El documento trata sobre el acido úrico, su metabolismo, métodos de medición y el procedimiento EAGLE (TPTZ) para medir los niveles de ácido úrico en suero sanguíneo. El procedimiento EAGLE utiliza la reducción de iones férricos por el ácido úrico para formar un complejo de color azul que se mide a 590 nm. Se toman 0.002 mL de muestra y 2 mL de reactivo férrico amortiguado, se incuba y se mide la absorción para calcular la concentración de á

1. Acido Úrico
Introducción
El acido úrico del suero es el producto final del metabolismo de las purinas en los tejidos y es eliminado
a través de los riñones por filtración celular. Altos niveles de Acido urico son el resultado de
enfermedades como Leucemia, Polistemia, la ingestión de comidas ricas en nucleoproteínas o cuando la
función renal está deteriorada.
La gota resulta del depósito de Acido Úrico en las articulaciones.
El acido úrico ha sido ensayado por una variedad de procedimientos incluyendo la reducción del acido
fosfotungstico, y por la edición directa a 293 nm antes y después del tratamiento con uricasa. Los
productos del reactivode uricasa han sido usados también como base para las determinaciones del acido
úrico. El método del acido fosfotungstico carece de especificidad y los procedimientos de uricasa son
laboriosos e insensibles.
El procedimiento EAGLE (TPTZ) de acido urico emplea el método de reducción férrica propuesto por
Morin. Este método ofrece una determinación sensible y rápida del acido úrico en la cual la interferencia
es mínima.
Fundamento
Una mole de acido urico reduce cuatro moles de iones ferricos a la forma ferrosa, 2, 4, 6-tripyridyl –
triazine (TPTZ) reacciona con los iones ferrosos para formar un complejo en color azul el cual absorbe
fuertemente a 590 nm.
Reactivos
Reactivo amortiguado – ferrico
0.66 mM iones ferricos en acetatto amortiguado (pH=4.65) Incluye estabilizadores
Reactivo TPTZ
12.0 mM TPTZ en metanol, incluye estabilizador.
Calibrador de acido urico ATPZ
10 g/dL Acido urico Estabilizador y preservativo incluidos.
Muestra
Suero sanguíneo no hemolizado
Procedimiento
Material

2. Reactivo TPTZ
Calibrador Acido urico
Micropipeta 0.02 mL.
Pipeta o dosificador 2.00 mL.
Condiciones de la reacción
Longitud de onda 590 nm
Selección de filtro 580 – 610 nm
Tipo de reacción Punto final
Tiempo de incubación 15 min a 25 grados C
Temperatura de incubación 10 min a 37 grados C
Volumen de la muestra 0.002 L
Volumen del reactivo 2.00 mL
Volumen total 2.02 mL
Normal bajo 2.02 mL
Normal alto 7.0 mg/dL
Valor de calibrador 10.0 mg/dL
Técnica
1. Coloque 2.00 mL del Reactivo en función en tubos etiquetados: Blanco de Reactivos, calibrador,
control, muestra 1, etc.
2. Colque 0.002 mL de la muestra en un tubo debidamente etiquetado. Use agua desionizada
como muestra para el Blanco de reactivo. Mezcle bien.
3. Permita a las muestras de la prueba estar a temperatura ambiente por 15 min. (o 10 min a 37 C)
4. Ajuste el instrumento a cero de absorción a 590 nm usando el Blanco del reactivo.
5. Lea y registre los valores de absorción para el calibrador, control y desconocidos.
Calculo de resultados
La siguiente ecuación es usada para determinar la concentración de la muestra desconocida:
퐶표푛.퐷푒푠푐 (
푚푔
푑퐿
) =
퐴푏푠.퐷푒푠푐.
퐴푏푠. 퐶푎푙.
푚푔
푑퐿
푥 퐶푎푙. 퐶표푛푐. (
)
Valores esperados
Hombres 3.0 – 7.0 mg/dL
Mujeres 2.2 – 6.2 mg/dL