Este documento presenta información sobre el estudio de la anemia en el laboratorio. El estudio inicial incluye un hemograma completo y lámina periférica para evaluar tamaño, color y forma de los eritrocitos. Las constantes corpusculares como el volumen corpuscular medio ayudan a clasificar la anemia. Los reticulocitos miden la producción eritrocítica. Pruebas adicionales como el test de Coombs buscan causas como hemólisis. Alteraciones en lámina como microcitos, macrocitos o fragmentocitos respaldan el diagn

1. DIPLOMADO EN HEMATOLOGÍA Y BANCO DE SANGRE
MÓDULO III (30 de Agosto de 2015)
CLASE 3

2. El laboratorio en el
estudio de la anemia
Juan Jorge Huamán Saavedra
Doctor en Medicina, Patólogo Clínico, Magister en Bioquímica
2015

3. Contenido
• Estudio inicial
• Estudios complementarios
• Constantes corpusculares
• Reticulocitos
• Lámina periférica. Alteraciones
• Test de Coombs

4. Cuestionario
• ¿Cuál es el perfil de laboratorio para el estudio inicial de una
anemia?
• ¿Cuál es la importancia de las constantes corpusculares en ele
estudio de la anemia?
• ¿Qué alteraciones de los eritrocitos conoce?
• ¿Qué son los reticulocitos y cómo los determina?
• ¿Qué es el test de Coombs?

5. Estudio inicial
1. Biometría hemática completa
A. Recuento eritrocítico
1. Hemoglobina
2. Hematocrito
3. Recuento de reticulocitos
B. Constantes corpusculares
1. Volumen Corpuscular Medio (VCM)
2. Hemoglobina corpuscular media(HCM)
3. Concentración media de hemoglobina corpuscular (CMHC)
4. Amplitud de la distribución eritrocitaria (RDW)

6. C. Indices leucocitarios
1. Recuento diferencial
2. Segmentación nuclear de neutrófilos
(lámina)
D. Recuento plaquetario
E. Morfología celular de serie roja( lámina)
1. Tamaño
2. Cromicidad
3. Forma. Poiquilocitosis
4. Policromasia

7. Estudios complementarios
• Pruebas dirigidas de acuerdo a resultados de perfil inicial
• Estudio para deficiencia de hierro: hierro sérico, capacidad
total de unión al hierro (TIBC) y ferritina sérica
• Estudio de médula ósea: Aspirado (morfología celular, tinción
de hierro, cociente M/E). Biopsia (celularidad y morfología).
• Estudio para hemólisis: test de Coombs, fragilidad osmótica,
electroforesis de hemoglobina.
• En anemia megaloblástica: determinación de vitamina B12 y
ácido fólico

8. Constantes corpusculares
• Volumen Corpuscular Medio (VCM)= (Hematocritox10)/Nº
de hematíes (millones). Valores normales: 90+- 8 fL
• Hemoglobina Corpuscular medio (HCM)= (Hemoglobinax10)/
Nº de hematíes (millones). Valores normales: 30+-3 pg
• Concentración de Hemoglobina corpuscular media (CHCM)=
(hemoglobinax10)/ hematocrito. VN: 33 +-2 % g/dl
• Amplitud de distribución eritrocitaria (RDW o ADE): indica
variación en tamaño de los glóbulos rojos. Valores normales:
13+-2 %. Anisocitosis: aumento de ADE

9. Volumen Corpuscular medio
• El volumen corpuscular medio: nos dará los valores del
volumen de los glóbulos rojos para así poder dividir a la
anemia en microcítica, normocítica o macrocítica.
• Ya hemos dicho que antes que será normocítica cuando
los niveles se encuentren entre 80 y 100 fl, que es el
volumen normal de los eritrocitos. Si se encuentran los
valores por encima se tratará de una anemia macrocítica
donde los hematíes son de un tamaño mayor, y si se
encuentran los valores por debajo, estaremos frente a
una anemia microcítica donde los hematíes son más
pequeños que los normales.

13. Hemoglobina Corpuscular
Media
• Hemoglobina corpuscular media: se refiere al valor
medio de hemoglobina que existe en cada eritrocito.
• Este valor va a dar como resultado la intensidad del color
de los eritrocitos ya que la hemoglobina es la que le
confiere su color rojo característico, siendo hipocrómicos
(más claros de lo normal) cuando los valores se
encuentran por debajo de 27 pg, o hipercrómicos (más
intensos que los normales) cuando los niveles se
encuentran por encima de los 32 pg.
• Los niveles entre los 27 y 32 pg serán normales que son
los que existen en los hematíes normocrómicos

14. ADE
• Amplitud de distribución eritrocitaria (ADE o RDW): Es la
amplitud de distribución eritrocitaria.
• Mide el grado de heterogeneidad en el tamaño de los
eritrocitos y es muy importante en el diagnóstico diferencial
de la anemia ferropénica y la talasemia

15. RETICULOCITOS
• Los reticulocitos son los glóbulos rojos jóvenes que contienen
restos de RNAm, que se precipita en presencia de ciertos
colorantes llamados vitales tales como el azul brillante de
cresilo y da lugar a imágenes puntiformes y filamentosas,
fácilmente visibles mediante el microscopio óptico,
• El número de reticulocitos es prácticamente un reflejo del
grado de actividad eritropoyética medular. Es utilizado en el
estudio de las anemias, incrementa en las anemias
hemolíticas y por sangrado, y como respuesta al tratamiento
en otros tipos de anemias

16. Reticulocitos

17. Reticulocitos
• Muestra: Sangre anticoagulada con EDTA
• Método:Manual o automatizado
• Material y reactivos:
• Azul brillante de cresilo 1%. Disolver 1 g de azul brillante de
cresilo en 100 ml de solución salina fisiológica (NaCl 0,9%),
añadir 0,4 de citrato de sodio, mezclar ben y filtrar para su
uso.
• Lámina portaobjetos
• Microscopio
• Cubeta de coloración
• Baño maría
• Tubo de vidrio
• Cronómetro

18. Reticulocitos
• ProcedimientO
• Colocar tres gotas de colorante filtrado en un tubo de
vidrio
• Añadir 4 gotas de sangre capilar o anticoagulada
• Mezclar bien e incubar a 12 minutos en baño maría a
37°
• Realizar frotices delgados en lámina y secar a
temperatura ambiente
• Observar 1000 glóbulos rojos con objetivo de
inmersión y contar los glóbulos rojos que contengan
gránulos o filamentos como redes de color azul oscuro
(reticulocitos)
• Determinar el % de los reticulocitOS

19. Reticulocitos
• Correcciones: Por anemia
• Recuento de reticulocitos corregido = % reticulocitos (Hb
paciente/Hb normal) ó % ret (Hto pac/Hto
normal)
• Se corrige porque el valor absoluto de reticulocitos puede ser el
mismo pero el porcentaje relativo aumenta al disminuir el número
de hematíes.
• Índice de producción de reticulocitos: valor anterior/2
• Esta última corrección se hace asumiendo que en la anemia los
reticulocitos tienen mayor vida media al ser liberados
prematuramente de la médula ósea. Se acepta que si el hematocrito
es 35 la vida media es de 1.5 días, si es de 25 es de 2 días y si es 15
es de 2.5 días, se ha tomado el valor de 2 por la mayor frecuencia.
Solo se hace cuando se observa policromasia o policromatofilia .

20. Reticulocitos
• Interpretación
• Alteraciones del de producción Aumento en anemias
hemolíticas y hemorragias, respuesta al tratamiento de
anemia. Por ejemplo en un hematocrito de 25 tendría valores
de reticulocitos sin corregir de 14 %, con la primera corrección
8 % y con la segunda corrección 4 %.
• Disminución: si el índice de producción es <2 la anemia se
debe a un defecto en la maduración o en la producción, como
la anemia por deficiencia de hierro, anemia megaloblástica o
en la anemia aplásica

21. LÁMINA PERIFÉRICA
• La muestra y procedimiento se ha señalado al referirse al
hemograma.
• Se estudia la morfología, cromicidad y tamaño de los
hematíes, y sus alteraciones como se señala más adelante.
• Si se observa aparentemente normal se informa la serie roja
como normocítica, normocrómica.
• También nos da información sobre la serie blanca y
megacariocítica.

22. Alteraciones de los glóbulos
rojos
• De acuerdo al tipo de anemia se encontrarán diversas
alteraciones de los glóbulos rojos en lámina periférica
• Alteraciones del tamaño
• Anisocitosis: tamaño diverso
• Macrocitos: hematíes grandes (VCM >100 fl), se observa en
las anemias megaloblásticas por deficiencia de ácido fólico o
vit B12, mielodisplasia, hepatopatía crónica.
• Microcitos: hematíes pequeños (VCM <80 fl), se encuentran
en la anemia ferropénica, talasemia, anemia de enfermedades
crónicas

23. Alteraciones de la coloración
(cromicidad)
• Anisocromia: hematíes con diversa cromicidad
• Hipocromía: disminución de la cromicidad, aumenta el halo
central, se encuentran en la anemia ferropénica, aunque no
son exclusivos (>1/3 diámetro)
• Hipercromía: aumento de la cromicidad, desaparece el halo
central, como en la esferocitosis
• Policromatofilia: hematíes con citoplasma basófilo por
persistencia del sistema reticular (reticulocitos). Se presenta
en casos de incremento de reticulocitos: anemias hemolíticas,
hemorragias, etc.

24. Alteraciones de la forma
• Acantocitos: hematíes con morfología especulada. Se
observan en hepatopatías. También en anemias hemolíticas
microangiopáticas, uremia, carcinomas, deficiencia de
piruvato cinasa
• Dacriocitos: hematíes con forma de lágrima. Frecuente en
cuadros de mielofibrosis, o mielopatía de otras etiologías
(ocupación tumoral de la médula ósea)

25. Alteraciones de la forma
• Dianocitos: hematíes con forma de tiro al blanco, también
llamados “target cell”. Aparecen en hemoglobinopatías
(talasemias, hemoglobina C), hepatopatías o anemia
ferropénica severa
• Drepanocitos: hematíes en forma de media luna o de banana,
por la presencia de hemoglobina S
• Fragmentocitos: hematíes fragmentados. Se observa en la
coagulación vascular diseminada, presencia de válvulas
cardiacas mecánicas, daño térmico.

26. • Microesferocitos: hematíes pequeños, esféricos, con
desaparición del halo central. Típicos de la esferocitosis
hereditaria (por defecto de membrana del hematíe), o
anemias hemolíticas autoinmunes
• Ovalocitos o eliptocitos: en la eliptocitosis hereditaria
• Poiquilocitos: presencia de diversas formas de hematíes,
inespecífico

27. Anisocitosis
Microcitos
Macrocitos Fragmentocitos