Este documento describe los métodos analíticos para la determinación y caracterización de la cafeína utilizando cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC). Explica la preparación de la muestra de café y la extracción de la cafeína mediante reflujo con agua y cloroformo. Finalmente, la cafeína se purifica disolviéndola en acetona y éter de petróleo y secándola a temperatura ambiente.

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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
Calidad, Pertinencia y Calidez
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
ANÁLISIS DE MEDICAMENTO
Diario de Campo # 22
Estudiante: Wilmer Andrés López Pinta.
Docente: Bioq. Farm. Carlos Alberto García González, Ms.
Fecha: martes, 25 de julio de 2018. Curso: 9no Semestre “A”
MÉTODOS ANALÍTICOS PARA LA DETERMINACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE LA CAFEÍNA
POR HPLC
La cafeína es un alcaloide
del grupo de las xantinas,
que actúa como droga
estimulante y psicoactiva.
Se encuentra en muchas
especies de plantas como
el té, guaraná, mate,
cacao y refrescos de cola,
entre otras.
Para elegir una técnica de
separción de la cafeína,
además de tener en
cuenta los criterios
económicos y de
accesibilidad, hay que
atender a dos tipos de
consideraciones:
Una tiene que ver con las
propiedades físicas y
estructurales de las
moléculas que se
pretende separar, otras se
derivan de los objetivos
de análisis( sensibilidad,
tiempo de análisis,
necesidad de una
detección específica).

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• El método de selección incluye los pasos necesarios para la
obtención, preparación y posible fraccionamiento de la muestra,
la aplicación de la técnica analítica adecuada y el tratamiento de
las datos obtenidos.
• Las técnicas análiticas más empleadas en la actualidad pueden
englobarse en dos grandes grupos: técnicas de separación y
técnicas espectroscópicas.
• La cromatografía no solo permite la separación de los
componentes de una mezcla, sino también su identificación y
cuantificación. El detector, situado al final de la columna es el
que garantiza la respuesta de los componentes que se separan.
La determinación de la cafeína se suele llevar a cabo mediante
técnicas de separación como HPLC (Cromatografía Líquida de ALta
Eficiencia), EC (Electroforesis Capilar), TLC (Cromatografía de Capa
Fina) o GC(Cromatografía de gases.
Estos métodos realizan la detección mediante técnicas
electroquímicas (potenciométricas, conductimétricas,
amperométricas, etc), ópticas (espectrofotométricas,
fluorométricas, etc), y otras (termoquímicas).
La elección de una u otra técnica depende del problema a resolver,
del volumen de muetra y de su concentración.

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PREPARACIÓN DE
LA MUESTRA
PATRÓN
Se ha preparado la
disolución patrón de
cafeína, a partir de
40 mg de cafeína
Previamente secada
se disuelven, en
matraz aforado de
100 ml, en agua
Milli-Q
Se traspasa con
pipeta aforada, 10
ml de esta
disolución a otro
matraz aforado de
100 ml.
Y si lleva a enrase
con la misma agua
Milli - Q (40 ppm).
Tipos de
Café
Tueste
natural
Mezcla
Descafeinado
natural
Descafeinado
mezcla
Soluble
natural
Soluble
natural
descafeinado

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Método de extracción de
cafeína utilizado
Equipos: Unidad de
purificación de agua
para laboratorios ELGA
Balanza Analítica
Mettler
Manta Calefactora
Selecta
Método de extracción de
cafeína utilizado
Reactivos: Cafeína,
sulfato de sodio
anhidro, carbonato de
sodio anhidro
Cloroformo , Acetona,
Etér de Petróleo, Agua
Milli-Q, Muestra de café
Se pesan 100 g
de café y se
ponen a reflujo
con 200 ml de
Agua Milli,
dutante 15
minutos.
PREPARACIÓN DE LA
MUESTRA DE CAFÉ
Se filtra la
soulción al
vacío en
caliente y se
añaden 5 g de
Na2CO3 hasta la
total disolución
PREPARACIÓN DE LA
MUESTRA DE CAFÉ
Se deja enfriar
y se agregan
15 ml de
cloroformo,
repitiendo este
procedimiento
una vez mñas.
PREPARACIÓN DE LA
MUESTRA DE CAFÉ

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BIBLIOGRAFÍA
❖ GARCIA CARLOS. Control de Calidad de los Medicamentos volumen I y II Ecuador
Ediciones UTMACH 2015.
❖ USP 34.2011. The United States pharmacopeia NF 29. The national formulary.
EEUU.V.1 (1713p.) v. 2 (1525p.) v3 (1395 p.)
❖ VILA JATO ed. Tecnología farmacéutica. Vol. I y 2. España. Ed. Síntesis. 2009. España
v. 1 (625 p.) v. 2 (591 p.)
FIRMA DEL ESTUDIANTE
Wilmer Andrés López Pinta
C.I. 1310695729
Finalmente, se introducen los criatales en una cápsula de porcelana, previamente
tarada, y se dejan secar a temperatura ambiente. Posteriormente, se pesa la cápsula
de porcelana con los cristales de cafeína para poder tener el rendimiento.
Una vez eliminado el cloroformo, se disuelve la cafeína en acetona, calentando y
añadiendo gota a gota éter de petróleo con lo que se oberva una ligera turbidez. Se
deja secar a temperatura ambiente, hasta que se vean los cristales de cafeína
purificada y se filtran al vacío.
En una matraz de fondo redondo se introducen las dos fases orgánicas recolectadas
de als dos extracciones anteriores. Se añaden pequeñas cantidades de Na2SO4 para
absorver el agua y se deja evaporar hasta sequedad.