El documento resume los mecanismos de citotoxicidad mediados por gránulos en células T citotóxicas y células NK. Estos incluyen la liberación de perforinas y granzimas que inducen apoptosis caspasa-dependiente e independiente, así como daño a la membrana mediado por granulisina. Se describe específicamente que la granzima M induce una forma única de muerte celular perforina-dependiente que causa daño mitocondrial sin fragmentación del ADN.

1. Citotoxicidad mediada por
gránulos. Nuevas armas en el
arsenal
Judy Lieberman
Nature Reviews Immunology March 2003

2. Muerte celular e inmunidad
 CTL y NK son el arma efectora de eliminación
de células infectadas.
 Utilizan los mismos mecanismos.
 Liberación de gránulos citolíticos: Virus , patógenos
intracelulares y tumores
 Activación de receptores de muerte. (TNFR, FAS): Virus
 El descontrol conlleva a una GVDH
 Mecanismos de citotoxicidad mediadas por
gránulos, dependiente e independiente de
caspasas

3. CTL y NK

4. Exocitosis de gránulos
Lisososmas especializados de células
citolíticas
Granzimas:
 A y K: Triptasas
 B y H : Quimasas Caspasa dependiente
 C, D, E, F, G y M: Metasas (Met)
Células expresan algunas de estas
granzimas
No son redundantes

5. Mecanismos de protección
Clivaje proteolítico e inactivación de
perforinas
Proteccion de polimerización de perforinas
por calreticulina.

6. Dominio exocítico

7. Contenido de gránulos
 Proteinas perturbadoras de
membrana: Perforina y
granulisina
 Gránulos de serin proteasas:
granzymas A, B, C, D, E, F, G,
H, K, y M
 Proteoglicanos de matriz:
seriglicina
 Inhibidor de perforinas:
Calreticulina
 Enzimas lisosomales:
Catepsinas
 Moléculas efectoras: FasL

8. Citotoxicidad de CTL
Muerte celular caspasa dependiente
Granzima B
Muerte celular caspasa independiente.
Granzima A y C

9. Granzima A
Mecanismo de acción
 Ataca Histona H1
 Corte de proteínas lámina
Muerte celular lenta
Induce DNAsa GAAD

10. Granzima A

11. Granzima B
Actúa clivando a caspasa 3 y a otras.
Mecanismo independiente de caspasas
Cliva BID. Alterando integridad
mitocondrial
Liberación de Citocromo C. Inhibida por
BLC2
Daño al DNA por 2 vias CAD y ENDOG

12. Granzima B

13. Granzima C
Potente inductor de otra via de muerte
celular
Induce daño a membrana celular (Anexina
V)
Mecanismo independiente de caspasa
Daño a membrana mitocondrial.
Especificiad desconocida

14. Granzimas

15. Perforinas
 Esenciales para
inmunocompetencia
 Altas concentraciones
inducen necrosis
 Probablemente se
asocia a un inhibidor
calreticulina

16. Granulisinas
Agente antimicrobiano
Daña paredes de bacterias gram + y –,
micoplasmas y hongos.
Induce mecanismos de apoptosis
caspasas independientes. Daño
mitocondrial.

17. Granzyme M Mediates a Novel
Form of Perforin-dependent
Cell Death
Janice M. Kelly, Nigel J. Waterhouse‡, Erika
Cretney, Kylie A. Browne, Sarah Ellis,
Joseph A. Trapani§, and Mark J. Smyth§¶
THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
May 21, 2004

18. Antecedentes
GrM es altamente expresada en NK pero
no en linfocitos T
Estudiar el potencial citotóxico en
presencia de perforinas

19. Granzima M induce citólisis

20. GrM no fragmenta DNA

21. Lisis por GrM no es inhibida por BCL2

22. Muerte por GrM es caspasa
independiente

23. Morfología lisis por GrM

24. Conclusiones
GrM Induce una nueva forma de
citotoxicidad perforina dependiente
Mecanismo de daño caspasa
independiente
Daño mitocondrial en ausencia de
fragmentacion de DNA