Este documento describe las propiedades generales de las bacterias de la familia Enterobacteriaceae. Explica que son bacilos gram negativos, anaerobios facultativos, que no forman esporas y son móviles gracias a flagelos peritricos. Además, contienen importantes antígenos de superficie como los antígenos O, H y K que son usados para su clasificación. Finalmente, señala que estas bacterias pueden sufrir variaciones fenotípicas en respuesta a cambios ambientales, así como variaciones gené
PRESENTACION DE LA SEMANA NUMERO 8 EN APLICACIONES DE INTERNET
Enterobacterias
1. Q.F.B. Telma Cerino Frias
Grado: 4to Grupo: B Turno: matutino
Integrantes:
Juan Gerardo Bautista Martínez (SUKE)
Carolina Cruz Cárdenas (UKE)
Karen Yoczely Cruz Cortes (SUKE)
Katherine Esqueda Ble (SEME)
Jaqueline Jesús León (UKE)
Karla Gpe Mijangos Arzat (SUKE)
Elisa Pérez de la Cruz (UKE)
Selena Pérez Pérez (SUKE)
Efrain Roman Ocaña (SEME)
2.
3. La más importante, es la familia Enterobacteriaceae,
formada por numerosas especies, muy grandes, gran
importancia clínica.
Hay 27 géneros y hasta 102 especies.
4. Bacilos Gram (−) anaerobios facultativos, de tamaño
moderado, extremos redondeados, móviles,
(flagelación
peritrica), no forman esporas y son catalasa (+) y
oxidasa (−), requerimientos nutricionales simples.
5. Los bacilos gram negativos que no forman esporas
constituyen un gran grupo de bacterias que incluye:
Comensales intestinales: Escherichia y proteus.
Patógenos entéricos: salmonella, shigella y algunas
cepas de Escherichia.
6. Patógenos de los tractos respiratorio y urinario:
klebsiella
Basilo de la peste: yersinia
Y una gran variedad de saprofitos y patógenos
vegetales
7. Los anaerobios facultativos constituyen el segmento
mayor de estos bastones gram negativos.
Este grupo esta formado por dos familias:
Enterobacteriaceae y vibrionaceae.
8. Las vibrionaceae son bacilos curvos rígidos, y
normalmente son móviles porque tiene flagelos
polares.
El objetivo son las Enterobacteriaceae o bacilos
entéricos, que se distinguen por la presencia habitual
de flagelos peritricos.
9. La mayor parte de estas bacterias se encuentran en el
intestino del hombre y de otros animales, en el que se
comportan como comensales de potencial patógeno
limitado.
A veces provocan diarreas, o con mucha menos
frecuencia, infecciones en los tejidos.
10. Algunas son saprofitas de vida libre en el suelo y en el
agua, y otras son patógenas para las plantas.
12. . En general, se reconoce que la subdivisión de las
Enterobacteriaceae en tribus, géneros y especies
convencionales, debe basarse en la relación genética,
especialmente en la integración interespecie de los
genes cromosómicos: en la similitud de la ordenación
de los genes en el cromosoma; en la química
comparada del genoma; y en la homología estructural
de proteínas específicas.
13. Las relaciones Taxonómicas de las Enterobacteriaceae
se basan en diferentes reacciones bioquímicas, en la
sensibilidad frente a bacteriófagos y en la hibridación
de DNA.
En el presente, la denominación de las subdivisiones
tribales no tiene una categoría formal, pero sirven para
aclarar las relaciones entre los géneros.
14. Escherichia E. collí
Escherichiae
Shigella S.Dysenteria
e
S.Flexneri
S.Boydii
S.sonnei
Edwardsiell E.tarda
Edwardsielleae a
S.cholerasuis.
S.Typhi
S.Enteritidis
Salmonella
Salmonelleae Arizona A.hinshawii
Cirobacter C.Freundii
C.Diversus
C.amalonoticus
16. Proteus P.Miriabilis
P.vulgaris
Proteeae Providentia P.Rettgeri
P.Stuartii
P.alcaliquifacien
s
Morganella M. morganii
Erwinieae Erwinia
17.
18. En este pequeño bloque examinaremos algunas de
las propiedades que tiene en común los bacilos
entérico, como lo son:
Morfología
Estructura Bioquímica
Composición antigénica
19. Las bacterias entéricas son:
Bacilos aerobios, anaerobios facultativos.
Gram(-).
No esporulados.
Algunas forman capsulas(klesiella).
Algunas forman cepas de Enterobacter y Serratia.
La mayoría son móviles por flagelos peritricos.
Shigella, Klebsiella y Yersinia no son móviles.
20. Productoras de Fimbrias(Escherichia,
Klebsiella, Proteus, Salmonella y Shigella)
Su tamaño característico oscila de
1.0a1.5 x 2.0a6.0um.
Al igual que sus formas estas varían,
Proteus : evidencia de filamentos,
Esferoplastos y otras formas aberrantes.
Yersinia : forma cocoide u oval siendo la mas
pequeña del grupo.
21. La Morfología de las Colonias de todas las Bacterias
entéricas son muy similares.
En medios bacteriológicos ordinarios, las colonias
suelen ser:
Lisas, húmedas y Brillantes
Color Gris
En ocasiones observaremos colonias rugosas,
secas, friables y no se emulsionan fácilmente en
solución salina
22. La presencia de capsulas o de mucilago flacilago se
refleja en general en colonias con formas de cúpula
de consistencia mocoide y viscosa
Algunas Cepas son hemoliticas en agar sangre
(Escherichia y proteus)
Produccion de Pigmentos, rojos en condiciones de
crecimiento (Serratina).
Produccion de Pigmentos, desde cremoso a
amarillento en condiciones de crecimiento
(Erwinia).
23.
24. Entre las Enterobacteriaceae la designación de género
y, en muchos casos, de las especies se basa sobre todo
en parámetros bioquímicos.
La diferenciación más precisa, en categorías
específicas en algunos casos y en serogrupos,
serotipos, y variedades, depende de reacciones
serológicas que detectan antígenos de superficie.
25. Estos antígenos pertenecen a tres clases principales:
Antígenos O somáticos.
Antígenos H flagelares.
Antígenos K de la envuelta o capsulares.
26.
27. Los antígenos O somáticos son lipopolisacaricos
termoestables comunes en todas las bacterias lisas
gramnegativas. Están presentes en la membrana
externa y son responsables de la actividad endotoxina
relacionada con las bacterias gramnegativas.
28. La reacciones de los antígenos O se superficie con
anticuerpos homólogos tienen como resultado la
aglutinación de las células bacterianas, produciendo
agregados celulares muy adherentes, que aparecen
macroscópicamente como gránulos finos, los cuales se
depositan rápidamente en la suspensión.
29. La variación de la forma colonial desde lisa a rugosa
(variación S-R) está acompañada por una perdida
progresiva de antígeno O liso y por ultimo, se
produce una cepa bacteriana rugosa (R) cuyo
lipopolisacarido carece de las cadenas laterales O-
especificas y solo retienen la estructura basal del
núcleo. Por lo tanto las cepas rugosas no reaccionen
con anticuerpos O-específicos.
30.
31. Los flagelos de las bacterias móviles poseen proteínas
especificas serológicamente (flagelinas) las cuales, a
diferencia de los antígenos O, son termolábiles y se
destruyen con etanol. Cuando estas bacterias móviles
se hacen reaccionar con anticuerpos antiflagelares
específicos, la observación microscópica revela la
existencia de una asociación débil de muchas células
con enmarañamiento y entrelazamiento de sus
flagelos.
32. La terminología de los antígenos H y O surgen del
hecho de que las bacterias móviles crecen con
frecuencia como una película delgada en medios
húmedos. Los investigadores alemanes llamaron
Hauch a esta película (puff o film); las cepas móviles y
sus antígenos flagelares se denominaron H. Las cepas
que crecen como colonias discretas en medios
húmedos (Ohne Hauch, sin nube o película) no son
móviles y se denominan O.
33. Las bacterias móviles pueden perder su capacidad
para producir flagelos, aunque aún retienen su
especificidad para el antígeno O. Esto se conoce como
variación OH-O.
34.
35. Los antígenos K aparecen en las Enterobacteriaceae
como capsulas, o como antígenos de la envuelta,
que cubren los antígenos O de superficie. Debido a
esto, los antígenos K bloquean la aglutinación
producida por los anticuerpos O-específicos.
Generalmente los antígenos de esta clase son
polisacáridos y su capacidad de reacción suele ser
alterada por el calor, de modo que un tratamiento de
este tipo producen cepas aglutinables con antisueros
O.
36. La terminología de antígeno K, varia un poco en los
distintos géneros.. En las pocas Salmonella que poseen
antígeno K, se denomina antígeno Vi. Por lo general,
los antígenos K de Escherichia son polisacáridos, pero
en algunos casos, están compuestos por proteínas y
aparecen como fimbrias en la superficie celular.
37. Es una sustancia hapténica También denominada
antígeno de Kunin.
38. Están localizados en la
membrana externa de la envoltura celular
bacteriana y juegan un papel muy importante en
la patogénesis de las infecciones bacterianas,
así como en la interacción con el hospedero
Figura 1.
unión del
hepteno
39. Es inmunogenico; sin embargo en la mayoría de las
bacterias entéricas se encuentran de forma libre.
Figura 2. Anticuerpos
41. anticuerpo
antígeno
Los anticuerpos contra ECA
Pueden detectarse en el suero
humano
42.
43. Junto con otras bacterias Gram-
negativas, las enterobacteriaceae
contienen varias proteínas importantes
en la membrana externa. Estas proteínas
son antigénicas y contribuyen al mosaico
antigénico de las enterobacterias.
44. Un antígeno es una sustancia que desencadena la
formación de anticuerpos y puede causar una
respuesta inmunitaria. Los antígenos son usualmente
proteínas o polisacáridos. Esto incluye partes de
bacterias (cápsula, pared celular, flagelos, fimbrias, y
toxinas), de virus y otros microorganismos. Los lípidos y
ácidos nucleicos son antigénicos únicamente cuando se
combinan con proteínas y polisacáridos
45. . Los antígenos no-microbianos exógenos (ajenos al
individuo) pueden incluir polen, clara de huevo, y
proteínas de tejidos y órganos trasplantados, o proteínas
en la superficie de glóbulos rojos transfundidos.
46. Hay una considerable capacidad de reacción serológicas
cruzadas entre las proteínas principales de las
membranas externas que pertenecen a cepas
relacionadas.
Scherichia Coli.
47. Además de las proteínas principales de la membrana
externa, las enterobacteriaceae parecen poseer un
antígeno lipoproteico común. Esta lipoproteína se
encuentra en la cara interna de la membrana externa, y
esta unida al peptidoglucano de la pared celular y
probablemente tiene algún papel en la estructura y
organización de la pared celular.
48. Los anticuerpos contra esta lipoproteina se producen
en un numero importante de los individuos que
padecen infecciones sistemáticas por enterobacterias.
49. Una toxina es una sustancia venenosa producida por
células vivas u organismos, como animales, plantas,
bacterias y otros organismos biológicos; Para destacar
su origen orgánico, se habla a veces también de
biotoxina. Sustancias artificiales, creadas por procesos
artificiales.
50.
51. Las bacterias poseen un genotipo que
transmiten por herencia y un fenotipo
que depende de las circunstancias que les
rodean. Las bacterias sufren variaciones
en sus caracteres y son de dos
tipos; fenotípicas o
adaptaciones y genotípicas
52. VARIACIONES FENOTÍPICAS O
ADAPTACIONES
•Se producen por la presión ambiental
sobre las bacterias, pero no afecta al
genoma.
•Son de alta frecuencia. Afectan a toda
la población bacteriana sometida a la
modificación ambiental.
53. •Son reversibles ; cuando cesa la
causa, retornan al estado primitivo.
•No son hereditarias, porque no se
modifica el ADN.
54. • Morfológicas; Bacilos cortos y móviles se
convierten en bacilos largos e inmóviles
debido al agotamiento de nutrientes).
• Cromógenas.
• Enzimáticas; algunas bacterias producen
enzimas en presencia de determinados
sustratos, por ejemplo, penicinilasa en
presencia de penicilina.
55. •Patogénicas; Bacterias que producen
toxinas según el ambiente en el que
crecen. así Corynebacterium sólo lo hace
si dispone de hierro en el medio.
•Sensibilidad a antibióticos; hay bacterias
que son sensibles en determinadas
condiciones pero no lo serán en otras.
56. La variabilidad genética es
interesante desde el punto de
vista de que muchas de estos
cambios genéticos aportan
resistencia a estas bacterias a
ciertos medios, antibióticos.
57. Mutación; cambio transmisible en el
genoma bacteriano, que es transmisible.
Estas mutaciones pueden ser puntuales y
suficientes para dar lugar, por ejemplo, a
una resistencia por el cambio en la
transducción de un proteína.
58. Pueden ser mutaciones de segmentos
del DNA, sustituciones de
nucleótidos, y microinserciones, o
por el contrario provocar alteraciones
en regiones más grandes (inserciones
y selecciones).
59.
60. •Las bacterias se transmiten material
genético a través de DNA libre en el medio,
elementos episomiales.
•La bacteria receptora tiene mecanismos
para captar el DNA a través de sus envolturas
externas e introducirlo en su cromosoma.
•Los genes intracrosomales se recombinan
dando lugar a genes mosaico.
61. •Se produce cuando dos bacterias tienen
contacto entre ellas para intercambiar
material genético.
Así se transmiten plásmidos, y otros
elementos.
62. •Durante la conjugación las bacterias
donadoras poseen una estructura, conocida
como '' pili'' en gram negativos, lo cual hace
contacto con la célula receptora.
•Pasa una cadena de los plásmidos a la
bacteria receptora quedando una en la
bacteria donadora.
65. •Transferencia de información genética de
una célula a otra a través de un virus.
•Estos virus se denominan bacteriófagos o
fagos.
•Penetran las membranas y la pared celular
de la bacteria para inyectarle su material
genético.
66. Durante la replicación del fago, éste puede
llevarse material genético de la bacteria
huésped, tanto plásmidos como material
cromosómico. Luego salen de la bacteria, e
infectan a otras, a las cuales les transmite e
integran el DNA que llevan.
67.
68. Es un proceso relativamente complejo, y se realiza de un
modo as adecuado en los laboratorios clínicos que poseen
personal cualificado y experto.
69. Recogida de muestras
Se pueden encontrar bacilos entericos e heces, orina,
abscesos,sangre heridas, esputos, y fluidos corporales
Deberan recogerse con cuidado para evitar la
contaminacion exogena
Trasportarse rapidamente y ser cultivadas
Se pueden refrigerar durante cortos periodos de
tiempo
70. Aislamiento
La selección de un medio de aislamiento apropiado
depende del numero y la clase de bacilos entericos
El grado y tipo de contaminacion
Contienen un gran numero de microorganismos
contaminantes
71. Medios de aislamiento Medios de enriquesimiento
No selectivos
Nutrientes o infusion de agar Caldo GNC(gramnegativas)
Agar sangre Caldo de tetrationato
No selectivo diferencial Caldo de tetrationato-verde
Agar lactosa con indicador
brillante
Poco selectivos, diferenciales
Agar eosina-azul de metileno
Caldo de seleita F
Agar macConckey
Agar desoxicolato
Moderadamente selectivos dife
Renciales
Agar salmonella-shigella
Agar desoxicolato-citrato
Agar hektoen-enterico
Agar xilosa-lisina desoxicolato
Muy selectivos
Agar sulfito de bismuto
Agar verde brillante
72. Las enterobacterias son Gram negativas y contienen más
de 30 géneros y más de 100 especies que pueden tener
morfología de bacilos o cocos. Los miembros de esta
familia forman parte de la microbiota del intestino
(llamados coliformes) y de otros órganos del ser humano
y de otras especies animales. Algunas especies pueden
vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos.
.
73. Para cultivarlas se hace sembrado en forma de estría,
se cultiva a 37º C de 18-24hrs, para posteriormente
refrigerar.
74. Para obtener un cultivo axénico:
(a)esterilizar un asa de siembra por flameado en la llama
de un mechero,
(b) (b) introducirla en la suspensión bacteriana para
recoger una muestra,
(c)(c) sembrar haciendo estrías sobre la superficie de un
medio sólido en una placa Petri, y
75. (d) volver a esterilizar el asa, tocar en la zona de la placa
ya sembrada y hacer un segundo grupo de estrías en
una región nueva de la placa. Repetir el proceso una
tercera y una cuarta vez, hasta conseguir que los
grupos de células se diluyan y se separen células
aisladas.
(e) Después de la incubación, se desarrollan colonias
aisladas. Para estar seguro de que el cultivo es puro,
repetir el proceso entero; para ello tomar una
colonia aislada y sembrar por estrías una segunda
placa.
76.
77. Prueba de la Oxidasa
El objetivo de la prueba “Oxidasa” es buscar la presencia de
la enzima Citocromo C oxidasa.
Procedimiento:
Con un pequeño papel de filtro añadimos reactivo de
Kovacs, lo impregnamos y a partir del tubo con la bacteria
problema tomamos un poco con el asa de platino y
ponemos en el papel. Tras unos 30 segundos, observamos
si ha ocurrido algún cambio.
78. Las bacterias que dan positivo a esta prueba tienen
generalmente un ciclo respiratorio oxidativo.
Se considera positva esta prueba cuando toma un
color púrpura la muestra
80. El Objetivo es buscar la presencia de la enzima catalasa
Prodecimiento:
Agregamos aproximadamente 5 ml. de peróxido de
hidrógeno al 3% a un tubo de ensayo previamente
esterilizado a continuacion tomamos una muestra de la
cepa del microorganismo a estudiar y la introducimos por
el tubo de ensayo, la muestra solamente debe acercrse a la
muestra de la solucion liíquida de peróxido de hidrogeno y
debemos observar la reacción de esta.
81. La prueba se considera como positiva si observamos
burbujas de oxígeno
Resultados:
(+) Staphylococcus aureus
( - ) Streptococcus spp.
82. La coagulasa es un enzima capaz de desnaturalizar la
bibrina del plasma. El objetivo es buscar en factor de
aglutinación de los microorganismos cuando estos se
mezclan con el plasma. Esta prueba se utiliza para
diferenciar microorganismos del
generoStaphylococcus.
83. Preparamos una mezcla de 0,1 ml. de CCC (caldo
cerebro corazon) y 0,3 ml. de plasma de conejo en un
tubo de ensayo previamente esterilizado. La muestra
ya contiene cepas de St. Aureus. Tapamos el tubo de
ensayo con algodón hidrofílico y lo llevamos a baño
María a 37° C durante una hora, observando la
muestra cada 15 minutos. Al completar la hora,
sacamos las muestras y observamos sus resultados.
84. Estratificaremos los resultados en 4 distintos niveles:
1: pequeños coágulos no organizados
2: pequeños coágulos organizados
3: gran coágulo organizado
4: todo el contenido aparece coagulado y se mantiene
cuando invierte el tubo.
Se consideran positivos los niveles 3 y 4.
(+) Staphylococcus aureus
( - ) Staphylococcus epidermis.