Revisión que hice hace más de dos años. Perdón por lo mala que son las páginas, pero considero el contenido interesante

1. Chlamidophila pneumoniae y
aterosclerosis
Cumple postulados de Koch
Fco. Javier Casas Ciria
U.G.C. Análisis Clínicos
Hospital de La Linea

2. Postulados de Koch
• El patógeno debe estar presente en casi todos los casos de
enfermedad
• El patógeno debe ser aislado desde el huésped enfermo y
crecer en cultivo
• La enfermedad debe ser reproducida cuando el cultivo es
inoculado en el huésped sano
• El organismo debe recuperarse desde el huésped infectado
experimentalmente.

3. Primer postulado de Koch
El patógeno debe estar presente
en casi todos los casos de
enfermedad

4. Presencia de Cpne en placa de
ateroma
Serología positiva con mayor frecuencia en pacientes con
enfermedad coronaria.
Detección de Cpne en placa de ateroma por:
- microscopía electrónica
- Inmunofluorescencia directa
- Inmunoperoxidasa
- PCR

5. Serología en Infarto agudo de
miocardio
Seroprevalencia para IgG más alta en grupo con IAM (35/61)
que en donantes de sangre emparejados por la edad, sexo, y
tabaco (18/61)
 Blasi. Chest. 1997;112:309-312.

6. Inmunocitoquímica en ateroma de coronaria
• 66 pacientes y 41 positivos para Cpne (71%)
o CMV en 35,5 % (27 muestras) y HSV en 10,5 % (8)
o Ningún tejido control fue positivo
 Chiu. Circulation. 1997;96(7):2144-2147.

7. Detección de Cpn en placa de ateroma por PCR
• Detección en 26 de 51 (51%) de placa de ateroma de
aneurisma aórtico
o No en ninguna muestra de tejido aórtico normal.
o 23/26 patrón de infección crónica o pasada.
 Blasi. J. Clin Microbiol. 1996;34:2766-9
• Detección de Cpn viable (detección de RNAm específico)
en 10/30 placas de arterias coronarias. Coincide con DNA
positivos.
o Todos los casos de arteria tiroidea y vena sublingual
negativos.
 Esposito. Ann Vasc Surg. 1999;30:434-9.

8. Detección de Cpn en ateroma de coronaria.
• Por PCR en 19/80 (19%) y por cultivo en 7/80 (9%)
o en by-pass venoso obstruido
 DNA 8/45 (18%) cultivo 5/45 (11%)
 Estos últimos casos tenían títulos muy elevados de
IgG a Cpne.
 Bartels. Circulation. 2000;101:137-141.
• DNA por PCR de Cpn en 12/46 ateromas de coronaria
(26%)
o DNA H. pylori en 17/46 (37%) y en ningún control.
o 23/46 (50%) al menos un germen.
o Ausencia de gérmen en tejido sano
 Farsak. J Clin Microbiol. 2000;38(12):4408-4411.

9. Detección de Cpne en placa de ateroma
• 60 indígenas de Alaska
• Bajo riesgo de enfermedad coronaria
• Muestra de suero 8,8 años antes de morir por enfermedad
no coronaria. Media de muerte: 34 años.
• Cpne dentro de macrófagos espumosos:
o en placa de ateroma en 15 (25%)
o en lesiones grasa tempranas 7 (11%)
o Por PCR 14,23 %
o Por ICC 20,33 %
• O.R. IgG >=1/256 8 años antes y Cpne (+) en ateroma
OR=6,1 y para todos los tejidos coronarios OR=9,4 (CI
2.6---33.8).
 Davidson. Circulation. 1998.98:628-633.

10. Segundo postulado de Koch
El patógeno debe ser aislado
desde el huésped enfermo y
crecer en cultivo

11. Detección de Cpn en placa de ateroma
• Cultivo positivo en 8 % de placas
• PCR positiva en 24 % de placas
o infección limitada a lesiones poco evolucionadas.
o No relación con serología a Cpn
 Maass. 1997.8th European Congress CMID.
• Cultivo positivo en 16 % de placas
• PCR positiva en 30 % de placas
 Maass. JACC. 1998;31:827-32

12. Tercer postulado de Koch
La enfermedad debe ser
reproducida cuando el cultivo es
inoculado en el huésped sano

13. Modelo experimental en animal
• 30 conejos a pienso enriquecido con 0,25 % de colesterol
• Tres inoculaciones intranasal de Cpne (20) o salino (10).
o Separadas una semana.
• Azitromicina a la mitad de infectados tras última inoculación.
• Engrosamiento de la íntima:
o en conejo infectado: 0,55 mm
o conejo no infectado: 0,16 mm
o conejo infectado con tratamiento: 0,20 mm
• Tambien difiere con igual patrón:
o Porcentaje de circunferencia luminal implicada
o Indice del area de la placa de aterosclerosis.
 Muhlestein. Circulation. 1998;97:633-636.

14. Modelo experimental en animal
• Tres grupos de conejos
o pienso libre de colesterol
o tres inoculaciones por nasofaringe separados dos
semanas
 grupo I (23): no tratamiento
 grupo II (24): azitromicina desde 5º días
 grupo III (24): azitromicina desde 2ª semana
o a las 10-11 semanas sacrificados.
 8 de grupo I AE
 1 de grupo II AE
 8 de grupo III AE
• Antibióticos sin valor con lesiones ya formadas.
 Fong. CDLI. 1999;6(6):891-894

15. Cuarto postulado de Koch
El organismo debe recuperarse
desde el huésped infectado
experimentalmente.

16. Modelo experimental en animal
• Ratón transgénico deficiente en apoE (desarrollo
espontáneo de aterosclerosis)
• inoculación intranasal de Cpne
o Detección por PCR del 100 % de ratones en aorta
o aislamiento en 50 % de muestras a las dos semanas de
inoculación.
o a mayor tiempo tras la inoculación no se aisla a Cpne.
 Moazed. JID. 1997;175:883-890.
• Aislamiento en placa de ateroma en ratón que requiere
dieta rica en colesterol para aterosclerosis tras inoculación
intranasal.
 Moazed. JID. 1997;175:883-890.

17. Otros patógenos implicados
• Estudio de serología en 572 pacientes para Herpes simple I
y II, Cpn, Citomegalovirus, Epstein Barr, Haemophilus
influenzae, Mycoplasma pneumoniae y Helicobacter pylori.
• La extensión de aterosclerosis se asociaba con IgA contra
Cpne, IgG contra H.pylory, Cytomegalovirus y Herpes
simple 2.
• Tras seguimiento durante 3,2 años
o mortalidad del 7% en AE y seropositivo con 0-3
patógenos
o mortalidad 20 % en AE y seropositivo para 6-8
patógenos.
 Espinola-Klein, Circulation, 2002;105:15-21.

18. También otros gérmenes
• Detection de Treponema denticola in atherosclerotic lesions.
 (23,1 % de placas de ateroma, ninguno en tejido
normal.
 Okuda. J Clin Microbiol. 2001:1114-117
• Identification of periodontal pathogens in atheromatous
plaques.
 Haraszthy. J Periodontol. 2000;71:1554-1560.

19. También otros gérmenes (mecanismo)
• LPS bacteriano (en pared de Gram negativos) al infectar
células endoteliales activa NF-kB y con ello la expresión de
moléculas de adhesión.
 Infect Immun. 2001;69(3):1273-1279.

20. Llegada a pared arterial
• 41 pacientes con aneurisma de aorta abdominal
o 19 positivos por PCR para Cpne en capa leucocitaria.
 Blasi. JID. 1999;180(6):2074-2076.
• 103 pacientes para coronariografía.
o 59 % PCR a Cpn + en capa leucocitaria
• 52 donantes de sangre.
o 46 % PCR a Cpn + en capa leucocitaria
 Boman. JID. 1998;178:274-277.
• Pacientes + a Cpn por PCR, no se detecta Cpn en suero.
 Boman. JID. 2000;181:S452-4
• Cpn infecta macrófago y se disemina sistémicamente vía
macrófago infectado por ruta hematógena y linfática.
 Moazed. JID. 1998;177:1322-1325

21. Llegada a pared arterial
• El monocito infectado puede transmitir directamente la
infección a la célula endotelial pero también parece
aumentar de manera independiente la infectividad de la
célula endotelial.
 Lin. JID. 2000;181:1096-1100
• La infección de la célula endotelial por Cpn induce actividad
procoagulante y promueve adherencia plaquetaria.
 Fryer. J Invest Med. 1997;45(4):168-174

22. Infección del Monocito
• Cpn infecta in vitro a c. mononucleares de sangre
periféricas y pueden mantenerse de manera crónica en
estas células con la inducción de citokinas: TNF-alfa, IL-1-
beta, IL-6, IFN-gamma.
 Kaukoranta-Tolvanen. Microb-Pathog. 1996;21:215-221.
• Cpn infecta macrofagos cargados de lípidos en el
laboratorio. Las formas modificadas de LDL inhiben el
crecimiento de Cpn pero no inhiben la entrada e
internalización de Cpn en Macrófago, persistiendo dentro
del macrófago e induciendo la secreción de citokinas
proinflamatorias.
 Blessing. Circulation 2002;105(16):1976-1982

23. Infección del Monocito
• Cpn induce un incremento de captación de lípidos en
monocito infectado.
 Katie. Infect and Immu. 2002;69:7894-7897.
• Cpn infecta el monocito e induce una respuesta proliferativa
en linfocitos.
 Airenne. Infect and Immu 1999;67:1445-1449.
• Presencia de linfocitos T reactivos frente a Cpn en pared de
aneurisma de aorta abdominal y ateroma coronario.
 Halme. Eur J Clin Invest. 1999;29:546-552
 Mosorin. Arter Thromb Vasc Biol. 2000;20(4):1061-1067.
• La producción de citokinas por la célula infectada por Cpn
indica que el organismo puede estimular el sistema inmune
 Gaydos. JID. 2000;181(Suppl 3):S473-478.

24. Infección del macrófago
• El LPS de la pared de Cpn induce la formación de células
espumosas por los macrófagos cuando se cultivan en
presencia de LDL
• A diferencia del LPS de Enterobacterias, el LPS de Cpn es
inductor débil de TNF-alfa, permitiendo a Cpn sobrevivir
dentro del macrófago y establecer una infección crónica.
 Kalayoglu. Infect Immun. 1998;66(11):5067-5072.

25. Modificación de perfil lipídico
• La infección por Cpne se asocia con un perfil lipídico factor
de riesgo de aterosclerosis
o aumento de Colesterol y descenso de HDL
 Laurila. Arterios Thromb Vasc Biol. 1997;17:2910-2913.
 Murray. Heart. 1999;81:239-244.
 Pesonen. Eur Heart J. 1993;14(Suppl K):7-11.

26. Modificación de la célula infectada
• Cpn inhibe la apoptosis de la célula infectada explicando la
predisposición a causar infección crónica.
 Fischer. Infect Immun. 2001;69(11):7121-7129.
 Rajalingam. 2001;69(12):7880-7888.

27. Estudios de tratamiento
• 32 pacientes para cirugía coronaria
o 16 pacientes 150 mg de roxitromicina durante 26 días
previamente a cirugía.
• grupo no tratado: PCR (+) a Cpn en carotida de 12/16.
• grupo tratado: PCR(+) en 5/16.
 Melissano. Eur J Endovasc Surg. 1999;18(4):355-359.
• In vitro: Tratamiento durante 30 días con azitromicina,
claritromicina o levofloxacino reduce pero no elimina
totalmente la carga bacteriana de Cpn en célula Hep-2
infectada.
• Todos los antibióticos redujeron los niveles de IL-6 e IL-8.
 Kutlin. Antimicrob Agent Chem. 2002;46(2):409-412.

28. Estudios de tratamiento
• 302 pacientes con enfermeda coronaria y serología positiva
a Cpn
• Tto con azitromicina durante 3 meses
o a los 6 meses se reduce PCR, IL-1, IL-6 y TNF-alfa, pero
no a los tres meses frente al grupo placebo.
o No diferencias en eventos clínicos entre los dos grupo.
 Anderson. Circulation. 1999;99:1540-1547.

29. Similitud con el trachoma y salpingitis
• Inflamación crónica de conjuntiva y la infección es
mantenida por episodios repetidos de reinfección.
• La mayor parte del daño tisular es mediado por el sistema
inmune.
• En infecciones muy evolucionadas las tasas de aislamiento
de C. trachomatis son muy baja
• En infecciones muy evolucionadas el tratamiento no revierte
la enfermedad.
• La inflamación continua en el trachoma no se debe a
moléculas superficiales de la clamidia si no a productos
lábiles liberados por los microorganismos. (¿HSP60?)
 Taylor. J Immunol. 1987;138(9):3023-3027.

30. Citokinas en infección por Cpne
• Cpn aislada de ateroma es capaz de infectar en laboratorio
a la fibra muscular lisa y a células endoteliales
• Provoca aumento de factor tisular, Inhibidor 1 de activador
de plasminógeno, e interleukina-6, así como activación
sostenida de NF-kB y aumento de heterodimeros p50/p60
(consecuencia de NF-kB)
 Dechend. Circulation.1999;100:1369-1373
• IL-6 aparece en placas de ateroma implicada en la
inestabilidad de la placa y patogenesis del IAM.
• heterodimeros p50/60 son responsables de la
trombogenicidad en la placa de ateroma

31. Respuesta serológica a HSP65/60
• Expresión de HSP60 en placa de ateroma.
 Kleindienst. Am J Pathol. 1993;142(6):1927-1937.
• La respuesta frente al HSP de 60 kDa de Cpne provoca
reacción cruzada frente a HSP60 humana.
• La HSP60 de Cpn se localiza de manera conjunta con la
HSP 60 humana en macrófagos de la placa de ateroma
humana.
 Mayr. Circulation.1999;99:1560-1566.
 Kol. Circulation 1998;98:300-307.
 Bachmaier.Science. 1999;283:1335-1339.
• Los anticuerpos IgG Cpne-HSP60 se encuentran elevados
en pacientes con enfermedad coronaria.
 Ciervo. CDLI. 2002;9(1):66-74.