El documento presenta los resultados de serologías realizadas en dos casos. En el caso 1 se analizaron virus y bacterias mediante diferentes pruebas serológicas. En el caso 2 se analizaron los mismos virus y bacterias que en el caso 1 más algunos virus y bacterias adicionales.

1. Serologías caso 1 Serologías caso 2
VIRUS
Virus Epstein-Barr (anti VCA IgM, CLIA)
Virus Hepatitis A (IgM)
Virus Hepatitis B (HBsAg)
Virus Hepatitis C (antic. totales, CLIA)
BACTERIAS
Borrelia burgdorferi (IgG, CLIA)
Brucella melitensis (rosa de Bengala)
Rickettsia conorii (IgM, CLIA)
Rickettsia conorii (IgG, IFI)
VIRUS
Citomegalovirus (IgM, CLIA)
Virus Epstein-Barr (anti VCA IgM, CLIA)
Virus Hepatitis A (IgM)
Virus Hepatitis B (HBsAg)
Virus Hepatitis B (antiHBs)
Virus Hepatitis B (anti-HBc IgM)
Virus Hepatitis C (antic. totales, CLIA)
VIH-1/VIH-2 (Ac+Ag, CLIA)
BACTERIAS
Rickettsia conorii (IgM, CLIA)
Rickettsia conorii (IgG, IFI)
Treponema pallidum, (Ig G CLIA)
PROTOZOOS
Leishmania (IFI)
Toxoplasma gondii IgM

2. Rickettsia conorii

3. Dominio Bacteria
Filo Proteobacteria
Clase Alfa-proteobacteria
Orden Rickettsiales
Familia Rickettsiaceae
Género Rickettsia
Especie Rickettsia conorii
Filogenia de Rickettsia conorii
Rickettsia: Howard Ricketts
Antiguo orden Rickettsiales: incluía también los géneros Erlichia y Coxiella (bacilos
gramnegativos aerobios intracelulares estrictos).
Análisis del ARN: el género Rickettsia se dividió en Rickettsia y Orientia, y Erlichia
en: Erlichia y Anaplasma.

4. Filogenia de Rickettsia conorii
Dominio Bacteria
Filo Proteobacteria
Clase Alfa-proteobacteria
Orden Rickettsiales
Familia Rickettsiaceae
Género Rickettsia
Especie Rickettsia conorii
Grupo bacteriano de origen de las mitocondrias: alfa-proteobacterias
(¿Rhodospirillaceae, Rhizobiales, Rickettsiales, Rickettsia…?)

5. • Bacilos gramnegativos pequeños
• Aerobios
• Intracelulares obligados
• Grupos:
– Grupos de
– Fiebres tíficas
– Fiebres maculosas
Género Rickettsia
R. prowazekii
R. typhi
R. rickketsii
R. conorii
R. akari
R. felis
Fiebre de las Montañas Rocosas
Fiebre botonosa mediterránea
Tifus epidémico o f. de las trinch.
Tifus endémico
nbgnbvnvnv
vbvcbvcbvcb
¡Durante algún tiempo se
creyó que eran virus!

6. Género Rickettsia
R. prowazekii
R. typhi
R. rickketsii
R. conorii
R. akari
R. felis
Fiebre de las Montañas Rocosas
Fiebre botonosa mediterránea
Tifus epidémico o de las trinch.
Tifus endémico
Viruela por Rickettsia Ácaro de la rata
Pulga del gato
Piojo humano
Pulga
Garrapatas
Garrapatas
• Bacilos gramnegativos pequeños
• Aerobios
• Intracelulares obligados
• Grupos:
– Grupos de transición y basales
– Fiebres tíficas
– Fiebres maculosas

7. Género Rickettsia
• Metabolismo de azúcares
• Síntesis de lípidos, aminoácidos y nucleótidos
Genes perdidos Genes presentes
• Ciclo de Krebs
• Numerosas translocasas ADP/ATP

8. Distribución geográfica de R. conorii
Países mediterráneos, mar
Negro, África, India,
Georgia, Rusia, sudeste
asiático…
• R. conorii subps
conorii: fiebre
botonosa
mediterránea
• R. conorii subsp.
israelensis: fiebre
manchada israelí (no
suele presentar la
mancha negra)
• R. conorii subsp.
caspia: fiebre de
Astrakhan
• R. conorii subsp.
indica: tifus por
garrapas indio

9. Ciclo vital de R. conorii
Reservorio: animales domésticos y salvajes
Vector: garrapata del perro
Para infectarse, el
individuo debe estar
expuesto a la
garrapata durante un
período de tiempo
prolongado (p. ej., de
24 a 48 horas).
Humano: hospedador accidental
Actividades al aire libre
Multiplicación dentro
del vector:
vía transovárica a
las garrapatas hijas

10. Factores de patogenicidad 1
• No hay ninguna evidencia sobre producción de toxinas ni que el daño de la
enfermedad se deba a la acción del sistema inmune.
Puerta de entrada de la infección:
inducción de la endocitosis
Mecanismo de escape del fagolisosoma:
producción de fosfolipasa
Rickettsia conorii entry into Vero cells. N Teysseire, J-A
Boudier and D Raoult. Infection and Immunity, Jan 1995,
Vol 63, nº 1, p 366-374
Rickettsial phospholipase A2 as a pathogenic mechanism in
a model of cell injury by typhus and spotted fever group
Rickettsiace. DH Walker, H-M Feng and VL Popov. Am. J.
Trop. Med. Hyg., 65 (6), 2001, pp 936-942.

11. Factores de patogenicidad 2
Vía de salida: proyecciones del citoplasma por polimerización de la actina
A comparative study of the actin-based motilities of the
pathogenic bacteria Listeria monocytogenes, Shigella
flexneri and Rickettsia conorii. E Gouin, H Gantelet, C
Egile, I Lasa, H Ohayon. V Villiers, P Gounon , PJ Sansonetti
and P Cossart. Jorunal of Cell Science 112, 1697-1708 (1999)
Microscopía confocal
Células Vero infectadas con R. conorii
Rojo: R. conorii
Verde: faloidina-FITC (actina)

12. Fiebre botonosa mediterránea: epidemiología en España durante el
periodo 2009-2012. B García-Magallón, M Cuenca-Torres, F Gimeno-
Vilarrasa y A Guerrero-Espejo. Rev Esp Salud Pública 2015; 89: 321-328
Tasa de incidencia anual:
0,36 casos / 100.000 hab
Nº de casos en España

13. Incidencia máx 2009-2012:
Ceuta: 1,9 casos/100.000 hab
La Rioja: 1,87 casos/100.000 hab
Incidencia mín 2009-2012:
Cantabria: 0 casos/100.000 hab
Canarias: 0 casos/100.000 hab
Nº de casos en EspañaY nº de casos por comunidades…
Fiebre botonosa mediterránea: epidemiología en España durante el
periodo 2009-2012. B García-Magallón, M Cuenca-Torres, F Gimeno-
Vilarrasa y A Guerrero-Espejo. Rev Esp Salud Pública 2015; 89: 321-328

14. Casos a lo largo del año…
Los casos son más frecuentes en verano,
que es cuando las garrapatas se encuentran
más activas
Fiebre botonosa mediterránea: epidemiología en España durante el
periodo 2009-2012. B García-Magallón, M Cuenca-Torres, F Gimeno-
Vilarrasa y A Guerrero-Espejo. Rev Esp Salud Pública 2015; 89: 321-328

15. … y distribución por sexos y edades
Los casos son más frecuentes en verano,
que es cuando las garrapatas se encuentran
más activas
Se registra un mayor número de casos en
varones y a partir de los 35 años
Fiebre botonosa mediterránea: epidemiología en España durante el
periodo 2009-2012. B García-Magallón, M Cuenca-Torres, F Gimeno-
Vilarrasa y A Guerrero-Espejo. Rev Esp Salud Pública 2015; 89: 321-328

16. Nº de casos en EspañaY nº de casos en nuestro hospital…
Pruebas positivas de IgM (CLIA e IFI) y IgG registrados en Gestlab (desde
2012 hasta la actualidad) Francisco Salvá Armengol
IgM (IFI) e IgG (IFI) positivas
2012-2015 aprox
Un total de 58 muestras
• Hombres: 25
• Mujeres: 33
• 0-10 años: 1
• 10-20 años: 6
• 20-30 años: 6
• 30-40 años: 15
• 40-50 años: 17
• 50-60 años: 5
• 60-70 años: 4
• 70-más años: 4
IgM (CLIA) e IgG (IFI) positivas
2015-actualidad
Un total de 14 muestras
• Hombres: 9
• Mujeres: 5
• 0-10 años: 0
• 10-20 años: 0
• 20-30 años: 0
• 30-40 años: 3
• 40-50 años: 7
• 50-60 años: 1
• 60-70 años: 2
• 70-más años: 1
En total:
Un total de 72 muestras
• Hombres: 34
• Mujeres: 38
• 0-10 años: 1
• 10-20 años: 6
• 20-30 años: 6
• 30-40 años: 18
• 40-50 años: 24
• 50-60 años: 6
• 60-70 años: 6
• 70-más años: 5
72 positivos en casi 5 años corresponderían a una
incidencia de 14’4 casos al año, lo que equivale a
1,31 casos /100.000 habitantes . año

17. • En general enfermedad benigna con buen
pronóstico
• Incubación de 4-20 días
(Según otras fuentes 5-7)
• La escara casi siempre está presente
(75% de los casos): es indolora y no
pruriginosa.
Pústula
Lesión ulcerosa
Escara negra
Halo eritematoso
+- Adenopatía regional
• Rickettsia tiene afinidad por el
tejido endotelial, y su
multiplicación provoca una
vasculitis.
Manifestaciones clínicas
Se encontró un ganglio inflamado
en el paciente 1 a nivel inguinal

18. • Los síntomas iniciales son:
100 % Fiebre, escalofríos
84% Cefalea, fotofobia, afectación del estado general
79% Mialgias (miositis sin vasculitis)
69% Artralgias
29% Hepatomegalia
9% Esplenomegalia, conjuntivitis bilateral
• Pasados 3-5 días:
99% Exantema generalizado
76% Maculopapular
Enantema faríngeo y genital
15% Púrpura
Manifestaciones clínicas

19. Otras manifestaciones
• Digestivas (30%):
Nauseas, diarrea, abdominalgia, pancreatitis…
• Respiratorias:
Tos, neumonía, pleuritis, edema pulmonar no
cardiogénico…
• Cardiovasculares:
Miocarditis, pericarditis, arritmias, tromboflebitis,
coagulación intravasculas diseminada, shock
• SNC:
Estupor, coma, convulsiones, meningoencefalitis…
• Otros:
Fracaso renal agudo, artritis, uveítis, orquitis,
síndrome mononucleósico, hemólisis…
Las formas
graves suponen
aproximadamen
te un 7,5% de
los casos

20. Diagnóstico de laboratorio
LABORATORIO
GENERAL
Aumento VSG
Leucopenia
Anemia
Trombopenia
Hipoalbuminemia
Hiponatremia
Alteraciones PF hepáticas
CPK
Aldolasas
Alteración de la coagulación
Crioglobulinemia
Inmunocomplejos
Hipocomplementemias

21. Diagnóstico de laboratorio
LABORATORIO
GENERAL
Aumento VSG
Leucopenia
Anemia
Trombopenia
Hipoalbuminemia
Hiponatremia
Alteraciones PF hepáticas
CPK
Aldolasas
Alteración de la coagulación
Crioglobulinemia
Inmunocomplejos
Hipocomplementemias
MÉTODOS
DIRECTOS
Cultivo (inoculación en
cobaya o en la línea celular
VERO, seguido de lisis-
centrifugación en shell vial:
72 horas, baja sensibilidad)
Identificación en tejidos por
tinción directa (Giménez,
Giemsa), PCR, IFD
IFI en células endoteliales

22. Diagnóstico de laboratorio
LABORATORIO
GENERAL
Aumento VSG
Leucopenia
Anemia
Trombopenia
Hipoalbuminemia
Hiponatremia
Alteraciones PF hepáticas
CPK
Aldolasas
Alteración de la coagulación
Crioglobulinemia
Inmunocomplejos
Hipocomplementemias
MÉTODOS
DIRECTOS
Cultivo (inoculación en
cobaya o en la línea celular
VERO, seguido de lisis-
centrifugación en shell vial:
72 horas, baja sensibilidad)
Identificación en tejidos por
tinción directa (Giménez,
Giemsa), PCR, IFD
IFI en células endoteliales
TÉCNICAS
SEROLOGICAS
Reacción de Weil-Félix
(actualmente NO se
recomienda, por sus bajas
sensibilidad y
especificidad)
IFI para IgM (>1/80)
Inmunoquimioluminis-
cencia indirecta (CLIA)

23. Diagnóstico de laboratorio
LABORATORIO
GENERAL
Aumento VSG
Leucopenia
Anemia
Trombopenia
Hipoalbuminemia
Hiponatremia
Alteraciones PF hepáticas
CPK
Aldolasas
Alteración de la coagulación
Crioglobulinemia
Inmunocomplejos
Hipocomplementemias
MÉTODOS
DIRECTOS
Cultivo (inoculación en
cobaya o en la línea celular
VERO, seguido de lisis-
centrifugación en shell vial:
72 horas, baja sensibilidad)
Identificación en tejidos por
tinción directa (Giménez,
Giemsa), PCR, IFD
IFI en células endoteliales
TÉCNICAS
SEROLOGICAS
Reacción de Weil-Félix
(actualmente NO se
recomienda, por sus bajas
sensibilidad y
especificidad)
IFI para IgM (>1/80)
Inmunoquimioluminis-
cencia indirecta (CLIA)

24. Diagnóstico de laboratorio: IFI

25. ¿Y cómo se hacen las IFIs?
• Técnica de referencia
• Lectura subjetiva
• Metodología:
• Pocillos pretratados con Ag
• Incubación con la muestra
• Lavados
• Incubación con Ac
conjugado
• Lectura en microscopio de
fluorescencia

26. Inmunoensayo indirecto mediante quimioluminiscencia (IgM)
Inmunoquimio-luminiscencia ind. (CLIA)

27. Tratamiento recomendado
Doxiciclina: 100 mg /12 horas (oral) 1-5 días
Josamina: 1g/8 horas (oral) 5 días
Ciprofloxacino: 750 mg/12 horas (oral) 2-5 días
No hay que esperar el resultado para empezar el tratamiento.
• Desparasitar a los animales
• Usar pantalones largos en las salidas al campo y los brazos
cubiertos
• Retirar rápidamente las garrapatas en caso de que nos
piquen
Profilaxis

28. Hay muchas más infecciones transmitidas por
garrapatas…
Anaplasma sp: m.e. y de fluorescenciaErlichia sp: m.e. y de fluorescencia
Borrelia burgdogferi Babesia: puede confundirse con Plasmodium (buscar estructura “cruz de Malta”).

29. Hay muchas más infecciones transmitidas por
garrapatas…
Anaplasma sp: m.e. y de fluorescencia
Flaviviridae, etc.
Erlichia a sp: m.e. y de fluorescencia
Borrelia burgdogferi Babesia: puede confundirse con Plasmodium (buscar estructura “cruz de Malta”).

30. Bibliografía
LIBROS
• Manual of Clinical Microbiology. 10th Edition. Volume 1. Editors: J Versalovic, KC Carroll, GF, JH Jorgensen, ML Landry, DW.
Warnock. ASM PRESS (American Society of Microbiology), Washington, DC, 2011
• Microbiología médica. PR Murray, KS Rosenthal y MA Pfaller. 5th Edition. Elsevier, Madrid, 2006.
ARTÍCULOS
• What are the evolutionary origins of mitochondria? A complex network approach. Carvalho DS, Andrade RF, Pinho ST, Góes-Neto
A, Lobão TC, Bomfim GC and E-Hani CN. PloS One. 2015 Sep 2, 10(9)
• Fiebre botonosa mediterránea; epidemiología en España durante el periodo 2009-2012. B García-Magallón, M Cuenca-Torres, F
Gimeno-Vilarrasa y A Guerrero-Espejo. Rev Esp Salud Pública 20015; 89: 321-328
• Rickettsial meningitis. Salva I, de Sousa R, Gouveia C. BMJ Case Rep. 2014 Mar 10, 2014.
• Cutaneous manifestations of spotted fever rickettsial infections in the Central Province of Sri Lanka: a descriptive study.
Weerakoon K, Kularatne SA, Rajapakse J, Adikari S, Waduge R. PLoS Negl Trop Dis. 2014 Sep 18; 8 (9)
• Early signaling events involved in the entry of Rickettsia conorii into mammalian cells. JJ Martínez and P Cossart. Journal of Cell
Science (2004), 117, 5097-5106.
• Rickettsial phospholipase A2 as a pathogenic mechanism in a model of cell injury by typhus and spotted fever group
Rickettsiaceae. DH Walker, H-M Feng and VL Popov. Am. J. Trop. Med. Hyg., 65 (6), 2001, pp 936-942.
• A comparative study of the actin-based motilities of the pathogenic bacteria Listeria monocytogenes, Shigella flexneri and Rickettsia
conorii. E Gouin, H Gantelet, C Egile, I Lasa, H Ohayon. V Villiers, P Gounon , PJ Sansonetti and P Cossart. Jorunal of Cell Science 112,
1697-1708 (1999)
• Rickettsia conorii entry into Vero cells. N Teysseire, J-A Boudier and D Raoult. Infection and Immunity, Jan 1995, Vol 63, nº 1, p 366-
374
OTROS
• Diagnóstico microbiológico de las infecciones por patógenos bacterianos emergentes: Anaplasma, Bartonella, Rickettsia y
Tropheryma whipplei. 2007 Procedimientos en Microbiología Clínica. Recomendaciones de la Sociedad Española de Enfermedades
Infecciosas y Microbiología Clínica. Nº27
• http://www.cdc.gov/otherspottedfever/

31. ¡Gracias por vuestra atención!