UNEFM, Medicina Veterinaria, Histología y Embriología Veterinaria, Guía de histotecnia

1. HISTOTECNIA
Conjuntode técnicasa travésde loscualesse procesanlostejidos,yque nospermitenobtener
finalmenteunamuestraconla que vamosa realizarel estudio. Entre estastécnicastenemosa
la:
 TECNICA DE INCLUSION EN PARAFINA:
Pasosa cumplir:
 Toma de Muestra (tamaño: 0,5 a 1 cm)
 Fijación (tipos de fijadores: físicos y químicos, y el utilizado en esta técnica es un
fijador químico como lo es el Formol al 10%)
 Deshidratación (Alcohol en forma creciente)
 Diafanizaciónó Aclaramiento (usodel Xilol:sustanciaque escompatiblecon el alcohol
y la parafina, mas no es compatible con el agua y al haber mala deshidratación esta
cambiade aspectoy se torna de color blancolechoso,de allílaimportancia de realizar
una buena deshidratación para que al colocar la muestra en xilol, esta se mantenga
transparente y el proceso no se arruine, saliendo así el alcohol de la muestra y
entrando el xilol en ella)
 InclusiónenParafina:usode laparafinasemidura;yusode laEstufa (aparatoutilizado
para derretir la parafina, a una temperatura entre 53 a 58 ºC)
 Formación del Bloque de Parafina: uso del Dispensador de parafina y las barras de
Leuckard (estas se utilizan como molde para formar el bloque)
 Corte del Bloque:usodel Microtomo(equipoutilizadopararealizarloscortesentre 5 a
8 micrometros) yel Bañode María (auna temperatura entre 45 a 48 ºC para distender
la muestra)
 Coloración de la muestra (uso de dos colorantes: HEMATOXILINA Y EOSINA)
La coloración es cruzada, y va a depender de los pH
- HEMATOXILINA (pH básico y de color azul) colorea al: Núcleo en la célula (pH ácido)
- EOSINA (pHácido y de color rosado) colorea al: Citoplasma en la célula (pH básico)
NOTA: Antes de colorear debemos DESPARAFINAR (con Xilol) e HIDRATAR (con
Alcohol de forma decreciente), y la razón es porque los colorantes se deben preparar
con agua y la muestra contieneparafina y el agua con la parafina no son compatibles,
lo que haría imposible la entrada de los colorantes a la muestra. Posterior a la
coloración de debe:
 Deshidratar (con alcohol en forma creciente, para que así la muestra no quede con
agua y perdure por muchos años sin dañarse)
 Montaje (para ellose usael pegamento “Martex de Canadá” y la lámina cubreobjeto)