Bajas dosis de interferón-γ preparado mediante activación cinética secuencial (SKA) mejoran la citotoxicidad de las células asesinas naturales (NK) extraídas de pacientes con cáncer colorrectal en etapa temprana contra líneas celulares tumorales, en comparación con donantes sanos. El estudio piloto encontró que las células NK de pacientes no metastásicos respondieron mejor al tratamiento con SKA-IFN-γ que las de pacientes metastásicos. Estos resultados sugieren que dosis bajas de SKA-IFN-

1. Low-dosesof sequential-kinetic-activatedinterferon-γ enhancethe ex vivocytotoxicityof
peripheral bloodnatural killercellsfrompatientswithearly-stage colorectal cancer.A
preliminarystudy.
ElisabettaRadicea, VincenzoMirandab, Graziella Bellonec,
Abstract
Natural killer(NK) cellsare innate immune-systemlymphocytescapableof killingtumorcells.
Theysecrete cytokines,includinginterferon(IFN)-γ,whichparticipate inshapingthe initial
inflammatoryanddownstreamadaptive immune responses.
Its potentimmunoregulatoryactionmeansthatIFN-γ mightbe beneficialincasesof tumor
rejection,butitssevere side-effectslimitclinical applications. Thispilotstudycomparedlow-
dose IFN-γ preparedbysequential-kinetic-activation(SKA), withstandard-dose recombinant(r)
IFN-γ,intermsof ex-vivocytotoxicactivityof peripheral blood(PB)-NKcellsfromcolorectal
carcinoma(CRC) patients. Thiswastestedagainstthe NK-sensitiveK562 cell line andthe less-
sensitivehumanCRCCaco-2 andHT-29 cell lines.Twentyprimitive non-metastaticCRC
patients,five metastaticCRCpatients,andthirteenhealthydonorswere enrolled.PB
lymphocytes(PBL) wereexposedtomediumalone,SKA-IFN-γ (0.25fg/ml) orrIFN-γ (1 ng/ml).
NK-cell cytolyticactivitywasexaminedviashort-term51Cr-release.Pretreatmentof PBLfrom
non-metastaticpatientswithSKA-IFN-γ causedasignificantincrease inNK-cell cytotoxicity,
comparedto those fromnormal donors,althoughlessmarkedlythanpretreatmentwithrIFN-γ
againstall three cell lines.Incontrast,PBLfrommetastaticCRC patientsdisplayedsignificantly
decreasedNK-cell activityandresponsivenesstobothrIFN-γ andSKA-IFN-γ treatments.These
resultsdemonstrate inprinciplethe immunomodulatorycapacity of low-doseSKA-IFN-γ,and
mightopenthe door to the possibilityof generatinganovel,safe,andfeasible approachto
enhancingNK-cell antitumoractivityinearly-stage CRCpatients.
Abbreviations
NKcell,natural killercell;
SKA,sequential-kinetic-activation;
CRC, colorectal cancer;
IFN,interferon;
r, recombinant;
PBL, peripheral bloodlymphocyte;
LU, lyticunit
Keywords
Interferon-γ;

2. Low-dose cytokines;
Natural killercells;
Cancer immunotherapy;
Colorectal cancer
CorrespondingauthorcontactinformationCorrespondingauthorat:Departmentof Medical
Sciences,ViaGenova3,10126 Turin, Italy.
Copyright© 2014 ElsevierB.V.All rightsreserved.
Dosis bajas de secuencial cinética activada por el interferón-γ mejorar en vivo la
citotoxicidad periférica de la sangre, crear células asesinas naturales a partir de
pacientes con cáncer colorrectal en etapa temprana. Un estudio preliminar:
Las células asesinas naturales (NK) son los linfocitos del sistema inmune innato capaces
de matar las células tumorales. Ellos secretan citoquinas, incluyendo el interferón
(IFN)-γ, que participan en la formación de las respuestas inmunitarias adaptativas
inflamatorias y corrientes iniciales. Tienen acción inmunorreguladora potente lo cual
significa que el IFN-γ puede ser beneficioso en casos de rechazo de tumores, pero sus
graves efectos secundarios limitan las aplicaciones clínicas. Este estudio piloto se
comparó una dosis bajas de IFN-γ preparado por activación secuencial kinética (SKA),
con la dosis estándar recombinante (r) IFN-γ, en términos de actividad en vivo
citotóxica periférica de la sangre y de células (PB)-NK de carcinoma colorrectal (CCR).
Esto fue probado contra el NK-sensibles en línea celular K562 y las células Caco-2 y HT-
29 CRC líneas celulares humanas menos sensibles. Veinte pacientes en etapa inicial de
CCR no metastásico, cinco pacientes con CCR metastásico y trece donantes sanos
fueron tesados. Linfocitos de PB (PBL) se expusieron a medio solo, SKA-IFN-γ (0,25 fg /
ml) o rIFN-γ (1 ng / ml). La actividad citolítica de células NK se examinó a través de un
corto plazo de liberación de 51Cr. El pretratamiento de los PBL de pacientes no
metastásicos con SKA-IFN-γ causó un aumento significativo en la citotoxicidad de
células NK, en comparación con aquellos de donantes normales, aunque menos
pronunciada que el tratamiento previo con rIFN-γ contra las tres líneas celulares. Por el
contrario, los PBL de pacientes con CCR metastásico aparece significativamente menor
actividad de las células NK y la capacidad de respuesta tanto a rIFN-γ y tratamientos
SKA-IFN-γ.
Estos resultados demuestran, en principio, la capacidad inmunomoduladora de dosis
bajas de SKA-IFN-γ, y podría abrir la puerta a la posibilidad de generar un nuevo
método seguro y factible de mejorar la actividad antitumoral de las células NK en
pacientes con CCR en etapa temprana.