1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad Pertinencia y Calidez”
D.L. N° 69-04, DE 14 DE ABRIL DE 1969
PROV. DE EL ORO-REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA
PRÁCTICA BF.9.01-04
1. DATOS INFORMATIVOS
Carrera: Bioquímica y Farmacia
Docente: Bioq. Carlos García González, Ms.
Estudiante: Gabriela Viviana Cunalata Cueva
Ciclo/Nivel: Noveno semestre “A”.
Fecha de Elaboración de la Práctica: Jueves 30 de Noviembre del 2017.
Fecha de Presentación de la Práctica: Jueves 7 de Diciembre del 2017.
Tema de la práctica: Evaluación de calidad de formas farmacéuticas líquidas (Gluconato
de calcio por permanganometría).
DATOS DEL MEDICAMENTO
Laboratorio: Sanderson S.A
Principio activo: Gluconato de calcio 10%
Peso neto: 10 ml
Forma farmacéutica: Líquido parenteral
2. OBJETIVOS
Realizar el control de calidad de una forma farmacéutica líquida parenteral (gluconato
de calcio).
Comprobar si el fármaco cumple o no cumple con los parámetros referenciales
establecidos en la farmacopea.
3. FUNDAMENTACIÓN
El calcio es el quinto elemento en abundancia en el cuerpo humano y desempeña una función
importante en la regulación de muchos procesos fisiológicos, y es esencial en la integridad
de las células nerviosas y musculares, en la función cardíaca, respiración, coagulación
sanguínea, en la permeabilidad capilar y de la membrana celular y en la formación del hueso.
Además, el calcio ayuda a regular la liberación y almacenamiento de neurotransmisores y
hormonas, la captación y unión de aminoácidos, la absorción de vitamina B12 y la secreción
de gastrina. La fracción principal (99 %) de calcio está en la estructura esquelética,
principalmente como hidroxiapatita, Ca10(PO4)6(OH)2; también están presentes pequeñas
cantidades de carbonato cálcico y fosfatos cálcicos amorfos. El calcio del hueso está en
constante intercambio con el calcio del plasma. Como las funciones metabólicas del calcio
son esenciales para la vida, cuando existe un trastorno en el equilibrio de calcio, debido a una
deficiencia en la dieta u otras causas, sus reservas en el hueso pueden disminuir para cubrir
10
2. las necesidades más agudas del organismo, por tanto, sobre un régimen crónico, la
mineralización normal del hueso depende de las cantidades adecuadas de calcio corporal
total. Actúa como cofactor enzimático y participa en los procesos de secreción y excreción
de las glándulas endocrinas y exocrinas, en la liberación de neurotransmisores, así como en
el mantenimiento de la permeabilidad de membrana, la función renal y la respiración.
Cada ampolleta de 10 mL contiene: gluconato de calcio 0,95 g; D-sacarato de calcio 4 H2O
(equivalente en gluconato de calcio) H2O 0,05 g; solución de sorbitol al 70 % 2,57 g; agua
para inyección c.s. Proporciona 2,2 mmol Ca++. (Calvo, s.f.)
4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS:
a) Densidad
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
Picnómetro
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Balanza
analítica
Agua destilada Ampolla de
Gluconato de
calcio
b) Límite de cloruros
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
Vaso de
precipitación
Pipetas
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Balanza
analítica
Campana de
extracción
Ácido nítrico
Nitrato de plata
HCl 1N
Ampolla de
Gluconato de
calcio
c) Valoración
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
Vaso de
precipitación
Bureta
Balón
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Campana de
gases
Cocineta
Agua destilada
KMnO4 0.1N
HiSO4
Ampolla de
Gluconato de
calcio
3. d) Microscopía
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
Portaobjetos
Cubreobjetos
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Microscopio
Laptop
Agua destilada Ampolla de
Gluconato de
calcio
e) Análisis Microbiológico
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
Asa
Caja Petri
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Incubadora Agar
MacConkey
Ampolla de
Gluconato de
calcio
5. INSTRUCCIONES
Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o accesorios
innecesarios para el trabajo que se esté realizando.
Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes, mascarilla,
gorro, zapatones.
Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
6. PROCEDIMIENTO
a) Densidad
Calibramos la balanza
Pesamos el picnómetro vacío en la balanza analítica
Luego llenamos el picnómetro con agua destilada hasta enrazar y pesar
Luego llenamos el picnómetro con la muestra (Gluconato de calcio) hasta enrazar y
pesar
Calcular la densidad mediante la fórmula por el método de picnometria
b) Límite de cloruros
Disolver 2ml de gluconato de calcio en agua más o menos 30 a 40ml
Agregar 1ml de ácido nítrico
Agregar 1 ml de nitrato de plata
Agregar agua hasta obtener un volumen de 50ml y dejar reposar por 5 minutos
protegiendo de la luz solar directa
Comparar la turbidez con la producida en una solución que contiene ácido clorhídrico
0.0020N.
c) Valoración (en caliente)
4. Tomar una alícuota de 2 ml de muestra y transferido en un matraz de 250 ml.
Agregar 10 ml de agua destilada y 12 ml de ácido sulfúrico 20%.
Hacemos hervir la mezcla hasta que se disuelva completamente.
Finalmente titulamos en caliente con solución de permanganato de potasio 0.1 N hasta
punto de viraje color rosa.
Cada ml de KMnO4 se equivalen con 21.52 mg de Gluconato de calcio.
Parámetros referenciales: 90 – 110%
d) Microscopía
Quitar la funda protectora del microscopio
Enchufar el microscopio, y conectar el USB con la laptop y programar
Colocar en primera instancia el objetivo de menor aumento para lograr un enfoque
correcto. Este paso en muy importante y se debe realizar siempre, ya que permitirá la
observación del medicamento y la ubicación de áreas de interés para su análisis
posterior.
Subir el condensador utilizando el tornillo correspondiente.
Colocar la muestra sobre la platina, con el cubre-objetos hacia arriba y sujetándola
con las pinzas.
Colocar la lámpara en la posición correcta y encenderla.
Enfoque la lámina mirando a través de la laptop y lentamente mueva el tornillo
macrométrico.
Recorra toda la muestra y haga sus observaciones. Situé la lámina en el sitio donde
debe seguir observando a mayor aumento.
e) Análisis Microbiológico
Aislamiento de E. coli.
Con un asa, hacer un aislamiento a partir de caldo lactosado, a agar MacCon-key.
Incubar a 35ºC por 24 horas.
Las colonias de coliformes en agar MacConkey son de color rojo ladrillo,
eventualmente rodeadas de zonas de bilis precipitada.
Si no hay colonias típicas, la muestra cumple los requisitos en cuanto a ausencia de
coliformes.
Si hay colonias típicas, trasplante una de estas colonias a agar eosina-azul de
metileno-lactosa, según Levine. Incubar a 35ºC por 24-48 horas. Las colonias de E.
coli en este medio, se caracterizan por dar color negro azulado al trasluz y brillo
metálico dorado verdoso a la luz incidente.
Transferir las colonias típicas del agar eosina-azul de metileno-lactosa (agar Levine),
a agar nutritivo inclinado y a agar TSI. Incubar a 35ºC por 24 horas.
Los cultivos típicos de E. coli en agar TSI presentan el bisel amarillo, sin
oscurecimiento y con formación de gas.
Hacer una coloración de Gram: E. coli es un bacilo Gram negativo no esporulado.
Confirmar la presencia de E. coli por medio de pruebas bioquímicas adicionales como
por ejemplo el Test del IMViC, o utilizando sistemas miniaturizados tales como API
MicroID.
5. 7. GRÁFICOS
a) Densidad
b) Límite de cloruros
c) Valoración (en caliente)
Preparación de la muestra
Tomar una alicuota de
2ml de muestra
Agregar 10 ml de agua
dest.
Agregar 12 ml de
ácido sulfúrico 20%
6. Preparación del ácido sulfúrico al 20%
d) Microscopía
Poner 2ml de acido
sulfurico a 3M
Mezclar en 25ml
de agua dest.
Agregar 12ml a la
solucion a valorar
Poner a calentar la solucion Armar equipo de titulación
Titular con KMnO4 Color rosa
7. e) Análisis microbiológico
8. CÁLCULOS
a) Densidad
Prueba de densidad Nº1
Datos
Peso del picnómetro vacío: 16.585g
Peso del picnómetro con agua destilada: 27, 730g
Peso del picnómetro con muestra: 27,790g
𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 =
𝑃. 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 − 𝑃. 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑣𝑎𝑐𝑖𝑜
𝑃. 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑑𝑒𝑠𝑡𝑖𝑙𝑎𝑑𝑎 − 𝑃 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑣𝑎𝑐𝑖𝑜
=
27.790 − 16,585
26,730 − 16,585 =
11,205
10.145 = 𝟏. 𝟏𝟎𝒈/𝒄𝒎 𝟑
Prueba de densidad Nº2
Datos:
Peso del picnómetro vacío: 16.570g
Peso del picnómetro con agua destilada: 26, 735g
Peso del picnómetro con muestra: 27,185g
𝐷𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 =
𝑃. 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 − 𝑃. 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑣𝑎𝑐𝑖𝑜
𝑃. 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑎𝑔𝑢𝑎 𝑑𝑒𝑠𝑡𝑖𝑙𝑎𝑑𝑎 − 𝑃 𝑑𝑒 𝑝𝑖𝑐𝑛𝑜𝑚𝑒𝑡𝑟𝑜 𝑣𝑎𝑐𝑖𝑜
=
27.185 − 16,570
26,735 − 16,570
=
10,615
10.165
= 𝟏. 𝟎𝟒𝒈/𝒄𝒎 𝟑
b) Valoración
Datos
Consumo práctico: 9 ml KMno4
Conc. P.A.: 200 mg
Consumo Teórico (CT): ?
Porcentaje Teorico (PR): ?
Consumo Real (CR): ?
Porcentaje Real (PR): ?
8. Equivalente: 1 mL de KMno4 0.1 N equivale a 21.52 mg de Gluconato de Calcio
K: 0.9640
Parametro referencial: 90% - 110%
1. Consumo teórico
1 mL KMno4 21.52 mg p.a
X 200 mg p.a.
X = 9.29 ml de KMno4 0.1 N
2. Porcentaje teórico
1 ml de KMno4 0.1 N 21.52 mg p.a
9.29 ml de KMno4 0.1 N x
X = 199.92 mg p.a.
200 mg p.a. 100 %
199.92 mg p.a. x
X = 99.96 %
3. Consumo Real
Consumo real = 9.29 ml de KMno4 0.1N x 0.9640 = 8.955ml
4. Porcentaje Real
1 ml de KMno4 0.1N 2.004 mg p.a
9 mL p.a. x
X = 193.68 mg p.a.
200 mg p.a. 100 %
193.68 mg p.a. x
X = 96.84 %
9. RESULTADOS OBTENIDOS
a) Densidad
El medicamento no se encuentra dentro de los parámetros establecidos, según se indican
en fichas internacionales de España, ya que estas expresan que la densidad del Gluconato
de Calcio es de 0.35g/cm3 hasta 0.65 g/cm3
b) Límite de cloruros
Se puede observar claramente el cambio de turbidez que se produce en la muestra, en
donde la turbidez significa la presencia de cloruros según lo indica las especificaciones
de la farmacopea española volumen I y II.
Donde la comparación de las dos muestras es entre gluconato de calcio con ácido nítrico
y nitrato de plata así mismo la otra muestra es gluconato de calcio con ácido clorhídrico.
9. c) Valoración
d) Microscopía
Medicamento Observación
Gluconato de calcio Se observó partículas extrañas aunque más
limpio, esto porque es inyectable.
e) Análisis Microbiológicos
No se observa crecimiento bacteriano alguno luego de 24 horas de incubación.
10. OBSERVACIONES
En el control de calidad de formas farmacéuticas líquidas se realizaron varios ensayos a la
ampolla de gluconato de calcio donde se observó: que la densidad no se encuentra en los
rangos permitidos, no se observó muchas partículas extrañas. En cuanto a la valoración fue
de 96.84% por ende cumple con la farmacopea.
11. CONCLUSIÓN
La práctica realizada fue de gran importancia porque se puedo evaluar la calidad de la
ampolla de gluconato de calcio donde se realizaron diferentes ensayos según los que nos
indica las diferentes farmacopeas y se llegó a la conclusión que la ampolla cumple con todos
los parámetros establecidos y es apta para el consumo humano.
12. RECOMENDACIONES
Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de
accidente que ponga en riesgo nuestra salud.
Aplicar las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Utilizar la cámara de gases para evitar intoxicaciones.
Realizar la asepsia de la mesa de trabajo.
Lavar siempre el material con agua destilada antes de utilizar ya que puede contener
sustancias que pueden interferir en su control.
Tratar de ser precisos en el momento de medir los volúmenes requeridos ya que de lo
contrario tendremos inconvenientes tanto en la práctica como en los resultados.
10. Colocar una hoja papel bond como base para observar correctamente el cambio de
coloración en la titulación.
Realizar la titulación con movimiento circular, agitación continua y gota a gota.
13. CUESTIONARIO
a) ¿Qué es la permanganometría?
Las permanganimetrías son valoraciones o volumetrías de oxidación-reducción, es decir, en
las que la reacción principal es una reacción en la que una sustancia se oxida y otra se reduce..
(Canaza & Quispe, s.f.)
b) ¿Para qué está indicada la ampolla de gluconato de calcio?
Está indicada para la hipocalcemia. Tetania hipocalcémica por hipoparatiroidismo
posoperatorio. Para disminuir o revertir los efectos depresores cardíacos de la
hiperpotasemia. Antídoto en la hipermagnesemia. Shock anafiláctico. (Famacias ahumada,
s.f.)
c) Como se utiliza el gluconato de calcio en la hipepotasemia
El gluconato de calcio también se usa como agente cardioprotector en casos
de hiperpotasemia. Aunque no tiene un efecto sobre los niveles de potasio en la sangre,
reduce la excitabilidad de los cardiomiocitos reduciendo así la probabilidad de
desarrollar trastornos del ritmo cardíaco. (Wikipedia , 2017)
d) Mencione los efectos secundarios que ocasiona el gluconato de calcio
Los efectos secundarios de la administración de gluconato de calcio
incluyen náuseas, estreñimiento y malestar estomacal. La extravasación de gluconato de
calcio puede conllevar celulitis. También se ha informado de que esta forma de calcio
aumenta el flujo plasmático renal, la diuresis, natriuresis, la tasa de filtrado glomerular,
la prostaglandina E2 y los niveles de alfa-F1 (Wikipedia , 2017)
11. 14. ANEXO
15. BIBLIOGRAFÍA
Calvo,D. (s.f.). Infomed.Recuperadoel 30de Noviembre de 2017, de
http://fnmedicamentos.sld.cu/index.php?P=FullRecord&ResourceId=705
Canaza , E., & Quispe,G.(s.f.). Monografias.Recuperadoel 30de Noviembre de 2017, de
http://www.monografias.com/trabajos105/permanganometria/permanganometria.shtml
Famaciasahumada.(s.f.).Recuperadoel 30de Noviembre de 2017, de
http://www.farmaciasahumada.cl/fasa/MFT/PRODUCTO/P3116.HTM
Vidal Vademecum.(2015). Vademecum.Recuperadoel 30de Noviembrede 2017, de
https://www.vademecum.es/principios-activos-calcio+gluconato-a12aa03
Wikipedia.(22 de agostode 2017). Obtenidode
https://es.wikipedia.org/wiki/Gluconato_c%C3%A1lcico
Densidad
Valoración
12. EJERCICIO DE APLICACIÓN
En una industria farmacéutica “exfari” se envían un lote de ampolla de gluconato de
calcio al departamento de control de calidad y el contenido declarado de cada ampolla
es de 10%.
Para valorar dicha forma farmacéutica líquida se utiliza una solución EDTA 0.1N,
obteniéndose un consumo practico de 0.5 ml. Determinar el consumo teórico (CT),
consumo real (CR) y el porcentaje real (PR), si se conoce que 1 ml de EDTA 0.1 N
contiene 2.004 mg Ca.
DATOS
Consumo Practico: 0.5ml EDTA 0.1 N.
Consumo Teórico CT: ?
Consumo Real CR: ?
% Real: ?
Equivalente 1 ml EDTA 0.1 N – 2.004 mg Ca
K: 1.0107
10 ml gluconato de calcio 0.0097 g p.a.
1 ml gluconato de calcio x
x = 0.00097g p.a. x 1000 = 0.97 mg p.a.
Consumo Teórico
1 ml EDTA 2.004 mg p.a
X 0.97 mg p.a.
X = 0.4840 ml EDTA
% teórico
1 ml EDTA 2.004 mg p.a
0.4840 ml EDTA x
X = 0.9699 mg p.a.
0.97 mg p.a. 100 %
0.9699 mg p.a. x
X = 99.98%
Consumo Real
Consumo real = Consumo práctico (viraje) x K
Consumo real = 0.5 ml EDTA x 1.0107
Consumo real = 0.50535 ml EDTA 0.1 N
% Real
1 ml EDTA 2.004 mg p.a
0.50535 ml p.a. x
X = 1.0127 mg p.a.
0.97 mg p.a. 100 %
13. 1.0127 mg p.a. x
X = 104.40%
Después de hacer los procedimientos correspondientes y de acuerdo a la Farmacopea USP
30 la ampolla de gluconato de calcio pasa el control de calidad ya que el porcentaje real y
teórico están dentro de los rangos permitidos los cuales oscilan entre 95 % a 105%.
16. FIRMA DE RESPONSABILIDAD
_____________________________
Gabriela Cunalata Cueva
0707070272
