Este documento describe un procedimiento para determinar la concentración de proteínas totales en suero a través de una reacción colorimétrica. Se extrae sangre de un paciente y se separa el suero mediante centrifugación. Luego se pipetean muestras de suero y un estándar conocido en tubos con un reactivo, y se incuban para formar un complejo de color azul. La absorbancia de la muestra se compara con la del estándar para calcular la concentración de proteínas totales en g/dL en el suero del paciente.

1. SEPDGETISEMS
CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de servicios N° 107
TUXTEPEC OAXACA.
NOMBRE DEL ALUMNO: ÁUREA AÍDA AGUILAR FELIPE
CATEDRÁTICO:I.B.Q. MARIA DE JESUS ROBLES ORTEGA
SUBMÓDULO PROFESIONAL: APLICAR TECNICAS DE VALORACIONMETABOLICAS
PRACTICA:
DETERMINACION CUANTITATIVA COLORIMETRICA
DE PROTEÍNAS TOTALES EN SUERO
SEMESTRE: 6° GRUPO: “AL”
FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_
CALIFICACIÓN Y OBSERVACIONES: _____________________________________

2. INTRODUCCION
Las moléculas de Proteínas contienen un gran número de péptidos unidos. Cuando se
tratan con iones de cobre (Cu2+) ensolución alcalina, se forma un complejo coloreado
entre el cobre ylos grupos amino/carbonil de estos péptidos. Una reacción igualocurre con
el Biuret (compuestos más simples formados por elcalentamiento de la urea). Así fue
adoptado el término de“Reacción de Biuret”
El método descrito está basado en los reportes deWeischselbaum y Gornal et al. El color
violeta desarrolladoes directamente proporcional al número de enlaces peptidicosde las
proteínas e independiente de la concentración relativade albúmina y globulina.
OBJETIVO
Determinar la concentración de nitrógeno presente en la muestra para luego ser
transformado a través de un factor en proteína.
PROCEDIMIENTO
1. Extraer 5ml de sangre sin anticoagulante
2. centrifugar a 2500 r.p.m. durante 5 min.
3. Separar el suero en un nuevo tubo debidamente rotulado y llevar a centrifugar a 2500
r.p.m. por 3 minutos.
4. Observar si hay un botón eritrocitario, si lo hay, vaciar el suero a otro tubo ya
rotulado, sin desprender el botón, y obtenernos suero libre de células.
5. Pipetear en tubos.
Reactivo
Blanco (RB)
Estándar (S) Muestra(U)
Reactivo 2.0ml 2.0ml 2.0ml
Estándar 20µl
Muestra 20µl
6. Dejar los tubos incubando por lo menos 5 minutos a 37°C o a temperatura ambiente
por 10 minutos.
7. Leer el estándar y muestra contra RB a 500-505nm en el transcurso de una hora.

3. INTERPRETACION
Reactivo proteínas: Color Azul Claro
Reactivo con suero e incubación: color azul un poco más
denso
CALCULOS
Los valores se derivan de la siguiente ecuación:
Proteínas Totales séricas (g/dL) = AM x (10)
AE
Donde AM y AE son los valores de las absorbancias de la muestra y el estándar
respectivamente y 10 g/dL es la concentración del estándar.

4. SEP DGETISEMS
Tuxtepec, OAX.
APLICAR TÉCNICAS DE VALORACIÓN METABOLICAS
PRÁCTICA
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA-COLORIMETRICA
DE PROTEÍNAS TOTALES EN SUERO
NOMBRE DEL PACIENTE:GARDOZO VARGAS EMMANUEL
SEXO:M EDAD:18 AÑOS FECHA:01/04/11 HORA:9:40AM
REPORTE
RESULTADOS:
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OBSERVACIONES:
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ANALISTA:
AUREA AIDA AGUILAR FELIPE 6°“AL”
VALORES DE REFERENCIA
Suero o plasma:
6.6 a 8.3 g/dL.