PRÁCTICA DE LABORATORIO N° 3 - GLUCONATO DE CALCIO
1. UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad, Pertinencia y Calidez”
D.L. N° 60 – 04, DE 14 DE ABRIL DE 1969
PROV. DE EL ORO – REP. DEL ECUADOR
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
LABORATORIO DE TECNOLÓGIA FARMACEÚTICA
CATEDRA DE ANALISIS DE MEDICAMENTOS
NÚMERO DE PRÁCTICA: BF.9.01-3
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
EVALUACIÓN DE CALIDAD DE FORMAS FARMACÉUTICAS LÍQUIDAS
1. DATOS INFORMATIVOS:
DOCENTE RESPONSABLE: Dr. Carlos García, MgSc.
NOMBRE: Leslie Maleni Carrasco Maxi
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
CURSO: Noveno Semestre
PARALELO: “B”
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 20/06/2019
FECHA DE ENTREGA DEL INFORME DE PRÁCTICA: 26/06/2019
HORA INICIO DE LA PRÁCTICA: 13H00
HORA FINALIZACION DE LA PRÁCTICA: 16H00
MEDICAMENTO: Gluconato de Calcio (solución inyectable)
2. FUNDAMENTACIÓN:
El Gluconato de calcio en solución al 10% es la presentación del calcio más utilizado en el
tratamiento de la hipocalcemia. Esta forma de calcio es superior al del lactato de calcio, aunque
sólo contiene 0,93% (930 mg/100ml) de iones de calcio.
El calcio es esencial para la integridad funcional de los sistemas nerviosos, musculares y
esqueléticos. Interviene en la función cardíaca normal, función renal, respiración, coagulación
sanguínea y en la permeabilidad capilar y de la membrana celular. Además, el calcio ayuda a
regular la liberación y almacenamiento de neurotransmisores y hormonas, la captación y unión
de aminoácidos, la absorción de vitamina B12 y la secreción de gastrina. La fracción principal
(99 %) del calcio está en la estructura esquelética, principalmente como hidroxiapatita,
Ca10(PO4)6(OH)2; también están presentes pequeñas cantidades de carbonato cálcico y
fosfatos cálcicos amorfos. El calcio del hueso está en constante intercambio con el calcio del
10
2. plasma. Ya que las funciones metabólicas del calcio son esenciales para la vida, cuando existe
un trastorno en el equilibrio del calcio debido a deficiencia en la dieta u otras causas, las reservas
de calcio en el hueso pueden deplecionarse para cubrir las reservas de calcio más agudas del
organismo. Por lo tanto, sobre un régimen crónico, la mineralización normal del hueso depende
de las cantidades adecuadas de calcio corporal total (1).
3. OBJETIVOS:
Evaluar la calidad de una forma farmacéutica que tenga como principio activo el
Gluconato de Calcio.
4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVO Y SUSTANCIAS:
a) Valoración
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Vaso de
precipitación
✓ Varilla de
agitación
✓ Soporte universal
✓ Pipetas
✓ Bureta
✓ Papel manteca
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Mandil
✓ Balanza
analítica
✓ Hidróxido de
sodio 0.1N
✓ Edetato disódico
0.1N
✓ Murexida
✓ Agua destilada
✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
b) pH
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Vaso de
precipitación
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Mandil
✓ pH-metro ✓ Agua
destilada
✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
3. c) Solubilidad
MATERIALES SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Vaso de
precipitación
✓ Pipetas
✓ 4 tubos de ensayo
✓ Franela
✓ Gradilla
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Mandil
✓ Agua destilada
✓ Formol
✓ Metanol
✓ Éter etílico
✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
d) Refractometría
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Vaso de
precipitación
✓ Agitador
✓ Pipeta Pasteur
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro y Mandil
✓ Refractómetro ✓ Agua destilada ✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
e) Determinación del contenido extraíble del envase
MATERIALES SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Probeta
✓ Franela
✓ Pipeta volumétrica
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Mandil
✓ Agua destilada
✓ Formol
✓ Metanol
✓ Éter etílico
✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
4. f) Aspecto disolución
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Vaso de
precipitación
✓ Agitador
✓ Probeta
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro y Mandil
✓ Refrigerador
✓ Cocineta
✓ Agua
destilada
✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
g) Características organolépticas
MATERIALES MEDICAMENTO
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Mandil
✓ Ampolla de Gluconato de
calcio
h) Densidad
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Picnómetro
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Gorro
✓ Mandil
✓ Balanza
analítica
✓ Agua destilada ✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
i) Límite de Cloruros
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MEDICAMENTO
✓ Vaso de
precipitación
✓ Franela
✓ Pipetas
✓ Guantes
✓ Mascarilla
✓ Balanza
analítica
✓ Campana de
extracción
✓ Ácido nítrico
✓ Nitrato de plata
✓ HCl 1N
✓ Ampolla de
Gluconato de
calcio
5. ✓ Gorro
✓ Mandil
5. PROCEDIMIENTO:
a) Valoración
Calcular la cantidad de principio activo a utilizarse, en este caso 2.5 ml de gluconato de
calcio 10% y poner en un vaso de precipitación.
Añadir 10 ml de agua destilada y 12 ml de hidróxido de sodio 0.1 N.
Adicionar 0.0020 g de murexida como indicador.
Titular con EDTA al 0.1 N.
Anotar el viraje cuando la solución cambie a color morado.
b) pH
Agregamos una cierta cantidad de muestra (Ampolla de Gluconato de Calcio), en un
vaso de precipitación y luego medimos el pH, con el respectivo pH-metro.
Verificar si cumple con los parámetros establecidos.
c) Solubilidad
Limpiar el área de trabajo, haciendo el uso de alcohol y franela.
Rotular los 4 tubos de ensayos respectivamente: M(Metanol), F(Formol), H (Agua
destilada) y éter etílico.
Colocar 1 ml cada uno de los reactivos respectivamente en los tubos rotulados.
Adicionar 1 ml de Gluconato de calcio en cada uno de los tubos.
Agitar vigorosamente los tubos durante 3 minutos.
Observar los resultados y tomar apuntes de cada uno para el informe.
d) Refractometría
Calibrar el refractómetro con agua destilada.
Colocar 10 ml de muestra en un vaso de precipitación.
Colocar en la unidad óptica del refractómetro con la pipeta Pasteur unas gotas de
muestra necesaria para tomar la lectura.
Leer el Brix indicado en el refractómetro.
Anotar el resultado.
Realizar los cálculos pertinentes.
e) Determinación del contenido extraíble del envase
6. Seleccionar uno o más envases si el volumen es mayor o igual a 10 ml, tres o más
envases si es mayor a 3 ml y menor a 10 ml, y cinco o más envases si es menor o igual
a 3 ml.
Extraer individualmente el contenido de cada uno de los envases seleccionados con una
jeringa hipodérmica seca cuya capacidad no exceda tres veces el volumen a ser medido,
provista de una aguja de 0,8 mm de diámetro interno y de no menos de 2,5 cm de largo.
Eliminar las burbujas de aire de la jeringa y de la aguja.
Verter el contenido de la jeringa sin vaciar la aguja en una probeta graduada y de
capacidad tal que el volumen a medir ocupe por lo menos el 40% de su volumen.
f) Aspecto disolución
Preparar la solución con 9ml de Agua destilada y 10 ml de gluconato de calcio.
Hacer hervir por agitación durante 10 segundos hasta disolución completa.
Llevar a una temperatura de 20°C por 5 minutos.
Comparar con la solución inyectable de referencia.
g) Características organolépticas
Se debe obtener 4 soluciones de Gluconato de Calcio al 10% de distintas industrias
farmacéuticas.
Se debe proceder a la observación de 4 soluciones de Gluconato de calcio al 10%.
A continuación, anotamos lo observado en la siguiente tabla.
h) Densidad
Calibramos la balanza.
Pesamos el picnómetro vacío en la balanza analítica.
Luego llenamos el picnómetro con agua destilada hasta enrazar y pesar.
Luego llenamos el picnómetro con la muestra (Gluconato de calcio) hasta enrazar y
pesar.
Calcular la densidad mediante la fórmula por el método de picnometria.
i) Límite de cloruros
Disolver 2ml de gluconato de calcio en agua más o menos 30 a 40ml.
Agregar 1ml de ácido nítrico.
Agregar 1 ml de nitrato de plata.
Agregar agua hasta obtener un volumen de 50ml y dejar reposar por 5 minutos
protegiendo de la luz solar directa.
Comparar la turbidez con la producida en una solución que contiene ácido clorhídrico
0.0020N.
7. 6. CUADRO DE RESULTADOS
a) Valoración
Si CUMPLE
CÁLCULOS
Datos importantes
Peso promedio: 1000 mg
Concentración: 100 mg P.A
Referencia: 90%- 110%
Equivalencia: 1ml de EDTA 0.1 N: 40.08 mg
PA
Viraje: 6.5 ml de EDTA 0.1N
K: 1.0107
Cantidad a
trabajar:
250mg PA
Consumo teórico: 6.23 ml de EDTA 0.1N
% Teórico: 99.87%
Consumo real: 6.56 ml de EDTA 0.1N
% Real: 105.16 %
Cantidad a utilizarse
10𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑖𝑛𝑦𝑒𝑐𝑡𝑎𝑏𝑙𝑒 → 989.8 𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝐴
𝑥 ⃪ 250𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝑃𝐴
𝑿 = 𝟐. 𝟓 𝒎𝒍 𝒅𝒆 𝒊𝒏𝒚𝒆𝒄𝒕𝒂𝒃𝒍𝒆
Cálculo del consumo teórico
1𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴 0.1𝑁 → 40.08 𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴
𝑥 → 250𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴
𝑿 = 𝟔. 𝟐𝟑 𝒎𝒍 𝒅𝒆 𝑬𝑫𝑻𝑨 𝟎.𝟏𝑵
Cálculo del porcentaje teórico
1𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴 0.1𝑁 → 40.08 𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴
6.23𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴 0.1𝑁 → 𝑥
𝑿 = 𝟐𝟒𝟗. 𝟔𝟗 𝒎𝒈 𝒅𝒆 𝑷𝑨
250𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴 → 100%
249.69𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴 → 𝑥
𝑿 = 𝟗𝟗. 𝟖𝟕%
Consumo real
8. 𝑪𝑹 = 𝑽𝒐𝒍𝒖𝒎𝒆𝒏 𝒑𝒓á𝒄𝒕𝒊𝒄𝒐 × 𝑲
𝑪𝑹 = 6.5𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴 0.1𝑁 × 1.0107
𝑪𝑹 = 𝟔. 𝟓𝟔𝒎𝒍 𝒅𝒆 𝑬𝑫𝑻𝑨 𝟎.𝟏𝑵
Porcentaje Real
1𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴 0.1𝑁 → 40.08 𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴
6.56𝑚𝑙 𝑑𝑒 𝐸𝐷𝑇𝐴 0.1𝑁 → 𝑥
𝑿 = 𝟐𝟔𝟐. 𝟑𝟕 𝒎𝒈 𝒅𝒆 𝑷𝑨
250𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴 → 100%
262.92𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑃𝐴 → 𝑥
𝑿 = 𝟏𝟎𝟓. 𝟏𝟔%
CONCLUSIÓN
La Farmacopea Argentina 8va Edición indica que las soluciones inyectables de
Gluconato de calcio debe contener no menos del 95 % y no más del 105 % de la cantidad
total de calcio declarado.
Sin embargo, se procedió a modificar la técnica sustituyendo el indicador azul de
hidroxinafol por el murexida ya que es un indicador para soluciones tituladas con EDTA
preparadas a la misma concentración de NaOH, por ende, podemos decir que la solución
inyectable si cumple con los requisitos establecidos. (La variación de 0.16 % se relacionan
con la modificación que se le hizo a la técnica.)
b) pH
pH
Ampolla de Gluconato de Calcio 6.22
CÁLCULOS
Datos: Valores de ph (Ensayo por triplicado)
pH 1.- 6.24
pH 1.- 6.26
pH 1.- 6.18
Calculo de la media:
𝑪𝒂𝒍𝒄𝒖𝒍𝒐 𝒅𝒆 𝒍𝒂 𝒎𝒆𝒅𝒊𝒂 =
𝟔. 𝟐𝟒 + 𝟔. 𝟐𝟔 + 𝟔. 𝟏𝟖
𝟑
= 𝟔. 𝟐𝟐 𝒑𝑯
9. CONCLUSIÓN
La farmacopea Argentina séptima edición, indica que una muestra de Gluconato de calcio debe
tener un pH que oscila desde los 6 hasta los 8.2, los resultados obtenidos en la práctica de
laboratorio arrojaron un pH de 6.22 por lo cual la muestra analizada si cumple con el requisito
de calidad establecidos en la farmacopea.
c) Solubilidad
METANOL FORMOL AGUA DESTILADA AGUA CALIENTE
insoluble ligeramente soluble Ligeramente soluble Muy soluble
Despuésde 3 minutos Despuésde 3 minutos Despuésde 3 minutos Después de 3 minutos
insoluble Ligeramente soluble Ligeramente soluble Muy soluble
CONCLUSIÓN
La Real Farmacopea Española 3° edición indica que el gluconato de calcio es bastante soluble
en agua y fácilmente soluble en agua hirviendo.
En la farmacopea argentina 8va edición se indica que el gluconato de calcio, es fácilmente
soluble en agua a ebullición; moderada y lentamente soluble en agua e insoluble en alcohol. En
cambio, en la farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos resalta que el gluconato de calcio
es fácilmente soluble agua a ebullición, ligeramente soluble en agua, casi soluble en alcohol y
eter dietílico.
d) Refractometría
MUESTRAS GRADOS
BRIX
INDICE DE
REFRACCION
Gluconato de calcio 10% 10 ml Lab. Sanderson S.A 10,53% 1,3486 nD
Gluconato de calcio 10% 10 ml Lab. Biosano S.A 11,26% 1,3498 nD
CONCLUSIÓN
Se cumplió con el objetivo de la práctica de conocer los grados Brix e índice de refracción con
dos ampollas de Gluconato de calcio de 10% 10 ml de diferente laboratorio. Gluconato de calcio
10% 10 ml Lab. Sanderson S.A nos dio grado Brix 10,53% e índice de refracción 1,3486 nD y
Gluconato de calcio 10% 10 ml Lab. Biosano S.A nos dio grado Brix 11,26% e índice de
refracción 1,3498 nD, esto lo puede encontrar en el farmacopea Argentina 8va edición en el
tomo 1.
10. e) Determinación del contenido extraído del envase
PRODUCTO 1: NO CUMPLE
PRODUCTO 2 Y 3: CUMPLE
AMPOLLAS
GLUCONATO DE
CALCIO 10%
VOLUMEN DE
PRESENTACIÓN
VOLUMEN REAL
1.Gluconato de calcio 10% 10 ml 10,9 ml
2.Gluconato de calcio 10% 10 ml 10,5 ml
3.Gluconato de calcio 10% 10 ml 10,5 ml
CONCLUSIÓN
El prodecto de elección fue el Gluconato de Calcio 10% inyectable para realizar la
determinación del contenido extraíble del envase, que consistió en observar si hay un exceso
de volumen previsto del producto, ya que cualquier medicamento puede tener un exceso
mínimo, pero no puede tener menos volumen que el establecido en su presentación.
Nuestro inyectable 1 contiene un exceso de 0,9 ml, los inyectables 2 y 3 un exceso de 0,5
ml, y según la Farmacopea Brasileña 5ta edición indica que los inyectables de 10 ml pueden
tener un exceso mínimo de 0,5ml. Por lo tanto, de los 3, únicamente el producto 1 no cumple
con este parámetro.
f) Aspecto de disolución
SI CUMPLE
CONCLUSIÓN
Mediante la práctica logramos determinar que la muestra de gluconato de calcio del laboratorio
La Sante si cumple con los parámetros establecidos con la farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos, debido a que la solución se mantuvo menos opalescente que la solución de
referencia.
11. g) Características Organolépticas.
Nombre Forma
Farmacéutica
Concent. Laboratorio
Farmacéutico
Vence Lote Color Olor Textura
Gluconato
de calcio
Ampolla 10ml Sanderson 09 -
2022
75MI1490 Transparente Característico Líquida
Gluconato
de calcio
Ampolla 10ml Biosano 03 -
2020
18031692 Transparente Característico Líquida
h) Densidad
CÁLCULOS
GLUCONATO DE CALCIO AL 10 % LABORATORIO DE SANDERSON S.A
𝑷𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝑴𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 − 𝒑𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝒗á𝒄𝒊𝒐
𝑷𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝒂𝒈𝒖𝒂 − 𝒑𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝒗á𝒄𝒊𝒐
=
21.05 𝑔−11.55 𝑔
21.02 𝑔−11.55 𝑔
=
9.50 𝑔
9.47 𝑔
𝟏. 𝟎𝟎𝟑 𝒈/𝒄𝒄
GLUCONATO DE CALCIO AL 10 % LABORATORIO DE BIOSANO S.A
𝑷𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝑴𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂− 𝒑𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝒗á𝒄𝒊𝒐
𝑷𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝒂𝒈𝒖𝒂 − 𝒑𝒆𝒔𝒐 𝒑𝒊𝒄 𝒗á𝒄𝒊𝒐
=
21.03 𝑔−11.55𝑔
21.02 𝑔−11.55 𝑔
=
9.48 𝑔
9.47 𝑔
𝟏. 𝟎𝟎𝟏 𝒈/𝒄𝒄
RESULTADOS
12. CONCLUSIÓN
Mediante la práctica se obtuvo el valor de densidad del Gluconato De Calcio Al 10 % Del
Laboratorio Sanderson S.A Y Del Laboratorio De Biosano el cual fue de 1.003 Y 1.001
respectivamente los cuales al ser comparados con el valor referencial de densidad de hasta 1,1
que se tomó de la Farmacopea Argentina él cual nos indica que si cumple al entrar en dicho
rango establecido.
i) Límite de cloruros
CÁLCULOS
Transformamos los gramos a mililitros, usando la densidad del HCl
D HCl =1,02g/ml
Se agrega hasta completar un volumen de 1000ml
Preparación a 0,0040 N
Se puede observar una cantidad significativa por su coloración blanco lechoso
CONCLUSIÓN
De acuerdo a la farmacopea Argentina 8 Edición volumen I nos indica que el gluconato de
calcio debe tener una cantidad de cloruros que la dilución con el ácido como podemos observar
13. en nuestra imagen nuestra muestra con gluconato tiene un aspecto blanco lecho por el contacto
con el nitrato de plata se forma el cloruro de plata que se hace presente mediante la coloración
blanco lechoso es decir que se aprueba este parámetro de calidad.
7. CONCLUSIONES:
Se evaluó la calidad en una forma farmacéutica liquida, que contenía como principio activo el
Gluconato de Calcio (solución inyectable); pudiéndose comprobar si el fármaco cumple o no
cumple con los parámetros referenciales establecidos en la farmacopea mediante la ejecución
de diferentes pruebas y ensayos destinados al control de calidad de medicamentos con el fin de
garantizar su calidad y seguridad.
8. RECOMENDACIONES:
Aplicar las correctas normas de bioseguridad dentro del laboratorio antes y después de
la realización de la práctica.
Usar siempre el equipo de protección adecuado para minimizar algún tipo de accidente
que ponga en riesgo nuestra salud.
Leer la guía de práctica antes de ingresar al laboratorio para tener conocimiento sobre
las actividades a realizarse y evitar posibles errores durante las determinaciones.
Manipular con responsabilidad los equipos de laboratorio siempre y cuando se conozca
el funcionamiento, mantenimiento y calibración.
Trabajar con reactivos que no estén caducados para obtener resultados satisfactorios.
Dejar el área de trabajo limpia, los reactivos y materiales limpios en su lugar.
9. BIBLIOGRAFÍA:
- ANMAT. (2003). FARMACOPEA ARGENTINA (Octava ed., Vol. I). Buenos Aires,
Argentina.
- ANVISA. (2010). FARMACOPEA BRASILEÑA (Quinta ed., Vol. I). Brasilia, Brasil:
Copyright.
- Ministerio de Sanidad y Consumo. (2005). REAL FARMACOPEA ESPAÑOLA
(Tercera ed.). Madrid, España: Editorial MSC.
- USP. (2013). FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS DE AMÉRICA. USP 36.
NF 31. EE.UU. Pharmacopeial Convention.
14. 10. ANEXOS:
ANEXO N° 1: ENSAYO DE VALORACIÓN Y SOLUBILIDAD
Valoración del gluconato de calcio en solucion inyectable.
Determinación de solubilidad del gluconato de calcio en solucion inyectable.
ANEXO N°2: ENSAYO DE REFRACTOMETRÍA
Determinación de refractometría en ampollas de gluconato de calcio.
15. ANEXO N° 3: ASPECTO DE DISOLUCIÓN Y CARACTERÍSTICAS
ORGANOLÉPTICAS
Determinación del aspecto de disolución del contenidode la ampolla de gluconato
de calcio.
Determinación de las características organolépticas del gluconato de calcio, en
solución inyectable.
ANEXO N° 4: DENSIDAD Y LÍMITE DE CLORUROS
Determinación de densidad con picnómetro.
16. Determinación del límite de cloruros
ANEXO N° 5: ESPECIFICACIONES DE LAS FARMACOPEAS
USP 36. NF 31GLUCONATO DE CALCIO – INYECCIÓN
