Dra. Carmen Pingarrón Santofimia. Madrid

1. NOVEDADES EN LA DETECCIÓN DE
MUTACIONES DE BRCA 1 y 2
DRA. CARMEN PINGARRÓN
SANTOFÍMIA
Jornadas de Gabinete Médico Velazquez 2016
DRA. CARMEN PINGARRÓN
SANTOFÍMIA
Jornadas de Gabinete Médico Velazquez 2016

2. Medicina Predictiva .Definición
Medicina Predictiva : es la medicina que se ha
especializado en el análisis genético de
diferentes patologías , a través de los test
genómicos,con la finalidad de saber qué
individuos estaran predispuestos a padecer
determinadas patologías, y asi , poder
adelantarnos, a su aparición

3. Frecuencia del cáncer de Mama
y del cáncer de Ovario
El cáncer de mama es el cáncer más frecuente,
sobre todo por debajo de los 40 años. Afecta
al 12% de la población general.
•1 de cada 8 mujeres tendrá un cáncer de
mama.
•De ellas, sabemos que el 70-80% son
espontáneos, y el 20-25% son heredados.
El cáncer de ovario, es el 5º cáncer en
frecuencia en mujeres. Supone el 1,4% de
cánceres de la población general.
•Afecta a 1 de cada 70-80 mujeres.
•De ellas el 85-95% son espontáneos y el 5-
15% son heredados.

5. Mutaciones de BRCA 1 y 2
• Son los factores de riesgo
más significativos para
padecer cáncer de mama
y cáncer de ovario.
• BRCA 1 Y 2 fueron
descubiertos en los años
94 y 95, en 17q y 13 q
• Herencia autosómica
dominante
• Función reparadora del
DNA

6. Incremento del riesgo de cáncer de
mama y ovario debido a mutaciones
de BRCA
Prevalencia de
BRCA 1 ó 2 :
1/400
Graficas del Royal College of
Obstetricians & Gynecologist
Scientific impact paper Nº48
February 2015

7. Incremento del riesgo de cáncer de
mama y ovarios en mutaciones de
BRCA 1 y 2 según la edad

8. ¿ A qué cánceres predisponen BRCA
1 y 2 ?
• Cáncer de mama
• Cáncer de ovarios
• Cáncer de trompas
• Cáncer de peritoneo
• Cáncer de páncreas
• Cáncer de próstata

10. Mary-claire King
2014

11. Mutaciones BRCA heredadas
King et Al. Population based screening for BRCA-1 and BRCA-2,
2014 Lasker Award, JAMA; 2014

12. Mutaciones de BRCA 1 y 2
• Se conocen cientos (BREAST
CANCER INFORMATION CORE)
• Inserciones y Delecciones
• Variación del número de copias
• SPLICING ( Alteraciones en la
eliminación de INTRONES)
• Duplicaciones
• Alteraciones en el
reordenamiento de grandes
zonas
• Variantes de significado incierto

13. Según la Sociedad Española de Oncología Médica, los criterios de selección serían pacientes para el estudio de los
genes BRCA 1 y BRCA 2:
Independientemente de la historia familiar:
Pacientes con cáncer de mama y cáncer de ovarios,
SINCRÓNICO o METACRÓNICO
Pacientes de 30 años o menos con cáncer de mama.
Pacientes con menos de 40 años con cáncer de mama
bilateral
Criterios de Selección según la SEOM

14. Familias con dos miembros afectos con cáncer de mama y/o cáncer de ovarios y al
menos una de las siguientes características:
Varón con cáncer de mama
Uno de ellos es un cáncer de ovario, cáncer tubárico o
cáncer primario peritoneal
Ambos casos diagnosticados en menores de 50 años
Familias con tres o más individuos con cáncer de mama y/o cáncer de ovario en la
misma rama de la familia
Criterios de Selección según la SEOM

15. NGS : Next Generation Sequencing
Tecnica más
avanzada
actualmente que
utiliza la
secuenciación
masiva en
paralelo de
próxima
generación

16. VENTAJAS DE NGS
• NGS. Realiza secuenciación completa de
ambos genes independientemente de la
predisposicion familiar y del área geográfica.
• Rápido. Resultados en 2 semanas
• Fiable : acreditado por la CE y por estandares
suizos
• Barato ( 1 / 4-5 NGS)
• Sensibilidad y especificidad del 99%

17. Serenity
• Secuenciación de los genes
BRCA1 y BRCA2 completos
• Detecta todas las variantes
patogénicas Interpretación
precisa de los resultados
• La bioinformática más
avanzada
• Toma de muestra de ADN por
frotis bucal
• Procesos certificados
• La más alta precisión
• Resultados en 2 semanas
• Calidad suiza

18. Modo de empleo
Tubo con HISOPO
Formulario de solicitud de
prueba (TRF)

20. SERENITY
Preparación para NGS
• Los fragmentos generados se transforman en
fragmentos con capacidad para ser Secuenciados:
“librería” de secuenciación.
Ej. Fragmentos más cortos con extremos
complentarios al soporte de secuenciación (Ion
Chips).
• A estos fragmentos se unen adaptadores específicos
que permiten reconocer la secuencia
• Amplificación por PCR
Procedimiento

21. Método Serenity
Secuenciación de las regiones BRCA1/2 con IonTorrent PGM11
11 Tarabeux J et al., Eur J Hum Genet. 2014 Apr;22(4):535-41
12 Ratajska M et al., J Appl Genet. 2014 Nov 1
13 Feliubadaló L et al., Eur J Hum Genet. 2013 Aug;21(8):864-70
14 Michils G et al., J Mol Diagn. 2012 Nov;14(6):623-30

22. Análisis bioinformático y detección de variantes: Sophia Genetics
Procedimiento

23. Resultados de SERENITY
• Variante patogénica
detectada
• No se detecta variante
patogénica
• Variante de significado
incierto
Serenity
BRCA1 and BRCA2 Genes Sequencing Report
™
No Pathogenic Variant(s) Detected
Patient information Sample Information
Name: Curnia Maria
Date of Birth: Not specified
Patient ID: AC0002141
Doctor's name: Oliver Juried
Reason for performing Serenity: Patient family
clinical history of cancer
Order ID: OR00215
Sample ID: 1502TKMOL200000
Type of sample: Buccal swab
DNA Sample Collection Date: Not specified
Laboratory Reception Date: Not specified
Results and interpretation
Report Date: Not specified
Results
Gene Variant* Exon Protein Variation type Interpretation
BRCA1 - - - - -
BRCA2 - - - - -
*only pathogenic, likely pathogenic and of unknown significance variants are reported
Interpretation
The analysis did not reveal any variation classified as pathogenous, likely pathogenous or of unknown significance
based on the current scientific knowledge.
These results should be interpreted according to the patient’s clinical context and family history during a genetic
counselling.
Geneticist signature
Geneticist: Patrick Perrin, MD, FAMH, GLN: 7601000861252
Genoma Laboratory: Genoma S.A., Chemin des Aulx, 12, 1228 Plan-les-Ouates, Geneva, Switzerland, +41 58 1000 100
Laboratory Registered in Switzerland under the number: 7601002154628
Director: Thomas Rio Frio, Ph.D
1/3

24. TARGET DE SERENITY
Elaborando protocolos con la SEGO
1. Todas las mujeres con Ca. mama y/o Ca. de ovario.(
con independencia de su historia familiar). Las Brca+ son
candidatas a mastectomia, no a cirugía conservadora.
2.A pacientes con antecedentes familiares , cualesquiera
que sean, de los cánceres Brca dependientes.
3.Pacientes en tratamiento por Ca. de ovario epitelial de
alto grado. A las Brca + que son respondedoras a
tratamientos con cisplatino, se benefician de mayor
intervalo de respuesta si se tratan con Olapariv.
4.Pacientes Braca 1y 2 con cáncer de mama responden
mejor a quimioterapia con inhibidores de la PARP
5.Seleccionar portadoras para DGP (diagnóstico genético
preimplantacional)

26. Consejo genético
• Actualmente existen 3
alternativas:
1. La vigilancia
2. La quimioprevención
3. La cirugía

27. Vigilancia en el cáncer de mama
En el cáncer de mama , la
vigilancia se realiza
alternando la
mamografía y la RMN
cada 6 meses y con la
autoexploración mensual

28. Vigilancia en el cáncer de ovarios
• En el caso del cáncer de
ovarios , la vigilancia se
realiza con ecografía
vaginal con doppler
color y con detección del
marcador Ca.125
• Combinar con EH 4 y
algoritmo ROMA (Edad,
estatus menopausico, Ca
125 , EH 4 )

29. Tasa de supervivencia al cáncer de mama a 5
años
Aunque la vigilancia no
se contempla como una
buena opción, ayuda a
tener un diagnóstico
más temprano ,
consiguiendo así
mayores tasas de
supervivencia.

30. Quimioprevención en cáncer de
mama
Para el cáncer de
mama, se usan los
serms, tamoxifeno y
raloxifeno

31. Quimioprevención en cáncer de
ovarios
En cuanto al cáncer
de ovario la
prevención con
anticonceptivos
utilizados durante
más de 6 años por
debajo de los 30 años
reducen hasta el 50%

32. Cirugia profiláctica
Se contemplan 2 tipos de cirugía
preventiva:
• Salpingooforectomía
bilateral: Reduce el riesgo de
cáncer de mama en un 50% y de
cáncer de ovario en un 90%
• Mastectomía bilateral
seguida de reconstrucción
inmediata: Reduce el riesgo de
cáncer de mama en un 85-100%
Si combinamos ambas ténicas la
supervivencia es mayor que
cualquiera de las dos de forma
aislada

33. Importante
• Explicar implicaciones del
resultado positivo
• Firma de consentimiento
informado
• Recepción de resultados con apoyo
del equipo de genetistas y asesores
de genoma
• Ampliacion de indicaciones
• +mujeres con ca de mama y/o de
ovarios
• +mujeres con antecedentes
familiares de ca. Mama y/o ovarios
• Diagnostico preimplantacional

34. Conclusión
Los avances tecnológicos en
Medicina Predictiva y
Regenerativa nos permiten
disponer de los test de
cribado más avanzados, con
unos resultados rápidos,
precisos, y fiables, que nos
permiten ya ir entrando en la
medicina del Siglo XXI