gametogonia, esporogonia)
(esquizogonia, endodiogenia)

7. 7
Reproducción Asexual
Fisión Múltiple o
Brotamiento Interno
Esquizogonia
Endodiogenia

8. 8
Morfología
Taquizoíto
Seudoquiste
Bradizoíto
Quiste tisular
Gametos
Ooquiste

9. 9
Morfología Hosp. Intermediario
TROFOZOÍTOS
QUISTES
Taquizoíto Seudoquiste Quiste tisular
Bradizoíto
Trofozoítos (Esporozoíto)
velocidad de multiplicación y ubicación
Endodiogenia

10. 10
Morfología Taquizoíto
 Forma de arco o
semiluna
 4-8 µm de largo por
2-4 µm de ancho
 Núcleo redondo con
cromatina densa
 Presenta una
estructura llamada
conoide
 Multiplicación
rápida
“Penetración activa de células nucleadas”

11. 11
Morfología Seudoquiste
 Forma con gran #
de taquizoítos en su
interior
 Núcleo ubicado
hacia la periferia
 Solo está cubierto
por la membrana de
la célula parasitada
 Predominan en fase
aguda
Tejido subcutáneo
Células THP-1

12. 12
Morfología Bradizoíto
 Semejante al
taquizoíto
 Multiplicación lenta
 Elemento
multiplicador de los
quistes
Bradizoíto
Músculo Cardiaco

13. 13
Morfología Quiste
 Verdadera forma de
resistencia del
parásito
 5-100 µm de
diámetro
 Gran multiplicación
(millares de
parásitos x quiste)
 Pared gruesa e
impermeable
constituidas por
gránulos
 Predominan en fase
crónica
Quiste en Cerebro
Quiste Tisular

14. Morfología Hosp. Definitivo
14
ESQUIZONTE
MEROZOÍTO
GAMETOCITO
OOQUISTE
Gametocito Ooquiste
Esquizonte Merozoíto
Esquizogonia Esporogonia
Gametogonia

15. Morfología
15
Esquizonte: Célula
con gran número de
Merozoítos en su
interior
Merozoíto: Similar
al bradizoíto y
taquizoíto, con
capacidad de invadir
células
Ooquiste: Resultan
de la reproducción
sexual
Gametocito: Se
desarrollan a partir
de merozoítos.
Microgametocito
Macrogametocito
Ooquiste no esporulado
Ooquiste esporulado

16. Morfología
16
Taquizoíto en Pulmón Quiste en Músculo Quiste en Cerebro
Esquizonte con
Merozoítos
Microgametocito Ooquiste no
esporulado
Ooquiste
esporulado

17. Ciclo Evolutivo
17
Reproducción
Sexual
(gametogonia, esporogonia)
Ooquiste
Reproducción
Asexual
(esquizogonia)

18. Fase Enteroepitelial
18
Esquizogonia
Gametogonia
Esporogonia
Fase Enteroepitelial
-Intestinal
-Hospedador definitivo
-Infección vía oral
-Reproducción asexual
ESQUIZOGONIA
esquizontes y
merozoítos
-Reproducción sexual
ESPOROGONIA
ooquistes inmad.
-Reproducción asexual
ENDODIOGENIA
 seudoquistes
 quistes tisulares

19. Fase Exógena
19
Fase Exógena
-Medio ambiente (suelo)
-Esporulación
 ooquistes maduros
Esporogonia
2 esporoquistes con 4
esporozoítos cada uno

20. Fase Extraintestinal
20
“Ingestión de ooquistes maduros, seudoquistes y
quistes tisulares”
Endodiogenia
Fase Extraintestinal
-Órganos y tejidos
-Hospedador intermediario
-Ingestión de cualquier
forma parasitaria de Tg
-Reproducción asexual
ENDODIOGENIA
 seudoquistes
 quistes tisulares

21. Ciclo Evolutivo
21

22. Ciclo Evolutivo
22

23. 23
Mecanismos Patogénicos
“Daño provocado depende de la virulencia de la cepa infectante,
resistencia natural y del estado inmunitario del hospedador”
1
Presencia del parásito multiplicándose en los tejidos
2
Destrucción celular, necrosis, compromiso vascular
3
Respuesta inflamatoria del organismo agredido

24. 24
Patología
Fase Aguda (reciente): Taquizoítos
Toxoplasmosis generalizada: dada por la diseminación y
destrucción celular (inflamación general)
Fetopatía grave o mortal / Aborto (primoinfección)
Muerte
Fase Crónica (latente): Bradizoítos
Coriorretinitis grave / Ceguera (ruptura de quistes en el ojo)
Trombosis vascular (SNC)
Período de incubación es de 10 a 17 días

25. 25
Manifestaciones Clínicas
 Toxoplasmosis Adquirida
 Toxoplasmosis Ocular
 Toxoplasmosis en Inmunosuprimidos
 Toxoplasmosis Congénita

26. 26
Toxoplasmosis Adquirida
Forma ganglionar
Forma generalizada
Forma crónica
SINTOMÁTICA
10%
ASINTOMÁTICA
90%
-malestar general
-astenia
-cefalea
-artralgia
-eritema
-mialgias
-inapetencia
-anorexia
-fiebre

27. 27
Toxoplasmosis Adquirida
Generalizada
•Más frecuente
•Malestar general,
anorexia, astenia,
cefalea
Ganglios más
afectados: cervical,
axilar, inguinal.
Unilateral o Bilateral
•Menos frecuente
•Signos y síntomas
dependen del órgano
afectado
Miocarditis,
pericarditis, hepatitis,
meningoencefalitis
formas graves en
inmunosuprimidos
•Carácter agudo en
inmunosuprimidos
•Diseminación
generalizada
•Encefalitis
•Muerte
Ganglionar Crónica Latente

28. 28
Toxoplasmosis Ocular
Congénita clásica= Bilateral
Manifestación tardía
No congénita= Unilateral
Molestias en la visión, dolor
Coriorretinitis necrotizante

29. 29
Toxoplasmosis en Inmunosuprimidos
 Mortal
 Parásito oportunista
 Abscesos encefálicos
 Retinitis
Lesiones:
.- Cerebral
.- Retina
.- Miocardio
.- Pulmones

30. 30
Toxoplasmosis Congénita
 Primoinfección
durante o antes del
embarazo
 Fetopatías
 Secuelas que
ocasionan .- Abortos
.- Malformaciones fetales
.- Muerte intrauterina
.- Infertilidad
.- Esterilidad
“Transmisión congénita transplacentaria depende de la
existencia de una infección reciente (primoinfección)”

31. 31
Toxoplasmosis Congénita
 Infección generalizada (visceral)
 Encefalitis aguda (neurológico)
 Daño irreversible con secuelas (SNC)
.- intensidad de la infección
.- virulencia de la cepa
.- periodo del embarazo

32. 32
Toxoplasmosis Congénita
Tetrada de Sabin: micro o hidrocefalia, calcificaciones cerebrales,
convulsiones y coriorretinitis

33. 33
Toxoplasmosis Congénita
2do. TRIMESTRE
(4to. – 6to. MES)
•Secuelas
neurológicas
•Tetrada de Sabin
Epilepsia, retardo
psicomotor,
calcificaciones
cerebrales,
hidrocefalia,
microcefalia,
glaucoma
•Meningoencefalitis •Infección generalizada
Miocarditis, neumonía,
hepato-esplenomegalia,
erupciones
1er. TRIMESTRE
(1er. – 3er. MES)
3er. TRIMESTRE
(7mo.- 9no. MES)
“Las gestantes con Toxoplasmosis crónica latente como resultado de una infección
adquirida antes del embarazo, no la transmiten al feto y tampoco producen abortos
recurrentes”

34. Diagnóstico
34
Clínico-epidemiológico:
1. Presencia gatos entorno doméstico
2. Ingestión carne cruda o mal cocida
3. Suele ser asintomático
4. Síntomas: Fiebre, adenitis, cefalea,
hepatoesplenomegalia, ictericia, corioretinitis
5. Recién nacido: hepatoesplenomegalia, ictericia
Diagnóstico diferencial: Histoplasma capsulatum,
Leishmania, Candida albicans

35. Diagnóstico
35
Demostración del parásito:
1. Reconocimiento microscópico
Sangre, líquidos orgánicos o tejidos
2. Anticuerpos Fluorescentes
Sangre, LCR, saliva, líquido de punción ocular
3. Inoculación en animales experimentales

36. Demostración del Parásito
36
Cultivo celular Corte Tejidos
Fibroblastos

37. Demostración del Parásito
37
Quiste en Cerebro

38. Diagnóstico
38
Métodos Inmunológicos:
1. Reacción de Fijación de Complemento
2. Reacción de Sabin y Feldman (Prueba de coloración)
3. Reacción de Hemaglutinación Pasiva
4. Reacción de Inmunofluorescencia Indirecta
5. ELISA
6. Intradermorreacción (hipersensibilidad retardada)
7. PCR

39. Diagnóstico
39
1. Incubación del Antígeno soluble + Suero paciente
2. Adición de suero de cobayo (complemento)
3. Adición de hemolisina + GR carnero
Reacción Positiva
(No hay hemólisis)
Reacción Negativa
(Hemólisis)
 Reacción Fijación de Complemento:
Detecta anticuerpos IgG, pero
se torna negativa 1 a 2 años
post-infección

40. Diagnóstico
40
 Reacción de Sabin y Feldman (Prueba de coloración):
Se basa en la pérdida de la afinidad del parásito por el colorante azul de
metileno frente a anticuerpos presentes en el suero del paciente
1. Técnica cualitativa y semi-cuantitativa, detecta IgG e IgM
2. Se torna positiva a los 14 días de la infección
3. Prueba de referencia, no da reacción cruzada con otras patologías
Los anticuerpos específicos inducen la
permeabilización de la membrana de los
trofozoítos, los cuales se lisan en
presencia del complemento, de modo que
el citoplasma se derrama y aparece
incoloro al no incorporar el colorante

41. Diagnóstico
41
 Reacción de Sabin y Feldman (Prueba de coloración):
Toxoplasmas vivos
(liquido peritoneal ratones
infectados
Suero del paciente
inactivado (30 min, 56°C)
+
Suero cobayo fresco
(fuente de complemento)
complemento
complemento
complemento
30 min, 37°C
Perdida afinidad tintorial
parásitos lisados
Colorante azul de
metileno

42. Diagnóstico
42
 Hemaglutinación Pasiva (HAI):
1. Sensibilización de glóbulos rojos carnero con antígeno Toxoplasma
2. Incubación de GR sensibilizados con suero de paciente
Si existen anticuerpos específicos contra Toxoplasma en el suero estos
reaccionaran contra el antígeno y se producirá una hemaglutinación visible.
Sólo es útil para la detección de IgG y por tanto no
es útil para detectar infecciones recientes

43. Diagnóstico
43
 Reacción Indirecta Anticuerpos Fluorescentes (RIAF):
1. Fijación de los parásitos a la lámina portaobjeto
2. Incubación con el suero del paciente
3. Lavado para eliminación de anticuerpos no fijados
4. Incubación con la antiinmunoglobulina marcada
5. Lavado para eliminación de antiinmunoglobulinas no enlazadas
6. Visualización al microscopio de fluorescencia
Muy útil detecta tanto IgG
como IgM, empleando
conjugados específicos para
cada uno de estos isotipos de
anticuerpos

44. Diagnóstico
44
Sólo es útil para la detección de infección pero no indica actividad del proceso, no
permite excluir infecciones recientes
1. Prueba de hipersensibilidad retardada mediada por células
del sistema inmune.
2. Se inyecta 0,1 a 0,2 ml de cultivo de suspensión inactivada
de parásitos de Toxoplasmas en la cara anterior del
antebrazo.
3. Revisión a las 24-48 horas. Positiva Pápula de 10 mm
4. Resultados:
 Intradermorreacción o Prueba de la Toxoplasmina:
Negativa (-): No hay ninguna reacción.
Positiva (+): Emisión de una pápula visible con un diámetro de 10 mm.

45. Detección de Anticuerpos
45
 IgM se detecta primero, llegan a un máximo en 15 días y puede permanecer
por 1 año o más.
 IgG aparecen en 2 a 4 semanas, llegan a un nivel máximo en 2 a 3 meses,
pueden persistir en meseta por años y en niveles bajos por toda la vida.

46. Detección de Anticuerpos
46
DETECCIÓN DE Ac.
INTERPRETACIÓN
IgG IgM
Negativa Positiva Fase temprana de la infección aguda
Positiva Positiva Infección aguda
Positiva Negativa No hay infección aguda/ paciente inmune
Negativa Negativa
No hay infección paciente no inmune, peligro de
infección

47. Detección de Anticuerpos
47
 Ausencia de IgG y Ausencia de IgM
No infección. Tomar medidas preventivas.
 Ausencia de IgG y Presencia de IgM
Infección aguda temprana
REPETIR SEROLOGÍA A LAS 2 SEMANAS.
 Presencia de IgG y Ausencia de IgM
Infección crónica latente, inmunidad.
 Presencia de IgG y Presencia de IgM
Infección aguda o reciente?
REPETIR SEROLOGÍA A LAS 2 SEMANAS.
Se generan luego de
haber sido infectado o
haber sido vacunado
contra una infección
Si sólo posee títulos de IgG por debajo de 1/64, se considera crónico asintomático,
pero igualmente hay que repetir el ensayo, ya que una elevación del título indica
una reactivación de la infección y hay que aplicar tratamiento inmediato.

48. En el recién nacido
48
La sospecha de toxoplasmosis, aún habiéndose identificado parásitos en la placenta o
en el cordón umbilical, debe estar acompañado por serología de la madre y el bebé, ya
que muchas veces las lesiones se restringen sólo a la placenta.
Presencia de IgM Toxoplasmosis congénita
Ausencia de IgM Repetir a los 10 días
Presencia de IgG
y Ausencia de IgM
Puede tratarse de anticuerpos transferidos
en forma pasiva de la madre al feto
Repetirse la prueba o
realizar un ensayo de
Inmunoblot
Si son iguales, es
transferencia pasiva
Si son diferentes, indica paso de
parásitos de la madre a1 feto y el
recién nacido reaccionó contra otros
epítopes.
ver si el perfil
reconocido por
la madre y el
feto coinciden.

49. Diagnóstico
49
Métodos Auxiliares:
1. Tomografía Axial Computarizada
2. Resonancia Magnética
3. Electroencefalograma
4. Rayos X de Cráneo
5. Evaluación oftálmica

50. Epidemiología
50
Reservorio o
Fuente de
Infección
Mecanismos de Transmisión
-Ingesta de ooquistes
-Transplantes de órganos
-Transfusiones sanguíneas
-Transmisión transplacentaria
Hospedador
Susceptible
 Felinos: Ooquistes, trofozoítos
 Mamíferos y aves: quistes tisulares

51. Tratamiento
51
 Pirimetamina 75 a 100 mg/d los primeros 3 días, luego 25 a 50 mg/d
 Sulfadiazina 4 a 6 g/d, en 4 dosis
 Dapsona 100 mg/d
 Clindamicina 2.400 mg/d, en 4 dosis
 Claritromicina 2 g/d, en 2 dosis
 Azitromicina 1 g/d
 Folinato de calcio o Ac folínico 10 mg/d

52. Indicaciones de Tratamiento
52
 Gestante con IgM reactiva
 Recién nacido o lactante infectado congénitamente con signos y síntomas
de T. congénita (IgM especifica, IgG elevada)
 Corio-retinitis activa
 Toxoplasmosis ganglionar sintomática
 Inmunosuprimidos
NO TIENE INDICACIÓN DE TRATAMIENTO:
 IgG reactiva, IDR positivo, IgM no reactiva
 Corio-retinitis antigua cicatrizada por T. ocular
 T. congénita con secuelas
 T. ganglionar asintomática, sujeto al criterio médico

53. Profilaxis
53

54. Conclusiones
54
Toxoplasma gondii
“A” F.I.P. o Reservorio
“B”
Forma P. Infectante
Puerta de Entrada
Mecanismo Transmisión
Hospedador Accidental
Hospedador Definitivo
Medio de Eliminación
Puerta de Salida
Medio de Evolución
“C” Hospedador Susceptible
Gatos, Perros, Aves, Conejos, Ovinos, Bovinos, Roedores, Caballos
Ooquistes maduros, quistes tisulares y seudoquistes
Boca (vía oral)
Ingesta de las FPI en carnes crudas, vegetales, etc
A través de la placenta, transfusiones, trasplantes
Gatos y Felinos salvajes
Hombre, Ganado Vacuno, Gato y otros animales
Heces
Ano
Hombre y animales sanos expuestos
Suelo

55. Bibliografía
55
 Becerril M. (2008). Parasitología Médica. 2da Edición. México: Editorial McGraw-Hill Interamericana.
 Botero D, Restrepo M. (2012). Parasitosis humanas. 5ta Edición. Colombia: Corporación para Investigaciones
Biológicas.
 Ferguson D. (2009). Toxoplasma gondii: 1908-2008, homage to Nicolle, Manceaux and Splendore. Mem Inst
Oswaldo Cruz. 104(2): 133-148.
 Gállego Berenguer J. (2007). Manual de Parasitología: morfología y biología de los parásitos de interés
sanitario. España: Edicions de la Universitat de Barcelona.
 Hómez J, Soto R, De Soto S, Méndez H, Mármol P. (2004). Parasitología, Libro de Texto. 10ma Edición.
Venezuela: Editorial de la Universidad del Zulia (Ediluz).
 Incani RN. (2012). Guía de Parasitología. Venezuela: Escuela de Medicina, FCS- UC.
 Markell EK, John DT, Krotoski WA. (1999). Medical Parasitology. 8va Edición. USA: Editorial W.B. Saunders.
 Rey L. (2001). Parasitología. 3ra Edición. Brasil: Editorial Guanabara-Koogan.
 Rodríguez Pérez EG. (2013). Parasitología médica. 1ra Edición. México: Editorial El Manual Moderno.
 Todd A, Sanford L, Davidsohn P. (1988). Diagnóstico y tratamiento clínicos por el laboratorio. 8va Edición.
Tomo I.