CLASE MARCADORES TUMORALES UNLP DAOICEJFVFRWEETEBT45VWETBEWTEWRHJTVBEHITUHEIUWTHQ´B H OJOPQQ RVQNTUETIJEOTJERTEW EVWRTIHWEIUVTH EOÇTHÇRTBUOWIEJTPEOUTER´MKWFAAREAGVEGEEVRTWE

1.  Específicos de tumor
Proteínas o RNA
producidos exclusivamente
por el tumor y resultado de
mutaciones, fusiones o
translocaciones genómicas, o
bien, variantes de splicing.
MARCADORES TUMORALES
DEFINICIÓN
Moléculas que representan alteraciones de la función celular
normal y se asocian a la presencia de un proceso neoplásico
maligno.
 Asociados a tumor
Proteínas sobre
expresadas por genes
normales dentro de los cuales
pueden encontrarse
oncoproteinas, antígenos
oncofetales, productos
virales.
1

2. Principales vias de seňalización involucradas en cancer
2

3. PDFG PDFG
Activa la señal del Ras: promueve el fenotipo del Cancer (protooncogen) Myc, E2F
Factores de crecimiento
Receptores
Proteinas participantes en procesos de señalizacion
Factores de transcripcion
1. Oncogenes
3

4. Principales proteinas reguladoras que pueden estar alteradas
Une a elementos regulatorios y aumenta proteinas
p/ sintesis de DNA
En 50% de los CA el p53
es defectuoso o nulo (70 %
en CA colorrectal)
2. Genes supresores
DNA dañado p53
Detención del ciclo celular
(p21 inhibe E2)
reparación del ADN
(GADD45)
Inducción de apoptosis
BAX o PUMA
4

5. Propiedades de la celula cancerosa
3. Inmortalidad (expresion
aumentada de telomerasa- 90%
de la CA)
Carol Greider, Elizabeth H. Blackburn y Jack W. Szoztak.
Premio Nobel Medicina Octubre 2009
5

6. 4. Capacidad de Angiogénesis : VEGF
5. Adhesión celular
Cadherinas
Selectinas
6

7. Agentes causantes de cancer
(mutaciones en el ADN)
Hereditarias pronostico
Un marcador de susceptibilidad
permite identificar personas con mayor riesgo de desarrollar un determinado tipo de
cáncer.
BCRA 1
45 % de las familias con alta incidencia de cáncer de
mama existe una mutación en el gen BCRA 1, así como
en el 80 % de las familias en las que se detectó cáncer
de ovario
7

8. La actriz Angelina Jolie se sometió a una doble mastectomía
preventiva de cáncer de mama, al sufrir un 87 por ciento de
posibilidades de padecer esta enfermedad y un 50 por ciento
de desarrollar un cáncer de ovario.
"Yo siempre les he dicho que no se
preocuparan, pero la verdad es que llevo
un gen defectuoso, el BRCA1, que
aumenta drásticamente mi riesgo de
desarrollar cáncer de mama y de ovario".
8

9. Agentes causantes de cancer
(mutaciones en el ADN)
Hereditarias pronostico
Agentes quimicos (hidrocarburos, aromaticos,
aminas aromaticas, nitrosaminas)
Radiaciones (luz UV, radiaciones ionizantes,
rayos gamma y alfa)
Virus EBV (CA orofaríngeo, etc)
Papillomavirus (CA cuello útero)
Adquiridas
9

10. Harald zur Hausen
Premio Nobel de Medicina 2008
Ha realizado las
investigaciones sobre
el cáncer del cuello de
útero, donde descubrió
el papel del virus del
papiloma humano,
10

11. Glifosato?
…Carrasco dijo que la investigación determinó que “el glifosato puro, en dosis
menores a las usadas en fumigación, genera malformaciones” y “podría estar
interfiriendo en algún mecanismo normal del desarrollo embrionario que tiene que ver
con la forma en que las células se dividen y mueren”.
Investigador CONICET
Centro Nac. Inves Científica, Univ. Pierre y Marie Curie, Francia
Confirmado: el glifosato es cancerígeno, según la OMS
Publicado el 23.03.15 por Laura Rocha
A casi un año de la muerte del científico del Conicet, Andrés
Carrasco, la OMS le dio la razón: el glifosato es cancerígeno.
Incluso en el paper en donde detalla los peligros del
herbicida se refiere a las consecuencias que provoca en
animales.
11

12. 12

13. CANCER
LOCATION INCIDENCE* LOCATION INCIDENCE*
Lung USA (New Orleans,
blacks)
110 India (Madras) 5.8
Breast Hawaii (Hawaiians) 94 Israel (non-
Jews)
14.0
Prostate USA (Atlanta, blacks) 91 China
(Tianjin)
1.3
Uterine cervix Brazil (Recife) 83 Israel (non-
Jews)
3.0
Stomach Japan (Nagasaki) 82 Kuwait
(Kuwaitis)
3.7
Liver China (Shanghai) 34 Canada (Nova
Scotia)
0.7
Colon USA (Connecticut, whites) 34 India (Madras) 1.8
Melanoma Australia (Queensland) 31 Japan (Osaka) 0.2
Nasopharynx Hong Kong 30 UK
(Southwestern)
0.3
Esophagus France (Calvados) 30 Romania
(urban Cluj)
1.1
Bladder Switzerland (Basal) 28 India (Nagpur) 1.7
Uterus USA (San Francisco Bay
Area, whites)
26 India (Nagpur) 1.2
Tipo Pais Incidencia Pais Incidencia
de cancer 13

14. Un marcador de diagnóstico es el que indica la existencia de una neoplasia
o bien resulta de utilidad en la confirmación de un diagnóstico histopatológico
cáncer de testículo
no-seminoma
HCG
alfa-fetoproteína (á-FP)
Proteinograma
electroforetico
Test rápido para determinar cancer bucal en 24 h (Méjico)
?
14

15. Electroforesis bidimensional Microarray
Determinaciones a partir de la lesion
MARCADORES TUMORALES
15

16. Aislar mARN en dos
estadios del desarrollo,
cada muestra representa
todos los genes
expresados
En ese estadio
Convertir mARN en
cDNA con la
transcriptasa inversa,
usando dNTP
fluorescentes
Agregar los cDNA al
microarray, los
cDNA complementarios
se aparean
Cada mancha
fluorescente implica un
gen expresado en la
muestra
Microarray 16

17. España
17

18. 18

19. ¿Qué enfermedades se estudian?:
1. Degeneración macular relacionada con la edad
2. Asma
3. Fibrilación auricular
4. Cáncer colorrectal
5. Enfermedad arterial coronaria
6. Diabetes tipo 1
7. Diabetes tipo 2
8. Cancer de pulmón
9. Melanoma
10. Infarto de miocaridio
11. Obesidad
12. Enfermedad arterial periférica
13. Cáncer próstata (hombres)/cáncer de mama (mujeres)
14. Psoriasis
15. Artritis reumatoidea
16. Lupus eritematoso sistémico
17. Colitis ulcerosa
18. Enfermedad de Alzheimer de inicio tardío
19. Esclerosis lateral amiotrófica
20. Glaucoma por exfoliación de cristalino
21. Hipertensión
22. Leucemia linfocítica crónica
23. Esclerosis múltiple
24. Osteoartritis
Qué se mide actualmente?
Directoras
» Mariana Herrera Piñero Doctora en Ciencias
Biológicas
» Viviana Bernath Doctora en Ciencias Biológicas
http://www.zoigen.com/buy
Costo aprox 12000$
19

20. FUNCIONES:
Determinación del pronóstico (prognosis o perspectiva)
para ciertos cánceres
Detección de cáncer recurrente:
MARCADORES TUMORALES
CONVENCIONALES
Determinación de la eficacia del tratamiento del cáncer: Este
es el uso más importante si existe un marcador especifico para el cancer estudiado
20

21. o Que se presente solo en tejido tumoral y no en tejidos normales o
a causa de otra patologia
o Que tenga especificidad para organo determinado
o Que pueda detectarse cuando la carga tumoral es baja
o Que su concentracion en sangre u otros fluidos corporales tenga
relacion directa con la carga celular tumoral
Caracteristicas de un marcador ideal
El marcador tumoral circulante que más precozmente se eleva es la subunidad
beta de la gonadotrofina coriónica, que es detectable cuando el coriocarcinoma
que la origina consta de solamente un millón de células.
Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana
http://www.faba.org.ar/fabainforma/383/01-index.htm
21

22. Naturaleza quimica de los MT
Enzimas:
Ribonucleasa (ca de pancreas, mama, colon)
Fosfatasa acida (ca prostata)
Lactato deshidrogenasa (leucemias, linfomas)
PSA
Proteínas
Bence-Jones (cadenas livianas de Ig en orina,
mieloma multiple), IgM por electroforesis
Glicoproteinas
DNA
RNA
Hormonas
Lipidos??
22

23. Inmunizacion del raton
con Ag especifico
Linea celular mutante de tumor
de linfocitos B
Cel que fabrica
el anticuerpo
Cel que crecen indefinidamente
Fusion y plaqueo de productos
Secretante de anticuerpo
Analisis de sobrenadante para el anticuerpo
Multiplicacion y seleccion
de clones positivos para
el anticuerpo
Obtencion de anticuerpos monoclonales para usar en metodos de deteccion
Un fueguito, la historia de César Milstein
23

24. Respecto a muestra, tecnicas y otras yerbas..
-gran variabilidad de metodologia
Distinto tipo de muestra
Distinto rango y unidades
Distinta sensibilidad
Consultar tipo de muestras
Repetir el laboratorio
IDENTIFICACIÓN
•Células
•Tejidos
•Líquidos corporales
- Baja sensibilidad de marcadores
Pocos dan elevado en estadíos tempranos
24

25. - Baja especificidad de marcadores
Patologias benignas que mas comunmente puedan inducir elevaciones:
Cirrosis y otras hepatopatias
Insuficiencia renal
inflamacion
Determinaciones seriadas
Días
0 10 20 30 40 50 60 70
1
2
3
4
5
6
7
8
BENIGNO
CANCER
CANCER
BENIGNO
25

26. Usaría marcadores tumorales para diagnóstico?
26

27. PSA: (Antigeno prostatico especifico) VN < 4 ng/ml
Serin proteasa, con actividad parecida a la quimotripsina. La produce el epitelio glandular de la prostata.
Se libera en concentraciones elevadas en el fluido seminal. Se asocia a
En sangre: complejado con
libre (mas elevado en hipertrofia benigna)
Diagnostico junto con ecografia prostatica y tacto rectal
Para VN, si el PSA libre es > 25% la probabilidad de CA es baja
Enfermedades
(CA)
malignas
CA de prostata.
Ca de mama
Neoplasma de glandulas salivales,
periuretrales, anales, etc
Otras
Patologias
benignas
prostatitis,
hiperplasia benigna
Ejercicio energico en
bicicleta
Sensibilidad ~ 70-80%
Vida media ~ 2-3 dias
alfa-1 antiquimotripsina (PSA-ACT) * predominante en CA
alfa-2 macro-globulina (PSA-MG)
Velocidad de PSA : tasa de cambio en el PSA sérico en el tiempo.
0.75 ng /ml/ año con VN justifica estudios
PROSTATA
(oculto a la deteccion x Ac)
27

29. Sigue…
Sociedad argentina http://aaoc.org.ar/
29

30. FOSFATASA ACIDA PROSTATICA:
Enfermedades
malignas
Prostata
Ca testicular
Leucemia
Linfoma no Hodgkin
Otras
Patologias
benignas
Cirrosis
Enfermedad de Gaucher y Paget
Embolia Pulmonar
Osteoporosis
60-70% de pacientes con metastasis oseas
20% de pacientes sin metastasis pero extension al tejido blando
5% de carcinomas confinados a la glandula
Otros marcadores diagnosticos y pronosticos no habituales en cancer de prostata
Analisis inmunohistoquimicos con p53.
oncoproteina supresora de apoptosis bc12, moleculas de adhesion (cadherina –E, integrina
# Factor de crecimiento similar a Insulina (IGF-1)
30

31. Consenso AAOC
Enfermedades (CA) Gastrointestinales: Diagnóstico 31

32. CEA
Pancreas
Colorectal
prostata
Ovaricos
Mama
pulmon
Otras Patologias benignas
Enteritis
Hepatitis
Cirrosis
Insuficiencia renal
EPOC
(tabaquismo puede elevar ~ 2 veces)
CA 27-29
colon,
riñón,
Estómago
Pulmón
Páncreas
Útero
hígado
VN<2.5 ng/mL
Pancreas
Colorectal
gastrico
Hepaticos
Vias biliares
Ovario (mucinoso)
CA 19-9
Cirrosis
Hepatitis
Pancreatitis
Fibrosis quistica
Otro: CA 72-4 en especial en CA gástrico
Enfermedades (CA) Gastrointestinales (seguimiento)
32

33. Antígeno del tumor de la vejiga (ATV) aparece en orina, detecta proteinas de
membrana basal. Cualitativa
Sensibilidad 40% (mayor que la citologia).
NMP22. (proteina de mitosis Nuclear).
PDF (producto de degradacion de fibrina). Sirven para detectar recidiva.
Cancer vesical: hematuria, citologia, a veces piuria
pronosticos no habituales
Perdida de cadherina –E y sobreexpresion de Autocrine Motility Factor aumenta
capacidad invasiva
Sobre células exfoliadas u obtenidas por biopsia pueden
emplearse diversos marcadores como Lewis x y CEA.
Antioncogenes: p53 y pRb
Marcadores de proliferación: Ki-67 o PCNA
Oncogenes: ErbB2, myc, kras
VEGF
VEJIGA
33

34. TESTICULO
Tumores de celulas germinales (95 % de los tumores de test.)
Sensibilidad (ambas o alguna de ellas) 70 %
El nivel aumenta con el
tamaño del tumor.
ALFAFETOPROTEINA
Primario de Higado
(75%)
(hepatocelular)
ovaricos
Testicular (celulas
Germinales)
Pancreas
Otras
Patologias
benignas
Cirrosis (cribado cada 6 meses)
Hepatitis
GONADOTROFINA CORIONICA
ovaricos
Testicular (celulas
Germinales)
ciertos cánceres de mediastino
neoplasia trofoblástica del embarazo
Embarazo
34

35. Pronostico Otro marcador diagnostico y no habitual en ca de testiculo de celulas
germinales: Isocromosoma del brazo corto del cromosoma 12, 95% de los tumores
No seminomatosos
ALFAFETOPROTEINA
GONADOTROFINA CORIONICA
80%
Pronostico
excelente
menor de
AFP 1000 ug/L
B-hGC 5000 U/L
LDH 1,5 veces el nivel inferior
Seminomatosos
LDH
GONADOTROFINA CORIONICA
Gonzalez Hernandez (Ppios de Bioq y pat mol)
35

36. CA 125 (Ac OC125)
CEA
CA 15-3 (Ag MUC1)
Se emplean en el seguimiento de carcinoma ovarico epitelial invasivo.
1-2% de individuos normales
Enfermedades
(CA)
malignas
Ovario
Pancreas
Colon
Higado
Pulmon
mama
Otras
Patologias
benignas
Endometriosis
Inflamacion pelvica
Hepatitis
Pleuritis
CA de OVARIO
Embarazo
menstruacion
Otras
Situaciones
fisiologicas
36

37. CA 15-3,
27-29,
CEA
Destinados como ayuda en el tratamiento del Cancer de ovario y mama
(estadios II y III). Solo 10 % en estadio I. Lo mismo el MUC1 en estadios II y III
FDA las aprobo para detectar recidiva de Carcinoma mamario antes de los sintomas
(<9 meses)
Valor predictivo positivo 77%
“ “ negativo 90% con 49U/l
CA de mama
37

38. Receptores de estrógeno y receptores de progesterona: las muestras del
tumor de mama se someten a prueba para estos marcadores. Los positivos tienen
mejor pronostico y responden mejor a terapia hormonal como tamoxifeno o
inhibidores de la aromatasa.
En extractos de tumor
Her2-neu (c-erbB-2) receptor tirosina quinasa involucrado en el crecimiento
celular. Sobreexpresado en 15-30% de los CA de mama. Sirve como criterio de
agresividad en CA de mama. No se ha reportado marcador tumoral alguno que resulte útil
para la detección o diagnóstico en etapa inicial. En tejido (pero una porción se libera a suero
y puede estar elevado en plasma, se ve por ELISA
Mutaciones en los genes BRCA1 y BRCA2 genes se asocian con 85% de
tumores multiples de ovario y mama, pero solo un porcentaje bajo de familias
con tumores de ovario y menos de 5% de los casos de solo tumores de mama
genes supresores encargados de la reparacion del DNA
BRCA1 (~50% en CA mama hereditario) y BRCA2 (en CA de mama en Hombres).
J Mammary Gland Biol Neoplasia (2011) 16:17–25
Pronostico
Nueva York (Reuters) ~ El miembro
fundador de Kiss, Peter Criss, sabe que
muchos de sus admiradores se consideran
machos, por lo que se está tomando el
tiempo para contar que incluso los
rockeros como él pueden sufrir una
enfermedad usualmente asociada con las
mujeres: el cáncer de seno.
38

39. Hipersecresion monoclonal de Inmunoglobulinas:
macroglubilinemia
Mieloma multiple (deteccion de proteinas de Bence Jones en orina)
Beta-2-microglobulina (B2M): parece tener una función inmune importante. Se eleva
en:
Enfermedades
(CA)
malignas
mieloma múltiple,
leucemia linfocítica
crónica
algunos linfomas
Otras
enfermedades
benignas
disfunciones renales tubulares:
diálisis,
lesión renal de la hipertensión
del embarazo
detección precoz del rechazo
de transplante renal,
intoxicación con metales pesados,
alcoholismo crónico,
fármacos nefrotóxicos,
uropatía obstructiva
lepra.
Marcadores asociados a celulas del sistema inmune
LDH
39

40. CA de pulmon
Enolasa específica de las neuronas (NSE) para tumores neuroendocrinos como el cáncer de
pulmón de células pequeñas, el neuroblastoma y los tumores carcinoides.
Citoqueratinas (CYFRA 21-1): cáncer de pulmón de células no pequeñas
Fosfohexosa isomerasa: enzima glucolitica (gluc6-P a fruct-6-P). Eleva 72%, > en pacientes
con metastasis hepatica.
Calcitonina:
Eleva en el cáncer de las células C parafoliculares, llamado carcinoma medular
de la tiroides. Se usa para seguimiento en familiares de pacientes con CMT
Insulina: para insulinoma.
Otros marcadores
40

41. S-100:
melanoma (junto con el TA-90), en las celulas sospechosas. Los niveles sanguineos
aumentan en carcinomas metastasicos
Sintetizada por células del sistema nervioso puede aumentar en LCR y en sangre en ACV
Consenso AAOC
41

42. NOMBRE
CA 125 MARCADOR DE OVARIO
CA 15-3 MARCADOR DE MAMA
CA 19-9 MARCADOR PARA TUBO DIGESTIVO
CA 21-1 CYFRA (MARCADOR TUMORAL PULMON)
CA 72-4 (MARCADOR TUMORAL GASTRICO)
CA VEJIGA Ag-BTA
MARCADORES PRONOSTICOS DE LLC (CITOMETRIA DE FLUJO
Marcadores reconocidos por la Federación Bioquímica
de la PBsAs
Marcadores incorporados al PEEC (Programa de Evaluación Externa de
Calidad)
AFP, hCG, PSA y CEA.
Los laboratorios participantes completan una planilla de resultados, que deben
completar con el tipo de método y marca comercial utilizados en cada una de las
determinaciones.
La evaluación y tratamiento estadístico se realiza agrupando las respuestas por método
y marca comercial.
42

43. Caso clínico: Martín, de 43 años, intendente de una populosa ciudad del
conurbano, consulta por dolores en la zona inguinal, siendo diagnosticado con
cáncer de testículo. A los pocos días lo operaron, confirmando el diagnóstico e
iniciado el tratamiento (rayos y quimioterapia durante 90 días) a la brevedad.
1) Supone que el diagnóstico fue realizado midiendo niveles en sangre de alfa feto-
proteína o gonadotrofina coriónica?
2) De su historia clínica se observa que en este paciente nunca estuvo aumentada
la LDH. Coincide este dato con el estado actual del paciente?
Caso clínico: Antonio Gasollo, consulta por alteraciones sospechosas en
lunares del brazo. Ante su consulta, le comenta que tiene una profesión muy redi-
tuable durante varios meses, por lo que usa el invierno de Argentina para descansar
en una casa que adquirió en Miami, en donde hace abundante actividad al aire libre.
De una biopsia de dichos lunares detecta por inmunohistoquímica la proteína S-100.
Qué indicio da este hallazgo?

44. Caso Juan A. Badie
Paciente de unos 60 años, profesionalmente muy activo y con actitud generosa y
positiva ante la vida. Había consultado por astenia y pérdida de peso involuntario, con
tos seca y dificultad respiratoria de regular intensidad. Del estudio de rutina realizado
detectó hipercalcemia. Posteriormente por análisis de imágenes detecta tumor de
mediastino. Ahora solicita varios marcadores tumorales, a fin de apoyarse en la
evaluación del tratamiento. Ninguno de ellos da sensiblemente elevado. Suspende la
cirugía por falta especificidad?
2) A los 10 meses de la consulta inicial, y a pesar de la actitud colaborativa y positiva
del paciente, un nuevo análisis detecta incremento de la gonadotrofina coriónica y
elevación además de la LDH. En esta ocasión el paciente está anémico y ha perdido
peso. Considera esperable estos resultados?

45. Caso Tabaré Velazquez: 74 años, médico oncólogo, presidente de un país
latinoamericano, había consultado por tos seca y decaimiento generalizado a
pesar de su gran actividad intelectual yfísica. Por estudios de imágenes
detectan una mancha sospechosa en la base del pulmón. Se le realizó curva
de marcado Enolasa específica de las neuronas (NSE): el que siguió una
curva ascendente en los dos ultimos meses. Qué diagnóstico apoya este
estudio?

46. Caso Alberto: paciente de 65 años, oriundo de un pueblo del nordeste
santafesino. Consulta por malestar gastrointestinal a repetición. Se mudó a
La Plata porque su hija mayor se erradicó en esta ciudad y su estado de
salud no le permitía continuar trabajando en la curtiembre donde realizaba
distintas tareas de mantenimiento. Además su hijo menor enfermó de
leucemia y necesitó tratamiento urgente en un centro especializado. En los
estudios de laboratorio que trae desde el pueblo detecta ligera ictericia,
eritrosedimentación elevada y enzimas transaminasas 10 veces el valor
normal con una relación TGO/TGP de 3.4. Dada la No disponibilidad de
equipos para diagnóstico por imágenes derivaron una muestra de suero
para determinación de alfa feto proteína, la que dio 5 veces el valor normal.
Cómo interpreta este valor